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COMPORTAMIENTO DE CEPAS DE Rhizobium japonicum ASOCIADAS CON VAR IEDADES DE SOYA (Glycine max (L.) Merr.) SELECCIONADAS PARA EL DEPARTAMENTO DEL TOLIMA* RaCiJ Varela G. Fernando Munévar M. INTRODUCCION Recientemente se ha despertado un gran interés por incrementar el area sembrada con soya (Glycine max(L.) Merr.) en Colombia. En el departamento del Tolima, existen areas potencialmente aptas para este cultivo. Para la terraza de Lbagué, la introduc- don de este cultivo tendria una importancia adicio- nal, ya que son pocos los cultivos que se pueden utilizar con éxito para establecer rotaciones con el arroz (Oryza sativa L.) que es el cultivo predomi- nante. Por otra parte, la introducción de la soya en estas zonas podrIa significar un gran aporte a la economIa del nitrógeno en tales suelos. El Programa de Leguminosas de Grano del Insti- tuto Colombiano Agropecuario, ha adelantado estu- dios de mejoramiento genético de la soya y ha identificado como materiales promisorios para el Tolima las lIneas L-108, L-109 y L-120, motivo por el cual es importante seleccionar cepas de Rhizo- bium japonicum que formen una asociación simbió- tica, con tales genotipos de soya. El principal objetivo del presente estudio fue seleccionar cepas de Rhizobium /aponicum que se comporten eficientemente con las Ilneas de soya L-108, L-109 y L-120 en dos suelos del Tolima, teniendo en cuenta la especificidad que comünrnen- te se presenta entre cepas y genotipos de soya. REVISION DE LITERATURA La necesidad de inocular la soya en suelos, no cultivados previamente con esta especie, ha sido determinada en muchos lugares del mundo, y esta práctica ha dado resultados exitosos en muchos casos. Sin embargo, la selección de la cepa de Rhi- zobium japonicum que se utilice como inoculante es un aspecto de gran importancia, debido a la especifi- cidad entre las cepas y las variedades de planta y a Ia competencia entre diferentes cepas (Vincent, 1974). La especificidad existente en las asociaciones simbióticas entre bacterias del género Rhizobium y las plantas leguminosas, se ha reconocido desde mucho tiempo atrás. Esta especificidad determina que el nUmero de especies de plantas hospederas con las cuales puede asociarse una especie dada de Rhizobium es limitada. Con base en esta especifici- dad se han establecido los grupos de inoculación cruzada, en los cuales se basa la identificación y la nomenclatura de las especies de este género de bac- terias (Burton, 1965), La especificidad entre la planta hospedera y la bacteria se manifiesta también al nivel de la variedad de planta y la cepa de Rhizobium, al menos en algunas especies, entre las cuales está la. soya (Gra- ham, 1973). Se ha comprobado que esta especifi- cidad entre variedades o lIneas de Glycine max y cepas de Rhizobium japonicum ocurre tanto con respecto a la nodulación como a la efectividad de la fIjación de nitrógeno. En algunos casos la especifi- cidad es tal que ciertas combinaciones de genotipos de soya y cepas de Rhizobium japonicum no produ- cen módulos (Vincent, 1974). Contribución del Programa de Estudios para Graduados UN-ICA y de Ia Division de Agronomia, lnstituto Colombiano Agropecuarlo (ICA). Resumen de la Tesis de Grado presentada por el autor principal para optar al titulo de Magister Scientiae. Respectivamente: Ingeniero AgrOnomo, Programa de Leguminosas de Grano y Oleaginosas Anuales, ICA. Apartado Aereo 233, Palmira; e Ingeniero Agrónomo, M.S. Programa de Suelos ICA. A.A. 151123, Bogota, Colombia. Los autores agradecen al Dr. Ph.D. Graham del dAT, el suministro de las cepas y sos valiosas sugerencias, y a la Dra. Esperanza V. de Rozo de IGAC, por su ayuda en parte del trabajo de laboratorlo. Revista ICA. Bogoté (Colombia) Vol. XIII. No. 2. pp. 249-255 Junio 1978. CK. ISSN. 0018-894. 