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Injertos vegetales en Biotecnología Beatriz Xoconostle Cázares Depto. de Biotecnología CINVESTAV IPN ¿ Qué son los injertos vegetales ? • El injerto es la unión física de dos plantas, la que proporciona la raíz se llama patrón, portainjerto o pie y la segunda es el vástago o injerto. • Ambas crecen como un solo individuo. Rojas González et al., 2004 Roble y Maple. Fuentes et al., 2014. Los Griegos y Romanos ya la conocían El injerto de uno sobre otro es mejor en el caso de los árboles que son similares y tienen las mismas proporciones. Aristóteles (384-322 a.C.) Injertos de olivos “buenos” sobre olivos "silvestres". Apóstol San Pablo en Romanos 11:16-21. http://www.ehowenespanol.com/historia-del-injerto-plantas-sobre_315385/ http://commons.wikimedia.org/wiki/File:P46.jpg Para qué sirven? • Resistencia • Nutrición • Propagación vegetativa • Aceleración de la madurez fisiológica • Enanización Por aproximación por hendidura por yema Wikipedia.es http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Injerto_de_hendidura_simple.JPG http://www.google.es/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&source=images&cd=&cad=rja&uact=8&ved=0CAcQjRw&url=http://www.infogranja.com.ar/tipos_de_injerto.htm&ei=kXhAVI6QCsPJ8AHyoIDwBw&bvm=bv.77648437,d.eXY&psig=AFQjCNFdMujjGFcIY7T0WBkSQK-qWxie9A&ust=1413597585510929 http://www.google.com.mx/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&source=images&cd=&cad=rja&uact=8&ved=0CAcQjRw&url=http://www.jardin-mundani.com/empelts/INJERTOS.htm&ei=cFZAVOqwAYL08AGFh4HwBg&bvm=bv.77648437,d.eXY&psig=AFQjCNFjRTP3O6zMrDC8JyaX2kZM3TPVyA&ust=1413588967230189 http://www.google.com.mx/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&source=images&cd=&cad=rja&uact=8&ved=0CAcQjRw&url=http://www.jardin-mundani.com/empelts/INJERTOS.htm&ei=cFZAVOqwAYL08AGFh4HwBg&bvm=bv.77648437,d.eXY&psig=AFQjCNFjRTP3O6zMrDC8JyaX2kZM3TPVyA&ust=1413588967230189 http://www.infojardin.com/foro/showthread.php?t=92309&page=4 http://img444.imageshack.us/i/dsc08769n.jpg/ Ruta de transporte de fotoasimilados Floema Ruta de transpiración Xilema Supracelular Multicelular Sistema circulatorio Sistema no circulatorio Plantas vs. animales Raven et al.; 1999 Células del floema Plasmodesmos modificados entre Célula Acompañante y Tubo Criboso. SAM PDs forman dominios simplásmicos locales Los plasmodesmos interconectan todas las células de plantas Floema Composición promedio del floema de dicotiledóneas Figura modificada de Moore, R., Clark, W.D. & Vodopich, D.S. (1998). Botany. 2nd ed., WCB McGraw-Hill Lin et al., 2009. Proteínas en la savia del floema Funciones •Unión a RNA * Proteólisis * Movimiento de RNA y proteínas * Movimiento de vesículas *Defensa *Antioxidantes *Señalización Lin et al., 2009. Proteínas en la savia del floema CmPP16 es supracelular Xoconostle- Cázares et al. (1999) Science 283: 94-98 Xoconostle- Cázares et al. (1999) Science 283: 94-98 Proteína RNA calabaza calabaza Las macromoléculas de floema se transmiten por injerto Pepino pepino pepino calabaza Xoconostle-Cázares et al., 1999, 2001. mRNA, miRNA, siRNA detectado en: Cucurbitáceas, Brasicáceas, Arroz Cebada, Papa. Se han identificado más de 1200 diferentes mRNAs La savia del floema contiene RNAs Ruiz Medrano et al., 2000, 2004, 2005, 2010, Lough & Lucas, 2007. CmNACP transloca injertos (Ruiz-Medrano et al., 1999). RNAs: mouse ears and GAI RNAs cambian forma de hojas (Kim et al., 2001; Haywood et al., 2005). BEL5 RNA y miRNA172 Tuberización (Banerjee et al., 2006; Martin et al., 2009). Aux/IAA mRNA Arquitectura raiz (Notaguchi et al., 2012). RNA a plantas parásitas (LeBlanc et al., 2013, 2014). Evidencias de transferencia de macromoléculas en injertos S. Stegemann & R. Bock,. 2009 A. rhizogenes (Ri T-DNA) Proliferación de raíces A. tumefaciens (T-DNA) Genera tumores en la parte aérea. Movimiento supracelular de transgenes Ramírez-Ortega et al., 20011 , 2014. Herrera-Martínez, et al., 2014. Transformación genética Calabaza 5 cm Adaptado de Navarrete et al., 2007. Ramírez-Ortega et al., 20011 , 2014. Inoculación con Agrobacterium Transformación genética de calabaza 2 cm Cambios fenotípicos en las calabazas transformadas Detección de b-glucuronidasa (GUS) en raíces pilosas 2 cm Silvestre KNOTTED-EGFP Cotiledones de calabaza expresando KNOTTED-EGFP Ramírez-Ortega et al., no publicado. Nudos en venas Silvestre KNOTTED-GFP Expresión temprana de KNOTTED Ramírez-Ortega et al., no publicado. Silvestre KNOTTED-GFP Expresión tardía de KNOTTED Maíz Calabaza El fenotipo nudoso en hoja es comparable al obtenido en maíz por expresión ectópica (Vollbrecht et al. 1991) • ¿ Se pueden modificar genéticamente a portainjertos ? • ¿ Se pueden translocar macromoléculas supracelulares ? ¿El movimiento supracelular tiene potencial biotecnológico? Tolerancia a sequía evaluada por actividad fotosintética al sobreexpresar CmPP16 Ramírez-Ortega et al., no publicado. Las proteínas son móviles, pero no el DNA F=500mmol/seg = 2.6cm/seg (585mmHg) [CO2]entrada = 400ppm I=2000mol/m2*seg 100% = 76 mmol de CO2/m 2*seg Fotosíntesis en plantas con expresión transitoria de CmPP16 Posibles Aplicaciones Ruiz-Medrano et al., 2005 Señales transportadas a través del floema involucradas en: Inducción floral (Lin et al., 2007) Resistencias sistémica adquirida (SAR) (Maldonado et al., 2003) Respuesta a déficit hídrico Dominancia apical PTGS (Palauqui et al., 1997; Yoo et al., 2004) Recombinación sistémica adquirida en respuesta a patógenos (Kovalchuk et al., 2003) Tuberización (Banerjee et al., 2006; Martin et al., 2009; Navarro et al., 2011). SAR Inducción floral Fotoperíodo Ataque por patógeno FLOEMA XILEMA León-Ramírez et al., 2004 Liu et al., 2013 FT se desplaza a través del floema de hojas al meristemo apical Injertos temporales Nicotiana glauca y N. tabacum Nature, July, 2014. • Los injertos tienen grandes aplicaciones en mejoramiento de plantas por genética clásica y por Ingeniería genética, produciendo frutos no GM. • Su utilidad dependerá de la creatividad del Biotecnólogo. Conclusiones Gracias por su atención
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