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151 Revista Ecuatoriana de Ciencia Animal, Vol. 2, No 2, 2018 ISSN 2602-8220. Perfil hematológico en perros afectado por el piso altitudinal, edad, sexo y raza del animal (Artículo de revisión). Hematological profile in dogs affected by the altitudinal floor, age, sex and breed of the animal (article review). Paola Gabriela Alvarado Dávila; José Luis Patiño Márquez; Teófilo E. Palacios Ordóñez. Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad de Cuenca, Azuay, Ecuador. Correo electrónico del autor para la correspondencia: estuardo.palacios@ucuenca.edu.ec Resumen El objetivo de la revisión fue lograr una aproximación sobre los efectos de la altitud, la raza, sexo y edad de los perros en los valores hematológicos de estos animales. Se revisaron numerosos artículos sobre valores hematológicos, métodos y efectos en distintos parámetros y discusión se perfiló en razón de la altitud y aspectos relativos a edad, sexo y raza determinan el rango de valores. El efecto determinado individual y/o combinado tuvo mayor peso en los valores producto a los factores mezclados, pero la altitud tuvo efecto diferencial marcado además por el racial y edad. Los llamados ecosistemas montañosos de Sudamérica, tienen como característica común la elevación sobre el nivel del mar. Su principal variable climática es la disminución de la concentración de oxígeno atmosférico, además como la temperatura disminuye en función de la altura, aparece el frío como otras de sus características. Asimismo, las radiaciones cósmicas, ultravioleta y otras aumentan con la altura y la humedad atmosférica disminuye. Es importante recordar entonces, que cuando se habla de adaptación a la altura, debe tenerse presente que los animales deben desarrollar mecanismos adaptativos a múltiples variables climáticas. Contra el frío y las radiaciones, es posible poner en juego, además de mecanismos biológicos, la adaptación por comportamiento que se adquiere instintivamente en animales. En el caso de la variable oxígeno, ésta adaptación es básicamente biológica aunque pueda darse también por comportamiento según las tareas físicas y las necesidades de conservar energía. Palabras claves: tipos caninos, fisiología, indicadores sanguíneos, ecosistema serrano, adaptación. mailto:estuardo.palacios@ucuenca.edu.ec 152 Abstract The objective of the review was to achieve an approximation on the effects of altitude, race, sex and age of dogs on the hematological values of these animals. Numerous articles on hematological values, methods and effects in different parameters were reviewed and discussion was outlined based on altitude and aspects related to age, sex and race determine the range of values. The individual and / or combined effect had a greater weight in the product values of the mixed factors, but the altitude had a differential effect, which was also marked by racial and age. The so-called mountain ecosystems of South America, have as a common characteristic the elevation above sea level. Its main climatic variable is the decrease in the concentration of atmospheric oxygen, in addition as the temperature decreases as a function of height, cold appears as other characteristics. Also, cosmic, ultraviolet and other radiations increase with height and atmospheric humidity decreases. It is important to remember then that when talking about adaptation to altitude, it should be kept in mind that animals must develop adaptive mechanisms to multiple climatic variables. Against the cold and radiations, it is possible to put into play, in addition to biological mechanisms, the adaptation for behavior instinctively acquired in animals. In the case of the oxygen variable, this adaptation is basically biological, although it can also occur as a result of physical tasks and the need to conserve energy. Keywords: canine types, physiology, blood indicators, mountain ecosystem, adaptation. Introducción. Los parámetros sanguíneos en animales son indicativos de funciones determinadas, que se ven alteradas de manera normal por diversos factores extrínsecos como son altitud, latitud, temperatura y humedad relativa; así como factores intrínsecos relacionados a edad, sexo y raza (Bossa et al., 2009). La mayor parte de las alteraciones que encontramos en el hemograma no corresponden a enfermedades que tengan origen en la medula ósea que es en donde son producidas las células sanguíneas, sino que son consecuencia de modificaciones patológicas y/o efectos ambientales de diferente naturaleza (Torrens, 2015). En este sentido, el objetivo de esta revisión fue lograr una aproximación sobre los efectos de la altitud, la raza, sexo y edad de los perros en los valores hematológicos de estos animales. 