249 Las diferencias en el comportamiento de las cepas de Rhizobium japonicum con diferentes geno- tipos de soya se manifiesta en el peso del follaje, el conteriido de nitrógeno del mismo y el rendimiento en grano (Graham y Hubell, 1974; Vincent, 1974). Graham (1973) comprobó la existencia de esta especificidad con respecto a las variedades Liii, Mandarin, Pelican y Americana, y diferentes cepas en suelos del Valle del Cauca. Algunas cepas sufrie- ron un marcado efecto del genotipo de planta en su comportamiento y otras fueron poco afectadas por dicho factor. La necesidad de hacer estudios de selección de cepas de Rhizobium japonicum se desprende de lo anteriormente mencionado y de los estudios de competencia entre cepas, los cuales indican que bajo determinadas circunstancias, algunas cepas de Rhizo- bium japonicum pueden establecerse en el suelo y, a pesar de ser ineficientes para fijar nitrógeno con un determinado genotipo de planta, no permiten que una cepa que se introduzca en un inoculante forme un porcentaje apreciable de los nódulos (Weaver y Frederick, 1974). Esto significa que el uso de un inoculante que contenga una cepa cuya eficiencia no se haya determinado, podrIa ofrecer problemas para establecer en el futuro una cepa de comprobada eficiencia. 3. MATERIALES Y METODOS En el estudio se incluyeron nueve cepas de Rhi- zobium japonicum, las cuales fueron proporcionadas por el Centro Internacional de Agncultura Tropical (CIAT). Las cepas CIAT 1, 2 y 4 son aislamientos provenientes de Rodesia, la cepa CIAT 51 proviene del Brasil y las cepas CIAT 196, 197, 199 y 200 fueron aisladas en Colombia. 3.1. ESTUDIO EN BOTELLAS CON AGAR PARA PLANTULAS. Se utilizaron botellas de vidrio con boca ancha, de 250 ml de capacidad y en cada una de ellas se sembraron dos plántulas de soya. Las botellas conte- nIan medio de Jensen para plántulas y fueron prepa- radas segün ci método propuesto por Trinick, tal como lo describe Vincent (1970). Las semillas se esterilizaron con una soluciOn de HgCl2 al 0,1% durante 30 segundos, y se colocaron sobre un papel de filtro en un germinador a 21°C durante chico dias, manteniendo las condiciones de esteriidad. Después de sembrar las plántulas se inocuió cada botella con un ml del cultivo lIquido de la cepa correspondiente. Los cultivos IIquidos se prepararon usando medio de mamtol y extracto de levaduras (Vincent, 1970) y antes de usarse se comprobó su pureza y viabilidad por medio de una tmción de Gram y observación directa al microscopio de con- traste de fases. Las botellas con las plántulas se mantuvieron durante 60 dIas en el invernadero y se les agregó solución nutritiva esterilizada dos veces por semana. La temperatura del invernadero fue cerca de 26°C durante el dia y 12°C en la noche. Los tratamientos ensayados fueron la combinación de las nueve cepas de Rhizobium japonicum con cada una de las variedades de soya L-108, L-109 y L-120. Se incluyeron además un tratamiento "testi- go" que Hevaba el medio nutritivo sin inocular y un tratamiento "testigo más N" cuyo medio no fue inoculado pero llevaba 70 ppm de N en forma de KNO3 (Vincent, 1970). Todos los tratamientos fue- ron replicados cuatro veces y el experimento tuvo un diseflo completamente al azar. Las plantas se cosecharon a los 60 dIas y se determinó ci peso seco de los nódulos, el peso seco del follaje y ci contenido de nitrógeno de la parte aérea de la planta por digestion y destilación semimicro-Kjel- dahl (Lott, et aL, 1956), utilizando muestras de 0,1 g de tejido y como reactivo de digestiOn una mezcla de ácido sulfürico y ácido salicflico. 