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www.aetel.es Asociación Española Técnicos de Laboratorio · 43 p u b lic a c io n e s a e te l AETEL N.º 71 Ana I. Aramendia, Mª Cristina Caballero, Teresa Tuñón, Federico G. Bragado (Banco de Tejidos Neurológicos de Navarra, Centro de Investigación Biomédica, Hospital de Navarra, Hospital Virgen del Camino) INTRODUCCIÓN La legislación española, como existe en otros países, contempla una normativa específica que regula la donación de tejidos humanos para la investigación y la actividad de los bancos de teji- dos biológicos. La normativa vigente en España, relacionada con el uso científico de los tejidos procedentes de cadáveres e investigación con muestras biológicas, queda recogida en: 1. Ley de autopsias clínicas de 29/1980 y Real Decreto de 2230/1982, que hace referencia a la utilización con fines formativos y científicos del material obtenido en la autopsia clínica. 2. Opinión científica sobre: Banco de Tejidos y Muestras Neurológicas de Procedencia Humana. Adoptada por el CMIETT (Subcomité de Bancos de Tejidos de Procedencia Humana), el 9 de octubre de 2001. 3. Opinión científica sobre: Bioseguridad). Adoptado por el CMIEET (Subcomité de Seguridad), el 15 de Enero de 2001. 4. Manual de Bioseguridad en el laboratorio (OMS), Ginebra 2005 5 Ley 14/2007, de 3 julio, de Investigación Biomédica (BOE, nº 159) MATERIAL Y MÉTODOS En la actualidad, en el banco de cerebros de Navarra adoptamos un protocolo bien definido en el procesamiento del tejido neurológico, que queremos exponer en este artículo por si pudie- ra servir como referencia para otros bancos: 1. El traslado del cerebro desde el centro extrac- tor a las instalaciones del Banco se realiza en doble envase. El envase exterior debe ser cerrado con manos limpias. 2. Una vez recibido el cerebro se procesa en fresco en el interior de una cabina de biose- guridad (Telstar Bio-II-A), adoptando las medidas oportunas de bioseguridad: buzo Tychem C amarillo, mascarillas filtro para par- tículas biológicas y químicas (3M), guantes anticorte y gafas para evitar salpicaduras. Todo el material utilizado en el procesamien- to en fresco no desechable, es descontami- nado con lejía durante 1 hora. 3. En todos los cerebros se recogen un pequeño fragmento de cerebelo, para realizar el des- pistaje de la PrPSc. Este proceso dura de 3 a 4 días, porque requiere fijación del tejido en formol 24h., desinfección con ácido fórmico 98% 1 h., lavado en agua del grifo y 48 h. mas de fijación en formol. Posteriormente se inclu- ye de manera habitual en parafina, se realiza un bloque, se corta y se tiñe mediante inmu- notinción con anticuerpo anti-PrPSc, para confirmar o descartar la presencia de la misma. La preparación incluye un array de control positivo y negativo. Bioseguridad en los Bancos de Tejidos Neurológicos: a propósito de las Enfermedades Priónicas a e te l p u b lic a c io n e s 44 · Asociación Española Técnicos de Laboratorio www.aetel.es AETEL N.º 71 4. Una vez realizado el despistaje y si la inmu- nohistoquimica es negativa, seguiremos el protocolo habitual de tallado. Por el contrario, si la técnica para PrPSc resulte positiva, decontaminaremos todos los bloques con ácido fórmico(1h.) utilizando material dese- chable, y únicamente se almacenará congela- da una pequeña muestra para realizar, si es necesario estudio genético y molecular. Procuraremos estar el menos tiempo posible en contacto con el material infectado, y el resto del material se destruirá mediante inci- neración. 5. Si existe sospecha clínica de Enfermedad Espongiforme Transmisible Humana (EETH), el cerebro será considerado infeccioso. Adoptaremos otras medidas: recogeremos pequeñas muestras en congelación de tres zonas del cerebro (conservándolas en doble envase, separada del resto de la colección de cerebros, -80ºC) y una muestra para realizar la PrPSc, el resto lo sumergiremos en formol, para su posterior estudio, seguiremos el pro- tocolo de PrPSc Positiva, independientemen- te del resultado de la PrPSc. RESULTADOS En el Banco de Tejidos Neurológicos de Navarra, en 5 años de existencia hemos recibido 230 cerebros procedentes de donaciones: • Hemos tenido un total 9 casos de EETH. De ellos, únicamente 2 (0, 88 % del total de autopsias), han supuesto riesgo de contagio teórico por la