153 Factores del piso altitudinal. Los llamados ecosistemas montañosos de Sudamérica, tienen como característica común la elevación sobre el nivel del mar. Su principal variable climática es la disminución de la concentración de oxígeno atmosférico, además como la temperatura disminuye en función de la altura, aparece el frío como otras de sus características. Asimismo, las radiaciones cósmicas, ultravioleta y otras aumentan con la altura y la humedad atmosférica disminuye (Ragg, 2000). Es importante recordar entonces, que cuando se habla de adaptación a la altura, debe tenerse presente que los humanos y animales deben desarrollar mecanismos adaptativos a múltiples variables climáticas. Contra el frío y las radiaciones, es posible poner en juego, además de mecanismos biológicos, la adaptación por comportamiento que se adquiere culturalmente en humanos e instintivamente en animales. Así es posible desarrollar el vestido adecuado y protegerse del sol, o acurrucarse lo más posible para evitar la pérdida de temperatura. En el caso de la variable oxígeno, ésta adaptación es básicamente biológica aunque pueda darse también por comportamiento, adecuando las tareas físicas a las necesidades de conservar energía. Las investigaciones sobre el comportamiento fisiológico del ganado bovino con respecto a la altitud cobran importancia especialmente cuando los animales son trasladados del medio ambiente en donde se han logrado estabilizar productivamente a ambientes altitudinales diferentes, presentándose en el organismo una variación en el comportamiento fisiológico para alcanzar nuevamente su estabilidad funcional, dándose así un proceso de adaptación de dicho organismo, que sufre ajustes fisiológicos de acuerdo con la altitud a la que se encuentre (Mc Dowell et al., 1976; Guyton, 1998; Raggi, 2000; Pedroso et al., 2010). Cuando los animales domésticos se mantienen a grandes alturas, se produce en ellos la adaptación del organismo a la disminución del oxígeno ambiental (hipoxia), debido a que en las alturas, al disminuir la presión atmosférica total, se presenta una disminución en la presión parcial del oxígeno disponible en el medio, exigiendo al organismo una serie de ajustes, expresados inicialmente en un aumento de las frecuencias cardíaca y respiratoria. Además se registra en el animal una mayor actividad del sistema hematógeno, una elevación de la hemoglobina sanguínea, por ende, un aumento en el número de glóbulos rojos, (Gurtler et al., 1976; Pedroso et al., 2010). 154 Para Guyton (1976) y Health y Reid (1974), la causa principal de la hipoxia en la fisiología celular en las alturas, es la disminución en la presión de oxígeno atmosférico disponible para el transporte desde los pulmones hasta las mitocondrias celulares, 10 cual implica que el animal recurra a esfuerzos propios para lograr la aclimatación a la nueva presión parcial de oxígeno. La temperatura corporal depende del equilibrio entre los factores que le adicionan calor y los que tienden a sustraerle; varía en algunas décimas en animales de una misma especie y aún en un mismo animal en el transcursodel día. Según Witter y Bohmwald (1974) los valores leucocitarios descritos en varios paises demostraron la existencia de variaciones causadas por diversos factores, principalmente: raza, edad y condiciones ambientales entre otros. Otros factores tales como la hora del día, la ingestión de alimento, el ejercicio, la epinefrina (endógena o exógena) y además condiciones como la tensión debido al 'stress" contribuyen a la leucocitosis