Presentación Diapositivas Propuesta Proyecto para Niños Infantil Juvenil Doodle Colorido Rosa

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE
CHIMBORAZO
Histología I
Emily Morocho
David Núñez
Jennyfer Pastor
Cristhian Patín
 
PREPARACIÓN DE
MUESTRAS
BORCELLE 2030
INTRODUCCIÓN
Para conocer su estructura morfológica
microscópica y sus funciones, deberíamos
primero examinarlas a través de los
instrumentos a través del miscroscópico, al
intentar hacerlo se presentan serias dificultades .
Por lo tanto, es necesario utilizar una serie de
procedimientos, porque nos permite describir,
comprender y analizar la estructura microscópica
de las células, tejidos y órganos.
 
Permiten la observación y el estudio de protozoarios, células
sanguíneas y entre otros más.
Para una observación óptima suele utilizarse tipos especiales de
microscopios fotónicos como el de campo oscuro: observación al
estado fresco.
Cuando se requiera destacar alguna estructura celular o tisular
se pueden emplear colorantes inocuos y a este proceso se
conoce como coloración vital.
PROCEDIMIENTOS
INMEDIATOS O VITALES
COLORACIÓN VITAL 
Coloración intravital: A través de las vías digestiva o intratraqueal; mediante
inyecciones sanguíneas. Las soluciones más utilizadas son: tinta china,
carmín de litio, azul tripan
Coloración supravital: Aplican a células o tejidos provenientes de
organismos vivos.
Mitocondrias verde de Jano
Los gránulos de las células rojo neutro
La sustancia granulofilamentosa del reticulocitos azul brillante de cresyl
 Ramificaciones nerviosas con el azul de metileno
 ADN y el ARN de las células con naranja de acridina 
Ejemplo: tejido conectivo laxo
PROCEDIMIENTOS MEDIATOS O POSTVITALES
Este procedimiento prepara muestras de seres 
 cuyos procesos vitales se han detenido
Para alcanzar este objetivo es
necesario realizar los
siguientes pasos:
TOMA DE MUESTRAS 
La calidad y la fidelidad con que una célula o un tejido muestren
una imagen al microscopio, con las características morfológicas
que poseían cuando estaban con vida, dependen esencialmente
de la prontitud y el cuidado que se aplicó para obtener la
muestra a ser procesada 
Mediante la biopsia
consiste en la toma de un
fragmento de tejido u órgano de
un ser vivo. realiza a través de
una operación quirúrgica
incisional 
excisional 
por sacabocados
por punción y absorción
 por raspado 
por trepanación
 
mediante la necropsia
las muestras se obtienen de seres
muertos: En este caso es
recomendable que los tejidos y
órganos se obtengan
inmediatamente después de
producida la muerte. 
Recomendaciones para la
toma de las muestras. Los
tejidos y los órganos
provenientes de biopsias y
necropsias se seccionar
empleando bisturís o navajas
de afeitar nuevos, sin hacer
presión sobre ellos. 
 
