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Universidad pedagogica y tecnologica de Colombia
Facultad de Ciencias Básicas – Escuela de Biología
INFORME - ESPERMOGRAMA - BIOLOGÍA GENERAL
RESUMEN
En la práctica de laboratorio, se realizó la toma de la muestra de semen según lo
recomendado en la guía para realizar el conteo de espermatozoides presentes en
la muestra. Esto es necesario debido a que la cantidad y el aspecto de estos
pueden predecir distintas alteraciones y enfermedades presentes en la persona.
Para una correcta observación, se procedió a aplicar los respectivos tintes según
indicaba el procedimiento. Una de estas fue realizada desde un tubo de eppendorf
y con solventes como eosina, entre otros, para después proseguir a observar en el
microscopio. Luego se trabajó con otra muestra de semen y solventes diferentes
haciendo un extendido de esta sobre la cámara neubauer la cual se llevó al
microscopio para que fuese posible el conteo de espermatozoides presentes en
las muestras tomadas.
INTRODUCCIÓN
Los espermatozoides se originan en el aparato reproductor masculino y es
producido en los túbulos seminíferos en cada testículo, los espermatozoides
tienen un ciclo de formación que dura unos cien días. Al salir de los testículos, los
espermatozoides necesitan mezclarse con los líquidos seminales para formar el
semen y lograr su meta, la fecundación del óvulo. La cabeza del espermatozoide
contiene el ADN, la punta corresponde a la porción llamada acrosoma que permite
al espermatozoide penetrar en el óvulo y la parte media contiene la mitocondria
que suministra la energía que la cola necesita para moverse. La cola tiene un
movimiento en forma de látigo de un lado a otro para impulsar el espermatozoide
hacia el óvulo. Los espermatozoides normales tienen cabeza ovalada y cola larga.
Los espermatozoides anormales tienen defectos en la cabeza o en la cola, una
cabeza grande o deformada o bien una cola doblada o doble. Estos defectos
pueden afectar la capacidad del esperma de llegar al óvulo y penetrarlo. Así,
puede presentar las siguientes anomalías: Alteraciones de
cabeza: espermatozoides sin cabeza (cabeza de alfiler), cabeza pequeña, amorfa,
redonda, alargada, con forma de pera (piriforme), con acrosoma grande, con
acrosoma pequeño, sin acrosoma, con muchas vacuolas, con vacuolas grandes o
con dos cabezas. Alteraciones de cola: espermatozoides sin cola, cola enrollada,
corta, larga, doblada o doble cola. Alteraciones de pieza
intermedia: espermatozoides sin pieza intermedia, con una curvatura, asimétrica,
engrosada, delgada, irregular o con una protuberancia de un tamaño superior a la
tercera parte del área de la cabeza. La cantidad de espermatozoides es muy
importante ya que indica su viabilidad los valores normales deben estar por
encima de 60 millones/ml. Si el valor se encuentra por debajo puede sea estéril.
Para esto es importante hace un conteo con ayuda de la cámara neubauer.
METODOLOGIA
Para esta práctica primero se obtuvo la muestra donada por compañeros de
laboratorio 10 minutos antes de su tratamiento y después se procedió a usar cada
una en los siguientes procedimientos:
1. Viabilidad/vitalidad y morfología espermática:
En tubo eppendorf se mezclaron 50 μL de semen con 50 μL de eosina
azulada al 1%, y se procedió a esperar 30 segundos, se añadieron 100 μL
de nigrosina al 10%. Se agito y realizo una extensión sobre portaobjetos.
Después de que se secara, se procedió a observar en el microscopio con
objetivo de 40 y 100X.
2. Metodología de recuento espermático:
En tubo eppendorf, se preparó una disolución 1/5 de semen Vs solución de
macomber-saunders. Para lograr la dilución, se pusieron 200 μL de semen
con 800 μL de solución. Se Transfirieron 15 μL de la dilución en la cámara
de Neubauer y, tras 2-3 minutos de reposo (sedimentación) se puso en el
microscopio y se contaron espermatozoides en los 25 cuadraditos del
retículo de Tomas.
RESULTADOS
1. Morfología espermática
metodología descripción aumento imagen
morfología
espermática
en la muestra
que se puso en
observación en
el microscopio
con ayuda de la
cámara
neubauer, se
pudo notar que
la mayoría de las
deformidades
que estos
espermatozoides
presentaban,
estaban
localizadas en la
Aumento
40x
cola, algunos
con una forma
anormal, torcida,
más larga o
corta de lo
normal y algunos
incluso llegaban
al punto de no
tener cola.
