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MATERIAL DE LABORATORIO MICROBIOLOGICO El material de uso corriente en el laboratorio implica.un número muy grande de elementos, sin embargo, bajo los �os generales de la microbiología, que son netamente prácticos, se mencionarán aquellos más frecuentes. Los materiales resaltados en negrita son indispensables en el laboratorio microbiológico. Material de vidrio - Tubo de hemólisis: son cortos y finos, se utilizan sobre todo en algunas pruebas serológicas y para medio de cultivo de tipificación bacteriana.como BAM y Kligler. Cantidad mínima para un laboratorio que se inicia: l 00. · - Tubo de ensayo: el más usado es de 16 cm x 18 mm de diámetro, aunque-·msten · de-varios tamaños y pueden poseer reborde;·deben · ser fabricados. con· vidrio de buena calidad, neutro, transparente e incoloro, no opaéificable con los continuos lavados. Se destinan a la contención de los distintos tipos de medios de cultivo.· Cantidad mínima para un laboratorio que se inicia: 1 OO. - Tubo de centrifuga: miden l O cm x 1 O IIIIIl; pueden tener fon do redondo o cónico y se emplean para decantar suspensiones. Cantidad mínima para un laboratorio que se inicia: 20. - Campana de Durbam: son pequeños tubos qué se utilizan en las pruebas bioquúnicas de identificación bacteriana, específicamen te en la prueba del ataque a la glucosa; la campana se coloca en posición invertida dentro del medío líquido sin burbujas de aire y el gas producido se recolecta en su interior. - Portaobjetos: láminas de vidrio rectangulares de bordes bise lados, .de 76x25 x 1 mm; deben ser totalmente transparentes y libres de rayaduras que retengan colorante e induzcan a error. Cantidad mínima para un laboratorio que se inicia: 100. - Cubreobjetos: láminas delgadas de vidrio con medídas que oscilan entre 15 y 22 mm de lado y O, 17 y 0,20 mm de espesor. Cantidad mínima para un laboratorio que se inicia: 2 cajas. - Placa de Petri: recipientes circulares compuestos por dos tapas de diferente tamaño, con 6, 8 o 1 O cm de diámetro y 15 o 20 mm de altura; se las emplea para cultivos. Comercialmente se encuentran también placas de plástico descartables. Cantidad mínima para un laboratorio que se inicia: 60 (8 a I O cm de diámetro). - Erlemneyer: recipiente de paredes finas, base plana, cuerpo cóni co y cuello cilíndrico corto; empleado para preparar y/o contener medíos de cultivo o líquidos en general. Cantidad mínima para Wl laboratorio que se inicia: 1 de 1 litro y 2 de 500 rnl. - Pipetas: existen varias clases: - aforadas: sólo poseen uno o dos enrases y carecen de graduaciones intermedias; miden volumen total. Prácti camente no se usan más. - graduadas: tienen una escala graduada numerada que indica el volumen contenido; pueden ser de enrase simple o doble. Para el laboratorio de bacteriología, con enrase simple son más prácticas. Si se desea medir con precisión, las de doble enrase son más exactas. Cantidad mínima para un laboratorio que se inicia: 1 O de 1 rnl, 10 de 5 rn1 y 1 O de 1 O rnl. - Pasteur: se forma por calentamiento y estiramiento de un tubo de vidrio ablandado a la llama; tiene de 4 a 8 mm en su parte tubular, que al estirarse se toma capilar; por no tener graduación se usan para siembras o medición de pH. - de bola: llamadas así por poseer entre los tercios supe rior y medio l!Dª dilatación que permite trasvasar mayor volurnen de líquidos. - autemátiea: instrumento de:r,recimmpantransfetenc:ia 1 de líqµidos en volúmenes-que van desde 1 µI a 1 O ml; se jasemejan a una jeringa con un tubo capilar, generalmente 4 de plástico de diferente capacidad e intercambiable, y con sistemas de desplazamiento de fluidos variable(aire · o con émbolo); el dispensador puede ser de canal único i o múltiple. �on útiles para sembrar pequeños volúmenes, t especialmente para laboratorios que realizan serología. Inconveniente: son caras. Cantidad mínima para un laboratorio que se inicia: no son indispensables, pero de acuerdo con el presupuesto son más prácticas las de volumen variable que las fijas, aunque más caras. Se recomendaría una de 50-200 µl y otra de I O µl. - Propipeta: es una pera de goma que contiene válvulas que permiten el llenado y vaciado de pipetas de vidrio sin necesidad de aspirar mediante la boca (indispensables para la bioseguridad en el laboratorio). También hay peras de goma sin válvulas. Cantidad mínima para un laboratorio que se inicia: 2. No son muy caras y evitan las infecciones adquiridas en el laboratorio. i.