Práctica 6 hongos

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PRÁCTICA No.6:HONGOS.
Mauricio Ortiz Aragón 1330114
Juan David Ortega 1329842
Brayan Stevens Ortiz 1324444
Universidad del Valle
Facultad De Ingeniería, Escuela De Ingeniería De Alimentos.
Santiago de Cali, Noviembre 26 del 2014. C= 4,5
RESUMEN 
En el laboratorio se observaron diversos hongos pertenecientes al género Saccharomyces, Aspergillus, Penicillium, Fusarium, Rhizopus y Tricoderma tanto en su estado macroscópico como microscópico. Las imágenes de cada hongo con sus estructuras y su respectiva descripción de acuerdo a la presencia de estructuras, y coloración se muestran en las diversas figuras desarrolladas en el presente informe. Dentro de los Saccharomyces se observan la levadura Candidaa albicans hongo unicelular , en Aspergillus niger y Penicilliumsp se identifica la presencia de esporas en su superficie. Microscópicamente este hongo presenta un conidióforo con Fiálides y Conidiosporas. En Fusarium Spse buscó identificar los macroconidios “Curvados” . Se observó Rhizopussp, en el cual se logró ver los esporangios esféricos de color negro. Con Tricoderma se apreció los conidióforos erectos y ramificados .	Comment by Usuario: Colocar los nombres científicos en letra cursiva	Comment by Usuario: En el resumen debe colocarse el método básico y fundamento de la práctica con que se lograron los resultados obtenidos
ORTIZ.A-ORTEGA-ORTIZ		ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DE LOS ALIMENTOS 
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1. INTRODUCCIÓN
Los hongos son organismos heterótrofos que se alimentan por medio de la absorción de nutrientes solubles y aunque algunos hongos son capaces de metabolizar materiales complejos insolubles, como la lignocelulosa, estos materiales tienen que ser degradados fuera de la pared celular por medio de la secreción de enzimas apropiadas. Algunos hongos son parásitos de los animales, de las plantas y de otros y algunas de estas asociaciones parasitarias han llegado a ser muy complejas e incluso obligadas. Sin embargo, lo realmente preocupa es la capacidad de algunos hongos para producir metabolitos tóxicos, conocidos como micotoxinas, en los alimentos y su asociación con una serie de enfermedades humanas, desde enfermedad gastroentericas hasta el cáncer. 
Los hongos filamentosos crecen en la superficie y en el espesor de su sustrato por procesos de alargamiento, de ramificación y de anastomosis del extremo de las hifas que conducen a la producción de un micelio extenso. Algunas especies han sido especialmente favorecidas para crecer a valores majos de actividad de agua que les permite colonizar productos, como los cereales, que de otro modo estarían excesivamente secos para el crecimiento de microorganismos.
Frecuentemente cuando los mohos atacan los alimentos no causan el tipo de destrucción putrefactiva relacionada con algunas bacterias por lo que los alimentos pueden ser consumidos a pasar de estar enmohecidos y tal vez contaminados por micotoxinas. En realidad, algunos cambios llevados a cabo por el crecimiento de determinados hongos en la superficie de un alimento pueden ser deseables desde el punto de vista organoléptico rigiendo la fabricación de productos tales como quesos madurados por hongos y los embutidos madurados por mohos. ( ADAMS, 1997)
1. OBJETIVOS 
· Conocer la morfología de las estructuras somáticas y reproductoras de las levaduras y de los hongos filamentosos más importantes que atacan lo alimentos. 
· Identificar las características macroscópicas de colonias de hongos filamentosos y levaduras 
2. MATERIALES Y METODOS
3.1. APARATOS, INSTRUMENTOS Y MATERIALES
· Microscopio compuesto
· Estereoscopio
· Cultivos de mohos
· Cultivos de levadura
· Portaobjetos y cubreobjetos
· Lugol, azul de metileno, lactofenol.
· Cinta adhesiva
· Aceite de inmersión y papel lente.
3.2 MÉTODOS
Parte 1. 
se colocó una gota de agua destilada en el portaobjetos, con el alza tomar un poco del cultivo Candidaalbicans y añadir una gota de lugol, colocar el cubreobjeto y observar en el microscopio con los diferentes objetivos.