fisiológica. Para otros autores el número total de leucocitos se afecta por diferencias fisiológicas como: excitación del animal, actividad muscular, balance hídrico del individuo y edad promedio, además otros factores tales como momento de la toma de la muestra, temperatura ambiente, tipo y calidad de la nutrición. De acuerdo con la función específica de cada tipo de célula leucocitaria se cumplen las características determinadas para la especie y la edad, se produce una reacción orgánica en mayor o menor grado a estímulos producidos por agentes tóxicos, virales, bacteriales y parasitarios. Aparte de la altura, juega un papel importante la latitud del ecosistema montañoso. Los Andes habitados pueden ser considerados como montañas tropicales, trópico alto, por su cercanía con la línea del Ecuador, lo que produce altas temperaturas diurnas, quedando la noche expuesta al enfriamiento natural producido por la mayor distancia del centro del globo terrestre y a las escasas propiedades térmicas de una atmósfera más diáfana (Raggi, 2000). Sólo una visión ecológica integral permite interpretar los mecanismos biológicos y culturales que condicionan la aclimatación de la flora, la fauna y el ser humano a la altura. A medida que se asciende, el aire se hace mucho más seco y las radiaciones solares más intensas, por lo que los habitantes de altura deben ser capaces de resistir la desecación y la fuerte insolación. Como si lo anterior no fuese ya una fuerte limitante hay que agregar el hecho de que en las capas más altas de la atmósfera hay una menor cantidad de oxígeno, de forma que un animal no adaptado a estas condiciones se encuentra frente a un desequilibrio fisiológico difícil de enfrentar. 155 En general las especies adaptadas a la vida en las grandes alturas disponen de una gran cantidad de mecanismos homeostáticos que permiten su vida en este ambiente en extremo desfavorable. Las dificultades anteriormente señaladas son la principal causa de que el número de especies alto andinas sea relativamente reducido, pero esta condición, sumada a su asombrosa adaptación las hace particularmente interesantes y muy importantes desde el punto de vista de la biodiversidad (Raggi, 2000). Conocer los "valores normales" de un componente del organismo es crucial para tomar decisiones clínicas y epidemiológicas. Hay varias categorías para expresar los valores normales, cada una de las cuales tiene un significado preciso, como "valores de referencia", "intervalo de confianza del 95% de probabilidad" para el promedio (a veces la mediana), "valores de decisión" entre otros. Es cotidiana y muy frecuente la necesidad de decidir sobre valores de hemoglobina presentados por animales enfermos, lo que obliga a tener valores de referencia para comparar. Estos valores en la población general no necesariamente son los mismos que en poblaciones especiales; al fin de cuentas, la pregunta de qué es sano o normal, en el campo de la salud y la medicina, es compleja y no tiene una única respuesta. Los valores normales de hemoglobina varían en función de la altura sobre el mar (mayor valor a más altura), el sexo, la edad (con excepción del recién nacido menor de una semana -que tiene los niveles más altos, aumenta con la edad, hasta llegar a adulto. Otro aspecto de la aclimatación a elevadas altitudes es el incremento de la concentración de la hemoglobina que conlleva a mejorar la capacidad de transporte de O2, sin embargo esta aparente paradoja sería una consecuencia de elevados valores de la concentración de hemoglobina en zonas de baja altitud, cuando se comparan perros, vacunos y ovejas. Esta disminución es una forma clásica de un proceso de aclimatación con mecanismos adaptativos a zonas alto andinas. En animales no adaptados, la baja presión de oxígeno en la altura produce una vasoconstricción arteriolar pulmonar, principal mecanismo causante de la hipertensión arterial pulmonar (HAP) conducente a una insuficiencia cardiaca derecha que frecuentemente culmina con la muerte del animal. Este cuadro patogénico se presenta en diversas especies animales, especialmente en bovinos y en aves, ocasionando grandes pérdidas económicas. 