B) FIJACIÓN
Detener la vida de las células e impedir las
modificaciones post morten que pueda
sufrir la célula (procesos autolíticos),
manteniendo la estructura morfológica de
células y tejidos sin que ocurran cambios
notables en ellos
CLASIFICACIÓN DE LOS FIJADORES
el tetraóxido de osmio
(ácido ósmico), el
bicromato de potasio,
ácido crómico,
bicloruro de mercurio o
“sublimado corrosivo”,
ácido pícrico, ácido
acético.
ACCIÓN REDUCTORES
 el formaldehído, el
glutaraldehído, el
alcohol etílico, el alcohol
metílico. 
OXIDANTES el alcohol etílico absoluto
conserva el glucógeno
el bicloruro de mercurio
provoca que las anilinas
coloreen de manera más
brillante a las fibras
colágenas
el bicromato de potasio
facilita la coloración de las
mitocondrias
 ácido acético permite una
mejor tinción de los núcleos,
TAMBIEN PUEDEN SER:
Como el
Formalaldehído.
SÓLIDOSLÍQUIDOS
Como el ácido
acético
AlcoholmEtílico
La acetona
GASEOSOS
Bicloruri¿o de
Mercurio
Bicromato de
Potasio
CONDICIONES DE UN
BUEN FIJADOR
Matar inmediatamente a las
células: Impidiensdo la
aparición de los procesos
autolíticos, debe tener poder
de penetración y poder de
difusión.
Producir cierta dureza a los
tejidos: Sin hacerlos
quebradizoz y friables.
Debe tener fácil manipulación
No debe disolver componentes
celulares
Que sea fácil de conseguir y
que sea barato
Formol o formalina: Solución
acuosa del gas formaldehído al 39
- 40% es liquido claro, incoloro y
con vapores tóxicos a la mucosa
respiratoria, tiene buen poder de
penetración y de difusión
Se le emplea en una solución al
10% (10 del formol comercial y 90
partes de agua).
FIJADOR SIMPLE
Propiedades
FIJADORES
COMPUESTOS
Suele emplearse
como un fijador de
rutina.
Propiedades
FIJADORES
COMPUESTOS
Es recomendable usarlo para fijar tejidos
hematopoyético y linfáticoreticular.
Facilita la tinción de fibras colágenas y células
conjuntivas
Propiedades
FIJADORES
COMPUESTOS
Preservar lípidos, especialmete fosfolípidos
Propiedades
FIJADORES
COMPUESTOS
Fijador de uso rutinario
Mejor resultados con el Tricrómico de Masson
Para fijación de embriones y fetos pequelos
pues ejerce cierto poder descalcificante.
Propiedades
FIJADORES
COMPUESTOS
preserva muy bien a los eritrocitos y a los
gránulos de las células de glándulas
endocrinas
Propiedades
FIJADORES
COMPUESTOS
un excelente poder de penetración y de
difusión. Las muestras delgadas de tejidos y
órganos se fijan en dos o tres horas. Produce
lisis de los eritrocitos
CRITERIOS PARA OBTENER UNA BUENA FIJACIÓN
Depende del estudio a
realizar, para tejidos y
órganos se necesitan
fijadores con buen o¿poder
de pentración y difusión
como el Zenker, Boüin o
Helly, caso contrario se
deberá colocar formol al 10
o 15%.
VOLUMEN DEL FIJADORTAMAÑO DE MUESTRAS
Tamaño y grosor deben ser
pequeñas y delgadas , de
1cm2 a 2 cm2 y con un
espesor de 2 mm a 5 mm
ELECCIÓN DEL FIJADOR
Una proporción que es
necesario emplear será de 1
a 20 (muestra – fijador).
Tiempo de fijación Temperatura
1. El intervalo que media
entre la interrupción del
aporte sanguíneo y la
inmersión de las muestras
en la solución fijadora
2. Debe tenerse en cuenta el
tiempo que permanecerán
las muestras sumergidas
en los fijadores
Es recomendable efectuar la
fijación a bajas
temperaturas ( 4o C.)
dentro de un refrigerador
retardará el tiempo de
fijación pero disminuirá de
manera notable la autólisis
de los tejidos., 
CRITERIOS PARA OBTENER UNA BUENA FIJACIÓN
Almacenamiento de muestras Lavado de las muestras
fijadases conveniente almacenar y
conservar los tejidos fijados
para un uso posterior.
Después de eliminar el
fijador mediante un
“lavado”, se guardan en
una solución de alcohol al
70%
Al concluir la fijación, el
fijador debe ser eliminado
de las muestras. Para tal fin
se procede al lavado de los
tejidos mediante agua o
alcohol
CRITERIOS PARA OBTENER UNA BUENA FIJACIÓN
MICROTOMIA (OBTENCIÓN DE LOS CORTES) 
En esta etapa, los tejidos y la parafina integran un solo bloque que, posee la
dureza y la consistencia suficientes para obtener secciones delgadas y
transparentes.
Los microtomos se clasifican de acuerdo a la manera como se desplaza el
bloque que contiene el tejido incluido
Microtomo de rotación tipo
Minot
Mediante una manivela circular
denominada volante, el
mecanismo que sujeta al bloque
de parafina se desplaza frente al
filo de la navaja, de arriba hacia
abajo y viceversa en un
movimiento vertical
El movimiento que se realiza
para obtener los cortes es
horizontal, es decir de atrás
hacia adelante y viceversa.
Generalmente el mecanismo
que sujeta al bloque de
parafina es el que se desplaza
y a la navaja permanece
estática
 
Microtomo de deslizamiento
INCLUSIÓN
Tejidos fijados cierta consistencia y dureza
Las sustancias de inclusión tienen la propiedad de incorporarse
e infiltrarse al interior de las células
Tejidos y la sustancia de inclusión forman un bloque
homogéneo en dureza-consistencia
Sustancias de inclusión
Son solubles en agua (gelatina, carbowax, glicol metacrilato) 
Solubles en solventes orgánicos (parafina, celoidina, resinas
epóxicas).
INCLUSIÓN EN PARAFINA
Después de la fijación y el “lavado” de las
muestras
Embebidas en agua o en alcohol
Se requiere deshidratarlos e infiltrarlos con el
solvente de la sustancia de inclusión.PASOS PARA SEGUIR 
 Significa extraer o remover el
agua de los tejidos fijados
Debe ser completa porque,
de lo contrario, el solvente no
actúa de forma adecuada
Más usados son el alcohol
etílico, el alcohol isopropílico,
el dioxano y el cloroformo.
Deshidratación:
 
Diafanización: Reemplazarlo por
sustancias que sean capaces,
simultáneamente, de mezclarse con el
alcohol y disolver la parafina
Ejemplos: xilol
 
