La acción de la Citicolina, analizando únicamente las ZSVs, parecería que aumentaría la apoptosis ya que ésta es superior al doble en los animales ...

La acción de la Citicolina, analizando únicamente las ZSVs, parecería que aumentaría la apoptosis ya que ésta es superior al doble en los animales tratados que no tratados y, por lo tanto, conllevaría a una menor producción global de CPNs. Sin embargo, a pesar de detectar estos cambios entre tratados y no tratados tanto a 1 día post-isquemia en la ZSVi como a los 7 días en ambas ZSVs, únicamente a 7 días post-isquemia en la ZSVi los niveles de apoptosis medida por TUNEL+/mm2aumentan por encima de los valores detectados en los controles no isquémicos, por lo tanto por encima de lo que se consideraría dentro de la normalidad (Figura 105). Por otra parte, si se analizan los cambios en la zona de infarto de forma concomitante a los 7 días post-isquemia en los animales tratados es cuando los animales presentan una disminución significativa de la apoptosis en la zona de infarto. La migración de las CPNs está dirigida básicamente por estímulos generados por la patología o en el caso del cerebro sano por los lugares de migración, como puede ser el bulbo olfatorio. Mandairon y colaboradores (Mandairon et al. 2003) determinaron en un modelo de ratón que en el caso del tracto migratorio rostral la desaferentización sensorial aumentaba la apoptosis de las células que migran hacia el bulbo, determinando que la señales estimuladoras del bulbo son necesarias para la supervivencia de las nuevas células. Por lo tanto, nuestra hipótesis sería que una reducción en la severidad del infarto debida a la acción del fármaco Citicolina en el territorio ACM podría traducirse en una menor señalización para la migración de las CPNs desde la ZSVi. Esto podría modular la proliferación neuronal hacia una menor producción de nuevas CPNs ya que la cantidad de tejido a reparar sería menor que en el caso del grupo no tratado. Esta regulación vendría mediada por el aumento de la apoptosis en la ZSV. La administración con Citicolina se esperaba inicialmente que modulara el nivel de proliferación en la ZSV de los animales y detectar luego dichos cambios mediante biomarcadores espectroscópicos de diferencia en proliferación (como el de TCho, 3,21 ppm), pero en nuestros animales no hubo diferencias en proliferación, contrariamente a lo esperado. Las diferencias en apoptosis son de un número bastante reducido de células (en comparación con las proliferantes) con lo cual los cambios probablemente están por debajo del límite de detección directo de la técnica de la ERM, aunque se detectaron diferencias en las resonancias de Lac+LM2 (1,30 ppm) y LMap (2,80 ppm) en las zonas donde había cambios significativos en apoptosis (Tabla 28). Sin embargo, debido a la poca intensidad de las señales analizadas en la región de las ZSVs estos cambios significativos deberían ser considerados con precaución. El análisis espectroscópico de la zona de infarto, muestra que a 1 día post-isquemia hay significativamente más lactato+LM2 en los animales tratados que en los no tratados. Sin embargo en el grupo de 7 días esta tendencia se invierte y a pesar de no mostrar diferencias significativas debido a que hay una elevada variabilidad en la desviación estándar, a nivel de promedios, la diferencia entre los animales tratados/no tratados del 0,58 en los LMap (2,80 ppm) y del 0,68 en el Lac+LM2 (1,30 ppm) siguen la tendencia de la reducción en la apoptosis detectada por inmunohistoquímica, que fue del 0,31, con lo cual ambos podrían ser potenciales biomarcadores de la apoptosis para la evaluación de la acción de fármacos, especialmente la señal a 2,80 ppm que tal y como se ha comentado en la discusión del infarto sólo se asocia a muerte apoptótica in vivo. A modo de resumen, se determinó que la Citicolina reduce la apoptosis medida en la zona de infarto a los 7 días post-isquemia pero en nuestro caso, no aumenta la proliferación de las CPNs en las ZSVs. Se detectó también un aumento de la apoptosis en las ZSVs en los animales tratados, aunque ello podría interpretarse a la luz de una menor severidad del infarto, que puede mediar en los niveles de proliferación de las CPNs. Mediante ERM in vivo no se pudo determinar un biomarcador espectral que permitiera determinar el efecto del fármaco en las ZSVs, posiblemente debido a que los cambios estaban por debajo del límite de detección de la técnica. En cambio en la zona de infarto, donde los cambios en el nivel de apoptosis son más evidentes según el estudio inmunohistoquímico, el Lactato+LM2 o los LMap son posibles biomarcadores por ERM in vivo de este cambio.