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324 G E N Ó M I C A , G E N É T I C A Y V I R O L O G Í A el plásmido deja de replicarse independientemente, pero el ope- rón tra sigue funcionando con normalidad y la cepa sintetiza los pelos. Cuando la célula encuentra un receptor, se desencadena la conjugación como si se tratara de una célula F+, y se inicia la transferencia de DNA en el sitio oriT (origen de la transfe- rencia). Sin embargo, como el plásmido forma ahora parte del cromosoma, cuando se ha transferido parte del DNA plasmí- dico, los genes cromosómicos empiezan a transferirse también (Figura 10.20). Como ocurre en la conjugación de solo el plás- mido F (Figura 10.18), la transferencia del DNA cromosómico también implica replicación. Debido a que la cadena de DNA normalmente se rompe durante la transferencia, solo se transfiere una parte del cro- mosoma del donador. Por consiguiente, la célula receptora no de los receptores superficiales, de manera que la célula deja de actuar como un receptor en la conjugación y es incapaz de cap- tar una segunda copia de plásmido F ni plásmidos relacionados genéticamente. Integración de F y movilización cromosómica El plásmido F y el cromosoma de E. coli contienen varias copias de elementos móviles llamados secuencias de inserción (IS; Sec- ción 10.11). Las IS proporcionan regiones de homología de secuencia entre el DNA cromosómico y el DNA del plásmido F. Por consiguiente, la recombinación homóloga entre una IS del plásmido F y una IS correspondiente en el cromosoma con- duce a la integración del plásmido F en el cromosoma del hos- pedador, como se muestra en la Figura 10.19. Una vez integrado, (b) 5′ Donador Cadena retenida DNA polimerasa Proteína de desenrollamiento (TraI) Cadena donada Cebador Proteína de la membrana externa específica del receptor Proteínas de membrana codificadas por el plásmido Receptor DNA polimerasa Pared celular Cebador 0 min 30 min (c) A . B a b ic , M . B e rk m a n , C . L e e , a n d A . D . G ro s s m a n A . B a b ic , M . B e rk m a n , C . L e e , a n d A . D . G ro s s m a n Una célula donadora roja que contiene un plásmido con la región lacO establece contacto con una célula receptora verde. LacI-GFP en la célula receptora se une a la región lacO en el plásmido transferido después de la conjugación. 3′ Figura 10.18 Transferencia de DNA plasmídico por conjugación. (a) La transferencia del plásmido F convierte una célula receptora F− en una célula F+. Obsérvese el mecanismo de replicación por círculo rodante. (b) Detalles de la replicación y del proceso de transferencia. (c) Visualización de la transferencia de DNA por conjugación en Bacillus subtilis usando microscopía de fluorescencia. La célula donadora expresa esencialmente una proteína de fluorescencia roja, mientras que las células receptoras emiten fluorescencia verde debido a la proteína verde fluorescente (GFP) fusionada a LacI ( Figura 7.15). El DNA transferido de la célula donadora contiene la región operadora lacO que se une a LacI-GFP. Las flechas indican puntos focales en la célula receptora donde LacI-GFP se une a la región lacO procedente de la conjugación. https://booksmedicos.org booksmedicos.org Botón1:
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