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309 23Micobacterias C A P Í T U L O Las micobacterias son bacterias aerobias de contornos cilíndri- cos, que no forman esporas. No captan con facilidad los colo- rantes, pero una vez teñidas resisten la decoloración por ácido o alcohol y por esa razón se les ha llamado bacilos “acidorre- sistentes”. Mycobacterium tuberculosis causa tuberculosis y es un patógeno muy importante para los seres humanos. Myco- bacterium leprae causa la lepra. Mycobacterium avium-intra- cellulare (complejo de M. avium, o MAC [M. avium complex]) y otras micobacterias no tuberculosas (NTM, nontuberculus mycobacteria) suelen infectar a enfermos de sida; son patóge- nos oportunistas en otros individuos inmunodefi cientes y a veces causan enfermedad en personas con sistemas inmunita- rios sanos. Se conocen más de 200 especies de Mycobacterium, incluidas muchas formas saprófi tas. Las micobacterias que infectan seres humanos se enlistan en el cuadro 23-1. MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS Morfología e identifi cación A. Microorganismos típicos En los tejidos, los bacilos tuberculosos son fi nas estructu- ras rectas cilíndricas que miden cerca de 0.4 × 3 μm (fi gura 23-1). En medios artifi ciales, se les identifi ca por tener formas cocoides y fi lamentosas, cuya morfología varía con la especie. Es imposible clasifi car las micobacterias en grampositivas o gramnegativas. Una vez que captan los colorantes básicos, el alcohol no las decolora, independientemente del tratamiento con yodo. Los bacilos tuberculosos verdaderos se caracteri- zan por su propiedad “acidorresistente”, es decir, la mezcla de alcohol etílico al 95% y ácido clorhídrico al 3% (ácido-alcohol), decolora rápidamente todas las bacterias, excepto las micobac- terias. Tal resistencia depende de la integridad de la cubierta cerosa. La técnica de Ziehl-Neelsen se emplea para la tinción e identifi cación de las bacterias acidorresistentes; en el capítulo 47 se explica dicho método a detalle. En extensiones de esputo o cortes de tejido se demuestra la presencia de micobacterias por la fl uorescencia amarillo-naranja después de aplicar los colorantes fl uorocrómicos (p. ej., auramina, rodamina). La facilidad con la que se visualizan los bacilos acidorresistentes, con los colorantes fl uorocrómicos los vuelve idóneos para este tipo de muestras clínicas (fi gura 23-1B). La disponibilidad de microscopios con diodos emisores de luz ultrabrillante, algu- nos de los cuales no requieren electricidad, ha constituido un avance en la microscopia de fl uorescencia en países con recur- sos limitados. B. Cultivo Los medios de cultivo primarios para micobacterias deben incluir medios no selectivos y medios selectivos. Estos últimos contienen antibióticos para evitar la proliferación de bacterias y hongos contaminantes. Existen tres preparaciones generales que pueden utilizarse para los medios selectivos o no selecti- vos. Los medios con agar (sólidos) son útiles para observar la morfología de las colonias, para la detección de cultivos mix- tos, para la realización de pruebas de susceptibilidad antimi- crobiana; también proporcionan algunas indicaciones de la cantidad de microorganismos en una muestra en particular. 1. Medio de agar semisintético. Los medios de esta categoría (como Middlebrook 7H10 y 7H11) contienen sales defi nidas, vitaminas, cofactores, ácido oleico, albúmina, cata- lasa y glicerol; el medio 7H11 contiene también hidrolizado de caseína. La albúmina neutraliza los efectos tóxicos e inhibido- res de los ácidos grasos en la muestra o el medio de cultivo. Los grandes inóculos permiten la proliferación en los medios men- cionados, en el curso de semanas; dado que se necesitan tales inóculos, los medios mencionados pueden ser menos sensibles que otros para el aislamiento primario de micobacterias. 2. Medios de huevo espesado. Los medios en cuestión (p. ej., Löwenstein-Jensen) contienen sales defi nidas, glicerol y sustancias orgánicas complejas (p. ej., huevos frescos o yemas de huevo, harina de papa y otros ingredientes en combinacio- nes). Se incluye el verde de malaquita para inhibir la prolife- ración de otras bacterias. Los inóculos pequeños en muestras teñidas de los pacientes proliferarán en dichos medios en un lapso de tres a seis semanas. Los medios en cuestión, con la adición de antibióticos, se utilizan como medios selectivos. 3. Caldos (como medios). Los caldos señalados (Midd- lebrook 7H9 y 7H12) permiten la proliferación de inócu- los pequeños. Por lo común, las micobacterias proliferan en cúmulos o masas, dado el carácter hidrófobo de la superfi cie celular. Si se agregan ésteres hidrosolubles de ácidos grasos, humedecen la superfi cie y permiten la proliferación dispersa en el medio líquido. En ellos es más rápida la proliferación de los microorganismos que en medios complejos. Existen varios medios comerciales utilizados en muchos laboratorios clínicos y especializados. 23 Chapter 23_Carroll_4R.indd 30923 Chapter 23_Carroll_4R.indd 309 14/04/16 18:1814/04/16 18:18 MICROBIOLOGÍA MÉDICA SECCIÓN III BACTERIOLOGÍA CAPÍTULO 23. MICOBACTERIAS MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS
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