Parte 2. 
Pasar cinta adhesiva sobre el cultivo de Aspergillus, Penicillium, fusarium sp, Rhizopus y Trichoderma. hasta que el durex quede impregnado con el micelio, luego adicionar una gota de lactofenol sobre un portaobjetos, adherir la cinta durex a la lámina portaobjetos y se observó en el microscopio con diferentes objetivos.	Comment by Usuario: No es impregnar es, para adheri	Comment by Usuario: No es impregnar, es adherir el micelio y estructuras a la cinta durex
3. RESULTADOS
Caracterización morfológica de Levadura.
Se pudo observar las características morfológicas del cultivo de Levadura (Candidaalbicans) Figura 1. (A) muestra las colonias formadas por la levadura de textura glabra, topografía lisa y color Blanco brillante. (B)muestra tomada del cultivo, observada con microscopio. Se lograron identificar células uninucleadas con forma ovoide, con algunos núcleos diferenciados y además se ve que en algunos casos se está originando el proceso de gemación (reproducción asexual) . 
Figura 1. Identificación morfológica de la levadura Candidaalbicans, observada directamente desde el cultivo en caja Petri (A) y al microscopio a (100X) (B).	Comment by Usuario: No parece que hubiera sido observada a 100X. Las estructuras señaladas no son nítidas
CARACTERIZACIÓN MORFOLÓGICA EN CULTIVO DE HONGOS.
Aspergillus niger.
Se pudo apreciar por medio de la Figura 2. (A) muestra hongo de textura polvosa, con micelio bajo, aéreo y delgado. Posee una topografía lisa ya que no tenía irregularidades en la superficie. Poseía una coloración blanca con esporas de color negro en el anverso. El reverso era de color blanco, se alcanzaron a observar las esporas agrupadas en la superficie. (B) Microscópicamente, Aspergillus nigerposee hifas, hialinas y delgadas. Se observaron conidias de color azul. Además Aspergillus niger poseía conidióforo con fiálides en sus extremos de color azul, las cuales sostienen las conidias o microconidias que luego son expulsadas.
Figura 2. Identificación morfológica de Aspergillus niger, observada directamente desde el cultivo en caja Petri (A) y al microscopio a (40X) (B).	Comment by Usuario: Fuente los autores
PenicilliumSp. 
Mediante la Figura 3. (A) muestra hongo de textura polvosa, con micelio, conjunto de filamentos tubulares (hifas). Posee una topografía rugosa ya que tiene irregularidades en la superficie. Poseía una coloración verde y color crema al reverso. (B) Microscópicamente se observó la presencia de hifas septadas gruesas y de azul traslúcida, producto del colorante azul de lactofenol. Además se observan las estructuras como el conidióforo que posee unas branquias de las cuales se ramifican las Fiálides que finalmente producen las Conidiosporas de coloración translúcida.
Figura 3. Identificación morfológica de PenicilliumSp, observada directamente desde el cultivo en caja Petri (A) y al microscopio a (40X) (B).
Fusarium Sp. 
En base a la Figura 4.(A) muestra Colonias algodonosas de color morado, tenía presencia de gran cantidad de hifas. El reverso era de color morado más intenso. (B) Microscópicamente, Fusarium sp posee hifas delgadas. Se observaron Fiálides y macroconidias acumuladas en la punta de la fiálide formando falsas cabezas, en la muestra los macroconidios están muy juntos entre sí dificultando la observación. 
Figura 4. Identificación morfológica de Fusarium Sp, observada directamente desde el cultivo en caja Petri (A), macroscopio (C) y microscopio a (40X) (B).	Comment by Usuario: La figura corresponde a la de un Ttricoderma no un Fusarium
Rhizopus Sp.
Con la Figura 5. (A) muestra hongo de textura vellosa, con micelio aéreo y delgado. Poseía una tonalidad gris, con esporangios esféricos negros al anverso. El reverso era de color crema, se alcanzaron a observar las esporas agrupadas en la superficie. (B) Poseía conidióforos de color marrón los cuales sostenían en su extremo a los esporangios. En estos esporangios se observaban las Conidiosporas. Las hifas de Rhizopus sp. no son septadas y con paredes gruesas.
