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PRACTICA # 09 DETERMINACIÓN DE AZUCARES REDUCTORES METODO DE LANE-EYNON INTRODUCCIÓN: En el análisis de las materias primas frescas y de productos procesador, la determinación del contenido de azucares es de suma importancia, pues la primera contiene diferentes azucares, que son resultado de la fotosíntesis. Por su parte, los productos procesados contienen sacarosa que es el componente responsable del sabor y si se añade tiene función de preservante. El método de Lane-Eynon se basa en la directa titulación en caliente de una mezcla de volumen igual de Fehling A y B (generalmente 5 + 5 ml) con la solución azucarada previamente diluida a un contenido de azúcar entre 0.1 y 0.4%, además al final de la titulación se da una gota de azul de metileno al 1% como indicador para encontrar el punto final de la titulación. El azul metileno juega el rol de indicador de oxidorreducción cuyo color desaparece en el momento en que todo el cobre es reducido por adición desde la bureta. No siempre se puede notar el cambio de color del azul de metileno, por lo que se puede observar la espuma de la solución en ebullición cuyo color cambia de azul a violeta o celeste y finalmente es incoloro, el tiempo de calentamiento no debe sobrepasar aproximadamente 2 min. Una vez determinado el gasto se calcula el contenido de azúcar en la solución. Es importante comentar que este método también es funcional para la determinación de otros tipos de azucares en diferentes muestras. MATERIAL: Matraz Erlenmeyer 250 ml (2) Pipeta graduada de 5 ml (2) Probeta 50 ml Perlas de vidrio (para dos matraces) Bureta Piseta Soporte y pinzas de bureta Mechero Tripie con tela de asbesto Vaso precipitado 100 mL Tubo ensayo 13x100 (2) Pinza para tubo Pipeta graduada 1 ml (2) REACTIVOS: • Solución A de Fehling (Disolver 34.639 g de sulfato de cobre pentahidratado con H2O destilada y diluir a 500 ml, filtrar y guardar en frasco ámbar) • Solución B de Fehling (Disolver 173 g de tartrato de sodio y potasio con 50 g de NaOH en agua y agorar a 500ml, dejar reposar dos días y filtrar, guardar en frasco ámbar) • Solución de azul de metileno al 1% en alcohol • Solución de glucosa 1% en agua • 20 ml de solución de sacarosa 70-80% (muestra problema 2) MUESTRA: Muestra 1: Bebidas azucaradas diferentes marcas METODOLOGÍA: I.- Determinación cualitativa de azucares en muestra 1.- Añadir en un tubo 1 ml de Fehling “A” y 1 ml de Fehling “B” y mezclar suavemente 2.- Posteriormente colocar 1.5 a 2 ml de muestra problema 3.- Mezclar bien y ponerlo a baño maría (si es necesario ponerlo a llama del mechero) durante 1 min aproximadamente 4.- Si se torna marrón o rojo la prueba es positiva 5.- Repetir el procedimiento con la muestra problema 2 II.- Estandarización de solución de Fehling 1.- Colocar en un matraz Erlenmeyer 5 ml de Fehling A y 5 ml de Fehling B, agregar 50 ml de agua y las perlas de vidrio, se observará un color azul. 2.- Calentar a ebullición en parrilla o en mechero a fuego medio bajo hasta que hierva a los 4 min. 3.- Cuando el matraz rompa a ebullición, titular la solución hirviente con la solución estándar (glucosa 1.0 %), la titulación debe no debe ser muy lenta, de 2 a 3 gotas por segundo. 4.- Continuar titulando hasta que el color azul comienza a cambiar a violeta o celeste y el color perdure 1 a 1.5 min aproximadamente. Una vez obtenido este color, cortar la titulación y agregar el indicador azul de metileno al 1% (5 gotas) y continuar titulando a ebullición hasta que el líquido pase de azul a amarillo o rojo ladrillo NOTA: el tiempo desde el azul de metileno al cambio de color no debe de superar un minuto aproximadamente No siempre se puede notar el cambio de color de azul de metileno, por lo que se puede observar la espuma de la solución en ebullición cuyo color cambia de azul a violeta y finalmente incoloro 5.- Medir el gasto de titulación III.- Determinación de azucares en muestra 1.- Valorar la solución A y B de Fehling siguiendo el mismo procedimiento: Colocar en un matraz Erlenmeyer 5 ml de Fehling A y 5 ml de Fehling B, agregar 50 ml de agua y las perlas de vidrio. 2.- Calentar a ebullición en parrilla o en un mechero a fuego medio bajo hasta que hierva a los 4 min. 3.- Cuando el matraz rompa a ebullición, titular la solución hirviente con la solución problema (muestra), la titulación debe no debe ser muy lenta, de 2 a 3 gotas por segundo. 4.- Continuar titulando hasta que el color azul comienza a cambiar a violeta o celeste y el color perdure 1 a 1.5 min aproximadamente. Una vez obtenido este color, cortar la titulación y agregar el indicador azul de metileno al 1% (5 gotas) y continuar titulando a ebullición hasta que el líquido pase de azul a amarillo o rojo ladrillo 5.- Medir el gasto de titulación CÁLCULOS: • Calcular el Factor de Fehling de la siguiente forma: FF= V1 x 1.0 / 100 Donde: V1= ml gastados en la titulación de la solución estándar 1.0= concentración de la solución estándar • Calcula el % de azucares en solución problema= FF X 100 / ml gastados de solución problema • Calcular gramos de glucosa que reducen 10 mL de Fehling= (Concentración de glucosa x mL de glucosa gastados) /100 • Calcular el % de glucosa en muestra= (gramos de glucosa / mL de muestra gastados) x 100 PROCESAMIENTO Y REPORTE DE RESULTADOS Realizar el reporte de la practica CUESTIONARIO: 1.- Menciona las ventajas y desventajas de usar reactivo Fehling 2.- Discuta y concluya a partir del análisis la recomendación de un producto o marca de productos de acuerdo con la cantidad de carbohidratos presentes en el. 3.- Menciona la definición, características e importancia química de un azúcar invertido, y cuál es la diferencia con un azúcar reductor 4.- Compara y contrasta que otros métodos y/o técnicas se usan para la cuantificación de azúcares reductores REFERENCIAS amyd.quimica.unam.mx/pluginfile.php/14545/mod_resource/content/1/An%C3%A1lisis%20de %20alimentos%20fundamentos%20y%20t%C3%A9cnicas.pdf https://core.ac.uk/download/pdf/71396367.pdf https://es.scribd.com/document/508561239/Practica-N-2-DETERMINACION-DE-AZUCARES- METODO-DE-LANE-EYNON
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