Reconocimiento de proteinas

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“Reconocimiento de Proteínas”
 Integrantes: Marta Espinoza 
Catalina Marambio 
 Ivannia Muñoz 
 Catalina Zúñiga 
 Docente: Robinson Henríquez 
 Asignatura: Bioquímica 
 Fecha: 02 de octubre de 2015 
Introducción
Las proteínas son biomoléculas de gran tamaño y peso molecular formadas por un C, H, O y N. Son macromoléculas (polímeros de aminoácidos), que efectúan el mayor número de las funciones en las células de los seres vivos. También forman parte de la estructura básica de los tejidos y desempeñan funciones metabólicas. Estas son la base de las estructuras de los códigos genéticos de ADN y de los sistemas de reconocimiento de organismos extraños en el sistema inmunológico.
Las proteínas son filamentos largos de aminoácidos unidos por una secuencia especial y especifica de aminoácidos. Creadas por los ribosomas que leen los codones de los genes y ensamblan la combinación requerida de aminoácidos por la instrucción de los genes presentes. Las proteínas recién creadas experimentan una cambio en la que se agregan átomos o moléculas adicionales, como: zinc, cobre o hierro.
Objetivo
· El reconocimiento de proteínas en la clara de huevo, de la coagulación de proteínas, precipitación de proteínas y reacciones coloreadas.
Procedimientos
Experimento n°1: Reacción de Biuret.
· Lavar todos los materiales y secarlos.
· Tomar 2 tubos de ensayos ya lavados, rotularlos uno como patrón y otro como control.
· En el tubo ya rotulado como patrón adicionar 20 gotas de solución ovoalbúmina, mientras que en el otro tubo rotulado como control se adiciona 20 gotas de agua destilada.
· Agregar en los dos tubos de ensayos 10 gotas de reactivo de Biuret y de manera lenta ir mezclándolo suavemente los dos tubos de ensayos.
· Para finalizar esto calentar agua en un vaso precipitado y a baño María colocar los tubos de ensayos por 5 minutos. Dejar enfriar.
Experimento n°2: Reacción Xantoproteica.
· Tomar 2 tubos de ensayos, rotularlos uno como patrón y otro como control.
· En el tubo rotulado como patrón añadir 20 gotas de solución ovoalbúmina, mientras que en el otro tubo rotulado como control se añaden 20 gotas de agua destilada.
· Agregar a los dos tubos de ensayos 10 gotas de Ácido Nítrico concentrado, haciéndolo de manera lenta y por las paredes de cada tubo.
· Como se describe en el experimento anterior, llevarlos a baño María y dejarlos 5 minutos. Luego esperar y dejar enfriar.
Experimento n°3: Desnaturalización de proteínas – Método del calor.
· Tomar 2 ambos tubos de ensayos, rotularlos uno como patrón y otro como control.
· En el tubo rotulado como patrón adicionar 20 gotas de solución ovoalbúmina, mientras que en el tubo rotulado como control se adiciona 20 gotas de agua destilada.
· Llevarlos a baño María y dejarlos hasta que haya un cambio.
Experimento n°4: Desnaturalización de proteínas – Método por alcohol.
 
· Tomar los 2 tubos de ensayos, rotularlos uno como patrón y otro como control.
· En el tubo rotulado como patrón adicionar 20 gotas de solución ovoalbúmina, mientras que en el tubo control se adiciona 20 gotas de agua destilada.
· Agregar a los dos tubos de ensayos 20 gotas de alcohol etílico/metanol, de manera lenta mezclar ambos tubos.
Resultados experimento n°1
Realice una observación de lo sucedido en la experiencia.
Se observa que en el tubo rotulado como patrón toma una coloración violeta cambiando después a un color café oscuro y esto es debido a la presencia de la proteína. Formando así una reacción positiva. Al mismo tiempo el tubo rotulado como control va tomando una coloración celeste, por lo que se generó una reacción negativa.
Escribir la reacción química que sucede en la reacción.
El reactivo de Biuret es el que contiene CuSO4 en una solución acuosa alcalina, por lo que presencia NaOH. Por lo que forma un compuesto de color violeta, debido a la formación de un complejo de coordinación entre los iones Cu2+ y los pares de electrones no compartidos del nitrógeno que forman parte de los enlaces peptídicos. 
Entregar el fundamento científico de lo sucedido en la experiencia.
