PRACTICA N 11 - BIOQUIMICA

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PRACTICA Nº 11 : VITAMINAS
RELACIÓN DE EXPERIMENTOS.
1. Determinación cuantitativa de Vitamina C, en jugos de frutas cítricas.
OBJETIVOS.
1. Cuantificar el contenido de vitamina C en diferentes frutos
2. Interpretar el fundamento de la determinación de vitamina C.
INTRODUCCIÓN.
Las vitaminas son compuestos orgánicos de estructura química diversa, que cumplen
destacada función en el mantenimiento de la salud y que, al no poder ser sintetizadas por el
organismo, deben ser ingeridas necesariamente en la alimentación; no obstante, sólo se
requiere de ellas, cantidades muy pequeñas.
Las vitaminas no tienen roles plásticos, ni energéticos y su mecanismo de acción es
básicamente regular el metabolismo directamente o a través de la constitución de coenzimas
y/o grupos prostéticos. No obstante, algunas vitaminas cumplen además roles específicos.
El indicar la incapacidad de la síntesis de las vitaminas, por los animales superiores, no es del
todo cierto, ya que está demostrado que el ácido nicotínico (niacina) puede ser sintetizado a
partir del aminoácido triptófano. De otro lado, existen otras vitaminas (ácido pantoténico,
biotina) cuyas manifestaciones carenciales en el hombre, no han podido ser detectadas
adecuadamente.
EXPERIMENTO Nº 1.
DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE LA VITAMINA C EN PLASMA
SANGUÍNEO O EN FRUTOS CÍTRICOS.
La vitamina C pura (ácido L-Ascórbico) es una sustancia blanca cristalina, de sabor ácido,
insoluble en la mayoría de solventes orgánicos; en el agua su solubilidad es de 1 g en 3 mL.
Tiene un fuerte poder reductor, que deriva de la facilidad con que puede perder los átomos de
hidrógeno que constituyen los grupos hidroxilo unidos a los átomos de carbono que
conforman el doble enlace (enediol).
Su función mejor conocida corresponde a su participación en la producción de los tejidos de
origen mesenquimatoso, como el colágeno, dentina, etc., aunque su mecanismo de acción aún
no está aclarado; no obstante, se piensa que la síntesis de hidroxiprolina está perturbada
cuando hay un déficit de vitamina C. También se ha postulado la participación del ácido
L-ascórbico en otras reacciones de hidroxilación, como la conversión del triptófano en
serotonina. También se ha reportado la intervención de la Vitamina C en la absorción de Fe
en el intestino de humanos.
Experimentalmente es factible producir escorbuto en el hombre, primates, y en el cobayo. En
cambio, en otros animales resulta dificultoso en razón a la capacidad que tienen éstos de
poder sintetizar la vitamina. A las manifestaciones clínicas propias del escorbuto y que se
observan muy bien en cobayos, se suman otras alteraciones bioquímicas, como un
metabolismo anormal de la tirosina. En este sentido la administración de tirosina o
fenilalanina, determinan una considerable excreción urinaria de p-hidroxifenilpirúvico. Se
asume que la actividad de la p-hidroxifenilpirúvico hidroxilasa que cataliza la transformación
del p-hidroxifenilpirúvico en ácido homogentísico, está disminuida en animales escorbúticos.
La determinación de la vitamina C en líquidos biológicos (suero o plasma sanguíneo, jugos
de frutas) se funda en la reducción del 2,6 diclorofenolindofenol en presencia de ácido
acético y ácido metafosfórico los que previenen la oxidación aeróbica de la vitamina y
además precipitan a las proteínas.
Procedimiento.
a) A 2 mL de plasma (o Jugo de frutas), añadir un volumen igual de solución
acética-meta fosfórica (ácido acético al 8 % (p/v) y ácido metafosfórico al 2 % (p/v).
b) Titular con una solución 0,05 % 2,6 diclorofenolindofenol, hasta una coloración
rosada débil y persistente durante 5 segundos.
c) Titular un blanco como control (agua en lugar de muestra).
d) Para efecto de los cálculos se asume que cada 1 mL de 2,6 diclorofenolindofenol
equivale a 0,12 mg. de ácido L-ascórbico.
Expresión de resultados.
En un cuadro anote la concentración de vitamina C en el plasma o las diferentes soluciones
problema (jugos) en mg %.
