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UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS FACULTAD DE QUÍMICA E INGENIERÍA QUÍMICA E.A.P. DE INGENIERÍA QUÍMICA Extracción del mucílago de la penca de tuna y su aplicación en el proceso de coagulación-floculación de aguas turbias TESIS Para optar el Título Profesional de Ingeniera Química AUTOR Megy Ninoska SILVA CASAS ASESOR Eder VICUÑA GALINDO Lima - Perú 2017 DEDICATORIA A Dios, por haberme permitido llegar a esta etapa de mi vida y por demostrarme su amor y protección. A mis padres, Edwin y Filomena, son mi motor y ejemplo de lucha, sin ustedes no hubiera concluido esta etapa en mi vida profesional. Seguiremos siempre adelante, los amo demasiado. A mi hermana Betsy por ser mi ejemplo, siempre recordaré como te veía estudiar, eso me motivaba a continuar con mis proyectos, y a mis queridas sobrinas Arely y Ailish, son la alegría que tengo en la vida. A mi novio Erick, por haber sido mi compañero en toda mi etapa universitaria, testigo de mis buenos y malos momentos, por haber creído siempre en mi y por amarme tal como soy. A mi abuelita Margarita, por haberme apoyado y aconsejado, sé que desde el cielo aún me estas cuidando. A mi abuelito Guillermo, por ser el socialista de la familia e impulsarme a luchar por mis sueños. iii AGRADECIMIENTOS A mi asesor el Mg. Eder Vicuña Galindo por su apoyo, dedicación y amistad, me brindó muchos conocimientos y consejos, no tanto en el desarrollo de este proyecto sino también a nivel personal. A los profesores de la facultad la Mg. Thais Linares, Dr. Alberto Garrido y a la Química Elizabeth Espinoza, por haberme permitido usar sus ambientes y equipos para el desarrollo de las pruebas experimentales del proyecto. Al Laboratorio de Bioquímica, Nutrición y alimentación animal de la Facultad de medicina veterinaria, en especial a la Dra. Sandra Bezada, por el apoyo en el desarrollo del análisis proximal de cada una las muestras. A mis padres, el desarrollo de este trabajo fue en gran parte gracias a ustedes, me apoyaron en la compra de las pencas, tenemos tantas anécdotas de ese día, y también en el desarrollo de la extracción del mucilago. A mi novio Erick De la Rosa, por haberme apoyado en el desarrollo de las pruebas experimentales, en especial en la etapa de clarificación de aguas y también por los consejos al momento de redactar la tesis. A amigos que no dudaron en darme una mano en conseguir ciertos insumos, gracias Ing. César Ortiz e Ing. Luis Huayta A mis amigas Mariela, Judith y Silvia por siempre animarme a continuar con este reto. Por último, a la Escuela de Ingeniería Química y a alma mater la Universidad Nacional Mayor de San Marcos. iv TABLA DE CONTENIDO RESUMEN ................................................................................................................................ 1 INTRODUCCIÓN ..................................................................................................................... 4 OBJETIVOS .............................................................................................................................. 6 Objetivo General ____________________________________________________ 6 Objetivo Específicos __________________________________________________ 6 CAPITULO I ............................................................................................................................. 7 NOPALES O TUNA EN EL PERÚ ......................................................................................... 7 I.1. NOPALES _____________________________________________________ 7 I.1.1. Antecedentes. .................................................................................................................................. 7 I.1.2. Origen y Distribución ...................................................................................................................... 8 I.2. El NOPAL EN EL PERÚ ________________________________________ 9 I.2.1. La Tuna en las crónicas ................................................................................................................. 11 I.2.2. Nombres Comunes ........................................................................................................................ 11 I.2.3. Clasificación Científica ................................................................................................................. 13 I.2.4. Tipos y Características de Opuntia Spp. ....................................................................................... 13 I.2.5. Hábitat ........................................................................................................................................... 14 I.2.6. Importancia Ecológica .................................................................................................................. 15 I.3. DESCRIPCIÓN DE LA PLANTA ________________________________ 15 I.3.1. Composición química general ....................................................................................................... 17 I.3.2. Propiedades funcionales de los frutos y cladodios ........................................................................ 18 I.3.3. Usos del Nopal .............................................................................................................................. 20 CAPITULO II .......................................................................................................................... 24 EL MUCILAGO DE NOPAL ................................................................................................. 24 II.1. MUCILAGO DE NOPAL _____________________________________ 24 II.1.1. Extracción de mucilago ................................................................................................................. 25 v II.1.2. Factores a considerar en la extracción ........................................................................................... 28 II.1.3. Composición química del mucilago .............................................................................................. 30 II.1.4. Aplicaciones del mucilago del nopal ............................................................................................ 34 CAPITULO III ........................................................................................................................ 36 APLICACIÓN DEL MUCILAGO EN EL TRATAMIENTO DE AGUS TURBIAS ........... 36 III.1. AGUA RESIDUAL ___________________________________________ 36 III.1.1. Turbiedad y color en el agua residual ........................................................................................... 36 III.2. PARTICULAS EN SUSPENSIÓN ______________________________ 38 III.2.1. Tamaño de las partículas en Suspensión ....................................................................................... 38 III.2.2. Los Coloides ................................................................................................................................. 39 III.2.3. Afinidad de las partículas coloidales con el Agua ........................................................................ 39 III.2.4. Carga eléctrica y doble capa ......................................................................................................... 39 III.2.5. Factores de Estabilidad e Inestabilidad ......................................................................................... 40 III.3. COAGULACIÓN ____________________________________________ 41 III.3.1. Mecanismo de la Coagulación ...................................................................................................... 43 III.3.2. Coagulantes Utilizados ................................................................................................................. 46 III.3.3. Factores que Influyen en la Coagulación ......................................................................................47 III.3.4. Etapas o fases de coagulación ....................................................................................................... 49 III.3.5. Tipos de coagulación .................................................................................................................... 50 III.4. FLOCULACIÓN ____________________________________________ 52 III.4.1. Tipos de Floculación ..................................................................................................................... 52 III.4.2. Parámetros de la floculación ......................................................................................................... 53 III.4.3. Floculantes .................................................................................................................................... 53 III.5. POLIMEROS _______________________________________________ 54 III.5.1. Clasificación de los Polielectrolitos .............................................................................................. 55 vi CAPITULO IV ......................................................................................................................... 57 DISEÑO EXPERIMENTAL .................................................................................................. 57 IV.1. IDENTIFICACIÓN DE FACTORES ___________________________ 57 IV.2. METODOLOGÍA DEL PROYECTO ___________________________ 58 IV.3. DISEÑO EXPERIMENTAL ___________________________________ 58 IV.3.1. Extracción del Mucilago: .............................................................................................................. 58 IV.3.2. Clarificación de aguas turbias ....................................................................................................... 