Figura 5. Identificaciónmorfológica de Rhizopus Sp, observada directamente desde el cultivo en caja Petri (A), macroscopio (C) y microscopio a (40X) (B).
Tricoderma.
Mediante la Figura 6.(A)muestra hongo de textura pulverulenta, rugosa ya que tiene irregularidades en la superficie. Poseía una coloración verde y color crema al reverso. (B) Microscópicamente se observó la presencia de hifas septadas. Además se vieron las estructuras como el conidióforo erecto altamente ramificado, conidiassubglobosas y la presencia de Clamidiosporas.
Figura 6. Identificación morfológica de TrichodermaSp, observada directamente desde el cultivo en caja Petri (A), y microscopio a (40X) (B).
4. DISCUSION
La estructura somática (vegetativa) de los hongo, llamados micelos, está constituida por filamentos llamados hifas, las cuales pueden ser septadas (divididas por tabiques) o cenocíticas. La pared celular de las hifas está compuesta generalmente de celulosa o quitina. Las hifas permiten a los hongos absorber el alimento del medio. En algunos honogsfitoparasitarios las hifas producen estructuras llamadas hausotorios, los cuales absorben sustancias desde la celula de la planta sin dañar la membrana celulcar. Las hifas también pueden agregarse de distintas maneras para formas estructuras resistentes a las condiciones ambientales, las cuales le permiten al ojos vivir por un largo periodo de tiempo. Bajo condiciones de ambientales favorables las hifas pueden crecer indefinidamente. Grupos de hifas provenientes de un mismo lugar se denominan colonias. La fragmentación del micelio es un método común, y e s muy utilizados para propagar hongos en forma de laboratorio. (ARAUZ, 1898)
Asi de forma general lo más notorio entre una especie de hongos y otras son sus característicasgmorfologias, pues es apreciables en forma macroscópica, por lo forma sus principales diferencias son de suma importancia para poder hacer una diferenciación entre cada uno. Por esta razon se hace necesario realizar un cuadro comparativo entre las 5 clases analizadas en el laboratorio: Levaduras, Aspergillus Sp, PenicillumSp, Fusarium Sp, Rizhopus y Tricoderma. 
Levaduras: las levaduras son hongos unicelulares, no filamentosos, con una morfología característica esférica u ovalada. Al igual que los mohos, las levaduras se hallan ampliamente distribuidas en la naturaleza; se encuentran frecuentemente en forma de polvillo blanco que recubren los frutos y las hojas. Como la mayoría de las levaduras forman colonias de organismos unicelulares no se reproducen como una unidad; en su lugar la colonia crece a medida que aumenta el número de levaduras. Este aumento suele ocurrir por gemación. En la gemación la célula parental forma una protuberancia (yema) sobre su superficie externa. Cuando la yema se alarga el núcleo de la célula parental se divide y uno de los núcleos emigra a la yema. El material de la pared celular se deposita entre la yema y la célula parental y la yema acaba finalmente por separarse. (Figura 1).(TORTORA et al, 2007) 
Aspergillus Sp:Las colonias de las especies de este género se desarrollan en general de forma rápida y presentan diversas tonalidades: blanquecinas, amarillentas, Marron-amarrillentas, negruzcas, marron-negruzcas o verdosas (Figura 2). Estan formadas por densas agrupaciones de conidióforos sobre los que se encuentran las células conidiogenas que son las que originan las esporas asexuales o conidios. El conidióforo característico de Aspergillusposee tres partes bien diferenciadas: vesícula (extremo apical hinchado), estipe (sección cilidrica situada debajo de la vesícula) y célula pie (sección final, que une el conidióforo con el micelio). Sobre la vesicula se disponen las células conidiogenas, denominadas habitualmente fialides. En muchas especies, entre la vesicula y las fialides se encuentran otras células denominadas metulas. Las vesícula, las metulas (si ten presentes), las fialides y los conidios constituyen la cabeza uniseriadas, y si se presentan fialides y metulas, biseriadas. Los conidios pueden formar columnas compactas ( cabeza conidial columnar) o divergente (cabeza conidial radial),actualmente se conocen más de 180 especies en el género Aspergillus. (SORIANO, 2007)
