ESCHERICHIA

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ESCHERICHIA 
INTRODUCCION 
Escherichia coli e.s conocida C()mo habitante saprófüo del 
inrcstino Sin embargo, otr<.\s serotipos se identifican como un 
frcclJente agente causal de diarrea en animales nconatos, adultos 
y en el hmnbre. Las diferentes cepas aisladas de estos procesos 
se clasifican en patotipos: enteropatogénkits (EPEC), enteroin­
vash1as (EIEC), enterotoxigénicas (ETEC), enteroagregativ:is 
(EAEC) y vcrot.oxigénicas (VTEC), dependiendo de los factüres 
de virulencia que púseen. Aquellas VTEC que han sido causal de. 
colitis hemorrágica o síndrome urén-.ico hemolítico en el hombre 
se designan enferohemorrágicas (EH'EC}, siendo entonces este 
patotipo una subclase de VTEC (tabla 24- l ) A pesar de esta 
distinción, las distintas categorías presentan coincidencias: todas 
interactúan con la mucosa intestinal, producen enterotoxinas o 
citotoxinas, y pertenecen a ciertos serotip()s O:H. 
Clínicamente, la infección puede cursar con grandes pérdidas de 
agua y electrólitos, colitis hemorrágica, desaparición de las vellosi­
dades de la mucosa. intestinal y complicaciones clínicas diversas en 
vasos san�'Uineos mesentéricos, absorción deficiente de alimentos, 
desnutrición, pérdida de peso y muerte en los casos sin tratamiento. 
A.unquc con menor frecuencia, puede causar infecciones extraen-
1éricas, particularmente en vías urinarias. Anualmente, este agente 
infeccioso causa importantes pérdidas en la economía rnraL
EPIDEMIOLOGlA 
Escherichia coli puede hallarse en rodo el planeta, aun en el 
sector antártico. No obstante, la situación geográfica, temperatura 
y humedad ambiente son factores que determinan su incidencia. 
En Argentina se distribuye en todo el territorio, abarcando las más 
variadas especies anímales. La prevalencia es mayor en zonas 
húmedas y cálidas, condiciones que prolon.gan la sobrevida del 
microorganismo en el medio ambiente. El suelo y el agua suelen 
ser las fuentes de infección, con1amínados por las eyecciones de 
los an imales diarreicos. 
Desde las fuentes, el microorganismo es transmitido al animal 
por la vía digesti.va, a través de la bebida y los alimentos. 
La mortalidad es baja si se administra una rápida y oportlma 
terapéutica, pero puede aniquilar un criadero en pocos días si no 
Tabla . Patotipos de E. coli 
Tipo 
Enteropatogénicas (EPEC) 
Enteroinvasivas (ETEC) 
Enterotoxigénicas rETEC) 
Enteroagregativas (EAEC) 
Verotoxigénicas (VTEC) 
se tornan medidas a tiempo. El hacinamiento. la falta de higiene. 
el inadecuado manejo de las guacheras en ios rodeos de tambo, 
son causas de mennas import.amcs en un establecimiento . 
Como es de esperar, los ejemplares más st1�ceptihies íesurta11 
ser los neonaios, paniculannente si no han recibido adecuada in,1.1U­
noprote,...:ción materna. Por esa raz.ón, la pre.valencia e.s mayor entn: 
los remeros nacidos de. madres que no han si.do expuestas amerior­
mente a cepas patógenas de E. co/i o vacunadas . Su exi stencia en 
un rodeo de animales inmunológi.carnenie despror.egiáos, crea focos 
de multiplicación y di semi.nación de las cepas patog;énicas . 
CLASIFlCAClON 
De acuerdo con la novena edición del Manual Bergey de 
Bacteriología sis.temáúca, Escherichia coli pertenece al
. 
orden de 
las Eubacteriales, famiI ia Ent.erobacte1iaceae, tribu. Esche1ichiea.e. 
genero Escherichia, especie co/i. 
Jumo a otros bacilos gramn\:gativos, esta bacteria es descrita 
en la sección quinta, volumen l del manual referido. 
MORFO LOGIA Y CARACTERISTICAS 
GENERALES 
Escherichia coli se. presenta como bacilos rectos. gramnega­
tivos, que miden entre I y 1 ,5 ¡tm � 2 y 6 µm. según ias condicio­
nes, y pueden aparecer aislados o en pares. 
Entre los elementos constitutivos de su estrnctura. ademas de 
la pared bacteriana, se destacan !os pili o fimbrias, la cápsula. 
los flagelüs perítricos y la membrana externa (fig. 24- 1 ). Sin 
embargo, sólo algunas cepas presentan cápsula. Existen cepas sin 
movilidad y, por consiguiente, sin flagelos. No se han descrito 
fom1as espornladas en E. coli.
