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ANY ACADÈMIC 2012-2013 data: 11 de junio de 2011 1435 Técnicas Instrumentales en Bioquímica y Biología (7,5 créditos) Assignatura troncal de la Licenciatura de Bioquímica, anual Assignatura optativa de la Licenciatura de Biologia, anual Asignatura de libre configuración de la Licenciatura de Química, anual PROFESSORAT - RESPONSABLE: Dr. Adamo Valle Gómez (4,5 créditos teóricos + 1,5 prácticos) tel. 971 25 96 44, adamo.valle@uib.es - Dr. Josep Agustí Pablo Canaves (1,5 créditos teóricos) tel. 971 25 95 22 josep.pablo@uib.es TUTORIES HORARI: Flexible, según disponibilidad de los alumnos y del profesor. LLOC: Despacho 21A. Dept. Bioquímica.2ª planta edificio Guillem Colom Casasnovas DESCRIPTORS OFICIALS DE L’ASSIGNATURA AL BOE Laboratorio integrado sobre experimentación e instrumentación bioquímica. Fundamentos y aplicaciones de las técnicas instrumentales en la experimentación en bioquímica y biología. CRÈDITS TEÒRICS (6 crèdits): OBJECTIUS Analizar el fundamento de las técnicas de análisis en bioquímica y biología para ayudar al alumno a entender las bases de los protocolos que se aplican en los laboratorios de Bioquímica y biología. METODOLOGIA Clases magistrales con la ayuda de presentación powerpoint, seminarios monográficos sobre nuevas técnicas y visitas guiadas a los Servicios Científico-Técnicos. DESCRIPCIÓ DELS CONTINGUTS Tema 1.- Introducción a las Técnicas instrumentales en bioquímica y biología. Introducción general. Concepto. Objetivos. Bibliografía. Tema 2. Técnicas espectroscópicas. Introducción. A) Espectroscopía de absorción ultravioleta-visible. Fundamento. Espectro de absorción. Espectrofotómetro: unidades básicas. Aplicaciones de la espectroscopía de absorción UV-visible en el estudio de proteínas y ácidos nucleicos. Resolución de problemas. B) Espectroscopía de fluorescencia. Fundamento. Rendimiento cuántico. Espectro de emisión de fluorescencia y de excitación. Nociones sobre instrumentación. Medida de la fluorescencia. Desactivación de la fluorescencia. Polarización de la fluorescencia. Aplicaciones de la espectroscopía de fluorescencia en el estudio de proteínas y ácidos nucleicos. Tema 3. - Técnicas isotópicas: introducción. Desintegración de radionucleidos. Unidades y formas de expresar la radioactividad. Nomenclatura de compuestos marcados. Pureza radioquímica. Detección de isótopos radioactivos. Determinación de la eficacia de contaje en contadores de centelleo. Aplicaciones de los isótopos radiactivos en bioquímica y biología. Resolución de problemas. Tema 4.- Sedimentación. Introducción. Fuerza centrífuga relativa. Coeficiente de sedimentación. La centrífuga: unidades básicas del instrumento. Tipos de rotores. Técnicas de centrifugación preparativa. Ultracentrifugación analítica: Determinación del coeficiente de sedimentación y pesos moleculares de macromoléculas. Resolución de problemas. Tema 5.- Fraccionamiento celular. Introducción. Técnicas de homogeneización. Fraccionamiento de homogeneizados. Caracterización bioquímica de fracciones subcelulares. Resolución de ejercicios. Tema 6.