60 IV.4. ANÁLISIS ESTADÍSTICO ____________________________________ 63 IV.4.1. Extracción del Mucilago ............................................................................................................... 63 IV.4.2. Proceso de Clarificación de agua turbia ........................................................................................ 65 CAPITULO V .......................................................................................................................... 67 PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL ................................................................................ 67 V.1. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS _____________________ 67 V.2. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL _________________________ 68 V.2.1. Proceso de extracción del mucilago .............................................................................................. 69 V.2.2. Caracterización del mucilago de tuna: .......................................................................................... 76 V.2.3. Proceso de clarificación de aguas turbias ...................................................................................... 76 CAPITULO VI ......................................................................................................................... 81 TABULACIÓN DE RESULTADOS ...................................................................................... 81 VI.1. PROCESO DE EXTRACCIÓN DE MUCILAGO _________________ 81 VI.2. CARACTERIZACIÓN QUÍMICA DEL MUCILAGO _____________ 84 VI.3. PROCESO DE CLARIFICACIÓN DE AGUAS TURBIAS _________ 85 vii CAPITULO VII ....................................................................................................................... 89 ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS .................................................................... 89 VII.1. PROCESO DE EXTRACCIÓN DEL MUCILAGO ______________ 89 VII.2. CARACTERIZACIÓN QUÍMICA DEL MUCILAGO __________ 103 VII.3. PROCESO DE CLARIFICACIÓN DE AGUAS TURBIAS ______ 106 CONCLUSIONES ................................................................................................................. 115 RECOMENDACIONES ....................................................................................................... 117 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ................................................................................. 118 ANEXOS ................................................................................................................................ 132 viii INDICE DE TABLAS Tabla 1 Descripción completa de la clasificación científica de la tuna .................................. 13 Tabla 2 Composición química de 100g de nopal fresco ......................................................... 17 Tabla 3 Composición química de cladodios de distintas edades (porcentaje materia seca). .. 18 Tabla 4 Algunos productos alimenticios, subproductos y aditivos obtenidos de la tuna y los cladodios. ...................................................................................................................................... 23 Tabla 5 Descripción de cada una de las etapas de la extracción del mucilago según diferentes fuentes ........................................................................................................................................... 25 Tabla 6 Factores, intervalo de valores y Rendimientos porcentual según Publicaciones previas ....................................................................................................................................................... 28 Tabla 7 Descripción e intervalos de los factores a utilizar en este trabajo ............................. 29 Tabla 8 Rendimiento de mucilago y composición química (g/100g) ..................................... 31 Tabla 9 Peso Molecular (PM) y monómero (galactosa, ramnosa, arabinosa, xilosa, ácido galacturónico) presentes en mucilago de Opuntia Spp. Según diferentes estudios ...................... 32 Tabla 10 Principales compuestos presentes en el mucilago .................................................... 33 Tabla 11 Tiempos de decantación de las diferentes partículas en función a sus dimensiones 38 Tabla 12 Descripción de los factores de la coagulación. ........................................................ 47 Tabla 13 Identificación de factores en el proyecto ................................................................. 57 Tabla 14 Identificación de factores y sus niveles para la extracción del mucilago. ............... 59 Tabla 15 Matriz de diseño experimental para la extracción del mucilago de tuna. ................ 59 Tabla 16 Identificación de factores y sus niveles para la clarificación de aguas turbias. ....... 60 Tabla 17 Matriz de diseño experimental para la clarificación de aguas turbias. .................... 61 Tabla 18 Cálculo del ANOVA EXPANDIDO para diseño Factorial Fraccionado (23-1) ....... 63 ix Tabla 19 Cálculo del ANOVA EXPANDIDO para diseño Factorial (22) por bloques .......... 65 Tabla 20 Rendimiento porcentual de la penca de tuna............................................................. 81 Tabla 21 Rendimiento Promedio Porcentual en la extracción de mucilago según factores a considerar. ..................................................................................................................................... 82 Tabla 22 Análisis de varianza – Diseño factorial fraccionad aleatorizado ............................. 82 Tabla 23 Resumen del modelo – Diseño factorial fraccionado aleatorizado .......................... 82 Tabla 24 Coeficientes codificados – Diseño factorial fraccionado ......................................... 83 Tabla 25 Caracterización Química promedio del mucilago de tuna – Análisis proximal en Base húmeda .......................................................................................................................................... 84 Tabla 26 Caracterización Química promedio del mucilago de tuna – Análisis proximal en Base seca ................................................................................................................................................84 Tabla 27 Ecuación de Regresión por cada componente del mucilago de tuna en base húmeda ....................................................................................................................................................... 85 Tabla 28 Remoción porcentual promedio de turbidez por interacción de factores (Turbidez y concentración de mucilago). ......................................................................................................... 85 Tabla 29 Remoción porcentual promedio según interacción de factores (Turbidez y concentración de mucilago) por tratamientos de extracción ......................................................... 86 Tabla 30 Análisis de varianza – Diseño factorial por bloques aleatorizado ........................... 86 Tabla 31 Resumen del modelo – Diseño factorial por bloques aleatorizado .......................... 87 Tabla 32 Coeficientes codificados – Diseño factorial por bloques aleatorizado .................... 87 Tabla 33 Remoción de turbidez utilizando Sulfato de Aluminio (Coagulante Catiónico) y el mucilago de tuna como Floculante natural. .................................................................................. 88 x Tabla 34 Rendimientos porcentuales de extracción de mucilago, según fuentes bibliográficas ....................................................................................................................................................... 99 Tabla 35 Aspectos y condiciones de cosecha de la Penca de tuna ........................................ 142 Tabla 36 Tratamientos a realizar según factores a considerar. ............................................. 142 Tabla 37 Cantidad de Penca y agua a utilizar en la etapa de molienda. ............................... 143 Tabla 38 Condiciones y rendimientos de extracción del mucilago ....................................... 143 Tabla 39 Rendimiento de la 1era filtración para todos los tratamientos ............................... 144 Tabla 40 Rendimiento de la 1era centrifugación para todos los tratamientos ...................... 144 Tabla 41 Condiciones y rendimiento de la concentración en todos los tratamientos ......... 144 Tabla 42 Condiciones de la precipitación con etanol para todos los tratamientos ................ 145 Tabla 43 Rendimiento después de la 2da centrifugación – filtrado y lavado con alcohol para todos los tratamientos. ................................................................................................................ 145 Tabla 44 Rendimiento del mucilago seco con respeto al mucilago fresco para todos los tratamientos ................................................................................................................................. 146 Tabla 45 Composición química del mucilago de tuna - Análisis Proximal Completo .......... 147 Tabla 46 Condiciones iniciales del agua a tratar. .................................................................. 148 Tabla 47 Resultados del proceso de clarificación del agua. .................................................. 148 Tabla 48 ANOVA EXPANDIDO (Diseño Factorial Fraccionado aleatorizado) ................. 155 Tabla 49 ANOVA EXPANDIDO (Diseño Factorial con bloques aleatorizados) ................ 157 xi INDICE DE FIGURAS Figura 1 Representación de Opuntia en la cerámica Moche .................................................... 10 Figura 2 Esquema de la Opuntia Ficus Indica. ........................................................................ 