La cápsula está constituida por polisacaridos que, de acuerdo 
con variaciones cuai i y cuantitativas en los monosadridos que los 
componen, originan una amplia gama de antígenos "K'. 
El antígeno somático "O" está detenninado por la. naturale.za 
de los azúcares de las cadenas laterales del lipopolísacúrido (LPS) 
que confonna la membrnna externa ('outer envelope ") de ia bac­
teria. A.!gunos cambios en la longitud de esas cadenas !aternle.s en 
Subti.po 
Enterohemomi.gicas (EHEC)* 
• Causa de colitis hemorrágica o síndrome urémko hemolítico.
Membrana celular 
Flagelo 
Antígenos H 
Pili 
Amígenos F 
Cápsula 
Antígeno:, K 
Figura Elementos constirutivos de E.coii. (Tomado de Tizard, Inmunología veterinaria . ) 
el LPS detenninan s i la cepa es lisa (S: "smooth") o rugosa (R:
"rough"). En las cepas R. las cadenas laterales del LPS son inexis­
tentes o muv cortas, Ello detennina el aspecto de las colonias en 
medios sólidos; !.as lisas son brillantes y húmedas, mientras que 
las rugosas se presentan como secas y opacas. En los -cultivos en 
medio líquido, esa diferencia se manifiesta como un desarrollo 
turbio unifonne o en grumos (autoagregación), respectivamente . 
Las cepas móviles poseen también un grupo de antígenos protei� 
cos. constituyentes de los flagelos. designados antígenos "H". 
Los antígenos fimbriales de. E. coli son estructuras protei­
cas montadas sobre las fimbrias de tipo l y U. Las fimbrias de 
tipo I (F1 ), IIamadas adhesinas universales, están ampliamente 
difundidas entre las distintas cepas de E. coli1 pero no poseen 
una variedad antigénica muy grande. Se adhieren a estructuras 
glucolipidicas localizadas en la superficie de los eritrocitos de 
distíntas especies, produciendo hemaglutinación. Este fenómeno 
puede ser inhibido mediante la adición de manosa, ya que, en 
el eritrocito, este azúcar forma parte del sitio de unión. Por este 
hecho, a la be.maglutinación producida por las fimbrias de tipo [ 
se la designa manosa sensible (MS). Por su parte, las fimbrias de 
tipo II también producen hemaglutinación, y se re.�.ono�e como
receptor a un gangliósido en 1a superficie de los en trocitos. 
A diferencia de las fimbrias de tipo l, las de tipo ll, o fac­
to.res d� colonización, reconocen receptores en la superficie de 
eritrocitos y células epitel iales intestinales provenientes sólo de 
detenninadas especies . Se dice que son hospedador�específicas. 
La unión es resístente a la aáición de manosa (M.R). 
La expresión de antígenos fimbriales de tipo ll es dependiente 
de la temperatura. Las células de E. coli desarrolladas a 37 ºC se 
adhieren al epitelio del intestíno delgado, mientras que cuando 
se desarrollan a 1 8 ºC carecen de esa cualidad. Altos niveles de 
glucosa y glicina en el medio de cultivo también bloquean la 
expresión de algunas fimbrías de tipo IL 
Por lo expuesto anteríonnente, la nomenclatura serotipica de 
Escherichia coli se efectúa mediante- una expresión que incluye 
antígenos somáticos (Oí, capsulares (K), flagelares (H) y fim­
briales (I'): por ejemplo: 0101 :K82 :H2:F41 . 
Los antígenos fimbriales, codíficados casi exclusivamente en 
plásmidos, son entonces: 
Fl (adhesinas universales. sin espe6ificidad de especie 
animal); 
F2 (antígeno de adhesión CFl , específico para intestino 
humano'¡; 
F3 (antes llamado CF2, también específico p-ara enteroci.t.os 
humanos): 
f'4 (adhesina ante& llamada K88, con especificidad 
preferentemente para cerdos neonatos): 
F5 (antigua adhesina K99, hallada en cepas aisladas de 
bovinos, porcinos y ovinos); 
F6 (antes llamada 987P: adhesina hallada en E. coii de 
cerdos y conejos); 
F41 (adhesina preferentemente encontrada en cepas aisla­
das de bovinos y porcinos); 
F1 65 (presente en cepas aisladas de cerdos) : 
Por razones históricas, los antígenos fimbnales K88 y K99 
habían sido designados con la. letra "K", mas no s.on de origen 
capsular. Los antígenos capsulares son polisacáridos, mientras 
que losfimbriales son proteicos. 