3.2. ESTUDLO EN MATERAS CON SUELO. Los tratamientos ensayados fueron la combina- ción de las mismas cepas de Rhizobium japonicum del estudEo anterior, excluyendo la cepa CIAT-20 1, con cada una de las tres variedades senaladas antes y en dos tipos de suelos del departamento del Tolima donde nunca Se habla sembrado soya: un suelo franco arcilloso de la terraza de Ibagué (Serie Pera- les) y un suelo franco arenoso de El Espinal (Serie Dindalito). Las principales caracterIsticas quImicasde estos suelos aparecen en la Tabla 1. Se utilizó un diseio completamente al azar con cuatro replicacio- nes. Se inciuyó un tratamiento "Testigo" que no fue inoculado y un tratamiento "Testigo más N'. que no fue inoculado pero recibió el equivalente a 40 kg de N/Ha en forma de urea. TABLA 1. Análisis quimicos de los dos suelos.* Serie Serie Perales Dindalito pH (1:1) H20 5,70 6,10 Materia orgánica % 3,00 2.52 P: ppm (Bray II) 26,70 103,60 K (meq/lOOg) 0,43 0,45 Na (meq/lOOg) 0,17 0,05 Ca (meq/100 g) 3,12 4,24 Mg (meq/lOOg) 0,89 1,03 N-Orgánico (%) 0,44 0,18 N-Amoniacal (pmm) 24,30 22,60 Nitrates (ppm N) 13,80 12,40 Nitritos (ppm N) 1,60 1,40 N-lnorgánico total (ppm) 39,70 36,40 Los análisis de formas inorgánicas de nitrógeno se realizaron seg(zn el método descrito por Bremner y Keeney (1966); & N orgénico se determinó segtn Lott y otros (1956), utilizando H2SO4 en la digestion; los demás análisis se realizaron segiTh los métodos descritos por Mar(n y colaboradores (1975). 250 Los suelos se colectaron de la capa arabic (prime- ros 15 cm) y se transportaron en bolsas de polieti- leno, se secaron at aire y se hicieron pasar por un tamiz de 2 mm. Se utilizaron materas de 2,5 litros de capacidad. Estas y las mesas del invernadero fueron desinfectadas interior y exteriormente con unasoluci6ndeHgCi2 at 0,2%. En cada matera se colocaron 2.300 g de suelo y se sembraron tres semillas esterilizadas en la forma indicada en ci experimento en botellas. Previamente se habla cob- cado una capa delgada de turba en ci fondo de cada hueco para Las semilias con ci fin de garantizar la supervivencia de las bacterias contenidas en los mo- culantes. La inoculación se hizo agregando aséptica- mente un ml de cultivo IIquido de la cepa corres- pondiente sobre cada semilia. Los cuitivos liquidos utilizados como inoculantes contenIan mãs de 218 x 106 céiulas/ml, segün se determinó por un conteo de colonias en piatos de dilución (Vincent, 1970). Después de la germinación se hizo un raieo para dejar una planta por matera. La temperatura del invernadero se mantuvo cerca de un promedio de 30 C en ci dia y 14 C durante la noehe. A los 65 dIas después de la germinación se cosecharon Las plantas y se determinó ci nirnero de nódulos por planta, ci peso seco de nôduios por planta. ci peso seco de la parte aérea y ci contenido de nitrógeno total de La misma, utilizando ci método descrito en ci experimento en boteila. 