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Agar TRIPTICASA DE SOYA Página 1 de 1 O-P.PD-000 Versión 1 Medio de cultivo universal, utilizado para el cultivo de una amplia variedad de microorganismos de acuerdo a los requerimientos Armonizados United States Pharmacopoeia (USP), European Pharmacopoeia (EU), and Japanese Pharmacopoeia (JP). EXPLICACIÓN En 1995 Leavitt et al descubrieron el Agar Tripticasa de Soya (TSA), lo cual facilitó un crecimiento vigoroso de microorganismos aerobios y anaerobios. TSA, es una base nutritiva y gran variedad de suplementos pueden ser adicionados para mejorar este medio. La adición de 5% estéril de sangre desfibrinada de cordero, caballo o conejo provee un excelente medio no selectivo, usado para la determinación de reacciones hemolíticas de bacterias. TSA suplementado con Lecitina y Tween 80 es ampliamente usado en el monitoreo ambiental. También es recomendado en múltiples aplicaciones de aguas y aguas residuales y numerosos métodos estándar para pruebas en alimentos. Clínicamente es usado en la diferenciación de especies de Haemophilus y para el mantenimiento de colecciones de cultivos. Digestión enzimática de caseína y Digestión enzimática de soya proveen nitrógeno, vitaminas y carbono. El cloruro de sodio mantiene el equilibrio osmótico y el agar es un agente solidificante. FORMULA Peptona de caseína 15 gr Peptona de harina de soya 5.0 gr Cloruro de sodio 5.0 gr Agar 15 gr pH final 7.3 +/- 0.2 EMPLEO E INTERPRETACIÓN Revisar referencias apropiadas para procedimientos específicos usando Agar Tripticasa de Soya. RESULTADOS Revisar referencias apropiadas para resultados RESPUESTA DE CULTIVOS ESPERADOS Y PRUEBAS DE PROMOCIÓN DE CRECIMIENTO USP/EP/JP Microorganismo Inóculo aprox UFC Resultados esperados Aspergillus niger ATCC 16404 10 - 100 Crecimiento Bacillus subtilis ATCC 6633 10 - 100 Crecimiento Candida albicans ATCC 10231 10 - 100 Crecimiento Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 10 - 100 Crecimiento Staphylococcus aureus ATCC 6538 10 - 100 Crecimiento Cuando este medio es preparado suplementando con sangre, se deben incubar de 30ºC a 35ºC bajo condiciones atmosféricas apropiadas y examinadas para revisar crecimiento a las 18 – 24 horas. Microorganismo Inóculo aprox UFC Resultados esperados (crecimiento) Escherichia coli ATCC 25922 10 - 100 Bueno a excelente B- hemólisis Staphylococcus aureus ATCC 25923 10 - 100 Bueno a excelente B- hemólisis Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 10 - 100 Normal a excelente Alfa-hemólisis Streptococcus pyogenes ATCC 19615 10 - 100 Normal a excelente B- hemólisis LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Debido a variaciones nutricionales, algunas cepas pueden ser encontradas con un crecimiento pobre o Inhibido en este medio. CONSERVACION: Las caldos se conservan entre 4 y 12 °C en su empaque original hasta la fecha de vencimiento, protegidas de la luz directa. La Duración a partir desde su producción es de 6 meses. DISPOSICIÓN FINAL Y PRECAUCIONES EN LA MANIPULACIÓN La inoculación de un medio de cultivo con bacterias, deliberadamente o accidentalmente, lleva al crecimiento rápido de estos en el medio, y altas concentraciones de cualquier microorganismo son potencialmente peligrosos, y deben ser descartados de manera segura y por métodos aprobados, como la inactivación en hipoclorito de sodio a 5000 p.p.m por no menos de 4 horas, descartando luego los agares en sus cajas contenedoras en doble bolsa roja para luego descartarlo como material de riesgo biológico; o por autoclavado, sin remover previamente el agar, colocando todo el contenido en bolsa roja doble y ser luego descartado como material de riesgo biológico. Todos los medios de cultivo deben ser manipulados por personal calificado y que hayan sido entrenados en procedimientos y técnicas microbiológicas. PRECAUCION !! Examine la fecha de vencimiento y signos de quebraduras de los tubos. Examine los caldos preparados antes de uso. Observe cualquier evidencia de contaminación, burbujas en la superficie del agar, mal llenado, cambios de color, hemólisis y signos de deshidratación y perdida de volumen o hendiduras en la superficie. Después de abierto el Rack de 10 unidades, debe usarse durante la semana siguiente para evitar posible contaminación. ***INFORMACIÓN TÉCNICA A PARTIR DE BASE DESHIDRATADA***
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