16 Figura 3 Estructura parcial propuesta del mucilago de Opuntia Ficus Indica ......................... 34 Figura 4 Doble Capa de una partícula coloidal ........................................................................ 40 Figura 5 Esquema de como las sustancias químicas anulan las cargas eléctricas sobre la superficie del coloide .................................................................................................................... 42 Figura 6 Fuerzas de atracción y Repulsión .............................................................................. 44 Figura 7 Reestabilización de partículas .................................................................................... 45 Figura 8 Atrapamiento de las partículas en un floculo ............................................................ 45 Figura 9 Efecto de puente de las partículas en suspensión ..................................................... 46 Figura 10 Fases de la coagulación .......................................................................................... 51 Figura 11 Acción de los polímeros .......................................................................................... 56 Figura 12 Esquema de la Metodología del proyecto ................................................................ 58 Figura 13 Metodología de la extracción de mucilago de tuna ................................................. 60 Figura 14 Procedencia de las tunas que se cosechó para los fines del proyecto – Tunales de Chilca ............................................................................................................................................ 69 Figura 15 Acondicionado de las pencas, para su posterior licuado. ........................................ 70 Figura 16 Picado y licuado de las pencas. ................................................................................ 70 Figura 17 Extracción Acuosa. .................................................................................................. 71 Figura 18 Primera Filtración .................................................................................................... 71 Figura 19 Primera Centrifugación ............................................................................................ 72 Figura 20 Concentración del mucilago .................................................................................... 72 xii Figura 21 Precipitación con alcohol etílico. ............................................................................. 73 Figura 22 Segunda Centrifugación ........................................................................................... 73 Figura 23 Lavado y filtración, se obtiene el mucilago en base húmeda .................................. 74 Figura 24 Secado y molienda del mucilago seco. .................................................................... 74 Figura 25 Extracción del mucilago a partir del cladodio del nopal ......................................... 75 Figura 26 Soluciones de mucilago a 10000ppm. ..................................................................... 77 Figura 27 Turbidímetro, potenciómetro y medidor de TDS .................................................... 78 Figura 28 Equipo de prueba de jarras. ..................................................................................... 78 Figura 29 Clarificación de aguas turbias. ................................................................................. 79 Figura 30 Proceso de coagulación-floculación aplicando polvo seco del mucilago de tuna como floculante ............................................................................................................................. 80 Figura 31 Resultados de Análisis Proximal - Tratamiento 1 ................................................. 134 Figura 32 Resultado de Análisis Proximal - Tratamientos 2 y 6 ........................................... 135 Figura 33 Resultado de Análisis Proximal - Tratamientos 3 ................................................. 136 Figura 34 Resultado de Análisis Proximal - Tratamientos 4 ................................................. 137 Figura 35 Resultado de Análisis Proximal - Tratamientos 5 ................................................. 138 Figura 36 Resultado de Análisis Proximal - Tratamientos 7 .................................................139 Figura 37 Resultado de Análisis Proximal - Tratamientos 8 ................................................. 140 xiii INDICE DE GRÁFICAS Gráfica 1 Gráfica normal de efectos estandarizados con respecto al Rendimiento porcentual de extracción del mucilago ................................................................................................................ 90 Gráfica 2 Diagrama Pareto de efectos estandarizados con respecto al Rendimiento porcentual de extracción del mucilago ........................................................................................................... 91 Gráfica 3 Gráfica de efectos principales para Rendimiento porcentual de extracción del mucilago ........................................................................................................................................ 92 Gráfica 4 Gráfica comparativa de la interacción de los factores, Relación Agua-Penca y Temperatura, para el Rendimiento porcentual de extracción usando el método estadístico Duncan ....................................................................................................................................................... 94 Gráfica 5 Gráfica comparativa de la interacción de los factores, Relación Agua-Penca y Tiempo, para el Rendimiento porcentual de extracción usando el método estadístico Duncan ................. 96 Gráfica 6 Gráfica comparativa de la interacción de los factores, Temperatura y Tiempo, para el Rendimiento porcentual de extracción usando el método estadístico Duncan ............................. 97 Gráfica 7 Gráfica de cubos (medias ajustadas) de Rendimiento Porcentual de Extracción del mucilago ........................................................................................................................................ 98 Gráfica 8 Gráfica normal de efectos estandarizados con respecto al porcentaje de remoción de turbidez ....................................................................................................................................... 106 Gráfica 9 Diagrama Pareto de efectos estandarizados que intervienen en la Remoción de turbidez ....................................................................................................................................... 108 Gráfica 10 Gráfica de evaluación de factores individuales, Turbidez inicial y concentración de mucilago, en el proceso de clarificación de aguas turbias .......................................................... 109 xiv Gráfica 11 Gráfica comparativa de la interacción de los factores, Turbidez inicial y concentración inicial, para la Remoción de Turbidez usando el método estadístico Duncan .... 110 Gráfica 12 Gráfica de remoción de turbidez con respecto a los tratamientos de extracción, utilizando el método de comparación Duncan ........................................................................... 111 INDICE DE ANEXOS ANEXO A .............................................................................................................................. 133 ANEXO B .............................................................................................................................. 141 ANEXO C .............................................................................................................................. 152 1 EXTRACCIÓN DEL MUCÍLAGO DE LA PENCA DE TUNA Y SU APLICACIÓN EN EL PROCESO DE COAGULACIÓN- FLOCULACIÓN DE AGUAS TURBIAS 2 RESUMEN Los objetivos de esta investigación consisten en la obtención de altos rendimientos de extracción del mucílago de la penca de tuna, luego caracterizar químicamente a esta sustancia y evaluar su eficiencia en el tratamiento de aguas turbias. Para la extracción del mucilago, se aplica el diseño factorial fraccionado, considerando los siguientes factores y sus niveles: Cantidad de Agua - Penca: 3/1 – 4/1, Temperatura de extracción: 60 - 80°C y tiempo de extracción 2 - 4 h; obteniéndose como resultado un polvo blanquecino (mucilago seco), con el mejor rendimiento porcentual de extracción de 2.41, cuando los factores de relación Agua: Penca, Temperatura y tiempo son 3:1, 80°C y 2 h respectivamente, realizando el análisis estadístico se concluye que los tres factores considerados, tienen una influencia significativa del tipo inverso; es decir a medida que estos aumentan, se reduce el rendimiento porcentual de extracción; siendo el tiempo el factor más influyente al tener un valor p igual a 0.000. Al realizar la caracterización del mucilago, mediante el análisis proximal, se obtienen los siguientes resultados para los límites de: Humedad, que varía entre 56 a 74%, Proteínas de 1.9 a 4.10%, Cenizas de 1.44 a 2.20%, Grasas de 0.07 a 0.1% y Carbohidratos de 20.21 a 39%. Relacionando estos resultados con el rendimiento de extracción, mediante la herramienta estadística Minitab, se obtiene la ecuación de Regresión: % Extracción = -1.079 + 0.0916 %Carbohidratos, que señala la directa relación entre el rendimiento de extracción del mucilago con la cantidad de carbohidratos presentes en el mismo. Con respecto a la aplicación del mucílago extraído en el proceso de clarificación de aguas turbias, utilizando un diseño factorial por bloques, considerando como factores a la turbidez inicial con niveles de 500 NTU y 1000 NTU y la concentración del mucilago con niveles de 30 ppm y 50 ppm, y como bloques a los tratamientos de extracción se obtiene la máxima Remoción de turbidez en un intervalo de 86 % a 88.9 %, cuando la turbidez es de 1000 NTU. Realizando el análisis 3 estadístico, mediante el programa Minitab e Infostat, se determina la significancia de estos 2 factores, en el caso de la turbidez se tiene una correlación positiva, es decir a medida que aumente sus valores, la remoción también se incrementará, a diferencia de la concentración del mucilago que tiene una influencia inversa, es decir, favorecerá la remoción cuando sus valores sean menores y pertenezcan al intervalo de trabajo de 30 a 50 ppm, donde se ubica la concentración óptima; finalmente, comparando la influencia de ambos factores, la turbidez influye de una manera más significativa al tener un valor p = 0.000, mucho más pequeño respecto al otro factor. Comparando el poder de remoción de turbidez con los tratamientos de extracción y considerando también el análisis proximal del mucilago, se concluye finalmente, que las condiciones favorables para la extracción del mucilago son, Relación Agua-Penca igual a 4, 60°C Temperatura y 2 h de tiempo; la misma que tiene una correlación directa con los carbohidratos presentes en el mismo y promueve satisfactoriamente la remoción de la turbidez. 