CARRERA DE MEDICINA

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CARRERA DE MEDICINA 
UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA RIOJA 
 
CONTENIDOS TEÓRICOS: 
 
-Acción de los agentes físicos y químicos sobre los microorganismos 
-Medios de cultivo 
-Flora bacteriana normal 
 
OBJETIVOS: 
1. Desarrollar el juicio criterioso en la aplicación de los métodos de antisepsia, 
desinfección y esterilización reconociendo los mecanismos de acción de los agentes 
físicos y químicos sobre los microorganismos. 
2. Adquirir habilidad para la búsqueda de evidencias de la existencia de 
microorganismos patógenos en las muestras clínicas. 
3. Adquirir habilidad en la selección de los medios de cultivos apropiados con 
el fin de favorecer el desarrollo de los microorganismos buscados a partir de 
diagnósticos clínicos presuntivos. 
 
 
ACTIVIDADES (Lea los textos y responda a las preguntas) 
 
1) LA COLONIZACIÓN 
Después del nacimiento, un ser humano es rápidamente colonizado por bacterias 
que van a habitar en su piel y mucosas, así como otros sitios del organismo. Uno de 
esos sitios son las vías aéreas superiores, que llegan a convertirse en un nicho 
ecológico importante para varias géneros y especies bacterianas. De este modo, 
tenemos a la faringe y nasofaringe como un sitio lleno de bacterias comensales. A 
estas bacterias las podemos clasificar como pertenecientes a la flora normal, 
pertenecientes a la flora transitoria, o pertenecientes a la flora patógena. 
PREGUNTA 1: 
• Explique las diferencias entre flora normal, flora transitoria y flora patógena. 
• ¿Puede una bacteria de la flora normal convertirse en patógena? 
-Si puede ser patógena. Algunas pueden convertirse en patógenas, si penetran al 
medio interno o si se hacen muy abundantes, y provocar infecciones endógenas. 
• ¿Puede una bacteria de la flora transitoria convertirse en patógena? 
 -También puede pasar a ser patógena. 
Microbiota normal o residente (autóctona o indígena): porque se encuentra 
regularmente en un lugar y a una edad determinada; si se destruye, se restablece 
rápidamente porque está bien adaptada a las condiciones ecológicas de la zona; 
Microbiota transitoria: formada por microorganismos que pueden colonizar 
temporalmente piel y mucosas (durante horas, días o semanas) sin establecerse en 
forma duradera. Pueden proliferar cuando se altera la Microbiota residente. 
 Microbiota patógena: La interacción de los microorganismos con el hombre no 
siempre es beneficiosa o inocua, sino que también puede ser una interacción 
patogénica. Esto puede ser debido bien a la actividad de microorganismos 
intrínsecamente patógenos o a la de microorganismos patógenos oportunistas bien 
de la Microbiota normal o de otras poblaciones bacterianas que por heridas o por 
descenso de las defensas inmunitarias llegan a colonizar sitios no permitidos 
desarrollando allí su acción patógena. 
 
• A las siguientes bacterias se las puede encontrar en la faringe. Clasifíquelas con 
respecto al tipo de flora al que pertenecen y describa como se verían en una 
coloración de Gram. Describa otros géneros bacterianos que podrían encontrarse 
en la faringe. 
Streptococcus pyogenes Flora transitoria faringe Gram (+) cocos en cadena 
Streptococcus 
pneumoniae 
Flora transitoria faringe Gram (+) diplococos en 
cadena 
Streptococcus viridans Flora Normal/Residente Gram (+) cocos en cadena 
Staphylococcus aureus Flora Normal/Residente Gram (+) cocos en racimos 
Haemophylus influenzae Flora Transitoria Gram (-) cocobasilos 
Neisseria meningitidis Flora Transitoria Gram (-) diplococos 
Treponema pallidum Flora Patógena Gram 
• Otros géneros que podemos encontrar en la faringe son: Borrelia spp, 
Fusobacterium spp, Corynebacterium spp. 
 