4. RESULTADOS Y DISCUSION El experimento en medio de agar para plántulas permitió coniprobar la especificidad existente entre ci genotipo de planta de soya (variedad) y la cepa de Rhizobiutn japonicum utilizada como inoculante. En la Tabia 2 puede observarse cómo algunas cepas (CIAT 4; 196; 197 y 201) produjeron un peso de nódulos relativamente alto en un genotipo de soya, pero el mismo fue bajo en los restantes genotipos. Otras cepas como CIAT 1, 2 y 51, tuvieron un buen comportamiento estimado por ci peso de nódulos, con Los tres genotipos. Un tercer grupo de cepas (CIAT 199 y 200) produjo una nodulación pobre en todos los genotipos de planta. Estas diferencias en la noduiación fueron estad 1st icamente significat ivas, como to indica Ia Tabla 2. En igual forma, los análisis estadIsticos mostraron que la interacción genotipo x cepa fue altamente significativa (al nivel del 1170, con to cual se comprobó Ia especificidad en cuanto a infectividad. La ausencia total de nóduios en Los tratamientos testigo indica el buen control bactcriológico del experimento. Las diferencias antes anotadas también se mani- festaron en ci peso seco y en ci contenido del nitró- geno de la parte aérea de La planta. Puede notarse (Tabias 3 y 4) cómo en ci caso de estas dos varieda- des también algunas cepas presentaron un buen comportamiento en todos los genotipos, mientras que en otras ci comportamiento varió con ci geno- tipo y también se presentaron algunas cepas que tuvieron un comportamiento pobre con todas Las variedades de planta. Las tablas respectivas indican cónio estas diferencias fueron cstadIsticamente signi- ficativas. Los análisis de varianza indicaron también una alta significaricia (al nivel del 1%) para la interacción genotipo x cepa en el caso de estas dos variables, to cual permite suponer que en general, para La fijación del nitrógeno en soya existe una especificidad de las variedades en cuanto a Las cepas de Rhizobium japonicum de Las cuales son hospede- ros. TABLA 2. Peso seco (mg/2 plantas) de nódulos de tres variedades de soya en medic de agar para plántulas, con diferentes cepas de Rhizobiumjaponicum. Variedad Cepa L-108 L-109 L-120 omedjo CIAT-1 140,0 96,5 96,7 111,1 (bc) CIAT-2 145,4 194.3 183,5 174,4 (a) CIAT-4 114,3 45,2 58,6 72.7 (c) CIAT-51 152,3 128,9 145,3 142,3 (ab) CIAT-196 60,6 40,8 114,4 71,9 (c) CIAT-197 71,3 52,3 147,8 90,5 (c) CIAT-199 51,3 35,4 22,7 36,5 (d) CIAT-200 39,5 80.5 60,3 60,1 (c) CIAT-201 18,6 118,6 69,4 68,9 (c) Testigo" 0,0 0.0 0,0 O(d) Testigo+ N" 0,0 0,0 0,0 O(d) Promedios con una letra en comün no son estadisticamente diferentes. Tratamiento sin inocular y sin aplicación de N. " Tratamiento sin inocular y con aplicaciôn de 70 ppm N. 251 TABLA 3. Peso seco (g/2 plantas) del follaje de tres variedades de soya en medio de agar para plántulas, con diferentes cepas de Rhizobium japonicum. Variedad Cepa L-109 L-120 Promedio dAT-i 1,853 1,022 1,092 1,322 (b) CIAT-2 1,542 1,870 2,035 1,815 (a) CIAT-4 1,304 0,673 0,768 0,915 (ci CIAT-51 2,018 1,442 2,081 1,847 (a) CIAT.196 0,882 0,499 1,147 0,740 (cd) CIAT-197 0,757 0,624 1,183 0,854 (c) CIAT-199 0,677 0,524 0,630 0,610 (cd) CIAT-200 0,561 0,785 0,899 0,748 (cd) CIAT-201 0.403 0,909 0,684 0,665 (cd) Testigo" 0,449 0,595 0,709 0,584 (cd) Testigo+N" 2,527 0,724 2,748 1,990 (a) * Promedios con una letra en comn no son estadisticamente diferentes Tratamiento sin inocular y sin aplicación de N. Tratamiento sin inocular y con aplicación de 70 ppm N. TABLA 4. Contenido de nitrógeno del follaje (%) de tres variedades de soya en medio de agar para plántulas, con diferen- tes cepas de Ahizobium japonicum. Variedad Cepa Promedio L-108 L-109 L-120 dAT-i 3,40 3,49 3,11 3,33(a) CIAT-2 3.24 3,45 3,45 3,38 (a) CIAT-4 3,44 3,17 3,42 3,34 (a) CIAT-51 3,40 3,31 3,33 3,34 (a) CIAT-196 2,77 2,52 2,75 2,68 (b) CIAT-197 1,95 2,83 3,06 2,61 (be) CIAT-199 2.33 2,90 1,67 2,30 (c) CIAT-200 2,71 2,94 2,90 2,85 (b) CIAT-201 2,35 2,84 2,51 2,56 (be) Testigo' 1,70 1,53 1,36 1,53 (d) Testigo + N" 2,18 3,91 1,77 2.62 (be) Promedio 2,59 (b) 2,87 (a( 2,53 (b) Promedjos con una letra en comCin no son