Inclusión y formación del bloque de parafina
 Las parafinas son hidrocarburos saturados provenientes de la
destilación del petróleo
Sólidas a temperatura ambiente
Oscilan entre 40o y 60o C. La parafina hierve a 300o C. 
Existen diferentes tipos de parafina
Blandas: punto de fusión de 45o C - 52o C.
Detectarán antígenos mediante inmunohistoquímica.
Semiduras: Puntos de fusión son de 54 o C - 58o C
Emplea en los laboratorios donde se realiza técnica histológica
Duras: Tienen un punto de fusión de 60o C - 65o C.
Deben usarse en ambientes con climas de temperaturas altas.
TEORÍA DE LA COLORACIÓN
 
FÍSICA QUÍMICA
Teoría física. Considera
que la coloración es un
proceso físico de
adsorción.
Teoría química. El
colorante se une a la
sustancia coloreable
combinándose con ella
íntimamente debido a la
presencia de
agrupaciones
moleculares ácidas o
básicas 
a) Por su origen.
Naturales
1) Animales. Como el carmín
2) Vegetales. Como la hematoxilina,
la safranina
CLASIFICACION DE LOS
COLORANTES 
a) Por su origen.
Sintéticos
1) Ácidos
Tienen carga eléctrica negativa, tiñen al
grupo químico, cargado eléctricamente, por
ejemplo, la eosina, safranina, el azul de
anilina.
CLASIFICACION DE LOS
COLORANTES 
a) Por su origen.
Sintéticos
2) Básicos
Poseen una carga eléctrica positiva, Se les
denomina también colorantes nucleares, pues
tienen afinidad por los ácidos nucleicos (ADN y
ARN) por ejemplo la hematoxilina. 
CLASIFICACION DE LOS
COLORANTES 
a) Por su origen.
Sintéticos
3) Neutros
Poseen una parte ácida y una parte básica,
tienen la propiedad de teñir de manera
simultánea, a los componentes nucleares y a los
citoplasmáticos. 
CLASIFICACION DE LOS
COLORANTES 
CLASIFICACIÓN DE
COLORACIONES 
a) Coloración directa o
sustantiva. Tinción que se ejerce
sobre células y tejidos cuando
éstos se ponen en contacto con la
solución colorante, el resultado
indica una verdadera afinidad
entre el tejido y el colorante. 
CLASIFICACIÓN DE
COLORACIONES 
b) Coloración indirecta o adjetiva. Es
indispensable recurrir al empleo de
sustancias intermediarias que faciliten
la adhesión del colorante “mordiente”. 
 La combinación que se efectúa entre el
mordiente y el colorante se denomina
“laca”. 
CLASIFICACIÓN DE
COLORACIONES 
c) Coloración progresiva. Los tejidos se
ponen en contacto con la solución
colorante para que, conforme
transcurre el tiempo de coloración, el
tejido, de manera progresiva, alcance
la intensidad de tinción deseada. 
CLASIFICACIÓN DE
COLORACIONES 
d) Coloración regresiva. En este caso
los tejidos se sobrecolorean con el
colorante para someterlos después a la
acción de una sustancia denominada
diferenciador, éste extrae parte del
colorante y, se detiene el proceso de
diferenciación cuando los
componentes alcanzan la tinción
deseada. 
CLASIFICACIÓN DE
COLORACIONES 
e) Coloración simple. Es el
procedimiento en el que se utiliza un
solo colorante para teñir algún
componente celular o tisular. 
CLASIFICACIÓN DE
COLORACIONES 
f) Coloración compuesta o
combinada. Consiste en la
aplicación, de varios colorantes con
la finalidad de destacar, mediante
colores diferentes, estructuras
específicas.
CLASIFICACIÓN DE
COLORACIONES 
g) Coloración metacromática. Un
colorante además de ceder su propio
color a una estructura celular o tisular
también tiñe de color distinto a otras
estructuras. 
La tionina y el azul de toluidina colorean
de azul a los núcleos pero, al mismo
tiempo la matriz cartilaginosa o el ácido
hialurónico se tiñen de violeta o rosado.
Colocar encima del corte coloreado una
gota de una sustancia adherente, diluida,
generalmente en xilol y encima de ellos, una
laminilla cubreobjetos, cuidando que no
queden burbujas de aire entre la resina. 
A continuación se deja que el xilol se
evapore, y la resina adquiera solidez
suficiente; para ello las láminas se colocan
en una platina caliente ( 45 o 50 C) durante
24 a 48 horas y estarán listas para ser
observadas.
1.- ¿Cuáles son los procedimientos mediatos o postvitales?
2.- En la clasificación de la parafinas las duras cual era el punto de fusión
3.-¿Cuáles son los dos tipos de coloración vital? 
4. ¿Cuáles son los dos tipos de procedimeinto para la toma de muestra?
5. ¿Cómo se clasifican los microtomos?
6. ¿Que es la microtomia?
7.-.- En qué se clasifican los fijadores y cite dos ejemplos de cada una
8.- Cuál es el otro nombre de la solución madre?
9.- ¿Cuáles son las condiciones de un buen fijador?
10. El resultado entre un mordiente y un colorante se denomina: ...........
11. ¿Cual es la caracterítica específica de la tinción metacromática? 
12. Explique qué es el "montaje"
PREGUNTAS