PREGUNTA 2: 
• Describa las ventajas que tiene para nuestro organismo la flora normal. 
Almacenamiento y conservación de energía, síntesis de vitaminas, protección 
contra organismos patógenos, competición por los nutrientes, producción de 
bacteriocinas y otros agentes antimicrobianos, modifica pH y potencial oxido-
reducción, motilidad de intestino, protección por Colonización. 
• ¿Qué sitios del organismo tienen flora normal? 
-Tracto gastrointestinal, Piel, Conducto auditivo externo, Vías aéreas superiores, 
aparato genital, vagina, aparato urinario 
• ¿Qué sitios son normalmente estériles? 
Tracto urinario alto, sangre, tracto respiratorio bajo, LCR, tráquea, bronquios, 
pulmones, liquido sinovial, humor acuoso, etc. 
 
“El Streptococcus pyogenes es una bacteria que puede alojarse en la faringe. En 
ocasiones puede ocasionar faringoamigdalitis eritematopultacea“ 
 
PREGUNTA 3: 
• Describa los pasos o eventos que deberían ocurrir para la colonización en la 
faringe del Streptococcus pyogenes (tenga en cuenta los siguientes conceptos: 
modo de infección, adhesión, competencia, nutrientes). 
Streptococcus pyogenes es la principal causa de faringoamigdalitis de origen 
bacteriano. Esta bacteria se encuentra como Microbiota transitoria en un 5 a 10% 
de los individuos sanos, siendo ésta, la forma que tiene el microorganismo de 
persistir en la naturaleza. Los individuos sanos se transforman en portadores de la 
bacteria, la que puede pasar a otro individuo a través de las gotitas de Phlügge 
(aerosolización). La virulencia de S. pyogenes se debe a la capacidad de adherirse 
mediante un complejo mecanismo a las células del huésped, y posteriormente 
invadir las mismas, produciendo además una variedad de enzimas y toxinas. 
El proceso de adhesión está mediado por múltiples adhesinas, como el ácido 
lipoteicoico, proteína M (importante en la adherencia a queratinocitos en 
infecciones cutáneas), y proteína F. Se establece una competencia por los 
nutrientes para poder dividirse y completar la colonización. 
 
2) VOLVEMOS AL DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO: EL CULTIVO O AISLAMIENTO 
Una muestra biológica que es tomada para ser usada en diagnóstico 
microbiológico, debe ser correctamente tomada. Correctamente conservada y 
enviada al laboratorio para su análisis. Una vez que la muestra llega al laboratorio, 
el primer paso es el examen directo de la muestra, o sea la observación 
microscópica de la misma, la cual puede ser realizada con coloración o sin ella. 
Luego de la observación directa, el siguiente paso es el cultivo o aislamiento de las 
bacterias o del microorganismo presente en la muestra. Para realizar el cultivo, el 
laboratorio cuenta con muy variados medios artificiales, donde se va a inocular la 
muestra, y donde el microorganismo va a poder desarrollarse o multiplicarse. 
 
PREGUNTA 4: 
• ¿Cuál es la función de un medio de cultivo? 
Proporcionarle a la bacteria o virus que está en la muestra los nutrientes para 
poder multiplicarse y así identificarlo. 
• Describa los componentes de un medio de cultivo bacteriológico. 
 Nutrientes y factores de crecimiento, temperatura, humedad, pH, contenedor 
estéril. 
• Clasifique a los medios de cultivo bacteriológicos según su consistencia y según su 
funcionalidad. 
SEGÚN SU CONSISTENCIA: 
Líquidos: llamados caldos, contienen los nutrientes en solución tamponada. 
Ejemplo: caldo nutritivo, caldo tioglicolato. 
Sólidos: se preparan añadiendo agar-agar (sustancia inerte polisacárido de algas 
marinas). Este agar-agar sirve de soporte. Ejemplo: agar nutritivo, agar-triptona 
soya. 
Semi-sólidos: La concentración de agar-agar es baja. Ejemplo: medios de 
transporte (Stuart-Cary Blair), medio de movilidad (para determinar si la bacteria es 
móvil o inmóvil). 
Bifásicos: son los que tienen una fase líquida y una fase sólida. Se utilizan para la 
recuperación de microorganismos exigentes. Ejemplo: medio de Ruiz Castañeda 
para Brucella spp. 
SEGÚN SU FUNCIONALIDAD: 
Medios comunes, - Medios enriquecidos, - Medios selectivos, - Medios de 
enriquecimiento, - Medio diferencial, - Medios de transporte, - Medios especiales, 
Medios de cultivo cromogénicos. 
 