Las enterotoxinas son producidas por ciertas cepas de Es­
cherich.ia coli, con un alto grado de correlación con la expresión 
de adhe-sinas. lvnbas enterotoxinas
i 
LT y ST, están codificadas 
en pl.ásmidos, junto con los genes que otorgan resisten.ci.a a 
antibióticos. La ente-rotoxina LT (termo}ábil ) es una proteína 
constituida por una moléeula de la subunidad A (PM 27.500) y 
cinco moléculas de la subunidad B (PM 1 1 . 500). La subunidad 
B se une a un gangliósido receptor situado sobre l.a superficie de 
la., células epiteliales del intestino, mientras que la subunidad A 
actúa como activador de la adenilatociclasa. 
Las enterotoxina). termoestables (ST) poseen variantes genética.,; 
definidas como STJ a. ST I b. Son proteínas muy pequeñas y por ende 
actúan como malos inductores de re6-puest.a inmun.e. STla tíene la 
propiedad de activar la guanilatoc.iclasa en las eéiulas dei epitelio 
intestinal., luego de contactar con un receptor de. naturaleza glic.opro­
teica, siniado en la supemcie de las células epiteliales del intestino. 
Otro típo de toxinas que presentan alguna.<; cepas de Es­
cherichia coli son las verotoxinas o '"Shiga-like toxins'·, en sus 
variantes l v 2 (VTl, VT2). Dentro de esta sinonimia.... el nombre 
verotoxina (sostenido por los europeos) se debe al efecto cit.opa­
togénic.o que. ejercen sobre células Vero en e-ultívo, mientras que 
el de Shiga-like toxin se origina en las semejanzas fisiológicas e 
inmunológicas con ias toxínas de Shige.lla dysenteriac tipo I . 
Un elemento adicional de vimlenda es el factor necrotizant.e 
citotóxico (CNF)1 caracterizado por ios efecros cliopatogénicos- que 
desarrolla in vitro en células HeLa y confimiados in vivo en enteritis 
padecidas por distintas especies animales y por el hombre . 
Las c6lulas HeLa sufren multinudeación y aumento de. tama­
ño. En animales de experimentación, tal.es como ramnes y pollos, 
es le.tal .. En conejos, ovinos, bovinos, porcinos, se ha. documentado 
tamb ién su acción citopatogénica sobre el epitelio intestinal o 
luego de !.a inoculación intradérmica. Este factor es intracelu­
lar. se libcni al medío de cultivo en presencia. de mitomicina o 
por sonicacíón de las bacterias. Es codificado en un plásmido 
(plá:smido Vir) y en electroforesis, en geles de poliae-riiamiq? 
con dode.c.il sulfato de sodio (SDS-P.AGE) , :-.e separa como urí,'l 
prote ína de peso molecular 1. 10 k. 
RESPUES'L� INMUNE 
Cna respuesta i nmune c.ficíente. contra cuaiquier microorga­
nismo. deberá estar dirigida hacia los antigenos más adecuados. 
en el momento jusía y en el lugar apropiado. de acuerdo con la 
patogenia de la enfermedad. 
Los anticuerpos producidos contra las adhesinas F4 (K88). 
F5 (K99), F6 (987P) y F4 1. tienen la propiedad de inhibir la ad­
hesión de las cepas que portan esos antígenos fimbriales, y evjtar 
la colonización del intestino en dist.inras especies. Este efecto ha 
sido comprobado también in vitre, trabajando con prepara.dos de 
c.Clu!as epiteliales con bordes en cepillo, pertenecientes a distinta-; 
porciones del intestino delgado de temeros neonatos . 
Los antígenos mencionados, situados sobre el extremo diStal. 
de las fimbrias de típo ll, se. unen a gangl.iósidos receptores en 
la superficie de las celulas epiteliales, siendo la galactosa un 
constituyente del sitio de unión. 
En un model.o experimental ín vi.tro, anticuerpos monoclona­
les contra galactosa bloquearon la adhesión de fimbrias de tipo 
,U de E coli a sus receptores , 
Dependiendo de la especie animal, los anticuerpos antiadhe• 
sinas que elabora una madre mediame í.nocula.ción del antígeno 
o por infección natural son transferid.os a la cría por vía transpla­
centari.a o mediante calostro, según corresponda. Esa inmunidad
pasiva mostró ser eficaz para disminuir ta morbilidad causada
por la colibacilosis en los remeros y lechones neonatos. Se ha
demostrado que aun luego de 5 semanas de vida, Ios terne.ros de
madres inmunizadas 6 y 2 semana� antes de la parición poseen
títulüs aceptables de anticuerpos antiadhesina F5 .