- Microscopía electrónica. Introducción. Microscopio electrónico de transmisión: descripción general. Microscopio electrónico de barrido: características específicas. Técnicas de preparación de muestras. Tema 7. - Cromatografía. Introducción. Cromatografía de elución: Parámetros fundamentales. Fenómeno de ensanchamiento de banda. Eficacia. Resolución. Selectividad. Cromatografía en columna. Cromatografía plana. Cromatografía HPLC; Cromatografía de reparto. Cromatografía de intercambio iónico. Cromatografía de filtración molecular. Cromatografía de afinidad. Cromatografía bidimensional. Aplicaciones a la separación de macromoléculas y compuestos biológicos. Resolución de problemas. Tema 8. - Electroforesis. Introducción. Movilidad electroforética. Electroforesis libre: movilidad electroforética de polielectrolitos biológicos. Electroforesis de zona. Movilidad electroforética en medios estabilizantes. Características de la técnica. Tipos de revelado. Técnicas de electroforesis analítica y preparativa. Fundamento de la Electroforesis SDS-PAGE, PAGE y PAGE en gradiente. Electroenfoque. Electroforesis bidimensional: metodología IEF-SDS-PAGE, DIGE. Aplicaciones de la electroforesis a la separación y caracterización de proteínas y ácidos nucleicos. Resolución de ejercicios relacionados con los contenidos teóricos. Tema 9.- Espectrometría de masas. Fundamento. Fuentes de ionización: ESI y MALDI. Analizadores de masas: Trampa de iones, Cuadrupolo, TOF, TOF reflector, fragmentación TOF/TOF. Detectores. Aplicaciones de la técnica. Huella peptídica. Bases de datos. CRÈDITS PRÀCTICS (1,5 crèdits): OBJECTIUS Realizar un experimento de purificación de una proteína y su caracterización bioquímica. METODOLOGIA La asistencia a las clases prácticas será obligatoria y los alumnos deberán redactar y entregar al finalizar las prácticas, y en el plazo convenido, un informe de prácticas que también se considerará un elemento de evaluación. DESCRIPCIÓ DELS CONTINGUTS Conjunto de prácticas integradas en el proceso de aislamiento, purificación y caracterización bioquímica de la proteína mioglobina, con aplicación de las técnicas de: centrifugación diferencial, cromatografía de elución, espectroscopía UV-visible y electroforesis SDS-PAGE. Evaluación global del proceso de purificación de la proteína. BIBLIOGRAFIA BÀSICA J.M. García-Segura, J.G. Gavilanes, A. Martinez del Pozo, F. Montero, M. Oñaderra, F. Vivanco. "Técnicas instrumentales de análisis en bioquímica". Editorial Sintesis. ISBN: 84-7738-429-0. P. Roca, J. Oliver, AM Rodríguez. “Bioquímica. Técnicas y Métodos” Editorial Hélice. ISBN: 84-921124-8-4 BIBLIOGRAFIA COMPLEMENTÀRIA (opcional) Fundamentos y Técnicas de análisis Bioquímico. Editorial Paraninfo. ISBN:978-84- 9732-231-4 K. Wilson and J. Walter (editores). Principles and techniques of Biochemistry and Molecular Biology. ELEMENTS D’AVALUACIÓ - La asistencia a las prácticas es obligatoria. Se ha de entregar un informe de prácticas en las fechas acordadas con el profesor. - La nota de los exámenes parciales de febrero y junio promedia siempre que sea igual o superior en cada examen a un 5. - El examen de febrero elimina materia. - Si no se supera el examen parcial de febrero, o no se ha presentado, se realizará un examen final en junio. -En la convocatoria de septiembre se evaluará de la parte que no se haya aprobado en febrero o junio (nota mínima de cada parcial 5) - Los exámenes constan de preguntas tipo test, preguntas cortas de razonamiento y problemas. Los exámenes incluyen como materia el programa teórico, los problemas, las visitas al SCT y las prácticas de la asignatura. RECOMANACIONS QUANT A CONEIXEMENTS PREVIS Bioquímica, Química, Matemáticas y Física. ALTRA INFORMACIÓ http://gmein.uib.es/ - La asignatura se imparte en castellano - Se puede autorizar la convocatoria anticipada de la asignatura. - Se puede autorizar la realización del examen en las sedes de Ibiza y Menorca.
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