156 Se han realizado diversos estudios sobre el tema, pero aún no se logra encontrar el mecanismo regulador íntimo de esta condición. Actualmente se conoce que existen factores intrínsecos producidos a nivel vascular que causan su remodelación, la que se acentúa de acuerdo al tiempo de exposición del individuo a la hipoxia; además, se incrementa la producción de factores de crecimiento y del fibroblasto adventicial, alterando el tono vascular (Knot y Nelson, 1998). Animales sometidos a hipoxia se caracterizan por un incremento del tono vascular pulmonar que es mantenido, en parte, por una remodelación vascular dependiente de la duración y severidad de la misma; así, en la pared arterial pulmonar, la célula endotelial, el músculo liso y el fibroblasto adventicial tienen un crecimiento específico, que se puede observar aún a las 24 horas de exposición a la hipoxia. Factores extrínsecos. Piso Altitudinal Los valores de referencia para hemograma en clínica veterinaria son particularmente críticos de determinar en poblaciones que habitan en zonas altas, pues la disminución de la presión parcial de oxígeno, asociada a una disminución de la presión barométrica, estimula la eritropoyesis, lo que ocasiona policitemia fisiológica e incrementa entonces los valores de los indicadores con ella relacionada (Martínez , 2010). Este fenómeno afectaría directamente a los mamíferos como lo explica (García et al., 2013) y (Wilches, 2011) en sus estudios realizados en humanos y asnos respectivamente, indican que en zonas con diferente altitud han demostrado que los parámetros eritrocitarios y los valores de hemoglobina se ven modificados. Por otro lado, en estudios cuyo objetivo está enfocado en valores de referencia hemáticos para perros, realizados en tres distintos lugares geográficos como Antioquia-Colombia (Bossa et al., 2009), Asunción-Paraguay (Pedrozo et al., 2010), y Lima-Perú (Cortés, Grandez y Hung, 2014); demuestran encontrar diferencias en sus tablas de referencia acreditada a las diferentes condiciones geográficas de los lugares donde se realizaron los estudios. Aunque el factor raza y edad utilizados podrían suponer otra causa de variación aparte de la altitud. La importancia del hemograma ha sido escasa en Medicina Veterinaria con relación a la hematología humana, sin embargo la introducción de contadores automáticos ha mejorado 157 la atención y su uso por parte de los clínicos. Varios modernos y grandes equipos automatizados de hematología que se han desarrollado para medicina humana como el House Laser-Based Sistems, han sido adaptados a las diferentes especies domésticas. Estos sistemas analizan miles de leucocitos y por lo tanto son capaces de realizar diferenciales de leucocitos más rápido, más barato y con una precisión más alta que el recuento diferencial manual tradicional de 100 células que se usa comúnmente (Stirn, Moritz y Bauer, 2014). El recuento manual depende directamente de la experiencia del clínico, aunque muchos profesionales optan por el método automático más el recuento manual; por ejemplo lecturas de hematocrito por medio del método capilar, hemoglobina con solución de Drabkin y realizando la lectura en el fotómetro semiautomático (Microlab 300),y el recuento de glóbulos rojos y blancos utilizando la solución de Turk y Havey, respectivamente; así como diferenciación leucocitaria con frotis laminal y tinción de Wright (Cortés, Grandez y Hung, 2014). Si bien el enfoque para reducir el número de diferenciales manuales es común en laboratorios humanos, todavía se siguen realizando comúnmente en laboratorios veterinarios independientemente del recuento automatizado. Las opiniones acerca de revisiones manuales son diversas, mientras unos laboratorios lo realizan para cada muestra, otros optan por realizarla solo cuando existen poblaciones anormales de células o si el diferencial de leucocitos automatizado parece inexacto (Stirn, Moritz y Bauer, 2014). En el estudio de las respuestas y adaptaciones del organismo a la altura, las variables hemoglobina (Hb), hemotocrito (Hct) y saturación arterial de oxígeno (SaO2 ) han sido investigadas a diferentes