4 INTRODUCCIÓN La contaminación de las aguas en el Perú es un problema muy antiguo. El crecimiento poblacional ha llevado a que los ríos, lagos y mares sirvan de botaderos de todo tipo de residuos, como por ejemplo la basura que constituyen los aceites usados. Por esto, podemos señalar que el grado de la contaminación en la naturaleza crece en la medida en que crece el desarrollo de las ciudades. Y en esta contaminación ambiental, el agua juega un papel importante por ser un elemento de transporte. Recordemos la definición de contaminación del agua: es la alteración de su calidad natural por la acción humana, que la hace total o parcialmente inadecuada para los usos a los que se destina. Entre los ríos más contaminados del Perú están el Mantaro, San Juan, Yauli, Rímac, Moche, Santa, Cañete, Locumba y Huallaga. Las causas que generan esta situación son varias y entre ellas están la actividad minera, la actividad industrial y las ciudades que no cuentan con un sistema adecuado de saneamiento El tratamiento primario consiste en la remoción, por medios físicos o químicos, de una parte sustancial del material sedimentableo flotante, reduciendo así una fracción importante de la carga orgánica, que representa porcentajes significativos de los sólidos contaminantes. Entre los tipos de tratamiento primario se utilizan: la coagulación y la floculación. Este tipo de tratamiento presenta grandes ventajas, como: una menor sensibilidad a las variaciones tanto de caudal como de composición, gran flexibilidad en el diseño de planta y posibilidad de adaptación según las características del vertido ya que puede ser aplicado a diversos efluentes, estudiando en cada caso el producto que proporcione los mejores resultados. En las últimas décadas se ha profundizado en el estudio de la coagulación-floculación y en el empleo de nuevos coagulantes, tanto inorgánicos como orgánicos, para conseguir una buena eliminación de materia orgánica y sólidos en suspensión totales, en los procesos de depuración de 5 aguas residuales urbanas y efluentes industriales. Uno de estos coagulantes químicos utilizados en el tratamiento de aguas residuales es el sulfato de aluminio para remover materia coloidal y sustancias orgánicas, mejorando la calidad del agua. Algunos estudios han concluido que el aluminio residual en el agua de consumo humano puede ser muy peligroso para la salud, causando efectos graves en el sistema nervioso central, hasta el punto que se estima existe una relación entre los agentes etiológicos del mal de Alzheimer y la concentración de aluminio en el organismo humano, indicándose además que ocasiona el envejecimiento prematuro. Tomando en cuenta los altos costos, y más aún, el residual de aluminio que presenta el agua tratada, surge la necesidad de evaluar la efectividad de algunas especies vegetales como coagulante en la potabilización del agua. Los coagulantes naturales son una fuente alternativa con gran potencial aún no explotado suficientemente; se producen de manera espontánea, debido a reacciones bioquímicas que ocurren en animales y en plantas. Por lo general, presentan una mínima o nula toxicidad y, en muchos casos, son productos alimenticios con alto contenido de carbohidratos y de proteínas solubles en agua. Algunos de ellos tienen propiedades coagulantes o floculantes que actúan de modo similar a los coagulantes sintéticos, aglomerando las partículas en suspensión que contiene el agua cruda, facilitando su sedimentación y reduciendo la turbidez inicial; en muchos lugares son utilizados en forma empírica por nativos para aclarar el agua turbia, con muy buenos resultados. Como alternativa, para sustituir estos coagulantes sintéticos, se plantea en este trabajo establecer una metodología para extraer un mucilago a partir de la penca de tuna y aplicarlo como un coagulante para el tratamiento de aguas, con la finalidad de reducir el nivel de turbidez y así obtener un agua con mayor calidad para el consumo de la población. 6 OBJETIVOS Objetivo General Obtener altos rendimientos de extracción del mucilago de la penca de tuna; mediante la aplicación de un diseño de experimentos, caracterizarlo químicamente y utilizarlo eficientemente en la remoción de la turbidez en aguas turbias. Objetivo Específicos Determinar, mediante un análisis de los trabajos de la literatura especializada, los factores más influyentes en el proceso de extracción del mucílago del Opuntia ficus Indica. Aplicar un diseño factorial fraccionado para obtener un alto rendimiento en la extracción del mucilago. Realizar la caracterización del mucilago por medio de técnicas químicas y/o físicas. Determinar la concentración óptima por medio de la prueba de jarras, aplicando el diseño factorial por bloques para obtener el máximo de remoción de la turbidez del agua trabajado. 7 CAPITULO I NOPALES O TUNA EN EL PERÚ I.1. NOPALES I.1.1. Antecedentes. El interés del ser humano por los nopales data de miles de años. Su origen e historia están íntimamente relacionados con las antiguas civilizaciones mesoamericanas, en particular con la cultura azteca. Existen evidencias arqueológicas que permiten afirmar que fueron las poblaciones indígenas asentadas en las zonas semiáridas de Mesoamérica las que iniciaron su cultivo de modo formal. (Pimienta, 1990) Los cronistas de la época, entre ellos Gonzalo Fernández de Oviedo y Valdés, uno de los primeros narradores peninsulares, relata en 1535 en su Historia General y Natural de las Indias, como al acercarse la época del fructificación de los nopales, los pobladores se alimentaban de las tunas “las cuales tienen en tanto, que no las dejan por cosa del mundo. Y este es el mejor manjar que ellos tienen en todo el año”. Sin duda los nopales influyeron en el asentamiento de tribus errantes que concurrían en la época del fructificación a las zonas habitadas por estas plantas y acababan por fijar ahí su residencia. (Bravo Hollis, 2002) Fray Bernardino de Sagahun ilustra, en su Historia General de la Nueva España, estos modos de consumo del nopal: Hay unos árboles en esta tierra que llaman nopalli, quiere decir tunal, o árbol que lleva tunas; es monstruoso este árbol, el tronco se compone de las hojas y las ramas se hacen de las mismas hojas; las hojas son anchas y gruesas, tiene mucho zumo y son viscosas; tienen espinas las mismas hojas. La fruta que en estos árboles se hace, se llama tuna que son de buen comer; es fruta preciada. Las hojas de este árbol comen las crudas y cocidas. En unos árboles de estos se dan tunas, que son amarillas por dentro, otros las dan que por dentro son coloradas, o 8 rosadas, y estas son de muy buen comer; otros árboles de estos hay que tienen en las hojas vetas coloradas, y las tunas que se hacen de estas son por de fuera y por dentro moradas… (Velásquez, 1998) I.1.2. Origen y Distribución Los nopales son originarios de América tropical y subtropical y hoy día se encuentran en una gran variedad de condiciones agroclimáticas, en forma silvestre o cultivada, en todo el continente americano. Además, se han difundido a África, Asia, Europa y Oceanía donde también se cultivan o se encuentran en forma silvestre. Los nopales pertenecen a la familia Cactaceae. La taxonomía de los nopales es sumamente compleja debido a múltiples razones, entre otras porque sus fenotipos presentan gran variabilidad según las condiciones ambientales, se encuentran frecuentemente casos de poliploidia, se reproducen en forma sexual o asexual y existen numerosos híbridos interespecíficos. El nombre científico le fue asignado por Tournefort en 1700, por su semejanza con una planta espinosa que crecía en el poblado de Opus en Grecia (Velásquez, 1998). Esta especie una vez introducida en España desde México, se distribuyó por toda la cuenca del Mediterráneo. Probablemente los primeros nopales fueron cultivados cerca de Sevilla o Cádiz, puntos terminales de los viajes a las Indias (Barbera, 1999) Es así como actualmente existen en forma silvestre o cultivada en el sur de España, y en toda la cuenca del Mediterráneo: Francia, Grecia, Italia y Turquía, llegando hasta Israel. Los árabes la llevaron desde España a África, difundiéndose en Argelia, Egipto, Eritrea, Etiopia, Libia, Marruecos y Túnez. Sin embargo, su distribución es aún mayor; en el continente americano, se encuentra desde Canadá a Chile, en Argentina, Bolivia, Brasil, Colombia, Chile, Estados Unidos de