virologia-medica (742)

Vista previa del material en texto

VIROLOGÍA MÉDICA / Guadalupe Carballal - José Oubiña776
-
No son aceptables: muestras remitidas en la sonda de aspiración, 
que contengan hisopos secos, que estén derramadas, que no estén 
7.4 INSUMOS PARA OBTENCIÓN DE MUESTRAS
 
Hisopos
-
Dacrón
Hisopos estériles de Dacrón 
individuales en tubo de transporte, COPAN disponibles en Ar-
gentina u otras marcas con características similares. No son 
recomendables los hisopos de algodón con mango de madera. 
No son aceptables los hisopos de alginato de calcio.
-
tina unos -
-
lly wrapped.
Medio de Transporte para Virus (MTV)
y antimicóticos para inhibir crecimiento bacteriano y fúngico y una 
solución buffer
Si no se dispone de medio de transporte para virus se puede 
. En este caso estas muestras sirven 
para 
no pueden emplearse para cultivo viral.
VTM-
RT 3 ml 
-
color debe ser rosa, si es amarillo o violeta –debido a cambio de 
pH– no utilizar.
8. DIAGNÓSTICO VIROLÓGICO: METODOLOGÍA
cultivo en laboratorios con nivel de -
Bioseguridad en la práctica biomédica y en el laboratorio
La metodología para diagnóstico de 
directa:
Detección del RNA viral por PCR en tiempo real o PCR 
convencional.
técnicas.
Los métodos indirectos o serológicos no son útiles para 
diagnóstico. Sin embargo, son de gran importancia en estudios 
epidemiológicos para detectar 
de técnicas de micro-neutralización o de inhibición de la hemoa-
glutinación. Asimismo, la detección de 
medio de las técnicas mencionadas es indispensable en los estudios 
vacunas.
8.1 DETECCIÓN DEL RNA VIRAL POR RT-PCR EN TIEMPO REAL
Es el ensayo de elección -
virus -
- WHO. CDC protocol of real time RT-PCR for swine 
(H1N1).: http://www.who.int/csr/resources/publications/swin-
- WHO information for laboratory diagnosis of pandemic (H1N1) 
2009 virus in humans-revised. Publication date: 23 November 
2009.
De acuerdo al protocolo inicial del CDC se deben realizar cua-
tro PCR diferentes utilizando cuatro grupos de primers y sondas: 
uno, para detectar la proteína de matriz de 
in-
hemaglutini-
na del nuevo 
la muestra. Este protocolo puede ser empleado en diferentes termo-
cicladores de Smart Cycler, Cepheid; Light 
Cycler,ROCHE; ABI Prism, etc.).
-
diagnós-
tico, por lo que se requiere un tiempo adicional.
Argene, Invitrogen, Roche, RVP- Respiratory Virus Panel, 
Quiagen Luminex, y otras) que permiten -
8.2 AISLAMIENTO EN CULTIVO
El aislamiento del nuevo virus pandémico 
es diagnóstico de infección. Los resultados se pueden obtener entre 
El aislamiento viral puede realizarse en células MDCK o en 
-
virus aislado por técnicas moleculares, secuenciación o 
realizar el aislamiento en laboratorios con nivel de bioseguridad 
8.3 DETECCIÓN DE ANTÍGENO VIRAL POR INMUNOFLUORESCENCIA
U OTROS ENSAYOS RÁPIDOS
IF)
La detección de antígenos virales por anticuerpos monoclo-
nales permite detectar la nucleoproteína común a todos los virus 
discriminar si se trata de las cepas de 
nuevo virus pandémico.
virus respiratorios si se em-
plean los 
respiratorio, adenovirus, metapneumovirus hu-
calidad. Se requiere la utilización de controles de calidad.
La sensibilidad de la 
tipo de población. Ginocchio y col. (J Med Virol -
	VIROLOGÍA MÉDICA
	PARTE 8
	CAPÍTULO 59
	7. DIAGNÓSTICO VIROLÓGICO
	7.4 INSUMOS PARA OBTENCIÓN DE MUESTRAS
	8. DIAGNÓSTICO VIROLÓGICO: METODOLOGÍA
	8.1 DETECCIÓN DEL RNA VIRAL POR RT-PCR EN TIEMPO REAL
	8.2 AISLAMIENTO EN CULTIVO
	8.3 DETECCIÓN DE ANTÍGENO VIRAL POR INMUNOFLUORESCENCIA
U OTROS ENSAYOS RÁPIDOS