estadisticamente diferentes. Tratamiento sin inocular y sin aplicación de N. " Tratamiento sin inocular y con aplicaciôn de 70 ppm N. Los tres parámetros contempiados en ci experi- mento en medio de agar para plántulas, mostraron que de las cepas estudiadas las que tienen un mejor comportamiento bajo las condiciones experimentales indicadas son CIAT 1, 2 y 51 y que éstas son las que sufren una menor influencia del genotipo de pianta para fijar nitrógeno simbiáticamente. Los datos sobre conteniclo de nitrógeno de la pianta indican cómo las cepas más eficientes permi- ten una mayor acumulación de nitrógeno que ci tratamiento consistente en apiicar 70 ppm de nitró- geno al medio de crecirniento. Las variables peso de nóduios, peso del follaje y porcentaje de nitrógeno de la parte aérea de la planta estuvieron correlacionadas unas con otras, como lo indican los coeficientes de correlación de la Tabia 5. Esto indica que para condiciones experi- mentales similares a las del presente estudio, la de- terminación (mica del peso del follaje puede ser suficiente para una comparación rápida y económica del comportarniento de cepa Rhizobium japonicum. 252 TAB LA 5. Coeficientes de correlaciOn (\() entre algunas variables seleccionadas para evaluar el comportamientode cepas de Rhizobiumjaponicum en tres variedades de soya en medio de agar para pléntulas. Variedad Peso de FoUaje %N L-108 Peso de nódulos 0,963" 0,883" L-108 Peso de follaje - 0,858" L-109 Peso de nódulos 0,942" 0,764** L-109 Peso de follaje - 0,691 L-120 Peso de nôdulos 0,881" 0,823" L-120 Peso de follaje - 0,693 + % = 0.602 \{+ 1% = 0.735 Sign ificativo Altamente significativo El experimento en materas con suelo, permitió observar de nuevo Ia especificidad de las cepas en cuanto at genotipo del hospedero. Los análisis de varianza de los datos de este experimento muestran una interacción genotipo por cepa significativa (al nivel del 5%) para el peso seco nódulo y altamente significativa (a nivel del 1%) para el contenido de nitrógeno de Ia parte aérea de Ia planta. En este estudio las cepas CIAT 1, 2 y 51 fueron también las que presentaron Un mejor comportamiento en cuan• to a peso seco de nódulos (Tabla 6). En igual forma éstas fueron las cepas cuyo comportamiento fue menos afectado por el genotipo de planta. La mayoria de las cepas incluidas en este estudio hab Ian sido previamente probadas por Graham (1973) en otros genotipos de soya que se siembran en el Valle del Cauca (Colombia). En dicho estudio Ia cepa CIAT 4 dio los mejores resultados, lo cual no ocurrió en el presente trabajo, hecho que enfati- za Ia necesidad de hacer pruebas de selección de cepas siempre que se introduzcan nuevos genotipos de soya a cualquier zona de cultivo. TABLA 6. Peso seco de nódulos (g/planta) de tres variedades de soya sembradas en materas con suelos de dos sitios del Tolima e inoculadas con diferentes cepas de Rhizobiumjaporsicum. Cepa 1-108 Suelo Serie Perales 1-109 1.120 Suelo -Sane Dindalito L-108 , L-109 L-120 Promedlo dAT-1 0,740 0,757 0,707 0,552 0,412 0,508 0,613 (a) CIAT-2 0,817 0,532 0,637 0,612 0,402 0,487 0,582 (a) CIAT-4 0,610 0,492 0,577 0,382 0,355 0,452 0,478 (b) CIAT-51 0,382 0,300 0,492 0,272 0,367 0,347 0,360 (c) CIAT.196 0,495 0,487 0,432 0,427 0,255 0.555 0,442 (bc) CIAT-197 0,530 0,607 0,792 0,420 0,555 0,545 0,575 (a) CIAT-199 0,840 0,607 0,722 0,822 0,517 0,465 0,662 (a) CIAT-200 0,695 0,715 0,750 0,470 0,480 0.542 0,609 (a) Testigo" 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 (d) Testigo + N"" 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000(d) Promedios con una letra en