América, México, Perú, y Venezuela y varios países de América Central y el Caribe; en otros 9 continentes se encuentra en Angola y Sudáfrica, en Australia y la India, existiendo especies tanto cultivadas como silvestres. En estos países, se encuentra parte de las más de 5 000 millones de hectáreas de zonas áridas y semiáridas del planeta y sus pueblos buscan especies que puedan desarrollarse y prosperar en ese peculiar y restrictivo hábitat. Independientemente de la clasificación taxonómica que pudiera usarse como referencia, en este documentose utiliza el nombre común nopal para la planta completa, la tuna se refiere a la fruta, el nopalito al cladodio tierno y la penca al cladodio adulto. I.2. El NOPAL EN EL PERÚ Los primeros restos sobre el uso de cactáceas encontrados en el Perú datan de la época del Horizonte Pre-agrícola (10,000 - 6000 años de antigüedad), y se encontraron en los basurales próximos a la cueva de Pachamachay en las cercanías del lago de Junín sobre los 4200 msnm. En ese sitio se hallaron semillas de una especie de Opuntia de una antigüedad de más de 11,800 años, la cual podría tratarse de Austrocylindropuntia floccosa, que es la única que crece en tales altitudes y cuyos frutos aún siguen siendo consumidos en las serranías del centro y sur del país (Ostolaza, 1994; Vilcapoma, 2000). Desafortunadamente son escasos los estudios de coprolitos humanos que son los tipos de restos arqueológicos que determinarían la identidad de las especies de cactáceas que formaban parte de la dieta del hombre antiguo del Perú. Posteriormente se encontraron restos de opuntia y otras cactáceas, formando parte de ofrendas con las que se enterraban a los muertos como anzuelos, alfileres o peines hechos con espinas de Austrocylindropuntia exaltata y Neoraimondia arequipensis (Towle, 1961; Ostolaza, 1994; Piacenza & Ostolaza, 2002). También se han encontrado restos de opuntia formando parte del material de construcción en algunas edificaciones prehispánicas (Alvarez & Cáceres, 2003). 10 El estudio de las manifestaciones artísticas de las culturas pre incas ha permitido identificar otras especies de gran importancia, siendo el cactus “San Pedro” el de mayor relevancia en el Perú prehispánico (Ostolaza, 1995, 1996, 1997, 1998, 1999, 2000; Reyna & Flores, 2001; Anderson, 2001). Los opuntias han sido documentadas como elementos importantes de las culturas Paracas, Nazca, Moche, e Inca (Yacovleff & Herrera, 1934; Blasco & Ramos, 1980; Ostolaza, 1996, 1997, 1998, 1999, 2000). Sin embargo, el grupo de las platyopuntias dentro del que se encuentra la tuna, solo ha sido reportado en las culturas Moche e Inca (Horkheimer, 2004). Especialmente es en la iconografía Mochica en la que resaltan estos opuntias de tallos planos y redondeados (Figura 1), probablemente se trata de Opuntia macbridei, la cual se distribuye ampliamente en el norte del país. Presumiblemente sus frutos eran consumidos por los moches, así como por los animales (zorros y venados) que se distinguen en los ceramios (Donan & McClelland, 1995). Figura 1 Representación de Opuntia en la cerámica Moche (Fuente: Novoa, 2006) 11 I.2.1. La Tuna en las crónicas Los primeros reportes de la colonia sobre O. ficus-indica en el Perú fueron realizados por cronistas como Pedro de Rivera en el año 1586, quien comenta: “…hay algunos cardones que se da en la tierra templada, del grandor de una mano, los cuales se cultivan con mucho cuidado; su fruto es de grana colorada finísima con que se tiñe la ropa, que en esta tierra se hace de cumpi y otras curiosas para el vestido de los indios…” y posteriormente, el padre Bernabé Cobo en su obra “Historia del Nuevo Mundo” en 1650, describe a la tuna de la siguiente manera “Viven muchos años, en que difieren de las yerbas; no producen ramas ni hojas, sino unos trozos redondos y gruesas pencas encaramadas e ingeridas unas sobre otras; son tiernas aguanosas, como zábilas, pepinos o calabazas, destila de ellas un humor pegajoso como el de la sábila, en que muestran no convenir con los árboles y las matas. Están de alto abajo pobladas de agudísimas espinas, unas mayores que otras, de agujas y alfileres…” en clara alusión a las características de esta cactácea. Estas referencias indican que durante la llegada de los españoles a esta parte del continente americano encontraron a estas plantas bajo cultivo. Igualmente hacen mención al uso de la cochinilla, Miguel de Estete en el año 1953, en una cita informa que la grana o cochinilla se cultivó en Perú desde antes de la llegada de los españoles, además de que habría otras pruebas de que se producía y se empleaba como colorante, no sólo en Perú (Lima y Ayacucho) sino en Bolivia y Chile, reportando que los indios recogían “mucha grana y algodón”, afirmación confirmada posteriormente por el padre Cobo en 1650. I.2.2. Nombres Comunes Algunos nombres comunes son muy ilustrativos acerca de su origen y distribución. El nombre tuna es de origen caribeño (Bravo-Hollis & Sanchez Mejorada, 1991), tomado por los primeros españoles que conocieron estas plantas. Más exactamente es un vocablo Taíno 12 (Morinigo, 1966). Con este término se designa mayormente a los frutos, aunque también se utiliza para la parte vegetativa de las especies de Opuntia. Lo extendido de este nombre sugiere que fue el primero conocido por los españoles, aún antes que los nombres mexicanos. Nopal es un término mexicano derivado del Náhuatl, "Nopalli" (Bravo-Hollis & Sanchez Mejorada, 1991; Morinigo, 1966), con el que se designa a varias especies. La tuna es conocido como Prickly pear, Cactus pear, Cactus fruti en Estados Unidos; Fico d' India (Sicilia), Figo morisca (Cerdeña), Figo della barbarie en Italia; Higo en España; chumbo en Francia; Tzabar en Israel; Kaktusfeigen en Alemania; Turksupurug en Sudafica Nopal en México y Tuna en Perú y Latinoamérica (Saenz, et.al, 2006). Al retirarse de España, los moros llevaron esta especie al norte de África, llamándola "Higo de los cristianos". Actualmente en Marruecos conocida como "tapia", ilustrativo de su utilidad como cerco. Su amplia difusión en la cuenca del Mediterráneo puede apreciarse por el término "Sabra", que en Israel designa tanto al poblador nativo como a esta especie, como también por la ilustración de esta especie en sellos postales de varios países que rodean el mar Mediterráneo (Kiesling , 1998). La forma cultivada fue llevada en 1769 a California por misioneros Franciscanos, provenientes de México, llamándosela hasta hoy "mission cactus” (Benson & Walkington, 1965). En el nor-este brasilero se la utiliza como forraje, lo que se expresa claramente por su nombre local "palma forrageira". Su introducción en ese país no está registrada con exactitud. Su cultivo es muy importante en el oeste del Estado de Pernambuco (Kiesling , 1998). 13 I.2.3. Clasificación Científica El primer nombre español es Higo de las Indias, que alude a su origen, las "Nuevas Indias" y de allí su primer nombre científico: Cactus ficus-indica L. El nombre ficus-indica había sido usado en "frases diagnósticas" ya mucho antes de Linneo, para designar varias especies (Amaya, 2009). Tabla 1 Descripción completa de la clasificación científica de la tuna Fuente: Barrientos, (1983) I.2.4. Tipos y Características de Opuntia Spp. Se conocen casi 300 especies del género Opuntia. Sin embargo, hay solo 10 o 12 especies hasta ahora utilizadas por el hombre, ya sea para producción de fruta y nopalitos para alimentación humana, forraje o cochinilla para obtención de colorante (Saenz, et.al, 2006). Entre ellas se encuentran, como especies cultivadas para producción de fruta: Opuntia ficus- indica, O. amyclaea, O. xoconostle, O. megacantha y O. streptacantha. Como especies silvestres: Opuntia hyptiacantha, O. leucotricha y O. robusta. De las especies citadas, la más ampliamente CLASIFICACIÓN CIENTÍFICA Reino Vegetal Subreino Embryophita División Angioespermae Clase Dycotyledonea Subclase Dialipetalas Orden Opuntiales Familia Cactácea Subfamilia Opuntioideae Tribu Opuntiae Género Opuntia Nopalea Subgénero 5 Especies 300 14 cultivada en distintas partes del mundo es Opuntia ficus indica; es más, en la cuenca del Mediterráneo es la única Opuntia que se cultiva (Uzun, 1997) y se emplea con diferentes propósitos. Las características de estas especies son variables,diferenciándose en la forma de los cladodios, en la presencia o ausencia de espinas, en el tamaño y color de los frutos y en otras características botánicas. Por ejemplo, los frutos de Opuntia ficus-indica son dulces, jugosos, de color amarillo, anaranjado, rojo o purpura, con mucha pulpa y cascara de grosor variable, pero generalmente delgada (Saenz, et.al, 2006). I.2.5. Hábitat En las zonas áridas y semiáridas existen diferentes factores ambientales que limitan el crecimiento de las plantas, tales como temperaturas altas y bajas, escasez de agua y limitación en la disponibilidad de nutrientes. La evolución de las cactáceas en estos ambientes ha conducido a que las diferentes especies del género Opuntia desarrollen características morfológicas, fisiológicas y bioquímicas que les permitan adaptarse a estas condiciones ambientales adversas (Amaya, 2009). La proliferación masiva de ciertos tejidos parenquimatosos, asociados con un aumento en el tamaño de las vacuolas y una disminución en los espacios intercelulares, le permite a la planta acumular agua en breves períodos de humedad. Por otra parte, las formas esféricas o suculentas representan los cuerpos más eficientes para evitar la evapotranspiración. Para su óptimo desarrollo, la planta requiere una temperatura anual entre los 18 y 25°C, aunque existen algunas especies resistentes a las bajas temperaturas donde pueden soportar hasta 16 grados centígrados bajo