Biologia-celula-25

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Soporte de
la muestra Freón
líquidoNitrógeno
líquido
Cuchilla helada
Muestra
Platina de
la muestra
1. Congelación 2. Fractura
3. Grabado 4. Sombreado y replicación
Muestra
5. Réplica vista al 
microscopio electrónico
CAPÍTULO 1: ESTUDIO GENERAL DE LA CÉLULA 11
jido en estudio se incorporan y, dentro de esas célu-
las, de qué orgánulos o estructuras celulares forman
parte, y seguir la transformación de dichas estructuras
(Fig. 1.6).
Si, por ejemplo, se quiere saber qué células de un
tejido están sintetizando DNA como un paso previo a
la división celular, se suministra timidina tritiada (H 3)
al tejido durante algún tiempo. Durante ese período,
en todo el DNA sintetizado por las células de ese teji-
do se incorporará la timidina marcada radiactivamen-
te. Al tomar muestras del tejido (p. ej., cortes histoló-
gicos), si la lámina que contiene el corte se recubre de
una emulsión fotográfica, en ésta quedará una impre-
sión producida por las radiaciones emitidas por la ti-
midina tritiada, que activan los cristales de bromuro
de plata de la emulsión. Al revelar fotográficamente
esta emulsión, aparecerán gránulos negros de plata
sobre los núcleos que han sintetizado DNA durante 
el período de administración de la timidina radioacti-
va (Fig. 1.7).
CITOQUÍMICA E HISTOQUÍMICA
Las tinciones empleadas comúnmente en microscopía
óptica proporcionan por sí mismas alguna información
acerca de la naturaleza química de los componentes de
las células y tejidos. Así, la tinción de rutina más co-
mún, la hematoxilina y eosina, utiliza un colorante bási-
co (hematoxilina) y un colorante ácido (eosina). Las sus-
tancias de naturaleza ácida (como los ácidos nucleicos)
tienen afinidad por la hematoxilina y, en general, por to-
dos los colorantes básicos, con los que se tiñen, y por
Figura 1.5. Preparación de
una muestra por criofractura.
Cristal de BrAg
Espécimen (sección)
Filme de sostén
(coloidón + carbón)
Gelatina
Filme de sostén
Grano revelado
Gelatina
Espécimen (sección)
Figura 1.6. Representación de una preparación radioau-
tográfica.
Figura 1.7. Marcaje radiactivo con timidina tritiada de
un cultivo de células de testículo fetal de ratón. Las célu-
las que se encontraban replicando el DNA durante la ad-
ministración de la timidina radiactiva aparecen marcadas
con gránulos negros. X900. (Cortesía de M.P. de Miguel).
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