Lechones que recibieron de su madre anticuerpos calostrales 
anü-F4 respondieron mal a la inoculación de antígena homólogo 
dentro del primer mes de vida, como causa d.e un claro efecto 
ínhibit.orio . En cambio, esa respuesta con.firió una moderada 
protección cuando el antígeno se aplicó con posterioridad. Los 
anticuerpos recibidos del calostro materno pertenecen predomi­
nantemente al isotipo lg.A en el cerdo y a lgG 1 en el bovino. 
Por otra parte, la existencia de una inmunidad local contra 
las toxinas termoestable (ST) y terrnolábil (lT) es desea.ble para 
minimizar los efectos. nefastos que eJJas ejercen sobre la fisiología 
del epitelio intestinal, provocan.do grande·s pérdidas de agua y 
electrólitos. La enterotoxina ST, de bajo peso mol ecular. es un 
pobre inmunógeno. aunque mejora como tal al ser unida a proteí­
nas mayores que actúan como vehí.culo . En cambio. la subunidad 
B de LT, al ser mejor inmunógeno, ha demostrado conferir una 
adecuada protección a techones, con producdón de IgA e-spe.cí� 
fica. cuando se la suministró oralmente. La inmunización con LT 
de las madres preñadas confirió protección vía calostra] . 
Efectos s.ernejant.es se han logrado en ovino;-;, caprinos y aves. 
Debido a que la enterotoxina t:r de E. coli y la. wxina colérica es� 
tán inmunológicamenre emparentadas, la inmunización de madres 
gestantes con l.a toxina inactivada de f'. cholerae pennite que sus 
crías adquíeran. inmunoprmecdón pasiva contra LT de E. coli.
Como siempre . ia dosls de antígeno, el plan de inmunización. 
el adyuvante empleado. !a vía de inoculación, son factores qu.e. han 
mostrado ser decisivos en la obtención de una buena respuesrn .. 
PATOGENESIS V ASPECTOS CLINlCOS 
La superficie de las mucosas de los animales provee un 
apetecible medio para }a adherencia de una ampi ia variedad de. 
microorganlsmos. Apenas después del nacimiento. las mucosas 
del tracto respirarorlo superior .. el tracto i.ntesünai y el traCT{) 
ge.n ita.l más bajo \'Cm siendo coloniza.das por d istintos microorga­
nísmos no patógenos contenidos en el aire inspirado. los alimentos 
ingeridos y las exCíec iones fecales. respectívameme. Estos m.icrn­
organismos constituyen la llamada ''mícrobiota normal'' ()tras 
mue.osas. tales como la del tracto respiratorio b.:1jo. el biíiar y e) 
tracto urinario alto. son normalmente estériles en condiciones de 
salud. Todas estas mucosas poseen barreras naturales qu.e impiden 
la adhesión de microorganismos patógenos . Sin embargo. cuando 
esas barreras son vencidas, la microbiota patógena va ganando 
rápidamente !as mucosas estériles o los sitios an.tes ocupados por 
!os microorganismos normales. La-patogénes-ís de· las enfermeda­
des infecciosas bacterianas implica distintas. imera.c.c.ione.s entre el
microorganismo y el hospedador. Entre los factores d.e virulencia
de E. coli figuran los acc.esori.os de adhesión a fa. mucosa y una
serie de toxinas que van destTuyendo las capas más- superficiales
o más profundas de-1 tejido� y pueden llegar a la septicemia.
El primer paso para desarrollar la patogenesis es la ad...1-ieren­
cia. La c.apacidad de una c6lula de E. coli para adherirse a lofi 
gangl.iósidos receptores de las microvellosidades del epitelio 
intestinal está vinculada a su propiedad de expresar esrructuras 
proteicas de adhesión (adhesinas) sobre las fimbrias, Obviamente , 
las distintas adhesinas de E, coli (FL F2, F3 , F4, F5, F6, f4 I , 
F l 65) reconocerán a sus correspondientes receptares gang:líosídi­
cos. Aquellas cepas que no expresen adhesinas no serán capaces 
de permanecer sobre el epitelio urinario, respiratorio o intesti• 
na!, arrastradas por el flujo de líquido , Esta complementariedad 
adhesina/receptor explica e1 tropismo por disti.ntos tej idos. S i 
E. coli F4 + se adhiere at intestino de los lechones, es porque ahí
encuentra receptores específicos. La misma expllcaciún es válid.2
para cepas que expresanF5 y se adhieren al intestino del t.ernero.
Tales adhesinas se expresan sólo a 3 7 ºC, como señal de que las
bacterias se hallan en un animal de sangre caliente.
Mecanismos de defensa del hospedador, tales como la se­
creción de un muc.us con sustancias semejantes. a los receptores 
para adhesinas o la descamación de la mucosa que había sido 
coloni1.ad.a por bacterias adherentes, tíenden a limpiar la super� 
ficie de.l im.estiw.) . 
