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BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA TESIS II EFECTO DEL DECOCTO DE Gentianella alborosea “hercampuri” SOBRE NIVELES SÉRICOS DE CREATININA EN Rattus norvegicus var. albinus PARA OPTAR EL GRADO ACADÉMICO DE: BACHILLER EN FARMACIA Y BIOQUÍMICA AUTOR: - Benites Rodríguez, Edwin Willy. ASESORA: - Dra. Ana Elena Mantilla Rodríguez. TRUJILLO – PERÚ 2011 Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A DEDICATORIA Ha sido el omnipotente, quien ha permitido que la sabiduría dirija y guíe mis pasos. Ha sido el todopoderoso, quien ha iluminado mi sendero cuando más oscuro ha estado, Ha sido el creador de todas las cosas, el que me ha dado fortaleza para continuar cuando a punto de caer he estado; por ello, con toda la humildad que de mi corazón puede emanar, dedico mi trabajo a Dios. De igual forma, a mis padres, quienes han sabido formarme con buenos sentimientos, hábitos y valores, lo cual me ha ayudado a salir adelante buscando siempre el mejor camino. Edwin Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A AGRADECIMIENTO Un especial agradecimiento a la Dra. Ana Elena Mantilla Rodriguez, por su capacidad professional y su incondicional apoyo para el desarrollo y culminación del presente trabajo. Edwin Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A JURADO DICTAMINADOR DR. GUILLERMO SEGUNDO RUIZ (PRESIDENTE) DRA. ANA ELENA MANTILLA RODRÍGUEZ (MIENBRO) DR. ROBERTO IBAÑEZ JULCA (MIENBRO) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A PRESENTACIÓN Señores miembros del jurado dictaminador: Dando cumplimiento a lo establecido por el reglamento de grados y títulos de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, someto a vuestra consideración y elevado criterio professional la presente Tesis II titulada: EFECTO DEL DECOCTO DE Gentianella alborosea “hercampuri” SOBRE NIVELES SÉRICOS DE CREATININA EN Rattus norvegicus var. albinus. Es propicia esta oportunidad para manifestar mi más sincero reconocimiento a nuestra alma mater y toda su plana docente, que con su capacidad y buena voluntad contribuyeron a mi formación professional. Dejo a vuestro criterio señores miembros del jurado dictaminador la calificación de la presente Tesis. Trujillo, Agosto 2011 Benites Rodríguez Edwin Willy Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A ÍNDICE Pág. Resumen……………………………………………...………………………… i Abstract…………..……………………………………………….…………… ii I. Introducción…………………………………………………………………… 1 II. Material y Método………………………………………………………….…. 5 III. Resultados…………………………………………………………………….. 13 IV. Discusión…………………………………………………………………….... 18 V. Conclusiones………………………………………………………………….. 20 Referencias Bibliográficas……………………………………………...……. 21 Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A i RESUMEN El presente trabajo tuvo como objetivo principal determinar si la administración del decocto de Gentianella alborosea “hercampuri” a dos dosis diferentes provoca cambios significativos sobre los niveles séricos de Creatinina en Rattus norvegicus var. albinus. Se usaron 36 ejemplares aparentemente sanos, machos de 3 a 4 meses de edad, con un peso corporal de 200 a 250 g, procedentes del Instituto Nacional de Salud, Chorrillos-Lima. Los animales fueron divididos aleatoriamente en tres grupos (grupo control, grupo problema I y grupo problema II) de 12 animales cada uno, que recibieron el decocto de Gentianella alborosea “hercampuri” en las dosis de 150 mg/Kg y 300 mg/Kg. El grupo control recibió solamente 1ml solución salina fisiológica. Los animales recibieron, diariamente dos veces al día durante 30 días, el decocto de Gentianella alborosea “hercampuri” en las respectivas dosis. Se obtuvieron muestras de sangre en dos oportunidades: después del periodo de adaptación de 15 días, los basales y al tiempo final después del día 30. El dosaje de Creatinina sérica fue realizado en el Laboratorio de Análisis Clínicos Peruano - Americana. Los resultados obtenidos muestran que el decocto de Gentianella alborosea “hercampuri” en las dosis utilizadas no provocaron cambios significativos en los niveles de Creatinina sérica (p > 0.05) entre los tres grupos de investigación. Palabras Clave: Gentianella alborosea, Creatinina sérica. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A ii ABSTRACT This paper's main objective was to determine whether the administration of decoction of Gentianella alborosea "hercampuri" at two different doses caused significant changes on serum creatinine in Rattus norvegicus var. albinus. 36 specimens were used apparently healthy males from 3 to 4 months of age with a body weight of 200 to 250 g, from the National Institutes of Health, Chorrillos-Lima. The animals were randomly divided into three groups (control group, group problem I and problem II) of 12 animals each, receiving the decoction of Gentianella alborosea "hercampuri" in doses of 150 mg / kg and 300 mg / kg. The control group received only 1 ml physiological saline. The animals received daily twice daily for 30 days, the decoction of Gentianella alborosea "hercampuri" in the different doses. Blood samples were obtained on two occasions after the adaptation period of 15 days, the baseline and final time after day 30. The dosage of serum Creatinine was performedin the Clinical Laboratory Peruano - Americano. The results show that the decoction of Gentianella alborosea "hercampuri" in the doses used did not cause significant changes in serum creatinine levels (p> 0.05) among the three research groups. Keywords: Gentianella alborosea, serum Creatinine. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A 1 I. INTRODUCCIÓN En la prehistoria, los humanos probablemente observando las costumbres de los animales, empezaron a manipular las plantas medicinales. El hombre de Neardenthal ya utilizaba plantas medicinales. Los conocimientos sobre las plantas medicinales, antes del nacimiento de la escritura, se realizaban oralmente. Se sabe que el primer texto escrito sobre el uso de plantas medicinales tiene unos 4000 años de antigüedad y aparece en una tablilla de arcilla en la cultura de los Sumerios, un antiguo pueblo que vivía al sur de los ríos Éufrates y Tigris, lo que equivaldría al actual Iraq. Como y porque una determinada planta tiene propiedades curativas debió ser un misterio para aquellos pueblos primitivos, por esta razón las personas que tuvieron un interés especial en las cualidades curativas de las plantas y que adquirieron una cierta experiencia sobre el tema consiguieron ocupar un lugar importante en la sociedad. Los pueblos primitivos atribuían sus efectos curativos a la intervención de uno de sus dioses. Por esta razón, los "médicos" primitivos quedaron asociados al conjunto de estructuras de las creencias religiosas de los pueblos. Muchos de ellos fueron sacerdotes que actuaban como instrumento de los dioses, de los que recibían poderes para curar. El conocimiento de las plantas medicinales se extiende a cualquier parte del mundo donde el hombre tradicionalmente ha necesitado de estos seres para curar sus enfermedades. El paso de las diferentes culturas ha creado todo un conocimiento de remedios vegetales que ha constituido la base de la medicina moderna. Un patrimonio que no puede atribuirse a ninguna cultura en particular sino al hombre en su globalidad y que nos corresponde a todos conocer y salvaguardar 1. El conocimiento empírico acerca de las plantas medicinales y sus efectos curativos se acumuló durante milenios y posteriormente pasó a ser parte integral de sistemas y tradiciones curativas como el Ayurveda en la India, la medicina tradicional china o las tradiciones curativas de los indios norteamericanos. Hoy en día se reportan numerosos descubrimientos científicos que confirman el enorme potencial curativo que posee el mundo vegetal y que están transformando la Fitoterapia en una práctica muy distinta a la de nuestros antepasados 1. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A 2 La medicina tradicional se viene utilizando desde hace miles de años, y sus practicantes han contribuido enormemente a la salud humana, en particular como proveedores de atención primaria de salud al nivel de la comunidad. La medicina tradicional ha mantenido su popularidad en todo el mundo. A partir del decenio de 1990 se ha constatado un resurgimiento de su utilización en muchos países desarrollados y en desarrollo. En algunos países asiáticos y africanos, el 80% de la población depende de la medicina tradicional para recibir atención primaria de salud. En muchos países desarrollados, del 70% al 80% de la población ha recurrido alguna vez a una u otra forma de medicina alternativa o complementaria. La OMS y sus Estados Miembros colaboran para promover el uso de la medicina tradicional en la atención de salud. 