Descarga la aplicación para disfrutar aún más
Vista previa del material en texto
Práctica 4 “Identificación de flavonoides” Pérez Villanueva Karina Itzel Farmacognosia Laboratorio Periodo: 2020-2 Séptimo Semestre Fecha de entrega: 16 de septiembre de 2020 Docente: Brenda Vianey Bandala Gibbens Resumen Se realizo una práctica bajo un simulador de espectrofotometría, donde se mide la absorbancia de cierto reactivo bajo diferentes concentraciones, por medio de esto se pudo calcular una concentración bajo una absorbancia dada. Los flavonoides suelen presentarse la fluorescencia de placa a 254nm y 365nm. La finalidad de la practica conlleva al uso de un equipo de espectrofotometría por lo que fue empleado dicho simulador. Palabras clave: Flavonoide, simulador, espectrofotometría, concentraciones Introducción Flavonoides es el nombre genérico de un grupo de moléculas generadas por el metabolismo secundario de los vegetales, que, como otros principios activos vegetales, se originan mediante una ruta biosintética mixta (en el caso de los flavonoides, a través de la ruta del ácido shikímico y la ruta de los policétidos). La acción antioxidante de los flavonoides depende principalmente de su capacidad de reducir radicales libres y quelar metales, impidiendo las reacciones catalizadoras de los radicales libres. Los flavonoides están ampliamente distribuidos entre los vegetales superiores, siendo las rutáceas, poligonáceas, compuestas y umbelíferas las principales familias que los contienen. Abundan, sobre todo, en las partes aéreas jóvenes y más expuestas al sol, como hojas, frutos y flores, ya que la luz solar favorece su síntesis. Estos compuestos son importantes para la planta, al igual que ocurre con la mayor parte de metabolitos secundarios, porque además de ser responsables de la coloración de muchas flores, frutos y hojas, intervienen en la polinización atrayendo a los insectos, tienen efecto antirradicalar, etc. Los flavonoides son sustancias sólidas cristalizadas de color blanco o amarillento. Sus heterósidos son solubles en agua caliente, alcohol y disolventes orgánicos polares, siendo insolubles en los apolares. Sin embargo, cuando están en estado libre, son poco solubles en agua, pero son solubles en disolventes orgánicos más o menos oxigenados, dependiendo de su polaridad. Farmacológicamente, los flavonoides destacan por su baja toxicidad, presentando en general actividad sobre el sistema vascular con acción vitamínica P (efecto protector de la pared vascular, debido a la disminución de la permeabilidad y al aumento de la resistencia de los capilares). Asimismo, tienen efecto antioxidante, pueden inhibir la peroxidación lipídica, poseen efectos anti mutagénicos y tienen la capacidad de inhibir diversas enzimas. Objetivos General • Identificar presencia de flavonoides en distintas drogas vegetales Especifico • Identificar bajo que solventes actúa mejor una extracción • Realizar actividades de absorbancia bajo un simulador Planteamiento del problema Por medio de un simulador conocer el manejo de un espectrofotómetro y así conocer la importancia de la absorbancia y concentración que los reactivos tienen. Justificación La espectrofotometría y la ley de Lambert- Beer permiten conocer concentraciones desconocidas de los compuestos empleados u obtenidos en un laboratorio. Hipótesis Las lecturas de absorbancia nos permiten conocer las concentraciones desconocidas de los reactivos utilizados Metodología Resultados Cubeta Reactivo 1 2 3 Agua (ml) 0 1 2 Para-nitrofenol (ml) 3 2 1 Tabla 1. Diluciones de 3 celdas a concentraciones diferentes de para- NitroFenol Encender espectrofotometro y colocar la longitud de onda a 405nm Calibración de espectrofotometro con una celda en blanco (agua) Preparar una serie de diluciones con agua y para- nitrofenol Colocar cada una de las soluciones preparadas y medir la abasorbancia para registarlas mL muest ra de pNF mL de mues tra de agua Absorba ncia Concentra ción μM 3 0 1.590 80 2 1 1.069 53.32 1 2 0.530 26.666 Tabla 2. Concentraciones obtenidas por medio de las lecturas de absorbancia Gráfico 1. Absorbancia vs concentración de las muestras diluidas de pNF Se planteo un problema donde se solicitó lo siguiente: Se mezcla 1 mL de una muestra problema con 2 mL de agua. Calcula la concentración de pNF en la muestra de partida si el ensayo ha proporcionado un valor A405= 1.399 De acuerdo con la ecuación dada por la recta se tiene que despejar a X para que nos de la siguiente ecuación 𝑥 = 1.399 0.0199 − 0.0031 X= 70.298 μM Análisis de resultados La técnica empleada fue la de espectrofotometría UV-visible; es una técnica analítica que permitió determinar la concentración de un compuesto en solución. Se basa en que las moléculas absorben las radiaciones electromagnéticas y a su vez que la cantidad de luz absorbida depende de forma lineal de la concentración. Para hacer este tipo de medidas se emplea un espectrofotómetro, en el que se puede seleccionar la longitud de onda de la luz que pasa por una solución y medir la cantidad de luz absorbida por la misma. Dado por la ecuación de la recta se puede notar en el grafico 1. La intersección que ocurre entre la absorbancia y la concentración y que de forma algebraica se puede obtener el resultado de la concentración desconocida. Para efectuar el análisis la radiación de la fuente luminosa debe ser monocromática. Se debe elegir máximo para obtener la máxima sensibilidad y minimizar los errores. El espectrofotómetro contiene un monocromador, que transforma la luz policromática en monocromática. Depende de la calidad de este, que tan buena es esta transformación. Conclusiones El espectrofotómetro nos permite conocer la relación de absorbancia incidente de una muestra y de dicha forma se permite realizar cálculos para la obtención de concentraciones. Así mismo, se desataca la importancia de la elección de la longitud de onda, para representar un gráfico lineal. Referencias y = 0.0199x + 0.0031 R² = 0.9999 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6 1.8 0 20 40 60 80 100 A b so rb an ci a (n m ) CONCENTRACIÓN (μM) absorbancia vs concentración • Arteche A, Vanaclocha B, Güenechea JI.(1998). Fitoterapia 3.ª ed. Vademécum de prescripción. Plantas medicinales. Barcelona: Masson. • Bruneton J. (2011) Elementos de fitoquímica y de farmacognosia. Zaragoza: Acribia. • Evans WC. (1986). Farmacognosia. Madrid: Interamericana-McGraw-Hill. p.519-40. • Font P. (1992). Plantas medicinales. El Dioscórides renovado. Barcelona: Labor. • Kuklinsi C. (2000) Farmacognosia. Barcelona: Omega. • Peris JB, Stübing G, Vanaclocha B. Fitoterapia aplicada. Valencia: COF de Valencia, 1995.
Compartir