- Varilla de vidrio: son varillas macizas y se utilizan para . homogeneizar medios de cultivo, suspensiones, etc. 1 - Espátula de Drigalsky: se obtiene calentando el extremo de J,una varilla o pipeta Pasteur y acodándola en forma triangu- Ilar; se la uúliza para siembra en superficies extensas de medios de culúvo. Instrumental l 7 - Membranas filtrantes: constituidas por derivados de celulosa ·1(nitrato y acetato) o poliamida de Nylon 66, son de alta calidad _1.y de estructura regular; actúan por verdadero efecto tamiz, ya que separan las partículas si éstas son mayores que los poros ·-1de la membrana. Según su constitución resisten o no la acción de ciertos elementos (solventes) y en el comercio se encuentran j marcas como Sartorius, Millipore, Ultipor, Pall Co., etc. ·•j · 1 1 , ./ - Portafiltros: son soportes encargados de contener los fil tros para su uso; pueden ser metálicos o sintéticos, son autoclavables y sus tamaños varían según la finalidad y el uso ( muestreo de aguas con jeringa, filtración de medios de cultivo a Kitasato, etc.). _ Mango de Kolle: constituido por una varilla metálica con un mango aislante de ebonita; en el extremo opuesto se fija un alambre fino de platino o níquel-cromo (nicrom), de calentamiento rápido a la llama y que según su terminación se denomina: Ansa o Asa ( extremo en anillo), aguja o ansa recta ( extremo aguzado) y espátula ( extremo aplanado); este- li.;. instrumento se utiliza en siembras. Cantidad mínima para un laboratorio que se inicia: 1 ansa en aguja y 1 ansa en anillo. - Mechero de Bunsen: formado por una base y un tubo me tálico vertical; el gas penetra por un tubo lateral, y existe un orificio que permite la entrada de aire. Para fabricar pipetas Pasteur, en el pico se coloca un accesorio aplanado ("ma riposa") que aumenta la superficie de acción de la llama. Cantidad mínima para un laboratorio que se inicia: 1. - Trípode: elemento metálico constituido por un aro soste nido por tres pies; se emplea como apoyo para recipientes que deben ser sometidos a la acción del calor. Conviene mandarlos a hacer a algún herrero, salen más baratos que los comprados en las casas destinadas a su venta. Cantidad mínima para un laboratorio que se inicia: 1. - Telas metálicas o difusoras: constan de un tramado de alam bre con amianto en su parte central; se utilizan colocándolas sobre el trípode, entre la llama y el recipiente a calentar, con lo que se amortigua el efecto del fuego directo. Cantidad mínima para un laboratorio que se inicia: 1 - Policubeta: placa múltiple de 96 celdas con fondo re dondeado, cónico o plano, construidas en poliestireno y esterilizables por radiación; poseen una gran claridad óptica y medidas estándar que permiten su utilización en variados equipos; se emplean en microanálisis por lo general de tipo serológico (hemaglutinación, inhibición de la hemaglutina cíón, fijación de complemento, etc.). Aparatos - pHmetro: instrumento destinado a medir el pH de distintos medios, entre ellos, los de cultivo. Su manejo no es complejo pero requiere cuidado para no romper el electrodo. Mucho más práctico es comprar tiras de pH; en el comercio se venden en rangos de pH, por lo que una que abarque de 5 a 9 cubrirá la mayoría de las reacciones del laboratorio. Se utliza sólo una pequeña cantidad; 0,5 cm es suficiente. Cantidad conveniente para un laboratorio que se inicia: 1 tira. - Balanza: aparato de precisión empleado para pesar diversos elementos; existen distintos tipos: - granataria: consta de dos platillos yse emplean pesas de l a l 000 g. Cantidad mínima para un laboratorio que se inicia: l . Este elemento es algo caro, sin embargo, las gra natarias son las más económicas. No sirven para pesar con precisión pero en bacteriología se pesan principalmente medios de cultivo en donde pueden tolerarse las pequeñas desviaciones que producen este tipo de balanzas. - analítica: de gran precisión; dos platiilos; capacidad máxima de 200 g y precisión de 0,1 a 0,2 rng. - analítica eléctrica