• Explíquelas y deejemplos de cada uno de ellos. 
- Medios comunes: son utilizados para bacterias con pocas exigencias: agar 
nutritivo - caldo nutritivo. 
 - Medios enriquecidos: son aquellos a los que se les adicionan sustancias que los 
hacen más ricos en elementos nutritivos permitiendo el crecimiento de bacterias 
más exigentes que no crecen en medios comunes. Ejemplo: agar sangre-agar 
chocolate. 
- Medios selectivos: son medios sólidos que contienen sustancias inhibidoras de las 
bacterias que forman parte de la flora normal permitiendo el desarrollo sólo de las 
bacterias que nos interesa aislar. La selectividad de dichos medios se debe al 
agregado de colorantes, sales en altas concentraciones o antimicrobianos: Agar de 
Thayer-Martin (para N. gonorroheae con antimicrobianos), agar SS para Salmonella 
y Shigella (con sales biliares y citrato). 
 - Medios de enriquecimiento: son medios líquidos que favorecen el crecimiento de 
ciertas bacterias presentes en baja densidad en una muestra clínica que inhiben 
transitoriamente otras presentes en la misma que pueden ser no patógenas. Se 
utilizan frecuentemente para la siembra de materia fecal, manteniendo el 
desarrollo de bacterias entéricas en fase de retardo (inhibiendo) y favoreciendo sólo 
la multiplicación de bacterias que son enteropatógenas (Salmonella spp., Shigella 
spp.). Ejemplo: caldo selenito F. 
- Medio diferencial: son medios que contienen sustratos sobre los que actúan 
determinados microorganismos demostrando algunas de sus propiedades 
metabólicas. Se utilizan para la identificación bacteriana. Ejemplo: medio de Levine 
o EMB (eosina-azul de metileno): este medio contiene lactosa permitiendo 
diferenciar las bacterias que la fermentan de las que no la fermentan. Las colonias 
que lo hacen se ven rojas y las que no, transparentes o rosas. 
- Medios de transporte: son los que permiten preservar la viabilidad del 
microorganismo hasta que la muestra sea procesada en el laboratorio. Son medios 
inertes o sea que no tienen factores de crecimiento por lo que las bacterias no se 
multiplican. Se utilizan cuando el tiempo entre la recolección y el cultivo de la 
muestra supera las 2 horas o cuando el microorganismo a investigar es muy lábil. 
Ejemplos: Cary Blair - Stuart-medios con atmósfera anaeróbica. 63 volver al índice 
capítulo 8 medios de cultivo. 
 -Medios especiales: son los que se utilizan para aquellas bacterias que tienen 
requerimientos nutricionales y metabólicos especiales para su desarrollo. Ejemplos: 
Lowenstein-Jensen (Mycobacterium tuberculosis) - Medio de Löeffler 
(Corynebacterium diphtheriae). 
 
• ¿Qué medio de cultivo utilizaría si el microorganismo que pretende aislar fuera 
un virus? 
 Medio de cultivo de células primarias, ya que los virus son parásitos intracelulares 
obligados 
 
os de los medios de cultivo bacteriológicos más usados son el Agar sangre y el 
Agar chocolate. Estos dos medios pueden clasificarse según su funcionalidad 
como medios enriquecidos” 
 
PREGUNTA 5: 
“D 
• Describa la composición del Agar sangre y del agar chocolate. Explique paso a 
paso como se prepara cada uno de ellos 
Agar sangre: agar enriquecido con sangre de carnero al 5%. Se pesa el agar en 
polvo, se disuelve en agua caliente, luego se agrega la sangre de carnero, se 
homogeniza y es colocado en capsulas de Petri, se solidifica y esta listo para su uso. 
El Agar chocolate tiene la misma composición enriquecida, solo que se hemolizan 
los GR. 
 