comin no son estadIsticamente diferentes. Tratamiento sin inocular y sin aplicación de N al suelo. Tratamiento sin inocular y con aplicaciôn de 40 kg/Ha de N. 253 Los resultados de peso seco de nódulos (Tabia 6) correspondientes a los tratamientos sin inoculación (Testigo y Testigo + N) indican que on los suelos estudiados la población "nativa" de Rhizobiurn japonicum es prácticamente nula y por to tanto es necesaria Ia irioculación de la soya en lotes no cultivados recienteniente con dicha especie. Los datos sobre contenido de nitrógeno de la parte aérea de la planta (labIa 7) muestran que los sOelos estudiados suministran muy poco nitrógeno a la planta y que las cepas rnás eficientes suministran cantidades apreciables de este nutrimento a través de la fijación simbiótica. El contenido de nitrógeno de las plantas inoculadas con las cepas CIAT I y 51 fue estadIsticamente igual at de piantas que recibic- ron fertiizantes nitrogenados a una dosis de 40 kg de N/Ha. Por los resultados obtenidos se puede sugerir el uso de las cepas CIAT I y Si para Ia preparación de inoculantes para las variedades de soya anotadas, on las zonas de Espinal y la meseta de Ibagué. Sin embargo, un estudio del comportamiento de las mismas bajo condiciones de campo dará un mejor criterio para recomendar su uso. 5. CONCLUSIONES Los resultados del presente estudio permitieron comprobar la especificidad existente entre cepas de Rhizobiurn japonicum y genotipos de soya. De nueve cepas estudiadas las que tuvieron un mejor coniportamiento con las Ilneas L.108, L-109 y L-120 fueron CIAT 1 y 51, pues presentaron los mayores pesos de nódulos y materia seca y los mayores contenidos de nitrógeno del follaje. Estas cepas fueron las menos influenciadas en su compor- tamierito por el genotipo de planta. Las cepas men- cionadas podrIan utilizarse para la preparación de inoculantes, aunque su prueba on el campo dana bases más seguras para su recomendacián con tal fin. La población "nativa" de Rhizobiurn japonicum en los suelos estudiados es prácticamentc nula, to cual indica la necesidad de usar inoculantes que contengan cepas cuya eficiencia se haya determina- do previamente. Los suelos de las series Perales y Dindalito sumi- nistraron muy bajas cantidades de nitrógeno a la soya, to cual reafirma la necesidad de usar inoculan- tes en esos suelos. El estudio en botelias con agar para plántuias mostró una corrclación estadIsticamente significativa entre ci porcentaje de nitrógeno de la parte aérea de la planta, peso seco de nódulos y peso del follaje, por to cual el iiltimo de estos parámetros puede utilizarse como estimativo para comparar rápida y económicamente el comportamiento de cepas de Rhizobiuin japonicum, utilizando el método descri- to. 6. RESUMEN Se estudió en el invernadero el comportamiento de nueve cepas de Rhizobiuin japonicum de la co- lección del Centro lntennacional de Agnicultura Tropical (CIAT), con tres genotipos de soya (L-108, L.109 y L-120) promisorios para ci departamento del Tolima. El estudio incluyó un experimento en medio de agar para plántulas y otro experimento en materas con suelos de las series Perales (terraza de Ibagué) y Dindalito (Espinal). TABLA 7. Contenido de nitrôgeno foliar 1%) de tres variedades de soya sernbradas en materas con suelos de dos sitios del Tolima, e inoculadas con diferentes cepas de Rhizobium japonicum. Suelo Serie Perales Suelo Serie Dindalito Cepa -- Promedio 1.108 1-109 L-120 L-108 L-109 L-120 dAT-1 3,90 4,33 3,62 3,88 3,25 3,79 3,79 (a1 CIAT-2 3,25 2,84 2,99 3,37 3,53 3,42 3,23 (b) CIAT-4 4,21 3,32 2,83 3,52 3,25 3,40 3,42 Ib) CIAT-51 