alturas, principalmente a nivel del mar y a alturas por encima de los 2600 m.s.n.m, debido a su gran contribución en el estudio y comprensión del aporte de oxígeno hacia los tejidos con disminución de la presión barométrica a medida que se asciende en altitud (Bossa, 2009; Brogrio et al., 2015; Coppo, 2010). La disminución en la presión barométrica causa un descenso en la presión parcial del oxígeno generando hipoxia. Ante estos cambios el organismo activa sistemas de compensación para mantener la homeostasis, como por ejemplo incrementar la concentración de hemoglobina [Hb] y el hematocrito (Hct). Estas respuestas varían de acuerdo al tiempo de exposición a la hipoxia ambiental, clasificándose en respuestas agudas a crónicas (Coppo, 2010). Además de su contribución a la aclimatación a la altura, la [Hb] y el Hct son considerados criterio diagnóstico de anemia. 158 La más común es la anemia por deficiencia de hierro que es considerada por la Organización Mundial de la Salud (OMS) como el mayor desorden nutricional en todo el mundo (12,159. La OMS, estableció unos límites para diagnosticar la anemia y su severidad. Así, la anemia leve puede variar de 11g/dl a 10g/dl en hombres y mujeres respectivamente, y la anemia grave en valores menores a 8 g/dl en ambos géneros. Estos datos se publicaron en 1968 y actualizados 1989, pero aún siguen vigentes16. Por su parte, la encuesta nacional de la situación nutricional en Colombia en el 2010 refiere el punto de corte en 12 g/dl según datos de la OMS (2010). Estos valores sin embargo no son diferenciados por alturas y se aplican para toda la población independiente de su lugar de residencia con respecto al nivel del mar. Los valores promedio pueden variar entre poblaciones que aunque residen a la misma altura presentan diferentes concentraciones de Hb y Hct, como es el caso de la población tibetana y andina (Bolivia). Se producen errores en el diagnóstico de anemia donde probablemente ocurrió aclimatación o adaptación a la altura. Niemeyer., et al. (2016) refieren que en el mundo aproximadamente 140 millones de personas residen a grandes alturas (elevaciones por encima de 2500 m.s.n.m.), y uno de los países con mayor número de residentes a estas alturas es Colombia. Allí, el 70% de la población reside entre los 1500 msnm y 3000 m.s.n.m., rango conocido como altura intermedia. Al revisar la literatura se ha encontrado pocas referencias de [Hb], Hct y SaO2 en el rango de alturas intermedias (1500 a 3000 m.s.n.m). En Colombia se reportaron valores de estas variables a diferentes alturas sobre el nivel del mar en el departamento de Antioquia, sin embargo no se han encontrado datos actualizados en población de la región Andina de Colombia (Niemeyer et al., 2016). Factores intrínsecos. Edad La variable edad influye marcadamente sobre los valores hematimétricos, el caso de perros recién nacidos que poseen un eritrograma con valores altos que a las pocas horas disminuye debido a la hemolisis necesaria para el recambio de la hemoglobina fetal, al igual que lo glóbulos blancos se encuentran aumentados. Esto se diferencia de la etapa de crecimiento en perros jóvenes, debido a un incremento paulatino de los valores hematimétricos. Al final, en la etapa geriátrica existe una menor cantidad de agua corporal y consiguiente hemoconcentración, que no elevan los valores hematimétricos sino los 159 disminuye como consecuencia de disfunciones orgánicas normales de la etapa senil (Coppo, 2010). Esto se encuentra claramente definido en los criterios de inclusión y exclusión en los trabajos de investigación de (Bossa et al., 2009) y (Pedrozo et al., 2010), en donde solo toman como sujetos de investigación perros de 1 a 6 años. Debido a las variaciones en cuanto a órganos hematopoyéticos en los cachorros y las disfunciones orgánicas fisiológicas que podrían presentar perros mayores a 6 años. Por ejemplo según (Bossa et al., 2009), nos indica que existe una diferencia significativa en cuanto a edad en los siguientes parámetros: porcentaje de linfocitos y número de plaquetas. Además, la serie roja es menor en perros jóvenes comparada con la serie roja de los adultos (Pedrozo