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Practica 1 Micrometría PROPOSITO. Conocer y manejar el micrómetro de platina y micrómetro ocular para la medición de células. ALCANCE Para todo el personal de laboratorio de Análisis Instrumental. REFERENCIAS. Casartelli J.D. Microscopia teórica práctica. Ediciones URMO Bilbao. Atlas de Microscopia. FUNDAMENTO La micrometría puede definirse como el arte de medir el tamaño de los detalles estructurales de los objetos o preparaciones que se observan al microscopio. En micrometría la unidad de medida es la micra (µ) que es igual a 0.001mm. El micrómetro es un disco colocado en el ocular del microscopio y que, por lo general, está calibrado por una línea dividida en 50 unidades. Como las divisiones del disco representan diferentes medidas, según el objetivo de aumento que se utilice, se deberán comparar las divisiones del disco ocular con una escala calibrada conocida, por lo general un micrómetro de platina, que consiste en un portaobjetos que en su centro tiene grabadas a punta de diamante unas líneas paralelas muy precisas separadas por una distancia de 0.01mm. Después de haber calibrado en el microscopio cada objetivo, no se deben intercambiar los oculares con los de otro microscopio. La micrometría tiene aplicación en Biología para las mediciones citológicas que sirven como parámetro de identificación de organismos. En análisis farmacéutico tiene también aplicación como uno de los métodos de medición de tamaño de partícula en polvos destinados a usos farmacéuticos. MATERIAL No aplica. EQUIPO O INSTRUMENTO. Microscopio compuesto MUESTRAS Laminilla teñida de muestra sanguínea. Laminilla teñida de parásitos. Laminilla teñida de varias células. REACTIVOS No aplica. ESQUEMA DEL INSTRUMENTO Microscopio Micrometros (Platina y Ocular) PROCEDIMIENTO Se formaran grupos de trabajo de 4 integrantes. Se asignara a un grupo de trabajo la exposición de la práctica, auxiliándose de cualquier material didáctico. Se realizara un resumen de la exposición tomando en cuenta los aspectos fundamentales. CALIBRACION ESCALAS DE MEDICION ESCALA DE MICROMETRO OCULAR ESCALA DE MICROMETRO DE PLATINA ESCALAS SOBREPUESTAS PARA CALCULAR FACTOR PRECAUCIONES Con cuidado llevar el microscopio a la mesa de trabajo. Con cuidado retirar los oculares del microscopio. Enfocar correctamente, para la calibración. TÉCNICA. Llevar el microscopio a la mesa de trabajo con toda precaución. Retirar los oculares y colocar el micrómetro ocular. Colocar el micrómetro de platina y enfocar el seco fuerte (40X). Observar que las líneas del micrómetro ocular y de platina coincidan, esto se hace para la calibración. Ya calibrado, se observa la muestra y se inicia la medición de células. OBSERVACIONES Al calibrar, el micrómetro se hicieron los cálculos para la determinación del Factor de micrometría La muestra utilizada fue un frotis sanguíneo teñido previamente, observamos las células sanguíneas y medimos dichas células, como fueron plaquetas, neutrófilos segmentados, linfocitos y eritrocitos. RESULTADOS. Célula Medición en micrómetro Medida en micras Linfocito 2 6 N. segmentado 2 6 Linfocito 3 9 Eritrocito 3 9 Plaqueta 1 3
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