cero, siempre y cuando no se presenten estas temperaturas por períodos prolongados. La Opuntia ficus indica se desarrolla bien en climas áridos y muy áridos con lluvias de verano, por lo que se refiere 15 a precipitación pluvial es poco exigente, ya que se le encuentra en zonas con lluvias de 125 o más milímetros al año, aunque los excesos de humedad pueden provocar enfermedades fungosas y daños por insectos (Amaya, 2009). En lo que respecta a suelos, se adapta bien a diversas texturas y composiciones, pero se desarrolla mejor en suelos sueltos, arenosos, de profundidad media, con un pH preferentemente alcalino y a altitudes que varían entre los 800 y 2.500m.s.n.m., aunque también pueden encontrarse a altitudes menores cerca de la costa. En terrenos apropiados con pH neutro y sin problema de plagas, la Opuntia ficus indica puede llegar a vivir hasta 80 años. Las plantaciones comerciales de explotaciones intensivas, pueden durar 5 años (Amaya, 2009). I.2.6. Importancia Ecológica La Opuntia ficus indica puede ser un recurso importante en la economía rural y de las zonas áridas en general, por los altos rendimientos que se pueden obtener en la fruta y demás usos en las vastas superficies que no cuentan con una precipitación pluvial adecuada para la siembra de especies más exigentes en agua y suelo, que la Opuntia ficus indica. Esta planta es muy eficaz para adaptarse y crecer donde confluyen mayor número de factores limitantes que no son favorables para la mayoría de especies vegetales (Amaya, 2009). I.3. DESCRIPCIÓN DE LA PLANTA Los nopales son plantas arbustivas, rastreras o erectas que pueden alcanzar 3,5 a 5m de altura. El sistema radical es muy extenso, densamente ramificado, rico en raíces finas absorbentes y superficiales en zonas áridas de escasa pluviometría. La longitud de las raíces está en relación con las condiciones hídricas y con el manejo cultural, especialmente el riego y la fertilización (Sudsuki, 1993; Sudzuki, 1999; Villegas, 1997) 16 Su tronco es leñoso y mide entre 20 y 50 cm de diámetro. Sus ramas están formadas por cladodios de 30 a 60 cm de largo x 20 a 40cm de ancho y de 2 a 3 cm de espesor. El cladodio fresco recibe el nombre de nopalito y el adulto de penca. En las pencas, de color verde opaco, se realiza la fotosíntesis, pues éstas remplazan a las hojas con esa función. Se encuentran protegidas por una cutícula gruesa que, en ocasiones, está cubierta de cera o pelos que disminuyen la perdida de agua, ya que poseen abundante parénquima. En este tejido se almacenan considerables cantidades de agua lo que permite a las plantas soportar largos periodos de sequía. Cabe destacar el papel de los mucílagos (hidrocoloides presentes en este tejido) que tienen la capacidad de retener el agua (Nobel, et.al, 1992). La Figura 2 esquematiza las partes de la Opuntia ficus indica, se identifica: 1) Cladodio o Penca, 2) Espinas, 3) Flor y 4) Fruto. Figura 2 Esquema de la Opuntia Ficus Indica. 2 1 3 4 17 I.3.1. Composición química general La Tabla 2 muestra la composición química del nopal fresco. Los cladodios tienen interés desde el punto de vista industrial ya que cuando los brotes son tiernos (10-15 cm) se usan para la producción de nopalitos y cuando están parcialmente lignificados (cladodios de 2-3 años), para la producción de harinas y otros productos. Tabla 2 Composición química de 100g de nopal fresco Fuente: De la Rosa & Santana, (2001) El contenido de los macrocomponentes en el cladodio cambia con su edad, como lo muestra la Tabla 3. Los nopalitos contribuyen con una alta proporción de agua (alrededor del 90%) y son altamente cotizados por su contenido de fibra, comparable al de varias frutas y hortalizas (Zambrano, et.al, 1998; Ruales & Zumba,1998). PARÁMETRO CONTENIDO Porción comestible 78.00 Energía (Kcal) 27.00 Proteínas (g) 1.70 Grasa (g) 0.30 Carbohidratos (g) 5.60 Calcio (mg) 93.00 Hierro (mg) 1.60 Tiamina (mg) 0.03 Riboflavina (mg) 0.06 Niacina (mg) 0.03 Ascórbico (mg) 8.00 18 Tabla 3 Composición química de cladodios de distintas edades (porcentaje materia seca). Fuente: López (1977) citado por Sáenz, et.al, (2006) Son ricos también en minerales, entre ellos el calcio y el potasio (93 y 166 mg/100 g, respectivamente), y tienen bajo contenido de sodio (2 mg/ 100 g), lo que es una ventaja para la salud humana. Su alto contenido en calcio, los hacen muy interesantes por la importancia de este mineral en la dieta. McConn & Nakata, (2004) en un estudio efectuado en nopalitos señalan, sin embargo, que el calcio no estaría disponible para la utilización por el cuerpo humano, ya que se encuentra bajo forma de cristales de oxalato de calcio. Contienen, además, cantidades moderadas de carotenoides (30 μg/100 g) y vitamina C (11 mg/100 g) (Rodríguez & Cantwell, 1988). La composición química de las cenizas varía en las distintas especies y también dentro de una misma especie, de acuerdo a la composición química del suelo y con los complicados fenómenos mediante los que esas plantas disponen de sus nutrientes. Estos fenómenos se relacionan con la acidez, salinidad, conductividad, grado de disociación o ionización, humedad y textura del suelo. I.3.2. Propiedades funcionales de los frutos y cladodios Los compuestos funcionales son aquellos que tienen efectos beneficiosos para la salud y tanto los frutos como los cladodios de la tuna son una fuente interesante de tales componentes, entre los que destacan la fibra, los hidrocoloides (mucilagos), los pigmentos (betalainas y carotenoides), los minerales (calcio, potasio), y algunas vitaminas como la vitamina C (Saenz, et.al, 2004). Los EDAD (AÑOS) PROTEÍNA GRASA CENIZAS FIBRA CRUDA EXTRACTO NO NITROGENADO 0.5 9.4 1.00 21.0 8.0 60.6 1 5.4 1.29 18.2 12.0 63.1 2 4.2 1.40 13.2 14.5 66.7 3 3.7 1.33 14.2 17.0 63.7 4 2.5 1.67 14.4 17.5 63.9 19 contenidos de estos compuestos son distintos en frutos y cladodios, siendo la pulpa de la fruta la parte más rica en vitamina C mientras que los cladodios son más ricos en fibra. Una alternativa explorada hace años es la obtención de betalaínas a partir de las tunas rojas o púrpuras. Las betalaínas son pigmentos solubles en agua derivados del ácido betalámico cuya estabilidad se ve afectada por el pH, siendo más estables a pH entre 4,0 y 6,0 (Castellar, et.al, 2003).Están formadas por dos grupos principales, las betacianinas (rojas) y las betaxantinas (amarillas), que presentan absorbancias a diferentes longitudes de onda (540 nm y 480 nm, respectivamente). Dentro de las betacianinas se encuentran varios compuestos, entre ellos la betanina, que suele ser el mayor responsable del color rojo (Fernádez, et.al, 2002). La benina, también llamada rojo-betarraga, es aceptada entre los pigmentos naturales, utilizados principalmente para colorear alimentos que no son tratados térmicamente, como yogur, helados y jarabes. Se encuentra presente tanto en la cáscara como en la pulpa de los frutos y su concentración varía de acuerdo a la especie (Saenz, et.al, 2004; Sepúlveda, et.al, 2003) por lo que es de interés estudiar y seleccionar las especies que concentran la mayor cantidad del pigmento. Según su solubilidad en agua, la fibra se clasifica en soluble e insoluble; la primera la conforman mucilagos, gomas, pectinas y hemicelulosas y la insoluble es principalmente celulosa, lignina y una gran fracción de hemicelulosa (Atalah & Pak, 1997). Estas fracciones de fibra tienen efectos fisiológicos distintos: es así como la fibra soluble se asocia con la reducción de los niveles de glucosa y de colesterol y la estabilización del vaciamiento gástrico y la fibra insoluble con la capacidad de retención de agua (aumento del peso de las heces), el intercambio iónico, la absorción de ácidos biliares, minerales, vitaminas y otros y su interacción con la flora microbiana. Los cladodios son una fuente importante de fibra, de calcio y de mucilagos, tres componentes que son necesarios para integrar una dieta saludable (Saenz C., 2004; Saenz, et.al, 2004). 20 Las pectinas, aunque están presentes en la pulpa en baja cantidad, son parcialmente responsables de la viscosidad de la misma y son un elemento positivo en la producción de jugos y jaleas. La viscosidad que poseen las pulpas se ve influida por la presencia de pectinas y mucilagos. Ambos compuestos están considerados dentro del grupo de los hidrocoloides por su gran capacidad para captar y retener agua; forman parte, a su vez, de la fibra dietética. Estos compuestos, pueden ser utilizados como espesantes en productos alimenticios (Saenz, et.al, 2004; Sepulveda, et.al, 2003). I.3.3. Usos del Nopal Actualmente, el nopal tiene múltiples usos, entre los que se encuentran los siguientes: Como frutal. Para producción de tuna, fruto del nopal, esta cactácea se cultiva en diversos países: México (67.000 Ha), Italia (2.500 Ha), Sudáfrica (1.500 Ha), Chile (1.000 Ha), Colombia (300 Ha), Israel (250 Ha), Estados Unidos de América (200 Ha), entre otros países (Abraján, 2008). Como hortaliza (nopalito). Con este propósito el nopal se cultiva en México (10.500 Ha) y en Estados Unidos de América (150 Ha) (Abraján, 2008). Como planta forrajera. El nopal se cultiva en muchos países para este propósito: Brasil (500.000 Ha), Sudáfrica (350.000 Ha), México (150.000 Ha, además 3.000.000 Ha de nopaleras silvestres las cuales se usan para la obtención de forraje), Túnez (75.000 Ha), Marruecos (10.500 Ha), Argentina (10.000 Ha), Estados Unidos de América (1.000 Ha, además de 500.000 Ha de nopaleras silvestres). De otros países, como Argelia, Libia, Egipto, Jordania, Etiopía, Namibia, Mozambique, etc., no se dispone de información sobre superficies cultivadas de nopal con fines forrajeros (Abraján, 2008). 