Movimientos cil iares del epitel.io respiratorio o con-ientes 
l íquidas en el r.racto urinario constituyen otro mecanismo defen­
sivo parn elimínar mícroorgani.smos que no están finnemente 
adheridos. lgA o JgG, inmunes, según la especie y la edad del 
animal, previenen la adherencía de bacterias a sus receptores. 
Se ha descrito w1 tipo de funbrias llamadas "p'', con la propiedad 
de adherirse a receptor<"' del epitelio del tracro unnario del humano, 
En lo referente al mecanismo de acción de. las enterotoxinas, 
la toxina LT necesita de sus subunidades A y B. Las subunidades 
B se unen al gangliósido receptor de la mucosa del intestino 
delgado, posibilitando la ímemalización de l2 suhunidad A. Esta 
incita la activación de la adenilatocidasa. con lo cual se elevan 
los niveles citoplasmáticos de AMP cíclico. Esto se traduce en 
!a pérdida de- iones Na�. CI .. y agua
La toxina ST existe en dos variantes: STa y STb, La primera 
es hallada en E coli aisladas de lechones y temeros neonatos : 
acrúa. sobre el íleon activando la guanilaw ciclasa. Los niveles 
ele-vados de GMP cíclico inteffieren con la bomba iónica. y esto 
se traduce en p6rdida de Na· . HCO/· y disminución de l a absor� 
ción de Cl". La STb se ha hallado en cepas aisladas de dia..'Tea 
de lechones posdestete, sin que hubiera ejerc ido acción alguna 
sobre los niveles de nucleótidos cíclicos. En el animal neonatp-. 
estos efectos pueden evitarse mediante. wrn buena transferenC.ia 
de inmunidad maternofilial .. Por el contrario. la situación dínic.a 
empeora si las ce.pas involucradas de E. coli s:on pon.adoras de 
adhesinas específicas de la espcc.íe hospedadora. 
Si bien existen semejan:t.as entre 11:1 patogénesis en disüma.s 
e.s.pecies animales_ se observan algunos matices distintivos ligados
a los sistemas de. cría (intensiva o extensíva j y a la. edad del anima.! 
(,neonato. lactante o posdestete) . El porcentaje de mortaíidad de la 
diarrea colibae-ilar del ceido neonaw es muy alto. y puede afectar 
a casi la totalidad de la cría. La colonización y la invasión del 
intestino provocan un adelgazamiento apreciable de la pared, con 
pérdida de las microvellosidades. La muerte sobreviene por lo ge­
ne.ral antes de las 24 horas de vida. El aspecto de las deposicíones 
se corresponde con el de la diarrea liquida blanco-amarillenta, En 
cambio, en posdestete, cuando se somete al animal a un cambio 
bmsco de su alimentación, suelen aislarse cepas distintas, algunas 
de el.las productora,;; de verotoxina y también se aislaron serotipos 
productores de enterotoxinas y veroroxinas (ETECW VTEC). A pesar 
de ello, la mortalidad en la diarrea de posdestete suele ser muy in� 
ferior a la padecida por el neonato. En ambos casos, la toxina más 
frecuentemente hallada de aislamientos en porcinos es la LT y en 
menor escala las STa y STb. Las adhesínas-más frecuentes en estas 
cepas son F4, y en menor abundancia, F5, F6, F4 1 , F l 65 . Escasos 
serogrupos (08, O ! 38, O 139, O 1. 4 l ) productores de VT2e ( variante 
de VT2) están involucrados en la enfennedad del edema del cerdo 
destetado o del adulto. Tras la coloniwción del intestino. las toxinas 
liberadas ganan el ton-ente sant,'llíneo y acceden a los distintos órga� 
nos. En la pared de los vasos de menor calibre, se va desarroll.ando 
degeneración hialina, edema y transvasación de liquido_ 
En el ternero, la patogenia es semejante, pero la adhesina más 
hallada es la F5. La enfermedad se desarrolla preferentemente 
durante la primera: semana de vida, en especial en temeros q_u.e 
no han recibido sufi.ciente cantidad de calostro durante su primer 
dfa de vida. Es común detectar STa en esas cepas de E. coli, a.ck 
tuando por el mecanismo descrito anterionnente. De no mediar 
tratamiento, los animal.es mueren por deshidratación y acidosi s . 
Ciertas. cepas má..:; invasivas, con factores necrotizantes citotóx.i� 
cos. hemotisina y verotoxinas, además de actuar como secuestr'-cUl w 
tes de hierro, pueden producir septicemia e invadir los tejidos. 