et al., 2010). Sexo La variable sexo está directamente relacionada a las hormonas sexuales tanto masculinas (andrógenos) y femeninas (estrógenos). En un estudio realizado en Lima-Perú muestra que las diferencias estadísticas para el efecto sexo sobre la concentración de hemoglobina y numero de eritrocitos, pero ninguna de ellas está fuera del rango normal comparado con tablas de referencia americanas; por lo tanto, no poseen significancia biológica (Cortés, Grandez, & Hung, 2014). En cambio, en un estudio similar realizado en Asunción-Paraguay, indica que la serie roja fue mayor en hembras que en los machos aunque tampoco demuestran diferencias estadísticamente significativas (Pedrozo et al., 2010). Los parámetros de VCM, HCM y CHCM se encuentran por debajo del límite inferior con respecto a otros autores como Day et al. (2000) y Harvey (2012). Es probable que estos parámetros difieran de la fórmula tradicional utilizada por el sistema de contaje de células hematológicas automatizadas (Cortés et al., 2014). Los valores obtenidos para la serie blanca concuerdan con Jacobs et al. (2001), Cortés et al. (2014), Lawler (1971) y Harvey (2012). Esto se puede atribuir a que se incluyó animales comprendidos entre las mismas edades que los utilizados en otros estudios, el examen clínico previo, la exclusión de animales bajo tratamiento médico y se redujo el estrés al momento de la toma de muestra; ya que estos factores tienden a modificar los valores (Villiers et al., 2013). Respecto a la serie blanca no se encontró diferencia estadística entre los resultados de caninos hembras con respecto a caninos machos. Los resultados obtenidos coinciden con Schalm, Jain y Carroll (1975) en el que concluyen, que en un perro sin signos clínicos de 160 enfermedad, los recuentos leucocitarios totales están influenciados por la edad; mientas que la influencia del sexo es menos significativa. Raza Existen en la actualidad un gran número de razas reconocidas por la Federación Cinológica Internacional, además existen mezclas entre las diferentes razas consideradas razas intermedias o razas mestizas que no son reconocidas. También se logra clasificar a los perros en razas determinadas por su tamaño, donde existiría variaciones en los valores hematimétricos en cuanto al tamaño del eritrocito. Esto se ve reflejado en un estudio realizado en Perú en perros de la raza Perro sin Pelo del Perú, en donde los resultados obtenidos hacen probable que la raza presente una mínima variación en el tamaño del eritrocito, que no fue detectable por el sistema de conteo manual (Cortés, Grandez y Hung, 2014). Por otro lado, en un estudio realizado en Asunción-Paraguay demuestran que no existe diferencias significativas entre la variableraza dependiente del tamaño del animal (pequeño, mediano y grande), pero los valores fueron menores en los perros de razas grandes. Esto podría deberse a que las razas grandes alcanzan la adultez al año y medio o dos años de vida, mientras que las razas pequeñas llegan a la adultez a los 8 meses (Romero y Guzmán, 2006; Pedrozo et al., 2010; Cortez et al., 2014). El hemograma constituye el examen de laboratorio de mayor uso para la evaluación patológica en el perro, por lo que se hace necesario disponer de valores de referencia adecuados y precisos para poder interpretar de una manera adecuada los resultados y así obtener una conclusión válida que nos permita proporcionar un diagnóstico acertado (Pedrozo et al., 2010). Serie roja. Eritrocitos Las células rojas o eritrocitos tienen forma redondas bicóncavas, a nucleadas con un promedio de 6,5 a 7.0 µg de diámetro y poseen áreas pálidas en el centro, se caracteriza por ser el componente celular responsable de transportar oxígeno (Rebar, Williams, & Metzeyer, 2002). 