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413Capítulo 23 / Herpesvirus Los ensayos moleculares disponibles comercialmente para de- terminar carga viral son: AMPLICOR Roche Diagnostic - Bayer- Chiron Digene Hibrid Capture CMV DNA de Digene Corporation PCR en Tiempo Real Esta metodología combina los procedimientos de la PCR con son- - - syber green molecular beacons) - ferentes equipos comerciales para carga viral, con distintos límites 6.2.5.3 Detección del RNAm Una alternativa al uso de ensayos cuantitativos es la detección de RNAm de proteínas tempranas y/o tardías del CMV por la técnica de - ción activa de - Se han desarrollado ensayos comerciales basados en la técnica de - Estos ensayos se han utilizado para la detección de infección activa por CMV en sangre y en LCR. En general, han resultado te- ner una menor sensibilidad que otros procedimientos pero presen- diagnóstico de enfermedad por CMV. Ventajas de los ensayos moleculares La aplicación de los ensayos moleculares al diagnóstico, tanto en la CMV presenta enor- - diagnóstico de certeza de infección activa, lo que posibilita un ensayos mole- culares pueden emplearse aun cuando la muestra no ha sido adecua- damente conservada para aislamiento. Puede realizarse en cualquier muestra, aun de escaso volumen, incluyendo líquido amniótico o sangre fetal obtenida por cordocentesis. La detección de DNA de CMV por en- Desventajas Se ha desarrollado una amplia variedad de técnicas moleculares primers, sondas, - yos comerciales ya estandarizados también requieren ser validados - tal y la necesidad personal especialmente entrenado en técnicas moleculares. 7. VALOR DIAGNÓSTICO DE LOS DIFERENTES MÉTODOS DIRECTOS (TABLA 23.4.7) La infección activa por CMV se diagnostica por el aislamiento del - Sin embargo, debido a que este virus establece un verdadero estado de latencia y cronicidad y a que puede producir infección clínica, es necesario tener en cuenta que la mera detección de CMV en ciertas producción de enfermedad, ya que el hallazgo del virus puede ser El CMV debe reali- - - sión cuidadosa de otros agentes etiológicos. En los pacientes trasplantados se ha determinado que la detec- ción del virus en sangre, ya sea por aislamiento, por antigenemia pp desarrollo de enfermedad por CMV, no ocurriendo lo mismo con la detección de viruria o de virus en saliva, como ya se ha mencionado. En el seguimiento de pacientes luego del trasplante, la de- tección de DNA de CMV en leucocitos de sangre periférica se positiviza muy tempranamente, precediendo en una semana a la ello es de gran utilidad para el embargo, como consecuencia de esta elevada sensibilidad, una vez instaurado el tratamiento con antivirales, la PCR puede continuar siendo positiva aun cuando la replicación de CMV haya disminui- do o cesado debido al PCR directa cualitativa no sería útil en el seguimiento de la terapia antiviral postrasplante. En estos casos es muy útil determinar la carga viral por ensayos moleculares cuantitativos. 8. EPIDEMIOLOGÍA Y PREVENCIÓN El hombre es el único reservorio del CMV humano y la transmisión ocurre por contacto directo con secreciones infectadas. La infec- - de adultos en países desarrollados presenta anticuerpos, mientras - La adquisición del CMV durante la infancia se incrementa a niños son seropositivos. Dos estudios sobre seroprevalencia de anticuerpos anti-CMV realizados en Argentina en niños de la ciudad de Buenos Aires han demostrado que la aparición de anticuerpos anti-CMV se detecta la seroprevalencia de anticuerpos en sangre del cordón es muy di- ferente de acuerdo con el nivel socioeconómico de la población última población carece de anticuerpos, implica un alto riesgo de primoinfección de la madre durante futuros embarazos. Por ello, se recomienda el estudio del estado inmune antes de la preñez y, si la madre es seronegativa, el seguimiento serológico durante el embarazo. Prevención La prevención de la infección por CMV es difícil dadas sus formas de transmisión. En el caso de embarazadas seronegativas se reco- - ten niños. En caso de necesidad de transfusiones o trasplantes se recomienda emplear sangre u órganos seronegativos para pacientes vírgenes de infección, lo que resulta difícil dada la alta prevalencia de anticuerpos anti-CMV en la población. La prevención en pacien- VIROLOGÍA MÉDICA PARTE 2 CAPÍTULO 23 CAPÍTULO 23.4 7. VALOR DIAGNÓSTICO DE LOS DIFERENTES MÉTODOS DIRECTOS 8. EPIDEMIOLOGÍA Y PREVENCIÓN
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