En e.stos casos suele desarrollarse meningüis, poliartritis y, por 
lo general, e ! animal mucre,_ En rodeos de leche. E. coli también 
suele producir mastitis. Luego de ad,herirse a la epidermis de la 
mama. comienza la colonización de los conductos. Un notable 
fenómeno inflamatorio se desencadena por la. acc.íón endotóxica 
del LPS (lipopolisacárido) sobre la glándula mamaria. Aparte del 
perjuicio en la producción láctica, estos animales pueden seguir 
con fiebre, leucocitosis, hipoglucemia y muerte, En los ovinos, 
la patogenia no es muy distinta de- la de los bovinos, 
En equinos, E. coli puede causar aborto, aunque con muy 
baja frecuencia. En los potrillosi esta bacteria suele presentarse 
como responsable de un cuadro febril, con debilidad e invasión 
de órganos y art iculaciones. tras io cual sobreviene ia muene. En 
equinos no se obseíVa con frecuencia enteritis causadas por E. 
cofi. En cambio, en conejos. los episodios de muerte de. cria por 
diarrea ime·nsa causada por E. coli son comunes_ e involucran 
especialmente e.epas portadoras de adhesina F6 
En aves, E coli invasivas suelen penetrar por v i.as respiraw 
torias y producir infecciones generalizadas _ septicemia y muen e. 
También pueden originar lesiones granulomatosas en e.l intest ino. 
el higado y el pulmón. Otras veces. el agente infeccioso es rrans� 
portado en el huevü, el cual fue contaminado en la cloaca o en e! 
oviducto. Perros y gatos frecuentemente manifiestan infecciones 
urinarias causadas por E_ coli_ agravadai� por la expresión de 
toxinas. Son mucho menos probables los ca�os de �ept icemia . 
DIAGNOSTICO DE LABORATORIO 
Diagnóstico bacteriológico 
Recolección de muestras 
Por lo común, las rnuestras a analizar incluyen heces. hisopa­
dos con materias focales. sangre, orina, leche. abscesos, secciones 
de intestino, hígado. riñón. bazo. En esos casos, E. coli puede ser 
el agente primario o secundario . En el e-aso de que e! transporte 
de las muestras hac;ta el laboratorio demande mis de. 2 horas, es 
aconsejable transferir et hisopo a un vial con medio. de transporte 
Staart De cualquier manera, ya se transporte la muestra ¡,ara 
efectuar la bacrer)ología1 ya se trate de un cultivo puro de E. 
coli enviado para estudios seroj.ógicos o de caracterización de 
factores de vírulencla, se debe Cuidar que el recipiente esté sellado 
perfectamente para evitar el desecamiento del material. 
Siempre debe rotularse el recipiente, indicando el medio de 
cultivo usado en el transporte, el tipo de muestra. la manera en 
que s.c obtuvo, la fecha de obtención y procedencia. Po-r fuera. 
la caja que contiene el recipiente pe1fectamente acondicíonado 
indicará que se tmnsporta material biológico patógeno, facilitando 
el nllmero telefónico del remite-nte para ser c.onsultado e11 caso 
de romrn o derrame durante el transporte. 
Medias de cultivo .<electivos 
Agar Mac Conkey. Este medio es apropiado para el aisla­
miento de enteroba.cterias a partir de materias fecales, 
orina, alimentos, aguas residuales, etc. 
Modo de acción: las sales biliares y el violeta c.ristal ej etw 
cen una inhibición significativa sobre. fas bacterias gram­
poslti.vas. La lactosa y el índicador rojo neutro permiten 
comprobar la degradación de ese disacárido. Las colonias 
\actosakpositivas (E. coli) aparecen rojas con halo turbio ; 
las lactosa-negativas son incoloras. E. coli es un fennen­
tador de. lactosa. 
Condiciones de cultivo: sembrar las placas por estrías e 
incubar a 3 7 ºC durante l 8w24 horas. 
Agar EMB (eosina-azul de metileno).Es un medio 
selectivo para d.emost.rnr la pre-sencia de eme.robacterias 
patógenas y propiClar su aislamiento. No e.s confirmativo 
y sólo sirve- de orientación. 
J.1.odo de acción: los componentes lactosa y sacarosH penniten 
distinguir entre distinm enterobacterias de acuerdo c.on su 
capacidad de fermentarlos y por el aspe<:to y el color de sus 
colonia,;. Los colorantes empleados inhiben notabl.emente e.f 
desarrollo de gérmenes gramposirivos. 
Las colonias de E coli aparecen con la iuz transmitida con 
d centro negro azulado y con la luz reflejada son verdosas 
con brillo metálico. Las transparen1es y de color ambarino 
suelen corresponder aSalmonella. Shigella. mientras que las 
de Enterobacter, Klebsiella y otras emerobacterias aparecen 
de mayor t.amaflo, de aspee.to mucoso, confluentes. con e! 
centro pardo grisáceo con la luz tra.nsmitida. 