161 Se producen en la médula ósea, en un proceso regulado por la eritropoyetina renal a partir del rubrublasto que pasa por los estados de prorrubrocito, rubrocito, metarrubrocito, reticulocito y eritrocito; el número de eritrocitos circulantes se ve afectado por cambios en el volumen plasmático, ritmo de eliminación o pérdida de eritrocitos, contracción esplénica, secreción de eritropoyetina y ritmo de producción de la médula ósea (Romero y Guzmán, 2006). Concentracion de eritrocitos El recuento de glóbulos rojos en animales sanos es de 5,5 a 8,5 x106/l en perros, se realiza por el método clásico del hemocitómetro o cámara de Neubauer, fisiológicamente el valor de eritrocitos aumenta desde el nacimiento hasta los 6 meses de edad, simultáneamente a las elevaciones de hematocrito y hemoglobina. La vida media de esta célula en caninos es de 100 días aproximadamente (Coppo, 2010). Hemoglobina (Hb) Expresa la concentración de Hb presente en la muestra de sangre, la cual en la mayoría de mamíferos es de 9 a 15 g/dL. La hemoglobina es una proteína que opera como transporte de gases como oxígeno, dióxido de carbono, y monóxido de carbono; a más de participar en el equilibrio ácido base su valor es de 13 a 16 g/dL en perros. La interpretación del aumento o disminución de su hematocrito y concentración de eritrocitos (Coppo, 2010). Volumen corpuscular medio (VCM) Corresponde al volumen promedio de los eritrocitos, se expresa en femtolitros o micras cúbicas, en caninos es 70 fl. Un VCM aumentado se denomina macrocitosis, es decir indica la presencia de glóbulos rojos más grandes de lo normal; en cambio un VCM disminuido se denomina microcitosis, e indica la presencia de glóbulos rojos que son más pequeños que el tamaño promedio (Morgan, Bright, & Swartout, 2004). Pedrozo, Quintana, Bazán y Florentín (2010) plantean que el hemograma es el examen de laboratorio de mayor uso diagnóstico en el canino, por lo que se hace necesario disponer de valores referenciales adecuados para poder interpretar correctamente los resultados y así obtener una conclusión válida. El presente estudio tiene como objetivo determinar los valores hematológicos en caninos adultos aparentemente sanos en la ciudad de Asunción. Este estudio descriptivo de corte transversal se desarrolló en un grupo de caninos aparentemente sanos. Se determinaron los valores hematológicos de 100 caninos adultos de 23 razas diferentes por técnicas manuales. 162 Los valores de referencia se hallaron con el método clásico o parámetrico que se calcula en base al valor de la media, más menos el doble de la desviación típica (x ± 2s). Los valores fueron número de eritrocitos (4,3 – 7,1 x 106 /µL), hemoglobina (9,2 – 15,6 g/dL), hematocrito (28,2 – 48,2 %), VCM (63 – 71 fL), CHCM (30 – 35 g/dL), HCM (20 – 23 pg), número de leucocitos (7,8 – 12,5 x 103 /µL), neutrófilos segmentados (62 – 86%), (5,7 – 9,3 x 103 /µL), neutrófilos en banda (0 -2%), (0 – 231 x 103 /µL), eosinófilos (0 – 5 %), (0 – 0,56 x 103 /µL), linfocitos (11 – 29%), (1 – 3 x103 /µL), monocitos (0 – 7,6%), (0 – 0.4 x 103 /µL), proteína total (4,5 – 7,05 g/L).Llaman la atención los valores más bajos de eritrocitos, hemoglobina, hematocrito y proteína total de los individuos estudiados al compararlos a los reportados por la literatura. La población accesible estuvo constituida por 100 caninos adultos, cuyas edades oscilaron entre los 1 a 6 años de edad, de ambos sexos y 23 razas diferentes que fueron divididos en razas pequeñas (pequeñas y pequeñas a medianas), medianas (medianas y medianas a grandes) grandes (grandes y gigantes) y perros de raza indeterminada. El método de muestreo fue no probabilístico, de casos consecutivos. Fueron consideradas razas pequeñas aquellas que pesaban menos de 10 Kg y con una altura menor a 30 cm, y razas pequeñas a medianas aquellas con peso menor a 16 Kg y altura menor a 40 cm. Fueron consideradas razas medianas aquellas que pesaban entre 10 a 25 Kg y con una altura menor a 50 cm, y razas medianas a grandes aquellas que pesaban de 10 a 45 Kg y con una altura menor a 60 cm. Fueron consideradas razas grandes aquellas que pesaban entre 25 y 45 Kg y con una altura menor a 70 cm y razas gigantes aquellas que pesaban entre 45 a 90 Kg y con una altura menor a 80 cm. Los valores de la serie roja son menores en perros jóvenes que en adultos (Coppo, 2010; Cortez et al., 2014). Los valores de la serie roja fueron mayores en hembras que en machos aunque no hubo diferencias estadísticamente significativas, este hecho se dio en el total de la población, en perros de raza indeterminada, razas grandes y pequeñas. Llama la atención los valores más bajos de número de eritrocitos, hemoglobina, hematocrito y proteína total de los individuos estudiados al compararlos a los reportados por la literatura. La causa probable de estas diferencias sería una alimentación deficiente en la población estudiada. Trabajos posteriores, con la inclusión de datos relacionados a la dieta de los animales serían necesarios para llegar a conclusiones valederas. 