Penicillum Sp: Estas especies forman colonias que crecen generalmente de manera rápida, están formadas por densas agrupaciones de conidióforos y la mayoría presentan coloraciones verdosas (Figura 3),la textura de la colonia también es una característica importante ( por ejemplo, velutina o aterciopelada, lanosa, funiculosa, fasciulada o sinematosa) y dependen de la disposición de los conidióforos. La estructura de reproducción asexual característica de Penicillumes un conidióforo formado por una estipe diferenciada que finaliza en un penilicio o pincel. Este pincel puede estar formado por diversas estructuras que reciben nombres distintos según su localización y complejidad ( metulas, ramas…) y que sustentan en la parte más apical un conjunto de fiàlides.(SORIANO, 2007)
Fusarium Sp: El género Fusarium comprende muchas especies y un gran número de ellas, por no decir casi la totalidad, son capaces de producir metabolitos tóxicos. La principal característica del género es la presencia de conidios hialinos, curvados, fusiformes y septados denominados macroconidios(Figura4). Esto macroconidios se forman a partir de unas estructuras denominadas esporodoquios o bien pionotes. Algunas especies pueden producir conidios mas pequeños uni o bicelulares denominados microconidios.(SORIANO, 2007)
Rhizopus: La clave para la identificación de las especies de Rhizopus es la producción de rizoides caracteristicos, similares a raíces. Los rizoides que de modo típico se origina en la hifa inmediatamente adyacente al esporiogioforo se denomina nodal (Figura 5). Los esporangioforos que miden 1000 micrometros terminan en una columna cóncava que se extiende al interior del esporangio sacular. El colapso en forma de paraguas del esporangio posmaduro se observa a menudo como un rasgo secundario en los cultivos más viejos, particularmente útil para identificación preliminar cuando los rizoides están desarrollados de manera insuficiente. (KONEMAN, 2008)
Trichoderma: de este hongo se obtiene poca información pero de forma general la mayoría de las especies tienen ascocarpos de brillantes colores; los estromas, si están presentes, usualmente también son de colores brillantes(figura 6) . Los tejidos de los peritecios y estromas son carnosos. Las ascas son persistentes y tiene varios tipos de estructuras apicales, forman sus peritecios embebidos en estromas, mostrando al exterior solamente los ostiolos. Las ascosporas con bicelulares, con una marcada constricción en el septo. Frecuéntenme al madurar las dos células de la espora se separan. (ULLUOA y HANLIN, 1978)
De este modo es posible ver que dependiendo el tipo de hongo, la clase y sus subdivisión se puede tener características determinadas para cada uno que permiten su identificación morfológicas y además una diferenciación con mayor precisión. 
5. CONCLUSIONES
· Las diferentes estructuras (macro y microscópicas) presentes en un hongo son un carácter importante en taxonomía de los diferentes grupos, pues están permiten una identificación preterminada para cada tipo de hongo. 
· Los diferentes mecanismos nutricionales son variables entre los grupos y así mismo existen grandes diferencias morfológicas, resultado de 	un proceso adaptativo y evolutivo. 
6. PREGUNTAS
7.1 Menciona las estructuras de reproducción asexual y sexual que se observaron.
¿Qué hongos crees que presentan mayor grado de organización estructural en sus cuerpos fructíferos?