o electrónica: tiene las mismas ventajas que la anterior pero posee un solo platillo; la lectura se realiza en una escala óptica digital iluminada. - Bailo térmico (Baño María): consta de un recipiente con agua en el que se colocan gradillas metálicas con el material a calentar; el calor se obtiene por medio de una resistencia eléctrica y se controla a través de un tennostato; se verifi ca la temperatura con un termómetro. No es un elemento indispensable en bacteriología, pero sí lo es si se realizan pruebas serológicas y bioquímica sanguínea. - Estufa de cultivo: caja rectangular de triple pared con dos puertas frontales (la interna es de vidrio), estantes interiores, fuente calórica (resistencia eléctrica). Por mantener una temperatura óptima de 35 a 3 7 ºC es el equipo indicado para desarrollar microorganismos en el laboratorio. Cantidad mínima para un laboratorio que se inicia: 1. - Horno o estufa de esterilización: gabinete metálico aislado con fibra de vidrio o amianto, eléctrico, temperatura de hasta 300 ºC; esteriliza por calor seco; puede adaptarse un horno de cocina que funcione bien (sin pérdidas de calor); en este caso, conviene destinarlo sólo a esterilización. - Autoclave de Chamberland: está formado por una caldera cilindricadedoble pared. mm fuente calórica (etéctrica o gas) y, en la parte superior; una corona de bukmescon losque'secieml; en la tapa se encuentran un manómetro, una válvula de segu ridad, una espita y un aro de caucho que otorga hermeticidad al cierre; en el interior (a cierta altura del fondo) hay una placa cribada o rejilla en donde se deposita el material a esterilizar para que no se contacte con el agua colocada por debajo. En la actualidad existen autoclaves automáticos que no varían en su fundamento pero sí difieren en su estructura y manejo. En est.e caso, el autoclave presenta unamannita, espita, manómetro y tapa de cierre hermético ( que se ajusta con una llave centtal), pero además tiene ficha de encendido eléctrico, tempori7.ador o "timer", regulador automático de la temperatura y espita de salida inferior; también tiene una alarma o timbre para anunciar la finaliz.ación del proceso de autoclavado. Cantidad mínima para un laboratorio que se inicia: 1. Sí el trabajo es poco, puede iniciarse con una olla a presión grande. - Congeladoras: empleadas para conservar virus, bacterias o sueros por largo tiempo, su temperatura es de -1 O ºC a -80 ºC; si se desea conservar sustancias por debajo de ese límite, deben emplearse termos especiales con N l líquido que produ cen temperaturas de -196 ºC. Si bien no es indispensable, la posibilidad de tener un freezer de -20 ºC es importante para conservar varios elementos de laboratorio. -Centrifuga: equipo empleado para separar líquido de partículas en suspensión aplicando la fuerza centrífuga y aprovechando las diferentes densidades de los elementos; los tubos deben equilibrarse antes de la centrifugación; existen diversos tipos con variaciones en capacidad, velocidad de centrifugado, etc. Si bien no es estrictamente necesario para bacteriología, es importante para analiz.ar ciertos elementos, como por ejemplo, orina, en los cuales el sedimento es de fimdamental importancia para correlacionar los hallazgos bacteriológicos. - Campana de flujo laminar: son campanas "barridas" por aire estéril en las que el aparato aspira aire contaminado, lo filtra y lo expulsa a través de la campana impidiendo la introducción de microorganismos en el medio ambiente; este equipo hace innecesario el uso de la llama del mechero y los trabajos bacteriológicos no son afectados por la corriente de aire. USO DE MATERIALES DESCARTABLES En la actualidad, muchos de los elementos mencionados en este capítulo, han sido remplazados por materiales descartables . Tal es el caso de las cajas de Petri, pipetas, ansas, etc. Además, dependiendo de la complejidad del laboratorio, los medios pueden comprarse directamente plaqueados o en tubos, evitando en este caso la necesidad de esterilización. Obviamente, esta metodología de trabajo, implica mayores costos, pero si el volumen de muestra es bajo, muchas veces justifica su uso, ya que no es necesario la compra de medios deshidratados.
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