2. Recuento espermático
metodología aumento conteo imagen
Recuento
espermático
40x Espermatozoides sanos
parte A: 98
espermatozoides sanos
parte B: 106
promedio: 102
disolución (x5): 510
cuadricula(X25): 12750
#de espermatozoides x
ml(x10000): 127500000
DISCUSION
En el análisis realizado en el laboratorio del semen, se podrá observar si el
eyaculado presenta una cantidad normal de espermatozoides y si tienen buena
movilidad y morfología, en lo que se observó una gran cantidad de
espermatozoides sanos y óptimos para la fertilización. Si la muestra obtenida no
cumplía con los estándares esto podría indicar los testículos no están fabricando
correctamente espermatozoides lo que indicaría una posible infertilidad. En la
observación de espermatozoides se encontraron varias curiosidades en los
espermatozoides observados por medio del microscopio y la cámara de neubauer
que nos ayudó a clasificar los espermatozoides y a hacer un conteo de las células
espermáticas presentes. Para hacer este tipo de pruebas es recomendable tener
unos 2-3 días de abstinencia lo que pudo influir en la cantidad de espermatozoides
presentes en la placa de neubauer de forma negativa o positiva. En el proceso de
tinción se pudieron dañar algunos espermatozoides por lo que los resultados no
son del todo exactos ya que puede haber un rango de error dependiendo de los
daños que se pudieron causar.
CONCLUSIONES
● El Espermograma es un examen para determinar las características de los
espermatozoides y otros parámetros del semen. Donde se pueden observar
los diferentes defectos morfológicos y también contar la cantidad presentes,
esto para ver su viabilidad.
● En los espermatozoides se puede observar de acuerdo a su morfología y
cantidad la salud reproductiva del individuo
● Hay diferentes tipos de afecciones en la morfología de los espermatozoides
que los hacen poco viables para fertilizar el ovulo, como problemas en la
cola, en la cabeza, en el cuello o en el acrosoma.
● El sujeto al que se le realizo la prueba de viabilidad de los espermatozoides
no solo se le encontró un alto porcentaje de almidón, también una alta
cantidad de espermatozoides con deformidades mayormente en la cola,
unos en la cabeza y muy pocos en el cuello
● Algunos espermatozoides podían haber sufrido daños en el proceso de
montaje, por lo que la cantidad de espermatozoides amorfos también se
debe a esto.
PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
1. Defina; Oligozoospermia, Criptozoospermia, Azoospermia.
● Oligozoospermia: se refiere a una cantidad relativamente baja con
respecto al promedio normal del número de espermatozoides
presentes en el semen. Generalmente está asociada con la
infertilidad masculina.
● Criptozoospermia: aunque puede llegar a ser confundida con la
azoospermia, en esta no se evidencia la presencia de
espermatozoides, hasta después de la centrifugación. y no solo esto,
sino que además; estos se encuentran en muy baja cantidad.
● Azoospermia: se caracteriza por la nula presencia de
espermatozoides existentes en el semen.
2. ¿Cómo se puede evaluar la morfología espermática?
● La evaluación y el estudio de la morfología espermática se realiza utilizando
los criterios de tygerberg, en los cuales una muestra se considera
morfológicamente normal cuando el número de espermatozoides normales
es igual o superior al 4%, donde estos espermatozoides deben cumplir con
las siguientes medidas:
● cabeza, cuello, cuerpo y cola con una longitud que varía de las 50 a
70 micras.
● La cabeza del espermatozoide debe ser ovalada piriforme y
representa alrededor del 10% del total del largo.
● La evaluación de las anormalidades morfológicas debe incluir:
● los defectos de la cabeza, del segmento intermediola cola y la
presencia de gotas citoplasmáticas mayores de de ½ o un 1/3 del
tamaño de una cabeza normal.
● La cabeza de un espermatozoide debe ser ovalada con una longitud
de 4-5um y un ancho entre 2.5 – 3.5um; la región acrosomal debe
ocupar el 40-70% de la cabeza; el segmento intermedio debe tener
un ancho menor de 1um y una longitud aproximada de cabeza y
media; la cola debe ser derecha y uniforme, más estrecha que el
segmento intermedio, debe estar desenrollada y medir
aproximadamente 45um de largo.
3. ¿Cuáles son las formas anormales más comunes en la muestra observada?
R: en la muestra que se puso en observación en el microscopio con ayuda
de la cámara neubauer, se pudo notar que la mayoría de las deformidades
que estos espermatozoides presentaban, estaban localizadas en la cola,
algunos con una forma anormal, torcida, más larga o corta de lo normal y
algunos incluso llegaban al punto de no tener cola.
4. ¿Usando la misma metodología se pueden contar otros tipos celulares?
R: si, se puede ya que la metodología aplicada fu el uso de cámara de
neubauer, la cual es usada para realizar el recuento de esporas o de
células que están en medio acuoso como la sangre, orina y otros fluidos.
5. ¿Cuál es el número de espermatozoides normales en la muestra
estudiada?
R: se encontraron de 188 a 204 espermatozoides sanos en promedio
aproximadamente.
6. ¿El número encontrado se encuentra dentro de los valores normales?
R: si, ya que la cantidad mínima de espermatozoides que debe estar
presente para ser contada es de 200 aproximadamente ya que
dependiendo de los días de abstinencia, esta cantidad ´puede variar en el
sujeto de estudio.
BIBLIOGRAFIA
1. Alma Galindo G, Roberto Avendaño P. Biología básica. Universidad
Autónoma de Sinaloa; 2012 pág. 87-88.
2. Geoffrey M. Cooper, Robert E. Housman. Espermatogenesis. Marvin libros
sl. Madrid; 2010 pág. 540- 543.
3. Helena, Curtis. Biología. Panamericana. Buenos Aires ; 1985 pág. 155- 158