3,55 3,92 3,20 4,14 3,83 3,55 3,70 lal CIAT-196 3.33 2,96 3,19 3,65 3,48 3,08 3,28 (b) CIAT-197 2,47 3,29 3,25 2,77 3,01 3,31 3,01 (c) CIAT-199 2,86 3,43 2,99 3,14 3,53 3,63 3,26 (b) CIAT-200 3,36 3,39 3,15 3,48 3,46 3,51 3,39 (b) Testigo" 1,46 1,46 1,50 1,92 1.67 1,78 1,63 (d) Testigo + 2,21 4,12 4,38 3,84 4,26 4,30 3,85 (a) Promedios con una letra en comün no son estacli'sticamente diferentes. Tratamiento sin inocular y sin aplicación de N al suelo. Tratamiento sin inocular y con aplicación de 40 kg/Na de N. 254 Los restiltados de ambos experimentos permitie- ron comprobar que existe una aita especificidad entre las cepas de Rhizabium japonicum y las vane- dades de soya. Las cepas CIAT 1 y 51 fueron las menos afectadas en su comportamiento por el geno- tipo de pianta, y dieron los más altos porcentajes de nitrógeno on ci tejido aéreo, y ci mayor peso de nódulos y matenia seca, por lo cual son recomenda- bles para Ia preparación de inoculantes para las vaniedades y los suelos incluidos en este estudio. Los suelos estudiados suministraron muy poco nitrógeno a Ia planta de soya, lo cual junto con Ia baja o prácticamente nula población "nativa" de R/iizobiunz japonicum muestra ia importancia de hacer inoculaciones bajo las condiciones descnitas. En estudios con medio de agar para plántulas, ci peso seco de Ia pane area de La pianta podrIa utilizarse como ónico paráinetro para comparar rápi- da y económicamcnte diferentes cepas de Rhizo- bium japonicum, ya que presenta alta correiación con ci peso de nódulos y ci porcentaje de nitrógcno del tejido aéreo. 7. SUMMARY Behavior of Rhizobium japonicum strains associated with soybean (Glycine max. (1.) Merr.) genotypes selected for the Department of Tolima (Colombia). Greenhouse studies were conducted to observe the behavior of nine Rhizobium japonicum strains in association with three soybeangenotypes (L-108, L-109 and L-120) of promising characteristics of adaptation to the enviroment of the Department of Tolima (Colombia). The strains were suplied by the Centro I nternacional de Agricuitura Tropicai (CIAT). The study included an experiment using seedling agar medium and another one in which the soybean plants were grown in pots containing soils from Perales series (lbagué plateau) and Dindalito series (Espinai). The results confirmed the specificity of the RIsi- zob iu in japonicum-plant genotype association. Strains CIAT 1 and 51 were affected the least by the plant genotype. The highest plant nitrogen- content, nodule dry-weight and dry-matter produc- tion were obtained with these strains. These results allow to suggest their use for preparing inocula for the indicated genotypes and soils. The soils studied supplied very small amounts of nitrogen to the soybean plant and had almost null populations of Rhizobium japonicum, which empha- sizes the need for inoculation. The results of the seedling-agar study indicated that dry-matter production is a suitable parameter for a quick and low cost comparison of Riuzobium japonicum strains, since it is correlated with nodule dry-weight and percent nitrogen of the aereai part of the plant. 8. BIBLIOGRAFIA BREMNER, J.M. and KEENEY, D.R. Determination and isotoperatin analysis of different forms of nitrogen in soils: 3. Exchangeable ammonium, nitrate and nitrite by extraction-distillation methods. Soil Sci. Soc. Amer. Proc. 30:577.582. 1966. BURTON, J.C. The Rhizobium-legume association. En C.M. Gilrnour and O.N. Allen (edt.) Microbio- logy and soil fertility. Proceedings of the Twenty-Fifth Annual Biology Colloquium. 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