Los péptidos y proteínas producen una reacción coloreada muy usada para su valoración, llamada reacción del Biuret. Las proteínas reaccionan con los iones cúpricos del reactivo en un medio alcalino formando así un complejo de color violeta. Se necesitan 2 o más uniones peptídicas para que se forme este complejo coloreado. Esta prueba sirve para la identificación de tripéptidos en adelante.
Resultados experimento n°2
Realice una observación de lo sucedido en la experiencia.
En el tubo rotulado como patrón se observa que la ovoalbúmina comienza a separarse quedando así un sobrenadante siendo la solución de agua y formándose un precipitado de grupo sulfuro (azufre) de un color amarillo, mientras en el tubo rotulado como control no se observan cambios quedando del mismo color.
Escribir la reacción química que sucede en la reacción. 
Esta reacción está caracterizada por su grupo fenilo en la molécula proteica. En la prueba se produce la nitración del anillo bencénico presente en los aminoácidos obteniéndose nitrocompuestos de color amarillo.
Entregar el fundamento científico de lo sucedido en la experiencia.
Es un método que se puede utilizar para determinar la presencia de proteínas solubles en una solución, empleando ácido nítrico concentrado. La reacción xantoproteica se puede considerar como una sustitución electrofílica aromática de los residuos de tirosina de las proteínas por el ácido nítrico dando un compuesto coloreado amarillo a pH ácido.
Resultados experimento n°3
Realice una observación de lo sucedido en la experiencia.
Se observa que el tubo patrón al estar en una temperatura alta va cambiando su color a un blanco paleciente, mientras en el tubo control no se observan cambios quedando del mismo color.
Escribir la reacción química que sucede en la reacción. 
La reacción pasa de un estado nativo y con el amento de la temperatura su estado se ve desnaturalizado y se forma una estructura primaria.
Entregar el fundamento científico de lo sucedido en la experiencia.
La desnaturalización de una proteína, se produce debido a distintos factores como el calor, el pH o la temperatura y producen que la proteína pierda su función biológica, además vuelve a ser una estructura primaria.
Resultados experimento n°4
Realice una observación de lo sucedido en la experiencia.
En el tubo patrón se observa un color blanco y luego se ve que comienza a burbujear aumentando así su volumen, mientras que en el tubo rotulado como control no se observan cambios quedando del mismo color transparente.
Entregar el fundamento científico de lo sucedido en la experiencia.
Las proteínas, debido al gran tamaño de sus moléculas, forman con el alcohol una solución coloide. Esta solución precipita forman coágulos al ser calentada a una temperatura mayor de 70°C o al ser tratada con distintas soluciones: salinas, ácidos, etc. 
La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a la desnaturalización por agentes distintos, que cuando actúan sobre la proteína, esta se desordena por la destrucción de su estructura terciaria y cuaternaria. 
Discusión
Todos los experimentos resultaron bien, todas las muestras coagularon, debido al gran tamaño de sus moléculas forman con el agua soluciones coloidales que pueden precipitar formándose coágulos al ser calentadas a temperaturas altas, o al ser tratadas con solucionessalinas. La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados que al actuar sobre la proteína la desordenan por destrucción de sus estructuras secundarias y terciaria.
Conclusión
Al realizar los experimentos, se puede observar que las proteínas de la ovoalbúmina (clara de huevo) al ser sometidas a temperaturas altas tienen distintas reacciones dependiendo de la solución que se use. En las reacciones en la cual se obtuvo una precipitación se debió a un cambio en el estado físico de la proteína, mientras que en la coagulación se ha producido un cambio en el estado físico y en la estructura química por eso es irreversible.
Bibliografía
· Archivo pdf http://catedras.quimica.unlp.edu.ar/qo3/Apuntes/Biuret.pdf
· Archivo pdf http://pendientedemigracion.ucm.es/info/analitic/Asociencia/DesnatProteinas.pdf
· Informe de laboratorio N° 4 de Bioquímica I http://es.scribd.com/doc/16795607/Informe-N%C2%BA4-laboratorio-de-bioquimicaI#scribd
· Reconocimiento de proteínas http://www.angelfire.com/scifi/anarkimia/Reconocimiento%20de%20Protenas.htm 
· Guía de Laboratorio N° 3 “Reconocimiento de Proteínas” Robinson Henríquez