• ¿Cómo se puede observar el crecimiento bacteriano en un medio de cultivo 
líquido y como se observa en un medio sólido? 
En un cultivo solido (agar sangre-agar chocolate) se forman colonias bacterianas 
firmes y macroscópicas, fácil a la vista. 
En un cultivo líquido, fluido, no es posible formar colonias firmes, a la vista se 
observa el cultivo con crecimiento de aspecto turbio por la diferente densidad de los 
microorganismos. 
 
 
 
3) ESTERILIZACIÓN Y DESINFECCIÓN 
La desinfección y la esterilización son dos procedimientos que se usan para 
eliminar microorganismos. Estos métodos son de suma importancia en los 
establecimientos médicos porque previenen enfermedades contagiosas. Ambos 
procesos son diferentes y no deben ser confundidos. Se pueden llevar a cabo de 
diferentes formas según el lugar a aplicar y el grado de erradicación microbiana 
que se pretende obtener. 
 
PREGUNTA 6: 
• Defina esterilización y desinfección, explicando sus diferencias. 
 Esterilización: Es el conjunto de operaciones destinadas a eliminar o matar 
todos los microorganismos presentes en materiales y sustancias, incluyendo las 
esporas, que son las formas de mayor resistencia de las bacterias. Es un estado 
absoluto: un objeto es estéril; o no lo es. Utilizamos procedimientos físicos o 
químicos. 
 Desinfección: Conjunto de operaciones destinadas a destruir o inhibir los 
microorganismos presentes en objetos inanimados. No necesariamente destruye 
todos los microorganismos. Utilizamos procedimientos físicos o químicos. 
 
“Uno de los métodos de esterilización más usados es el calor. El calor puede 
usarse como calor seco o como calor húmedo. La esterilización con calor húmedo 
es mucho más rápida y eficaz que el calor seco” 
 
PREGUNTA 7: 
• Explique cómo se realiza la esterilización con calor seco y con calor húmedo. 
Mencione que tipo de materiales se pueden esterilizar con cada uno de ambos 
métodos. 
Calor seco: Aire caliente (hornos de Pasteur y estufa), Incineración, flameado. Es 
lento y requiere temperaturas superiores porque es menos penetrante (180o C por 
30’, 170o C por 1 hora o 160o C por 2 horas). El tiempo se toma desde el momento 
en que se alcanza la temperatura adecuada. El aire caliente es el método utilizado 
para objetos de vidrio, instrumentos de metal, materiales termoestables que son 
afectados por la humedad (polvos, aceites, vaselina, parafina) 
Calor Húmedo: Vapor (Autoclave de Chamberland) 
• Vapor fluente (espita abierta): La temperatura que se alcanza es de 100°C 
por lo que se requiere un plazo más largo para actuar sobre las esporas. Se utiliza 
para sustancias termolábiles a más de 100°C, como los azúcares o medios con 
leche. 
• Vapor bajo presión (espita cerrada): Es el método más utilizado y más 
seguro para la esterilización de materiales de laboratorio, medios de cultivo, 
materiales quirúrgicos, ropa (ambos, ropa de cama, etc.) 
 La presión “per se” no actúa sobre los microorganismos, pero es necesaria para 
elevar la temperatura del calor húmedo. Una temperatura de 121°C durante 15 
minutos o de 134°C durante 7 minutos mata las esporas 
 
PREGUNTA 8: 
• Nombre métodos químicos de desinfección y esterilización. Defina Antisepsia y 
explique cómo o con que métodos puede realizarla. 
 Antisepsia: Conjunto de operaciones destinadas a destruir o inhibir los 
microorganismos presentes sobre tejidos vivos: piel y mucosas (flora normal). 
Utilizamos procedimientos químicos. 
Métodos químicos de desinfección: 
 
Métodos químicos de esterilización: 
• Óxido de etileno 
• Glutaraldehido 
• Esterilización por plasma 
• Ozono