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Artículo de revisión, Medicina Veterinaria, Instituto de Investigación Veterinaria de VETUNI, República Checa 1 Resumen - Haemophilus parasuis es una bacteria epífita común del tracto respiratorio superior de los cerdo, la cual puede ocasionar la enfermedad de Glässer. A su vez presenta síntomas clínicos muy variables, desde poliserositis fibrinosa, poliartritis meningitis o inclusive septicemia aguda. Por ello, una herramienta de diagnóstico esencial es la detección de cultivo del agente causal, en zonas del cerebro, articulaciones y membranas serosas. Siendo aislada comúnmente de cavidades nasales, amígdalas y parte superior de la tráquea. Palabras Clave - Haemophilus parasuis; Enfermedad de Glässer; Metodología; Diagnóstico; Cerdo. I. DIAGNÓSTICO Para su diagnóstico se toman un serie de metodologías que van desde el examen físico del paciente, la siembra en cultivos selectivos hasta pruebas más complejas como lo son las Inmunohistoquímica. A su vez, el diagnóstico basado en signos clínicos, es de baja importancia debido a su falta de especificidad. La observación morfologíca es fundamental para ayudar al diagnóstico. Tomando en cuentas las características morfológicas de este género, se observa bacterias pleomorficas, pertenecientes a la familia pasteurellaceae, gram-negativas, inmóviles y que se agrupan formando desde varillas solitarias hasta fibras. II. CULTIVOS Para el cultivo de este género se recomienda un tiempo de 24 a 48h y se utilizan varios medios enriquecidos con factor de crecimiento V, como el agar chocolate, agar Levintal, agar PPLO con NAD. Además, el H. parasuis crece en medios como agar sangre de forma satélite con Staphylococcus aureus, no hemolítico, ureasa negativo, catalasa positivo, reductor de nitratos, indol negativo, fermentador de glucosa, lactosa, maltosa, fructosa y otras azucares. Asimismo, presenta 15 serovariedades. III. AISLAMIENTO El aislamiento de las muestras clínicas se realiza en agar sangre cercano al cultivo de S. aureus como fuente de NAD, en agar chocolate o en medio PPLO suplementado con NAD. El aislamiento de este género a partir de muestras clínicas es difícil y suele complicarse por contaminaciones. Por ello suele recomendarse un cultivo mixto diluido en agar o en medios suplementados con antibióticos como lincomicina y bacitracina. A su vez, se deben realizar pruebas bioquímicas para diferenciarla de otras bacterias no hemolíticas dependientes de NAD, como lo son Actinobacillus indolicus, Actinobacillus porcinus o Actinobacillus minor. Haemophilus Parasuis: Enfermedad de Glasser en cerdos Metodología para el diagnóstico (2006) K. Nedbalcova1, P. Satran, Z. Jaglic1, R. Ondriasova, Z. Kucerova, Universidad de Medicina Veterinaria (VETUNI) en Brno, República Checa Integrantes: Adriana Duarte V-26.978.685, Diógenes García V-27.536.529, María Deibis V-18.858.913, Marino Alejandra V-27.246.952 Norayma Martínez V-27.453.674 Artículo de revisión, Medicina Veterinaria, Instituto de Investigación Veterinaria de VETUNI, República Checa 2 III. MÉTODO DE TIPIFICACIÓN MOLECULAR Este método genotípico se emplea para clasificar al género en sus diferentes serotipos, de acuerdo a la discriminación de patrones de ADN, ya que los patrones asociados a infecciones sistémicas tienen un patrón homogéneo en contraste a las no patógenas. Un ejemplo de este método es la prueba de rep- PCR, que usa los patrones repetitivos del genotipado de H. parasuis. Consiste en la amplificación de fragmentos de ADN en diferentes tamaños mediante cebadores ERIC y con ello releva los perfiles genómicos específicos tras su posterior separación por electroforesis. También existe la PCR (RFLP) o prueba de polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción. Usada para tipificar los aislados de H. parasuis PCR-RFLP de tbpA, que es un gen que codifica la proteína de unión a la transferina. III. DIAGNÓSTICO CON BIOLOGÍA MOLECULAR Otra posible herramienta de diagnóstico es la hibridación en placa de captura específica de oligonucleótidos (OSCPH). No obstante, debido a que no siempre es posible obtener un cultivo puro de H. parasuis, se desarrolló un test PCR que permite la identificación específica a partir de muestras clínicas. Sin embargo se obtiene una reacción positiva aunque débil para A. indolicus, la cual es una epífita común del tracto respiratorio superior. Por lo tanto, esta prueba se utiliza solo para aislamientos recuperados de sitios sistémicos. III. DIAGNÓSTICO CON MÉTODO INMUNOHISTOQUÍMICO (IHC) Se hace uso de este método, debido a las altas posibilidades de contaminación de aislados a partir de muestras clínicas de este género. La IHC permite la detección de microorganismos no vivos en citoplasma de fagocitos. Sin embargo, algunos anticuerpos policlonales reaccionan de forma cruzada con A. pleuropneumoniae.
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