Condióones de cultivo : sembrar las placas por estrías e 
incubar a 3-7 ºC durante 24 horas . 
Medios de cultivo para identificación 
Caldo MR-VP {Cal.do Rojo de metilo según Voge5- y Pros­
kauer ). Este medio de cultivo se emplea para et'eGruar el ensa­
yo de! ''Rojo de metilo·-·. y !a reacción de ·'Vog_es y Proskauer•· _ 
para procurar la caracterización de enterobactcrias. 
A1odo de acción: algunas bac.teri.as. como E. cnii., emplean 
glucosa con gran producción de ácido. haciendo descender el 
pH a menos de 4A (el índícador Rojo de metilo vira al rojoi. 
Otras originan un descenso menos acentuado de l p.H {ei 
indicador permanece de color amari llo si el pH no desciende 
de 5 , l ). Al degradar la glucosa, algunos microorganismos 
producen acetilmetilcarbino[, el cual se detecta mediante la 
reacción de Voges y Proskau.er con el reactivo de O' M.eara_ 
E. coli da reacción negativa.
Agua de tri.¡,tona (o caldo tri¡,tonado). Se emplea para 
demostrar la producdón microbiana de. indo! a partir de 
triptofano. 
Afodo de acción: la peptona de ca.i;eína es rica en triptofano. 
Los microorganismos que producen índol a partir de ese ami­
noácido son identificados mediante el reactivo de Kovacs. 
Condíciones de cult ivo: el medio se siembra c.on una 
e-olonia pura del microorganismo a identificar� se incuba
durante 1 2 a 24 hora.s a 37 ºC .
Luego de la incubación, el cultivo se cubre con 0,5 ml del
reactivo de Kovacs. Al cabo de. pocos minutos, ia capa de­
reactivo se torna rojo-cereza ante la prt�sencia de indo!.. E. 
coli es productora de indoi a panir de.l triptofano.
Agar dtrato de- Simrnons.. Pennite identificar mic.morganis.­
mos, especialmente ení:erobac.terias. que puede.n desarrollar­
se empleando como única fuente de carbono al citrato. 
A.fado de acción: et empleo del citrato como fuente única 
de carbono produce alcalinización del medio� con viraje 
del indicador azul de bromotimol al azul . E. coli. a1 igual 
que Shigella y Salmonelia, no puede desarrollarse en las 
condiciones de este medio de culti vo . 
Con.diciones de cuíiivo: sembrar estriado en la superficie 
del agar inclinado, a partir de una colonia pura. Incubar a 
37 "C durante 24 a 48 horas. 
Identificación bioquímica de E. coli
La muestra se. sembrará en los medios selectivos agar El\-1B y 
ag:ar Mac Conkey. Las colonias con ias c.arac.terística..;;; de f. coli, 
según se. describiera en el espacio de-stinado a esos medios de culti� 
vos, serán c.onfirma.das por las pruebas bioquímicas "tMViC", sigla 
de formación de indo! (1), prueba del rojo de meti lo (M), reacción 
de Voges y ProskaUc'T (V) y la utilización de c1tratú (C). 
Escherichio coii .se djferencia de otras enterobacterkas por 
presentar pruebas bi.oquimica!; IMViC : 
Producción de indol 
Viraje dei rojo metilo 
Reacción de V y P 
Util ización citra.to 
positiva 
positiva 
negativa 
negativa 
Mantenimiento de cepas por largo tiempo 
El mantenimiento de cepas de interés durante períodos 
prolongados es aconsejable efectuarlo de esta manera: luego de 
desarrollarlas durante- 24 horas a 37 ºC en caldo e.xtractü de came, 
se adiciona. 1 ::<20% de glicerol esté-ri l y se. consenra a -80 <�e: en 
viales plásticos cnn tapa a rosca. Si se desea efectuar la conser­
vación sólo durante algunas semanas y no mas de 3 meses. es 
preferible sembrarlas punzando un tubo de. aga.r extracto de. carne 
y luego de incubarlas e:n las condiciones referidas. rname.nerbs 
a te:rnperatura ambiente e.n la oscuridad. 
