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UNIVERSIDAD VERACRUZANA FACULTAD DE BIOANÁLISIS EXPERIENCIA EDUCATIVA MICROBIOLOGÍA GENERAL PROFESORA Q.F.B. EDITH POZOS MESTIZO PRÁCTICA NO.1 MICROSCOPÍA ALUMNA DANIELA FALFÁN LUCAS 09 DE MARZO DE 2022 OBJETIVO El alumno recordará las principales técnicas de microscopía aplicables en microbiología. GENERALIDADES El microscopio es un aparato que nos permite observar todo aquello que no es posible ver, o que es invisible a simple vista dado a su reducido tamaño. Los componentes del microscopio de dividen en 3 sistemas que interactúan entre si: 1. Sistema mecánico (azul) 2. Sistema óptico (rojo) 3. Sistema de iluminación (amarillo) El sistema mecánico es el esqueleto o armazón del microscopio, el cual proporciona soporte y estabilidad al equipo. Está integrado por: • Tubo del microscopio: Cilindro que en su parte superior sostiene a la lente o lentes oculares y en la parte inferior se encuentra el sistema de lentes objetivos. • Tornillo macro y micrométrico: El tornillo macro, proporciona avances rápidos de la platina. El tornillo micrométrico proporciona avances de la platina en milímetros. • Revólver: Parte circular en la que se encuentran atornilladas los diferentes lentes objetivos, al girar el revolver cambian las lentes objetivos sin causar desenfoque. • Platina: Pieza metálica cuadrada o circular, con un orificio central sobre el que se colocan las preparaciones a observar y por el que atraviesa el haz luminoso. • Base o Pie: Base sobre la que descansa el aparato y le da estabilidad. • Brazo o columna: Une la base con el tubo ocular, contiene los tornillos macro y micrométrico. El sistema óptico está formado por 2 sistemas de lentes: objetivos que proyecta una primera imagen y oculares que amplían la imagen anterior. • Lentes oculares: Van montados en la parte superior del tubo del microscopio. Su nombre se debe a la cercanía de la pieza con el ojo del observador y sus poderes de aumento van desde 4x hasta 20x. • Lentes objetivos: Se encuentran en el revólver y quedan cerca del objeto a observar. Hay 2 tipos de objetivos: Objetivos secos y de Inmersión. El número de objetivos varía con el tipo de microscopio y el uso a que se destina. Los aumentos de los objetivos secos más frecuentemente utilizados son: 4X, 10X, 20X, 40X y 60X. El sistema de Iluminación está formado por la fuente de iluminación, Espejo, Condensador, y Diafragma. • Fuente de iluminación: Consta generalmente de una lámpara incandescente, generalmente de tungsteno. • Condensador de luz: Está formado por un sistema de lentes cuya función es captar los rayos luminosos y dirigirlos hacia la preparación que se va a enfocar. • Diafragma: Una abertura que controla la cantidad de luz que debe pasar por el condensador, que se regula por una palanca lateral. (Cruz, 2017) Los protozoos o protozarios, son organismos unicelulares de tipo eucariota, con núcleo y citoplasma. Aunque también pueden estar compuestos por un grupo de células idénticas entre sí. Todos ellos se encuentran en entornos húmedos, tanto en aguas saladas como dulces, o bien, siendo parásitos de otros seres vivos. Por lo tanto, suelen ser sensibles ante la falta de oxígeno. Clasificación tradicional de los protozoos En función del desplazamiento, los protozoos se clasifican, tradicionalmente, de la siguiente manera: • Ciliados: Se caracterizan por tener el cuerpo cubierto de cilios los cuales son utilizados para moverse. Consumen bacterias en los medios acuáticos y poseen dos núcleos. • Flagelados: Los flagelados presentan un solo núcleo y están formados por células aisladas o en colonias. Se hallan entre los protozoos y las algas. La mayoría tienen alimentación heterótrofa. • Rizópodos: Son una clase de protozoarios unicelulares que cambian de forma mediante la emisión de seudópodos para capturar el alimento sólido. Su reproducción puede ser sexual o asexual. La mayoría habita en el mar o en las aguas dulces, aunque también los hay de tierra húmeda. • Esporozoos: Los esporozoos acostumbran a permanecer inmóviles ya que son parásitos internos. Poseen un ciclo de vida asociado al individuo que parasitan. La reproducción puede ser sexual o asexual. (Instituto Europeo de Química, Física y Biología, 2021) MATERIALES • 1 portaobetos • 1 cubreobjetos • 1 pipeta Pasteur EQUIPO • Microscopio óptico REACTIVOS • 1 cultivo de protozoarios para observación • Aceite de inmersión • Colorante Rojo neutro TÉCNICA PREGUNTAS Con base a la práctica e investigación, responder: 1. ¿Cuál es el aumento que permite el microscopio óptico? El máximo aumento que se puede alcanzar con este instrumento es de 1500x. 2. ¿Cuál es el aumento de un microscopio electrónico usado en la investigación? Se pueden obtener aumentos de 20,000 hasta 50,000x. 3. ¿Cómo sabemos cuántas veces vemos aumentada la imagen de un microscopio? El poder de la amplificación de la imagen se obtiene multiplicando la ampliación del ocular del microscopio por la ampliación del objetivo. 4. ¿En qué orden empezamos a enfocar con los objetivos? Del menor a mayor. En la práctica se utilizó 10x, 25x, 40x, y por último, usando aceite de inmersión: 100x. 5. Explica las razones por las que no deben tocarse las lentes de un microscopio con los dedos Porque esto puede causar distorsiones en la imagen, además no permite realizar un enfoque correcto ni obtener una buena definición. OBSERVACIONES Poder encontrar protozoarios en el cultivo fue un poco difícil, por eso, se decidió añadir el colorante rojo neutro a la preparación. De este modo, se trató de hacer el mejor enfoque posible al utilizar aceite de inmersión, es decir, localizar lentes objetivos en 100x. RESULTADOS La práctica dio un resultado correcto, fue posible observar a un grupo de protozoarios tanto móviles como inmóviles, por lo que se piensa que se observaron protozoos de tipo ciliados y esporozoos. CONCLUSIÓN Conocer el uso y manejo correcto del microscopio, es sumamente importante para el desarrollo del Químico Clínico. Dado que este es un instrumento base en la labor diaria del profesional, fue de gran aporte abordar esta práctica. Además, el conocimiento básico sobre protozoarios es fundamental en el área de la microbiología, por lo que la búsqueda de estos microorganismos es parte importante en la formación estudiantil, para posteriormente poder aplicar este conocimiento en la vida laboral. REFERENCIAS Cruz, S. (2017). MANUAL DE INSTRUMENTACIÓN. Xalapa: Universidad Veracruzana. Instituto Europeo de Química, Física y Biología. (27 de Enero de 2021). Protozoos: clasificación tradicional. Obtenido de https://ieqfb.com/protozoos-clasificacion- tradicional/#:~:text=Los%20protozoos%20son%20organismos%20microsc%C3%B3picos,lo s%20esporozoos%20y%20los%20riz%C3%B3podos.
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