ausencia de sospecha clínica. Al comprobarse la positividad de la técnica de PrP en la muestra de cerebelo tomada previamente, los bloques de los cerebros de estos pacientes se descontaminaron antes de la inclusión en parafina y el resto de mate- rial en formol se destruyó por incineración. A pesar de su baja frecuencia, la existencia de casos incidentales, nos obliga a adoptar las mismas medidas de seguridad en todos los casos. • El Insomnio Familiar Letal (IFL) y otras for- mas de enfermedades priónica de carácter familiar, son patologías de transmisión here- ditaria, infrecuentes y poco conocidas, cuya capacidad de contagio no está demostrada. Desde hace unos años se ha venido obser- vando que en el País Vasco había una mayor incidencia de esta enfermedad que en el www.aetel.es Asociación Española Técnicos de Laboratorio · 45 p u b lic a c io n e s a e te l AETEL N.º 71 resto de España(4,5). El Centro Nacional de Epidemiología dio a conocer este dato a las comunidades autónomas y ello ha hecho que en comunidades próximas, estuviéra- mos alertados de posibles casos. En Navarra, la comprobación postmortem de tres casos de IFL ha sido posible gracias a la existencia del banco de cerebros. Queremos insistir en que el mecanismo de transmisión de esta enfermedad no es por contagio, sino por herencia. DISCUSIÓN El conocimiento de las enfermedades prióni- cas es un tema tan importante que todo aquel que pueda aportar algo debe hacerlo por espíri- tu profesional, y los TEAP y TEL no se quedan fuera de esta cadena. No obstante, aunque los casos de contagio de Enfermedad de Creutzfeldt-Jakob a profesionales sanitarios no están bien demostrados, el riesgo cero es impo- sible. Los profesionales que trabajan o manipu- lan tejido humano (o tejido procedente de ani- males) deben intentar minimizarlo al máximo. No es nuestra intención sembrar alarma, pero ante los resultados aquí expuestos creemos oportu- no comentar que hay que cumplir todas las medidas de seguridad que obliga la ley y consi- derar todos los casos como potencialmente contagiosos. Sin alarmismos, se debe proteger a los trabajadores y estos deben ser meticulosos en el cumplimiento de las medidas de protec- ción, adaptando el área de trabajo en función del objetivo que debe cumplir. La Sala de contención nivel 3 es importante a la hora de plantear las instalaciones oportunas para este fin, y para el procesamiento en fresco. Esta medida es una barrera más que hay que adoptar para seguir con el funcionamiento del banco. Con todas las medidas adoptadas y siendo cuidadosos en nuestro trabajo creemos que aunque el trabajo implique un riesgo de este modo quedara minimizado. Por otra parte, los TEAP y TEL juegan un papel importante en el estudio epidemiológico de estas enfermedades. La comprobación y diag- nóstico en la mayoría de los casos no se puede hacer sin la autopsia por lo que no colaborar es poner impedimentos al desarrollo de la ciencia (6). Además, si se colabora positivamente, se está al día de las noticias que hacen mención o implican a nuestra profesión y se alerta, como en el caso del IFL, de la posibilidad de nuevos casos, habremos dado nuevos pasos hacia un mejor conocimiento de las enfermedades y en última instancia hacia un tratamiento eficaz que hoy por hoy no lo conocemos. BIBLIOGRAFÍA 1. E. Rivas, S.Teijeira, A. Tardio, C.Fachal, B. Quintáns, C. Navarro; “ Banco de Tejidos Neurológicos den el Laboratorio de Neruropatología. Organización Básica”, Neurología 2003;18(10):709-715. 2. Ley de autopsias clínicas de 29/1980 y Real Decretode 2230/1982 3. Subcomité de Banco de Tejidos de Procedencia Humana, Comité Científico Multidisciplinar para la investigación en Encefalopatías Espongiformes Transmisibles (CMIEET).Opinión científica sobre: Bancos de Tejidos Neurológicas de procedencia humana. Ministerio de Ciencia y Tecnología, 2001. 4. Rodríguez-Martínez, A. B., Zarranz, J. J., Digón, A., Galdós L., Ibáñez, A., de Pancorbo, M. M., 2007, Estudio Genealógico del Insomnio Familiar Letal en el País Vasco, Antropo, 15, 41- 47. www.didac.ehu.es/antropo. 5. J.J. Zarranz, Enfermedades priónicas o prion- patías, Neurología 2006;21(8): 395-399. 6. J.M. Polo y J. Berciano, Las vacas, locas: los neurólogos, en su sitio, Neurología 1996:11(5):201-204.
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