163 Volumen corpuscular medio El volumen corpuscular medio (VCM) indica el tamaño medio de los eritrocitos. En las anemias regenerativas se observa un aumento del VCM, junto con una disminución de la hemoglobina corpuscular media (HCM) y la 7 concentración de hemoglobina corpuscular media (CHCM). Las anemias macrocíticas también pueden observarse en anemias no regenerativas debido a mielodisplasias. Las anemias no regenerativas normalmente son normocíticas. Los VCM bajos suelen observarse en deficiencias de hierro (Villers y Blackwood, 2013). La hemoglobina corpuscular media (HCM) se expresa en picogramos (Pg) e indica la cantidad (peso) de hemoglobina por eritrocito. No tiene en cuenta el volumen de los eritrocitos ya que se calcula dividiendo la Hb por el recuento de eritrocitos (Villers y Blackwood, 2013). La concentración de hemoglobina corpuscular media (CHCM) indica la concentración media de hemoglobina por eritrocito. Se calcula dividiendo la Hb por el Ht, debido a que este último está afectado por el tamaño de los eritrocitos, la CHCM es el indicador más útil de la cantidad de hemoglobina presente en los eritrocitos. Si un animal tiene un VCM en el límite inferior del rango normal, la HCM puede ser baja, incluso aunque las células contengan cantidad normal de hemoglobina relativa a su tamaño (Villers y Blackwood, 2013). Una CHCM normal define los eritrocitos como normocrómicos y se observa en las anemias no regenerativas y en los animales normales. Cuando se observa una CHCM disminuida es sinónimo de hipocromia y se observa en anemias regenerativas y deficiencias de hierro. Un aumento de la CHCM la mayoría de veces se debe a la hemólisis y puede verse de forma artefactual en muestras lipémicas (Villersy Blackwood, 2013). Los leucocitos o glóbulos blancos son células sanguíneas que forman parte de la respuesta inmune, actuando como defensa del organismo contra sustancias extrañas o agentes infecciosos. Se clasifican en: neutrófilos, linfocitos, monocitos, eosinófilos y basófilos. El análisis del número total de leucocitos y la distribución relativa y absoluta de los diferentes tipos (recuento diferencial de los glóbulos blancos de la sangre) proporciona datos importantes para evaluar el estado de salud o el diagnóstico de enfermedades (Cunningham y Klein, 2013). 164 Conclusiones Los llamados ecosistemas montañosos de Sudamérica, tienen como característica común la elevación sobre el nivel del mar. Su principal variable climática es la disminución de la concentración de oxígeno atmosférico, además como la temperatura disminuye en función de la altura, aparece el frío como otras de sus características. Así mismo, las radiaciones cósmicas, ultravioleta y otras aumentan con la altura y la humedad atmosférica disminuye. Es importante recordar entonces, que cuando se habla de adaptación a la altura, debe tenerse presente que los animales deben desarrollar mecanismos adaptativos a múltiples variables climáticas. Contra el frío y las radiaciones, es posible poner en juego, además de mecanismos biológicos, la adaptación por comportamiento que se adquiere instintivamente en animales. En el caso de la variable oxígeno, ésta adaptación es básicamente biológica aunque pueda darse también por comportamiento según las tareas físicas y las necesidades de conservar energía. Referencias bibliográficas. Aguilar, J., Arias, L., Arzate, A., Corona, H., Méndez, r., Nuñez, L., & Tachika, y. (2009). Métodos y técnicas de diagnóstico. México D.F.: LDVF. Bossa Miranda, M. A., Valencia Celis, V. d., Carvajal Giraldo, B. A., & Rios Osorio, L. A. (2012). 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