MUESTRA
2, 6 diclorofenol
indofenol gastados (ml.)
mg. de Ac. Ascórbico /
100 ml de jugo
Naranja 2,7 ml 16,2 mg
Limón 3,8 ml 22,8 mg
Mandarina 2,2 ml 13,2 mg
Kiwi 8,5 ml 51 mg
Fresa 3,4 ml 20,4 mg
INTERROGANTES.
1. Comente brevemente la síntesis de vitamina C en otros animales.
Los primates, y cobayos son animales que no pueden sintetizar la vitamina C su
carencia produce muchos trastornos del sistema mecánico, por esta situación el
cobayo lo utilizan para estudios de laboratorios ya que no puede sintetizar ácido
ascórbico, en cambio en otros animales como algunos mamíferos se da su síntesis en
el hígado a partir de la glucosa es extraída del glucógeno, por esto la síntesis de
ascorbato es un proceso glicólisis-dependiente. En reptiles y aves la biosíntesis es
llevada a cabo en los riñones.
2. ¿Cómo se explica que la vitamina C no sea tal para la rata?
Suministrar la Vitamina C para la rata no es necesaria ya que este animal puede
sintetizar esta vitamina a través del hígado, a contrario que los primates ya que esta
https://www.ecured.cu/Gluc%C3%B3geno
https://www.ecured.cu/Reptiles
https://www.ecured.cu/Aves
https://www.ecured.cu/Ri%C3%B1ones
vitamina es indispensable en el complejo B, y es necesaria en la embriogénesis y en el
crecimiento.
3. ¿Qué propiedad del ascorbato se utiliza para su determinación?
Para la determinación del ácido ascórbico o ascorbato se utilizó su propiedad de
oxidación reversible para formar ácido dehidroascórbico. En otras palabras, cuando el
ácido ascórbico se encuentra en presencia de oxígeno, se degrada esencialmente a
ácido dehidroascórbico. Este último compuesto posee actividad completa de vitamina
C.
4. ¿Cómo determinaría colorimétricamente la vitamina C?
La determinación colorimétricamente del ácido ascórbico se basa en la reducción del
colorante 2-6 diclorofenolindofenol, por el efecto del ácido ascórbico en solución.
5. Cite Ud. las funciones que cumple la vitamina C en humanos.
La vitamina C se necesita para el crecimiento y reparación de tejidos en todas las
partes del cuerpo. Se utiliza para:
➔ Formar una proteína importante utilizada para producir la piel, los tendones,
los ligamentos y los vasos sanguíneos
➔ Sanar heridas y formar tejido cicatricial
➔ Reparar y mantener el cartílago, los huesos y los dientes
➔ Ayudar a la absorción del hierro
La vitamina C es uno de muchos antioxidantes. Los antioxidantes son nutrientes que
bloquean parte del daño causado por los radicales libres.
➔ Los radicales libres se producen cuando el cuerpo descompone el alimento o
cuando usted está expuesto al humo del tabaco o a la radiación.
➔ La acumulación de radicales libres con el tiempo es ampliamente responsable
del proceso de envejecimiento.
➔ Los radicales libres pueden jugar un papel en el cáncer, la enfermedad del
corazón y los trastornos como la artritis.
El cuerpo no puede producir la vitamina C por sí solo, ni tampoco la almacena. Por lo
tanto, es importante incluir muchos alimentos que contengan esta vitamina en la dieta
diaria.
6. Explique el fundamento en que se basa la determinación de la vitamina C.
Este análisis se basa en la reacción entre el agua de yodo y el ácido ascórbico
formando el ácido deshidroascórbico. El almidón agregado al sistema indicará cuando
la reacción se ha completado pues este reacciona con el yodo sobrante dando una
coloración azul-negro. En el experimento hecho en clase se pudo ver claramente este
color dando como resultado la presencia de la Vitamina C.
REFERENCIAS
1. Zago G Karina I, García F María Y, Di Bernardo María L, Vit Patricia, Luna José R,
Gualtieri María. Determinación del contenido de vitamina C en miel de abejas
venezolanas por volumetría de óxido-reducción. INHRR [Internet]. 2010 [citado el
27 de junio de 2021] ; 41( 1 ): 25-30. Disponible en:
http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0798-04772010000100004&l
ng=es.
2. Principal P, médica E, C V. Vitamina C: MedlinePlus enciclopedia médica [Internet].
Medlineplus.gov.2021 [citado el 23 de junio 2021]. Disponible en:
https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/002404.htm
http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0798-04772010000100004&lng=es
http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0798-04772010000100004&lng=es
https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/002404.htm