TÉCNICAS DE SIEMBRA

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TÉCNICAS DE SIEMBRA
INOCULACIONES O
SIEMBRAS 
AISLAMIENTO RECUENTOS CELULARES
BACTERIANOS
Medio líquido
Su finalidad es depositar una
parte de la muestra que se
desea estudiar sobre el
medio de cultivo para
obtener un crecimiento
visible en forma de colonias
La
siembra se
realiza en
tubo
Colonia: con asa
de platino
Suspensión
bacteriana: con
asa de platino o de
siembra, tórula,
pipeta
Muestra
biológica: con
tórula
Medio sólido
La siembra
se realiza
en placa o
en tubo
Inoculación
parcial en placa:
con asa o tórula
Inoculación total
en placa: con
tórula, por
inundación, con
asa de Drigalsky o
por contacto
 Tubo inclinado:
por picadura en
profundidad o por
estría en superficie
inclinada
Tubo recto: por
picadura en
profundidad
Medio
semisólido
La siembra se realiza en
tubo por picadura en
profundidad
Su finalidad es procurar la
separación necesaria de las
colonias bacterianas
sobre la superficie del medio
de cultivo para que éstas
puedan ser procesadas
individualmente
Placas Petri
Consiste en rayar la
superficie de una placa
Petri con medio utilizando
el asa de inocular
impregnada con el cultivo a
estudiar
Cuadrante
Tipos de
rayado
Radiante
En forma de T
Continuo
Los recuentos bacterianos se
efectúan para hacer un
recuento del número de
microorganismos que hay
presentes en una muestra
líquida
Medio líquido
Turbidimetría:
Escala de
MacFarland
Cámaras de
recuento
Medio sólido
Mediante asa
calibrada
Mediante
diluciones
seriadas
CULTIVOS
BACTERIANOS
Cultivo
Poblaciones bacterianas con millones de individuos. Cada
colonia corresponde a la división sucesiva de una célula
bacteriana o cepa en 18 a 24 horas (bacterias aeróbicas o
anaeróbicas facultativas)
Cultivo puro o
axénico Contiene una sola clase de microorganismo
Contiene varios microorganismos creciendo juntosCultivo mixto opolimicrobiano
FROTIS SIEMBRA O
TRANSFERENCIAS
ENTRE DOS MEDIOS
DE CULTIVOS
Tubo con
cultivo
bacteriano a
la placa
Procedimiento
Agite el tubo con el medio de cultivo
Flamee el asa de inoculación
Abra el tubo y flamee la boca del mismo
Introduzca el asa en el tubo de ensayo con el
medio líquido
Flamee la boca del tubo de ensayo 
Enfríe el asa en la contratapa y estríe sobre el
agar
Flamee el asa de inoculación e incube la placa
a 35°C 
CRECIMIENTO BACTERIANO
CUANTIFICACIÓN DE
POBLACIONES
MICROBIANAS
RECUENTO DEL
NÚMERO DE
BACTERIAS 
Permiten un recuento
de todas las células, tanto las vivas como las
muertas
Método de placa
(standard plate count)
Turbidometría
Contaje por laminilla
Petroff-Hauser 
Bioluminiscencia
Técnicas directas
Incluyen los recuentos directos
al microscopio o recuento electrónico, el recuento en
placa, o el cálculo del número más probable (NMP)
Métodos
más
utilizados
Tipos de
técnicas
Técnicas indirectas
Miden una propiedad de la masa de las células
como son la turbidez, el peso seco, o una actividad
metabólica
RECUENTO DE
COLONIAS O
RECUENTO
ESTÁNDAR EN PLACA
Se basa en contar las colonias de microorganismos que se
desarrollan después de inocular en un medio de cultivo
adecuado e incubar a una temperatura y tiempo determinados
un volumen determinado de muestra
Se utiliza para determinar el número de células aisladas o
microorganismos unicelulares viables como bacterias,
levaduras, también se utiliza para el conteo de esporas fúngicas
presentes en la muestra