2. La reconocida dependencia creciente del uso de sistemas de medicina alternativa para reducir costes y conseguir objetivos de asistencia sanitaria ha hecho que gobiernos de todo el mundo aumenten la inversión en medicinas complementarias y alternativas 3 El Perú es considerado un país mega diverso por ser uno de los primeros en número de especies de plantas de propiedades conocidas y utilizadas por la población; alberga cerca de 80 mil especies de flora, de las cuales unas dos mil son utilizadas por los nativos con fines curativos. De la flora se calculan un 10% total del mundial. Tiene una vasta reserva en plantas medicinales (4400 especies), ornamentales (1600 especies) y plantas alimenticias (unas 1200 especies). Es depositario de importantes recursos fitogenéticos; diversas especies de plantas contienen un enorme potencial de importancia estratégica para la industria farmacológica 4. La familia Gentianaceae consiste en unos 75 géneros y aproximadamente 1000 especies de distribución cosmopolita, pero más común en regiones templadas y subtropicales y en pequeñas montañas tropicales. El género más grande es Gentianella, con 400 especies 4. El Hercampuri (Gentianella alborosea) es una planta oriunda de la sierra del Perú, crece entre los 3,500 y 4,300 metros sobre el nivel del mar. Desde los tiempos del Imperio Incaico, ha sido usado para aliviar dolores estomacales y combatir las fiebres producidas por el paludismo. El extracto acuoso de la planta entera ha sido usado en nuestra medicina tradicional peruana como un remedio para la hepatitis, para el tratamiento de la obesidad y como un colagogo. Investigaciones realizadas sugieren que es un gran regulador del metabolismo de las grasas, motivo Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A 3 por el cual se le utiliza para ayudar a reducir la obesidad. Esta especie contiene sustancias amargas de tipo glucosídicas, como eritaurina (sustancia amarga de tipo glucosídica), amarogencina y genciopicrina, eritrocentaurina, genciopicrósidos (lactonas insaturadas), alcaloides, saponinas, taninos, resinas, hemicelulosa y minerales; asimismo, aceites volátiles, azúcares, mucílagos, ácido genciánico, terpenoides y entre ellos los monoterpenos del pentano-secoiridoides (secologanósido, amarosverina, amarogentina) y sesterpenoides (alborosin). Además la presencia de sales de aluminio, calcio, potasio, magnesio, sodio y cloro 5,6. La creatinina se forma a partir de la fosfocreatinina muscular, que tiene su origen en los aminoácidos arginina y glicina, siendo por consiguiente, un producto endógeno del catabolismo de la creatina a nivel muscular principalmente. Se elimina por los riñones en cantidades constantes a través de la filtración glomerular. Sus valores son independientes de la ingestión de proteínas y no son afectados por el volumen urinario. En los humanos, los valores normales de creatinina oscilan entre 0.5 y 1.6mg/dL. Es el elemento nitrogenado de sangre menos variable, ya que los daños y perjuicios pequeños que ocurren a nivel renal no son capaces de promover sus alteraciones séricas. El aumento de concentración sérica de creatinina ocurre por insuficiencia renal debido a patologías o anomalías a nivel renal7. En el Perú, el Instituto Nacional de Salud, es la entidad que se encarga de proponer políticas y normas,promover, desarrollar y difundir la investigación científica- tecnológica y brindar servicios de salud en los campos de salud pública, control de enfermedades transmisibles y no transmisibles, alimentación y nutrición, producción de biológicos, control de calidad de alimentos, productos farmacéuticos y afines, para contribuir a mejorar la calidad de vida de la población 8. El presente estudio está orientado a determinar efecto del decocto de Gentianella alborosea “hercampuri” sobre los niveles séricos de Creatinina en Rattus norvegicus var. albinus. Por todo lo expuesto se planteó el siguiente problema: ¿Cuál es el efecto del decocto de Gentianella alborosea “Hercampuri” sobre los niveles séricos de Creatinina en Rattus norvegicus var. albinus? Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A 4 Hipótesis: El efecto del decocto de Gentianella alborosea “Hercampuri”, no produce cambios significativos sobre los niveles séricos de Creatinina en Rattus norvegicus var. albinus Objetivo General: Determinar si la administración del decocto de Gentianella alborosea “Hercampuri” provoca cambios significativos sobre los niveles séricos de Creatinina en Rattus norvegicus var albinus. Objetivos Específicos: Determinar los niveles de Creatinina sérica en Rattus norvegicus var albinus antes y después de la administración del decocto de Gentianella alborosea “Hercampuri” a dosis de 150mg/kg p.c. Determinar los niveles de Creatinina sérica en Rattus norvegicus var albinus antes y después de la administración del decocto de Gentianella alborosea “Hercampuri” a dosis de 300mg/kg p.c Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A 5 II. MATERIAL Y MÉTODO 2.1 Material de Estudio: 2.1.1 Material Biológico: a. Animales de experimentación: Se empleó 36 ejemplares de la especie Rattus norvegicus var. albinus, aparentemente sanos, machos de 3 a 4 meses de edad, con peso corporal de 200 a 250 g, procedentes del Instituto Nacional de Salud, Chorrillos-Lima. Los especímenes fueron sometidos a similares condiciones ambientales y de alimentación por 15 días antes de iniciar el estudio. b. Vegetales: Se emplearon aproximadamente 1.5 Kg. de hojas y tallos de Gentianella alborosea “hercampuri”, procedente del Distrito: Atuncolla, Provincia de Puno y Departamento de Puno. La muestra fue obtenida del centro autorizado de medicina tradicional “Shangri - La”, ubicado en el centro de la ciudad de Trujillo. N° de Lote: 2010. La especie en estudio se identificó en el Herbarium Truxillensis de la Universidad Nacional de Trujillo, según el sistema de clasificación Fitogenético de A. Engler (1994). Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A 6 División : Angiospermae Clase : Dicotyledoneae Subclase : Metachlamydeae Orden : Campanulales Familia : Asteraceae Género : Gentianella Especie : Alborosea Nombre común : Hercampuri, té amargo, té de Chavin, harcapura, té indio 2.1.2 Material de Laboratorio: a. Equipos: - Balanza analítica Sanrotius Ag Gottingen PT 310 - Cocina eléctrica Glovana S 001 - Balanza de canastilla “O Haus” b. Material de vidrio: - Probetas 100 ml - Vasos de 150, 250 ml - Pipetas de 5 y 10 ml - Tubos de ensayo de 15 ml - Vasos de precipitación de 50 y 100 ml - Varillas de vidrio - Placa de porcelana c. Reactivos: - Solución salina fisiológica al 0.9% - Kit comercial Creatinina (Wiener Lab) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A 7 d. Farmacos: - Ketamina ampolla e. Otros: - Agua destilada - Algodón - Alcohol de 70° - Jeringas de 1 y 5 ml - Jaulas metálicas - Sondas nasogástricas Medex N°2 2.2. MÉTODO: 2.2.1 Tipo y Diseño de Estudio: Se realizó un estudio experimental in vivo siguiendo al diseño clásico de estímulo creciente para el que se utilizó un grupo control y dos grupos problemas con controles previos y sucesivos. Luego los especímenes de Rattus norvegicus var. albinus recibieron la administración del decocto de Gentianella alborosea “hercampuri” por vía oral durante 30 días. 2.2.2. Preparación de la especie vegetal: 2.2.2.1. Recolección y selección de la especie vegetal: Después de adquirir las hojas y tallos de Gentianella alborosea, se procedió a realizar una inspección visual para verificar el buen estado de la superficie. Se seleccionó aquellas hojas y tallos, luego fueron lavadas y secadas. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A 8 2.2.1.2. Preparación del decocto: Para la preparación del decocto se inició de la dosis recomendada en medicina popular: 2 vasos (250 mL) para una persona de 70 Kg, se calentó en un recipiente adecuado 100 g de agua, una vez alcanzado el punto de ebullición, se agregó 5 g de Gentianella alborosea “hercampuri” dejando hervir por un espacio de 5 minutos, luego se retiró del fuego y se dejó en reposo por 10 minutos hasta enfriar. Se preparó el decocto con las hojas y tallos, y con el volumen obtenido se determinó el extracto seco del decocto, tomando 5ml para llevar a sequedad hasta peso constante obteniéndose un peso promedio de 63mg/mL del decocto, posteriormente se calculó la dosis a utilizar en peso del extracto seco de la hoja y tallo obteniéndose 225mg/kg p.c.11. 