R/ El hongo de la especiesde Rhizopus pues producen esporas asexuales y sexuales. Las esporangiosporas asexuales se producen dentro de una estructura aguzada, el esporangium, y son genéticamente idénticas a su padre. EnRhizopus, el esporangio es soportado por una gran columelaapofisada, y el esporangióforo asoma entre rizpodes distintivos. Zigosporas negras se producendespués de dos fusiones compatibles de miceliosdurante la reproducción sexual. Y hacen colonias que pueden ser genéticamente diferentes de sus padres. (MIER, T.et al 2002)
ESPORAS ASEXUALES: Las esporas asexuales son siempre INMÓVILES y se producen en esporangios redondos o piriformes portados en Esporangióforos sencillos o ramificados. Algunos géneros carecen de esporangios y la reproducción asexual tiene lugar mediante Conidios. Son esporas que se producen dentro de los ESPORANGIOS. Al romperse el esporangio las esporas salen y al caer en el sustrato adecuado dan origen a nuevas hifas. En este tipo de reproducción el núcleo de la célula madre se divide en varios núcleos, cada uno toma una parte del citoplasma de la célula madre que luego se rodea de una membrana celular, la célula madre se rompe y se liberan varias células hijas. Ejemplo: en Mucor o en Rhizopussp (Ver. Figura 5). Los CONIDIOS son esporas desnudas que se forman en los extremos de las hifas mediante gemación. Ejemplo: en el hongo Aspergillus niver (Ver. Figura 2.)
Las levaduras se reproducen asexualmente por gemació o brotación y sexualmente mediante ascosporas o basidioesporas. Durante la reproducción asexual, una nueva yema surge de la levadura madre cuando se dan las condiciones adecuadas, tras lo cual la yema se separa de la madre al alcanzar un tamaño adulto. En condiciones de escasez de nutrientes las levaduras que son capaces de reproducirse sexualmente formarán ascosporas. Las levaduras que no son capaces de recorrer el ciclo sexual completo se clasifican dentro del género Candida. (Ver figura 1.)
 ESPORAS SEXUALES: Las esporas asexuales se producen en los Esporangios, que nacen de hifas especiales llamadas Esporangióforos (Ver. Figura 5). Estas hifas elevan de forma característica los esporangios por encima del micelio, de este modo, las esporas son capturadas fácilmente y transportadas por las corrientes de aire.
 Las Esporas Sexuales pueden ser de ENDÓGENAS, es decir, formadas dentro de un receptáculo cerrado; gametangios llamados anteridio y oogonio. O EXÓGENAS, es decir no encerradas, gametangios semejantes.(GARCIA, V. 2004).
7.2 Todos los hongos observados ¿presentan micelio? Explique. 
La mayoría de los hongos son organismos cenocíticos y tienen una estructura vegetativa denominada micelio. El micelio consta de una masa de citoplasma multinucleado encerrada dentro de un sistema de tubos rígidos y ramificados que son de diámetro bastante uniforme. Los tubos que encierran al protoplasma representan una estructura protectora homologa a la pared celular de un organismo unicelular. Normalmente, un micelio surge de la gemación y posterior crecimiento de una sola célula reproductora o espora. (STANIER, R.Yet al 1992)
7. BIBLIOGRAFIA
1. ADAMS, M.R. (1997).”Microbiologia de los alimentos”. Editorial ACRIBIA.S,A.España.Pag 287-288.
2. ARAUZ.L,F. (1898) “Fitopatologia: Un enforque agroecologico”. Editorial Universidad de Costa Rica- Ciudad Universitaria “Rodrigo Facio”. Pag 108.
3. TORTORA G.J.,FUNKE B.R., CASE C.L. (2007) “Introducción a la microbiología” 9ª edición. Editorial medica panamericana. Pag 284.
4. SORIAN.J,M et al.”Micotoxinas en Alimentos”. Editorial Diaz de Santo. España (2007).pag 32,35,47
5. KONEMAN, E. W. (2008). “Diagnostico microbiológico:Texto y Atlas a Color” 6ª edición. Editorial medica panamericana. Pag 1119
6. ULLOA.M; HANLIN. R (1978). “Atlas de MicologiaBasica”. Editorial Concepto S.A. Mexico.D.Fpag 81. 
7. GARCIA, V. (2004). Introducción a la Microbiología 2ª Ed. Editorial EUNED. Costa Rica.Pag 89-95
8. MIER, T. TORIELLO, C. ULLOA, M. (2002). Hongos microscópicos saprobios y parásitos. Editorial UNAM. Mexico. Pag 27.
9. STANIER, R.Y. INGRAHAM, J.L. WHEELIS, M. L. PAINTER, P. R. (1992). Microbiologia 2da edición. Editorial Reverté S.A. Barcelona. Pag 574.