21 Como sustrato para la producción de grana cochinilla. La cochinilla (Dactylopus coccus Costa) es un insecto que produce el carmín, un colorante rojo que ha vuelto a tomar importancia, a raíz de que se prohibieron, por considerarlos cancerígenos, los colorantes artificiales (FDA Nº 2 y 4). Se cultiva nopal para producir grana en Perú (70.000 Ha), Bolivia (1.000 Ha), Chile (500 Ha), España (300 Ha), Sudáfrica (100 Ha), Argentina (50 Ha) y México (10 Ha) (Abraján, 2008). Como planta medicinal. Se ha probado que los nopalitos y las cáscaras de la tuna ácida (xoconostle) abate los niveles de azúcar y colesterol en la sangre, por lo que su consumo en fresco, cocinado y procesado industrialmente se ha acrecentado en México (Abraján, 2008). Como materia prima en la producción de cosméticos. En México y otros países se fabrican, de nopal o de la tuna, cosméticos como: champú, acondicionadores, jabones, cremas, lociones, mascarillas, geles, etc (Abraján, 2008). Como materia prima para elaborar bebidas alcohólicas. En México, Estados Unidos de América, Italia, Perú, Chile, Dinamarca, etc., se utiliza el nopal y sobre todo la tuna para fabricar vinos, licores y aguardientes (Abraján, 2008). Como cerco. La utilización de las variedades espinosas de nopal para formar cercos en los huertos familiares y en los predios ganaderos es común y muy antigua en México (Abraján, 2008). Para la conservación del suelo. El nopal se utiliza en muchos países para proteger el suelo de la erosión hídrica y eólica. Evita la desertificación en zonas áridas y semiáridas, formando setos en curvas de nivel, que soportan las condiciones del medio árido 22 caracterizado por una precipitación pobre e irregular y alta oscilación térmica diaria y anual (Abraján, 2008). Otros usos populares a los que actualmente se les está estudiando su base científica, como la utilización de las pencas en la clarificación de aguas (López, 2000), su adición a la cal como adherente, en pinturas (Ramsey , 1999) o su introducción en el suelo para aumentar la infiltración de agua (Gardiner, et.al, 1999) La tuna y los cladodios se conservan y transforman aplicando tecnologías equivalentes de procesamiento y existen alimentos tradicionales preparados en base a tuna y nopalitos. Se cuentan entre ellos alimentos en base al fruto: mermeladas, jugos y néctares; productos deshidratados; jugos concentrados, jarabes y licores. En base a los cladodios se encuentran entre otros, encurtidos, jugos, mermeladas y productos mínimamente procesados (Abraján, 2008). Otra propiedad distinta es la que se atribuye al nopal como repelente de insectos, aunque no se conocen estudios científicos acerca de esta acción; un producto que con estos fines habría sido probado con éxito en la isla de Roatan, Honduras, está siendo elaborado en Texas, patentando y se ofrece a través de Internet (Saenz, et.al, 2006) A continuación, se mencionan una serie de sectores industriales que pueden obtener y/o beneficiarse con productos obtenidos a partir de los nopales (Saenz, et.al, 2006): Agroindustria de alimentos y bebidas para consumo humano (producción de diversos alimentos, bebidas alcohólicas y analcohólicas de tuna y nopalitos); Agroindustria de alimentos para animales (suplementos y piensos de cladodios y de desechos de la industria procesadora de tuna, como las cáscaras y las semillas); 23 Industria farmacéutica (protectores gástricos de extractos de mucílagos; cápsulas y tabletas de polvo de nopal); Industria cosmética (cremas, champúes, lociones de cladodios); Industria de suplementos alimenticios (fibra y harinas de cladodios); Industria productora de aditivos naturales (gomas de cladodios; colorantes de la fruta); Sector de la construcción (compuestos ligantes de los cladodios); Sector energético (producción de biogás a partir de las pencas); Sector productor de insumos para la agricultura (productos del nopal como mejoradores del drenaje de suelos); Sector turismo (artesanías en base a cladodios lignificados); Industria textil (uso de colorantes naturales como el carmín de cochinilla). Continuando con las aplicaciones de la tuna y sus cladodios, en este caso, en el sector alimentario, se visualiza la Tabla 4, donde indican los productos y subproductos de estos. Tabla 4 Algunos productos alimenticios, subproductos y aditivos obtenidos de la tuna y los cladodios. Fuente: Sáenz,et.al, (2006) PRODUCTOS SUBPRODUCTOS Tunas Cladodios Tunas y Cladodios Jugos y néctares Mermeladas, geles y jaleas Frutas y láminas deshidratadas Edulcorantes Alcoholes, vinos y vinagres Fruta enlatada Fruta y pulpa congelada Jugos Encurtidos y salmuera Mermeladas y jaleas Harinas Alcohol Confites Salsas Nopalitos Aceite de las semillas Mucilagos de los cladodios Pigmentos de las cáscaras y frutos Fibra dietaria de los cladodios Pasta forrajera de la cáscara y las semillas 24 CAPITULO II EL MUCILAGO DE NOPAL II.1. MUCILAGO DE NOPAL Otro componente al que se ya se ha hecho mención por su importancia fisiológica es el mucílago. Este compuesto se presenta tanto en los cladodios como en la piel y pulpa de la fruta, aunque en muy diversas proporciones. Estudios efectuados por (Saenz & Sepulveda, 1993) indican que el rendimiento en todos los casos es bajo: 0,5 por ciento en la cáscara y 1,2 por ciento en los cladodios. Estos hidrocoloides pueden ser interesantes porque se pueden extraer de las pencas maduras dándoles mayor utilidad o de pencas provenientes de la poda de plantas que se cultivan para producción de fruta. Estos hidrocoloides podrían integrar la oferta de una gran gama de agentes espesantes de amplio uso en la industria de alimentos y farmacéutica. Su poder viscosante está siendo actualmente estudiado (Cárdenas, et.al, 1997; Medina Torres, et.al, 2000; Sepúlveda, et.al, 2003) con resultados interesantes, por lo que -si se mejoran los rendimientos de extracción- podría competir con gomas de gran uso como la goma garrofin, el guar u otros agentes espesantes. Por su parte en Israel, (Garti, 1999) ha estudiado la capacidad como agente emulsionante de la goma o mucilago de Opuntia ficus-indica. El autor encontró que esta goma: (1) reduce la tensión superficial e interfacial; (2) estabiliza emulsiones del tipo aceite-agua; (3) forma gotas de aceite pequeñas; (4) absorbe hacia la interface aceite-agua y no contribuye a la viscosidad de los sistemas; (5) los sistemas no floculan. Espinosa (2002) estudio la adición de dispersiones de mucilago de nopal en distintas concentraciones (0,5 y 0,8 por ciento) a espumas elaboradas con clara de huevo, demostrando que la adición de mucilago en las dos concentraciones aumentaba la estabilidad con 25 respecto a un control sin adición de mucilago de nopal, lo que se manifestaba en una menor sinéresis y un mayor volumen luego de 48 horas de reposo. Hasta hace poco tiempo, se consideraba que las gomas o hidrocoloides, no contribuían al valor nutritivo de los alimentos, por consiguiente, sus calorías no aumentaban y no impartían ningún sabor ni aroma a los productos a los que se adicionaban. II.1.1. Extracción de mucilago No existe una técnica estandarizada para extraer el mucilago debido a que el método cambia según la fuente (Cladodio o fruta) y de la parte específica de la planta (piel, pulpa o semillas). Las metodologías de extracción del mucílago señaladas en los diferentes estudios realizados son muy variadas, desde metodologías muy simples como la señalada por (Vargas & Ramos, 2003) hasta otras más complicadas como la utilizada por Habibi, et.al, (2005). El método cambia según la fuente de mucílago (cladodio o fruto) y la parte concreta de la que se extraerá el hidrocoloide (piel, pulpa o semillas). En función de lo anterior y el grado de pureza que se desea obtener serán las modificaciones al método simple que se deban hacer. Haciendo una recolección de información se presenta un cuadro resumen de las etapas de extracción en la tabla 5. Tabla 5 Descripción de cada una de las etapas de la extracción del mucilago según diferentes fuentes PROCESO DESCRIPCIÓN Selección Se recolectan Pencas de 2 a 3 años de edad, se cosechan durante la mañana, ya que los ácidos de estas varían según la hora de cosecha por tratarse de plantas con metabolismo ácido de las crasuláceas (Corrales, et.al, 2004; Goldstein & Nobel, 1991; Abraján, 2008; Sepúlveda, et.al, 2007) 26 Lavado – Cepillado Luego de la selección y antes de entrar al proceso, la fruta debe ser lavada, con agua limpia. En el caso de los nopalitos, al igual que en el caso de la tuna, la remoción de las espinas forma parte de la limpieza. Esta se lleva a cabo en forma manual, con cuchillos afilados; de igual modo ocurre con el pelado manual de la tuna. (Saenz, et.al, 2006) Pelado Luego del desespinado, con un cuchillo casero se elimina la cutícula y la epidermis, tratando de recuperar la mayor cantidad de colénquima y parénquima, que es donde se encuentra la mayor cantidad de células que almacenan el mucilago. (Sepúlveda, et.al, 2007; Dominguez, et.al, 2011, Abraján, 2008) Trituración Se mezclan la penca previamente pelada con agua destilada para facilitar la molienda, para facilitar la extracción de principios activos. Extracción Acuosa A la penca molida se le somete a una extracción solido-líquida, Considerando ciertos factores como Relación Penca/Agua, Temperatura y tiempo. En algunas fuentes solo consideran valores fijos para este proceso (Contreras, et.al, 2015; Dominguez, et.al, 2011; Quispe, 2012; Abraján, 2008), en otros trabajos consideran un rango en cada uno de estos factores para así optimizar el % rendimiento (Sepúlveda, et.al, 2007; Cai, et.al, 2008) Filtración Paso necesario para retirar restos de fibra y pulpa de la penca, se usará una tela adecuada para este procedimiento, para así poder quedarse con el líquido mucilaginoso. (Sepúlveda, et.al,2007; Saenz, et.al,2006; Abraján, 