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PRUEBA PARA LEPTOSPIROSIS Introducción1. Enfermedad y origen2. Trasmisión 3. Pruebas4. Metodología de las pruebas5. Índice ¿QUÉ APRENDEREMOS? Establecer los procesos de obtención, conservación y transporte de las muestras para la detección de la leptospirosis. Describir los fundamentos técnico-científicos de los métodos de ensayos empleados para el diagnóstico por laboratorio de la leptospirosis. Introducción ¿CÓMO SE HACE EL EXAMEN DE LEPTOSPIROSIS? Se utilizan como antígenos cultivos de los serogrupos de mayor prevalencia en el área geográfica, los cuales se mezclan con diluciones seriadas del suero del paciente y posteriormente se examinan al microscopio de campo oscuro. Este examen se realiza exclusivamente en laboratorios de referencia. Prueba de aglutinación microscópica (MAT) La MAT se basa en la reacción que se establece entre antígenos vivos de distintos serogrupos con muestras de suero, y luego examinadas para ver aglutinación en un microscopio de campo oscuro. PRUEBA PARA LEPTOSPIROSIS El aislamiento de leptospiras es la única prueba directa y definitiva de la infección. Para el diagnóstico postmortem, además de la serología y el cultivo, las leptospirias pueden ser demostradas en tejido usando PCR o coloración (inmunohistoquímica) en especial por inmunofluorescencia directa. ELISA IgM Esta técnica es un ELISA indirecta, donde se utilizan tiras de pozos reactivas, recubiertas con el antígeno (fase solida). Los anticuerpos específicos presentes en la muestra del paciente se ligan a estos antígenos de la fase sólida. Este test es cualitativo para la detección de anticuerpos humanos de género específico contra las leptospiras en suero, y su utilidad está dada en los pacientes con fase aguda de la enfermedad. PRUEBAS DE LABORATORIO PARA LA CONFIRMACIÓN El diagnóstico es generalmente basado en la serología junto con una presentación clínica y datos epidemiológicos (antecedentes de posible exposición, presencia de factores de riesgo). La prueba de aglutinación microscópica (MAT por su sigla en inglés) y el inmunoensayo enzimático o enzimoinmunoanálisis (ELISA) son dos pruebas serológicas utilizadas para el diagnóstico de laboratorio de leptospirosis. Prueba ELISA IgM ¿Como se realiza la prueba? Es necesaria una muestra de sangre. La mayoría de las veces, la sangre se extrae de una vena que se encuentra en el interior del codo o del dorso de la mano. La muestra se envía a un laboratorio donde el anticuerpo o antígeno objeto de estudio se vincula a una enzima específica. CÓMO SE REALIZA LA PRUEBA MAT? Para obtener un diagnóstico positivo usando MAT, el estándar de oro, deben ser comparadas al menos dos muestras consecutivas de suero, tomadas a intervalos de cerca de 10 días, para observar un incremento de cuatro veces o más en anticuerpos. GRACIAS Lilibeth Nájera Karol Celano
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