2.2.3. Tratamiento de los Animales: 2.2.3.1. Alimentación de los animales de experimentación: Los especímenes fueron alimentados con una dieta balanceada a base de maíz, cebada y purina durante el desarrollo del estudio. 2.2.3.2. Distribución de los grupos en experimentación: Los animales de experimentación fueron distribuidos aleatoriamente en 3 grupos, identificados y distribuidos de la siguiente manera: Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A 9 Grupo I (Grupo Control): Formado por 12 animales de experimentación a loscuales se les realizó una lectura basal de los niveles de Creatinina sérica y posteriormente, se les administró 1 mL de solución salina fisiológica dos veces al día (en ayunas y por las tardes) vía oral durante 30 días, finalizado este tiempo se cuantificó Creatinina sérica (lectura final). Control Grupo I: Lectura Basal 30 días Lectura Final Grupo II (Problema I): Formado por 12 animales de experimentación a los cuales se les realizó una lectura basal de los niveles de Creatinina sérica y posteriormente, se les administró el decocto de Gentianella alborosea” a la dosis menor (150mg/kg) dos veces al día (en ayunas y por las tardes) vía oral durante 30 días, finalizado este tiempo se cuantificó Creatinina sérica (lectura final). Estímulo X Grupo II: Lectura Basal 30 días Lectura Final Donde: Estímulo X: Se le administró la dosis de 150 mg/kg p.c. del decocto de Gentianella alborosea por vía oral. Grupo III (Problema II): Formado por 12 animales de experimentación a los cuales se les realizó una lectura basal de los niveles de Creatinina sérica y posteriormente, se les administró el decocto de Gentianella alborosea a la dosis mayor (300mg/kg) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A 10 dos veces al día (en ayunas y por las tardes) vía oral durante 30 días, finalizado este tiempo se cuantificó Creatinina sérica (lectura final). Estímulo 2X Grupo III: Lectura Basal 30 días Lectura Final Donde: Estímulo 2X: Se le administró la dosis de 300 mg/kg p.c. del decocto de Gentianella alborosea por vía oral. 2.2.3.3. Evaluación de las pruebas bioquímicas: A todos los animales de experimentación se les sometió a ayuno de 10 a 12 horas para determinar los niveles séricos de Creatinina. 2.2.3.4. Determinación de las pruebas bioquímicas: A) Obtención de la muestra: Se obtuvo 1 mL de sangre haciendo un corte en el extremo distal de la cola del animal de experimentación previamente anestesiado con Ketamina a la dosis de 100 mg/Kg p.c. La muestra de sangre se recolectó en tubos heparinizados. El suero obtenido por centrifugación a 1500 rpm durante 15 min, se utilizó para determinar Creatinina sérica. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. 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Posteriormente añadir a cada tubo: Tubo blanco Tubo estándar Tubo muestra Agua Destilada 0.1 ml - - Estándar - 0.1 ml - Muestra - - 0.1 ml Reactivo de Trabajo 1 ml 1 ml 1 ml Stopper 50 ul - 50 ul Mezclar. Incubar 10 minutos en baño a 37°C. Dentro de los 15 minutos de retirado del baño, leer el Estándar y la Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A 12 Muestra en Espectrofotómetro a 510 nm. Luego agregar: Stopper, Mezclar. Dejar los tubos 5 minutos a temperatura ambiente y volver a leer los tubos en Espectrofotómetro a 510 nm. Valores normales: 0.4 – 1.4 mg/dL 12, 13,14. 2.2.3.5. Análisis Estadístico: Para determinar la variabilidad interindividual e intergrupal de los efectos en los grupos problema y control se aplicó el Análisis de Varianza y para determinar la significancia estadística entre los grupos problema y el control se aplicó el Método de Duncan con un nivel de significancia de 0.05 15. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A 13 III. RESULTADOS Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A 14 TABLA 1: Determinación basal y final de los niveles de Creatinina sérica en Rattus norgevicus var. albinus. Grupo I (grupo control) Grupo I Animal de Análisis (N°) Creatinina sérica (mg/dL) Lectura Basal Creatinina sérica (mg/dL) Lectura Final 01 0,58 0,56 02 0,62 0,67 03 0,60 0,61 04 0,55 0,50 05 0,62 0,61 06 0,56 0,50 07 0,70 0,65 08 0,65 0,67 09 0,60 0,59 10 0,63 0,63 11 0,60 0,61 12 0,65 0,65 TABLA 2: Determinación basal y final de los niveles de Creatinina sérica en Rattus norvegicus var. albinus. Grupo II (grupo problema I) Grupo II Animal de Análisis (N°) Creatinina sérica (mg/dL) Lectura Basal Creatinina sérica (mg/dL) Lectura Final 01 0,55 0,47 02 0,70 0,76 03 0,52 0,49 04 0,63 0,60 05 0,60 0,56 06 0,55 0,57 07 0,61 0,65 08 0,63 0,60 09 0,61 0,63 10 0,59 0,59 11 0,65 0,66 12 0,56 0,61 Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A 15 TABLA 3: Determinación basal y final de los niveles de Creatinina sérica en Rattus norvegicus var. albinus. Grupo III (grupo problema II) Grupo III Animal de Análisis (N°) Creatinina sérica (mg/dL) Lectura Basal Creatinina sérica (mg/dL) Lectura Final 01 0,60 0,58 02 0,61 0,58 03 0,59 0,63 04 0,61 0,47 05 0,70 0,8306 0,72 0,67 07 0,65 0,57 08 0,63 0,61 09 0,63 0,59 10 0,59 0,63 11 0,57 0,60 12 0,61 0,58 Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A 16 TABLA 4: Análisis de Varianza de Creatinina sérica antes y después de la administración del decocto de Gentianella alborosea en Rattus norvegicus var. albinus. VARIABLE GRUPO N° BASALES FINALES (30 días) P X ± D.S. X ± D.S. Creatinina sérica (0.4 – 1.4mg/dL) Grupo I* 12 0,61 ± 0,04 0,60 ± 0,05 0,16 Grupo II** 12 0,60 ± 0,05 0,59 ± 0,08 Grupo III*** 12 0,62 ± 0,07 0,61 ± 0,08 Leyenda: * : Control ** : Hercampuri 150 mg/kg *** : Hercampuri 300 mg/Kg P < 0,05 : Significancia Estadística ANOVA : Análisis de Varianza Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A 17 TABLA 4.1: Análisis DUNCAN para Creatinina sérica después de la administración oral del decocto de Gentianella alborosea en Rattus norvegicus var. albinus. TRATAMIENTO ni alfa = 0.05 Grupo I Grupo II Hercampuri 150 mg/kg 12 0,599 Control 12 0,604 Hercampuri 150 mg/kg 12 0,612 Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A 18 IV. DISCUSIÓN Gentianella alborosea es un desintoxicante sanguíneo que ayuda a eliminar los lípidos de baja densidad de la sangre. Facilita la circulación y debido a su acción diurética se usa para normalizar la presión sanguínea. El hercampuri ayuda a energizar el organismo debido a que contribuye a balancear el metabolismo ya que mejora la circulación 16. . Los fitoesteroles son particularmente abundantes en el reino vegetal: están presentes en los frutos, semillas, hojas y tallos de prácticamente todos los vegetales conocidos. Los fitoesteroles presentes en esta planta y cuya estructura química son muy similares a la del colesterol; sin embargo, los fitoesteroles difieren estructuralmente del colesterol (que posee 27 carbonos, C27) por la presencia de sustituyentes de tipo metilo o etilo en la cadena lateral de la molécula 17. No está totalmente elucidado el mecanismo mediante el cual los fitoesteroles ejercen efectos hipocolesterolémicos. Sin embargo, basado en sus propiedades fisicoquímicas, se ha postulado que estas sustancias actúan a tres niveles diferentes: a) inhiben la absorción a nivel intestinal del colesterol, tanto aquel de origen dietario como biliar, b) inhiben la reesterificación del colesterol a nivel de la actividad de la enzima acilCoA- colesterol-acil-tranferasa (ACAT), c) aumentan la actividad y la expresión del transportador tipo ABC (de ATP Binding Casette), acelerando el eflujo de colesterol desde las células intestinales al lumen intestinal. Debido a que los fitoesteroles son más lipofílicos que el propio colesterol, propiedad derivada de las características de mayor extensión y complejidad de la cadena lateral, los esteroles desplazarían competitivamente al colesterol desde la micela mixta formada por la acción de los fosfolípidos y de las sales biliares en el lumen intestinal. De esta forma, al tomar contacto la micela mixta con el ribete en cepillo formado por las microvellocidades de las células intestinales, los fitoesteroles ocuparían el lugar del colesterol 18. En las Tablas 4 y 4.1; se muestra el análisis estadístico realizado a los valores de Creatinia sérica que se encuentran en las Tablas 1, 2 y 3 correspondientes a los tres grupos de investigación, post – administración del decocto de Gentianella alborosea. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A 19 En la Tabla N°4 se muestra los valores promedio, desviación estándar y el análisis de varianza de Creatinina sérica de los tres grupos investigados. Analizando los valores de Creatinina sérica, observamos que no existe una diferencia significativa entre los valores del grupo Control y los dos grupos Problema (p > 0.05). Estos resultados se reafirman en la Tabla 4.1 con la Prueba de Duncan, donde se evidenció que no existe variabilidad significativa del parámetro en estudio después de 30 días de administración del decocto de Gentianella alborosea en los grupos de investigación. Al considerar los valores normales de Creatinina sérica para las ratas de estudio de 0.4 – 1.4 mg/dL 12, 13, 14. Las variaciones encontradas en los dos tratamientos fueron mínimas como para establecer cualquier alteración fisiológica en los animales. La Creatinina es el elemento nitrogenado de la sangre menos variable, ya que los daños y perjuicios pequeños que ocurren a nivel renal no son capaces de promover sus alteraciones séricas 7. La Creatinina se forma a partir de la fosfocreatina muscular, que tiene su origen en los aminoácidos arginina y glicina, siendo por consiguiente, un producto endógeno del catabolismo de la Creatina a nivel muscular. Se elimina por los riñones en cantidades constantes a través de la filtración glomerular. Sus valores son independientes de la ingestión de proteínas y no son afectados por el volumen urinario 7. El aumento de la concentración sérica de Creatinina ocurre por insuficiencia renal cuando se incrementa la cantidad de urea. En los Humanos, en la glomerulonefritis crónica con uremia las proporciones suben hasta 35 mg/dL cuando puede ocurrir un problema letal. Valores superiores a 5 mg/dL evidencian ya una insuficiencia renal. Las obstrucciones urinarias, por afecciones en la próstata, vejiga o uretra, como también la oliguria refleja provocada por la nefrolitiasis, muestran índices muy altos de Creatinina, y este cuadro es reversible cuando se retira la causa de la obstrucción 7. Los resultados obtenidos indican que la administración del decocto de Gentianella alborosea, en las dosis empleadas a lo largo del experimento, no ha producido cambios significativos cuando se midieron los niveles de creatinina sérica en las ratas de experimentación. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IOTE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A 20 V. CONCLUSIONES De los resultados obtenidos en el presente trabajo se puede concluir: La administración de 30 días del decocto de Gentianella alborosea, no provocó cambios significativos en los niveles de Creatinina sérica en Rattus norvegicus var. albinus. Los niveles de Creatinina sérica no mostraron diferencia significativa entre los valores basales (0,60 ± 0,05) y los valores finales (0,59 ± 0,08) después de la administración del decocto de Gentianella alborosea “Hercampuri” a dosis de 150 mg/Kg en Rattus norvegicus var albinus. Los niveles de Creatinina sérica no mostraron diferencia significativa entre los valores basales (0,62 ± 0,07) y los valores finales (0,61 ± 0,08) después de la administración del decocto de Gentianella alborosea “Hercampuri” a dosis de 300 mg/Kg en Rattus norvegicus var albinus. Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/ BI BL IO TE CA D E FA RM AC IA Y B IO QU ÍM IC A 21 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1.- Biomanantial. Historia de las plantas medicinales [en línea]. Soporte URL 2005. [Fecha de acceso 23 de Julio de 2011]. Formato html. Disponible en: http://www.biomanantial.com/historia-plantas-medicinales-a-87.html 2.- Organización Mundial de la Salud. Estrategia de la OMS sobre Medicina Tradicional 2002 – 2005. [en línea]. Soporte URL 2005 [fecha de acceso 23 de Julio de 2011]. Formato pdf. Disponible en: http://whqlibdoc.who.int/hq/2002/WHO_EDM_TRM_2002.1_spa.pdf 3.- Chakma T. Análisis del efecto de las plantas medicinales en Bangladesh en la duración del sueño [en línea]. 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