SER O LOGIA 
Detección de factores de virulencia 
Fimbrias de tipo JI (adhesinas hospedador-especificas) 
Debido a que las elevadas concentraciones de giucosa y 
glie-ina en el me-dio de cultivo actúan como inhibí.dores de 13 
expresión de algllnas de las adhesinas de E. coli. es convt:nieme 
cultivar este microorganismo en caldo Mine.a, a partir de una 
colonia pura. Luego de desanollarse durante 1 8- horas a 37 \";C 
ias células son )avadas c.on O, 1 5 lvtNaCl mediante ,:entrü\1gación 
y suspendidas al 10%1 en la. misma solución. La determinación 
de adhesinas se hace entonces -mediante aglminación en placa 
empleando sueros específicos contra cada una de cilas (F4, F�, 
F6. F4 1 . F 1 65) 
En el caso de enfrentarse con cepas rugosas, que facilmente 
ge autoag1ut.inan en medios líquidos;, la detección de. a.dhesin.as 
por aglutinación habrá de ser sustituida por un e.nsayo de dot­
blot i.nmunoperoxidasa o de inmunofluoresC'.enc1a , donde los 
anticuerpos estarán marcados c.on peroxidasa o isotioc.i.anato de 
fiuoresceí.na, respect ivamente. 
En.terotoxinas y verotoxinas 
Las enterotoxinas ST y LT pueden ser detectad.as mediante 
enzimoínmunoensayos o ensayos biológicos que miden las l.e­
siones producidas en segmentos de intestino de ciertas especies 
animales . Las verotoxinas se determinan por los efectos citopato­
génicos que inducen en células Vero en cultivo. 
Nuestra experiencia en este tema nos hate inc! ina.r por los 
m6todos más modernos de la biología molecu hu· que, basad os 
en 1a reacción en cadena de- la polimerasa (PCR)
1 
pe.m)iten una 
detección n ítida, específica y altamente sensible de los genes que 
codifican para estas toxina.s. 
Resíste11cia a antibióticas 
Puc-<le efectuarse por los métodos clásicos de inhibición del 
desarrol lo de la bacteria e.n contacto- con discos embebidos en 
di ferente-s. antibióticos (antibiograma) . 
Serotipificadón (0:K:H) 
Los antígenos somáticos, capsulare:"i y flagelares permiten 
efectuar la serotípifü;acíón de las cepas aisladas, empleando an-
tisueros monnespecíficos. o pol iespecific.os e.!aboradús en com:jos. 
contra los disrintos antígenos O, K y H. La prueba consiste en 
una aglutinación en placa a partir de un cultívo en caldo nutri.t.ivo. 
Puesto que los antígenos capsulares (K) enmascaran a los somá­
ticos (0), la reacción con los antisueros anti-O se debe. efecmar 
empleando una suspensión calient.e de. las bacterias. a los fines 
de ina.ctívar los capsulare-s y descubrir los somáticos. 
La seroüpificación de E. co!i result.a de: i.nt.e.rés clínico, ya que 
existe relación entre determinados serotipos O:K:H y patogenici­
dad. Sin embargo. aunque la mayoría de las toXlnas. ad.hesinas y 
factores de. resistencia a antibióticos son codificados en plé.smidos 
y éstos pueden transferirse de una bacteria a otra en determinadas 
condiciones. la correlación entre serotipos y patogenkidad no�6; 
tan a.bsolura y puede presentar excepciones 
TRATAMIENTO 
Debido a factores vincuiado-s al manejo de los krneros de 
tambo, que los hace más su.,;;ceptibles a E. coli .. el uso indiscri� 
minado de antlblóticos trajo aparejada una mayor resistencia. 
comparada con la observada en cepas aisladas en rodeos de cría .. 
Entre los antibióticos que muestran ser aún efectivos en nuestro 
medio se incluyen gentami.cina., cloranfenicol y combínación de 
trímetroprima --i- suifametoxazol. La. restitución de los parámetros 
normales del medio interno (hidratacíón, equil ibrio electrol.itico 
y ácido-base) es otro de los pumos a tener en cuenta en la recu­
peración del animal. 
PROFILAXIS 
Algunas medi.das generales deben ser tenidas en c.uentapara 
evitar deterioros en la sanidad del plantel causados por E. coli, con 
la.-; consecuentes pérdidas económicas. Además de todo aquel lo 
Concerniente. a ta inmunoprofilaxis, mencionado en secciones 
anteriores. es importante permitir que la cría de mamífaos reciba 
la dosis de calostro adecuada, rriantener la hi.giene de} en.tomo y 
evitar altas densidades poblacionaies. 
AGRADECIMIENTOS 
Deseo manifestai mi rcconocimíento al D;-. M.arc.c.lo E. Sanz. 
por su colaboración en la recopilación del material bibiiográ.fico, 
y a las instituciones que financian l.a l.abor óentifica (Universidad 
Nacional del Centro, Comisión de Investigaciones C ientíficas 
de la Provincia de Buenos Aires, CONICET, Foncyt., Fundac.ión 
Antorchas), por hac.er posible nuestro avance en este tema. 
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