2008; Dominguez, et.al, 2011; Quispe, 2012) Centrifugación Necesario para retirar mermas de partículas muy pequeñas, que pasaron el 1° filtrado. (Sepúlveda, et.al, 2007; Saenz, et.al, 2006; Cai, et.al, 2008; Abraján, 2008) Concentración Este paso es necesario para así poder evaporar el exceso de agua y así reducir el volumen de alcohol a utilizar en la siguiente 27 etapa. (Sepúlveda, et.al, 2007; Saenz, et.al, 2006; Cai, et.al, 2008; Abraján, 2008; Dominguez, et.al, 2011) Precipitación Esta etapa es necesaria para insolubilizar los polímeros mediante la adición del alcohol, generando un desfase así también poder solubilizar los pigmentos, disolviendo parte de la clorofila presente en la penca. (Sepúlveda, et.al, 2007; Saenz, et.al, 2006; Cai, et.al, 2008; Abraján, 2008; Dominguez, et.al, 2011; Contreras, et.al, 2015) Centrifugación Paso necesario para separar el mucilago precipitado del exceso de alcohol. (Sepúlveda, et.al, 2007; Saenz, et.al, 2006; Cai, et.al, 2008) Lavado – Filtrado Se utiliza el alcohol para eliminar el exceso de agua y facilitar el secado. (Sepúlveda, et.al, 2007; Saenz, et.al, 2006; Cai, et.al, 2008; Abraján, 2008) Secado Consiste en la eliminación del solvente orgánico. (Sepúlveda, et.al, 2007; Saenz, et.al, 2006; Cai, et.al, 2008; Abraján, 2008; Dominguez, et.al, 2011; Contreras, et.al, 2015) Fuente: Elaboración propia Otras etapas no consideradas en este cuadro, ya que no se tomarán en cuenta en el proceso experimental de este trabajo debido a un bajo rendimiento porcentual, son el Escaldado y decoloración, ya que la finalidad de estas es obtener un producto blanco y no la de alcanzar rendimientos de extracción elevados. (Abraján, 2008) 28 II.1.2. Factores a considerar en la extracción En la tabla 6 se resumirán algunos trabajos de investigación donde se consideraron ciertos factores para obtener un alto Rendimiento porcentual de extracción de polisacáridos. Tabla 6 Factores, intervalo de valores y Rendimientos porcentual según Publicaciones previas Fuente: Elaboración Propia Para este trabajo se considerará como factores los presentados en la tabla 7. A U T O R M A T E R IA P R IM A (E SP E C IE ) – P R O C E D E N C IA E T A P A F A C T O R E SIN T E R V A L O D E V A L O R E S % R E N D IM IE N T O Sepúlveda, et.al, (2007) Penca (Opuntia Ficus Indica) – Plantaciones en Chile Extracción Relación Penca Fresca / Agua 1/5 – 1/7 1.51 Temperatura 40°C – 16°C Tiempo 4h, 8h y 16h Precipitación Tipo de alcohol Etanol 95° - Alcohol Isopropílico Relación Extracto/Alcohol 1/3 – 1/4 Cai, et.al, (2008) Penca (Opuntia Milpa Alta) – Shangai China Extracción Relación Penca Fresca / Agua 1/2 – 1/3 – 1/4 0.694 Temperatura 70°C – 80°C – 90°C Tiempo 2h, 3h y 4h 29 Tabla 7 Descripción e intervalos de los factores a utilizar en este trabajo Fuente: Elaboración propia FACTOR INTERVALO DESCRIPCIÓN Relación Penca /Agua 1/3 – 1/4 Considerando la información de Sepúlveda, et.al, (2007) concluyen que el rendimiento puede aumentar si este factor o la Temperatura aumentan; Cai, et.al, (2008) analiza cómo influye este factor a una Temperatura y tiempo constantes, viendo que él Rendimiento porcentual es casi constante a valores de 1/3 y 1/4. Temperatura 60°C 2, 80°C 2 Tanto Sepúlveda, et.al, (2007) y Cai, et.al, (2008) coinciden que el Rendimiento porcentual de extracción se ve más afectado con este factor. Según Cai, et.al, (2008); quien evaluó este factor a una Relación penca/Agua y tiempo constantes indica que a Temperaturas superiores a 85°C el Rendimiento va disminuyendo debido al aumento de la hidrólisis del polisacárido cuando este factor es mayor. Tiempo 2h – 4h Según Cai, et.al, (2008) después de analizar sus resultados concluye que a medida que el tiempo aumenta hasta 4h este tendrá en efecto positivo en él rendimiento porcentual, exceder este valor originará el cambio de la estructura de la molécula de polisacáridos disminuyendo así el rendimiento. 30 II.1.3. Composición química del mucilago El mucílago es un carbohidrato complejo. Entre los monómeros contenidos en la cadena se encuentran: L-arabinosa, D-galactosa, L-ramnosa, D-Xilosa y ácido galacturónico. La proporción de estos monómeros en la molécula varía de acuerdo a diversos factores como: variedad, edad, condiciones ambientales y estructura empleada para la extracción (fruto, cáscara, cladodio), entre otros factores. La Tabla 8 muestra la composición química del mucílago de Opuntia ficus indica y la Tabla 9 los monómeros presentes en el mucílago de diferentes especies de Opuntia, así como su peso molecular, según distintas referencias bibliográficas consultadas. El mucílago está presente como su sal de calcio en las células de mucílago del parénquima de la penca (Trachtenberg & Mayer, 1982). 31 Tabla 8 Rendimiento de mucilago y composición química (g/100g) Fuente: Elaboración Propia AUTOR % R E N D IM IE N T O H U M E D A D P R O T E ÍN A C E N IZ A S G R A SA F IB R A C A R B O H ID R A T O BASE HUMEDA Almendárez, (2004) 0.78 7.56 5.0 38.74 0.47 0.47 55.32 Sepúlveda, et.al, (2007) 1.51 0.1 6.0 0.1 7.23 0.1 37.3 1.0 - - 49.47 Hong & Ibrahim, (2012) 2.12 13.69 4.81 28.67 - - 52.83 BASE SECA Bayar, et.al., (2016) 10.24 10.25 0.92 35.52 - - 63.45 Abraján, (2008) - - 3.65 22.78 0.75 0.52 72.3 Martínez & González , (2012) - - 7.39 - - - 58.77 32 Tabla 9 Peso Molecular (PM) y monómero (galactosa, ramnosa, arabinosa, xilosa, ácido galacturónico) presentes en mucilago de Opuntia Spp. Según diferentes estudios + Indica presencia del polisacárido por Fuente bibliográfica Fuente: Abraján,(2008) AUTOR MW (g/mol) G A L A C T O SA R A M N O SA A R A B IN O SA X IL O SA Á C ID O U R Ó N IC O Srivastava (1974) + + Saag (1975) + + + + + Paulsen and Lund (1979) + + + + + Mc Garvie and Parolis (1979) + + + + + Trachtenberg & Mayer (1981) 4.3 x 106 + + + + + Mc Garvie and Parolis (1979) + + + Mc Garvie and Parolis (1981) + + + + + Trachtenberg & Mayer (1982) 1.56 x 106 Nobel (1992) + + + + + Sáenz (1993) + + + + + Forni (1994) + + + + Cárdena (1997) 3 x 106 + + + + Medina (2000) 2.3 x 106 + + + + + Cárdenas (2008) + + + + Majdoub (2001) 6.92 x 106 + + + + + Majdoub (2001) 2.25 x105 + + Majdoub (2001) 13.3 x 106 + + + + + Habibi (2004) + + + + + 33 Tomando en cuenta las investigaciones más recientes, se puede concluir que los principales compuestos presentes en el mucilago de Opuntia ficus indica son: Tabla 10 Principales compuestos presentes en el mucilago Fuente: Saenz, (2004) De acuerdo a Trachtenberg & Mayer, (1981) el mucilago es un polisacárido, que contiene 10% de ácido urónico, arabinosa, galactosa, ramnosa y xilosa. La composición del mucilago de nopal fue bastante similar para Madjdoub, et.al, (2001) compuesto principalmente de L-arabinosa, D-Galactosa, D-xilosa y 19.4% de ácido urónico. McGarvie & Parolis, (1981) encontraron que el mucilago de nopal está compuesto de una familia de polisacáridos altamente ramificados. Ellos consideran una estructura de unidades de ácido - D – galacturónico unidas 1 2 a unidades de - L – ramnosa enlazadas 1 4 con ramificaciones en el C -4, las ramificaciones de oligosacáridos de galactosa las cuales llevan L – arabinosa y D – xilosa como sustituyente COMPONENTE PORCENTAJE (%) L-Arabinosa 24.6 – 42 D-Galactosa 21 – 40.1 L-Ramnosa 7 – 13.1 D-Xilosa 22 – 22.2 Ácido D-Galacturónico 8 – 21.7 34 Figura 3 Estructura parcial propuesta del mucilago de Opuntia Ficus Indica (Fuente: Sáenz, 2004) II.1.4. Aplicaciones del mucilago del nopal Ojeda (2012) Indica que los coagulantes naturales que han tenido mejor rendimiento e importancia para el uso de plantas de tratamiento de aguas son: los compuestos algínicos, los derivados de la tuna y nopal, los almidones y semillas de algunas plantas. Los polímeros orgánicos de origen natural presentan por lo general una mínima o nula toxicidad, dado como lo presentan muchos investigadores acerca de la tuna, esto aumenta las alternativas de tratamiento de aguas basadas en la utilización de coagulantes naturales en los procesos de clarificación, y se hace imprescindibles, teniendo en cuenta las condiciones económicas actuales de muchos países. (Rodriguez, et.al, 2007) En un estudio efectuado en Cuba se comparó la capacidad clarificante del mucílago de la tuna, con otros agentes tradicionales como el sulfato de aluminio y se llegó a la conclusión que el -(D - Gal A - (12) - L - Rha - - (14)n - 4 Gal 3 R 6 1 R 4 Gal 3 R 6 1 1 Gal 3 R 4 R R = Arabinosa o Xilosa 35 mucílago de Opuntia ficus-indica y de Opuntia stricta variedad Dillenii tienen una conducta similar al sulfato de aluminio para clarificar el agua. (López, 2000) Trabajos como los de Vaca-Mier, et.al(2014) concluye la aplicabilidad del polvo de nopal como un coagulante primario alternativo, de bajo costo, gran efectividad y sin efectos tóxicos al medio ambiente, que, acompañado de otros procesos como la desinfección con sustancias alternativas, representaría una opción de tratamiento sustentable para el reúso de aguas negras en actividades de riego. Otros como los de Villabona, et.al, (2013) determinaron que el material extraído de Opuntia ficus indica presenta una alta actividad como coagulante debido a su capacidad para remover 50% del color y 70% de turbidez de aguas crudas con alta turbidez inicial. También se logró establecer que el material no altera significativamente el pH del agua tratada. Todo lo anterior evidenció su potencial aplicación como alternativa a los coagulantes sintéticos. No obstante, se expone la necesidad de evaluar la dosis óptima de coagulante, y el efecto de otras variables, tales como la velocidad de agitación, en el desempeño del material en procesos de clarificación, con el fin
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