INFORME PRÁCTICA1 MEDIOS DE CULTIVO_GRUPO 8

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ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO 
 
VICERRECTORADO ACADÉMICO 
DIRECCIÓN DE DESARROLLO ACADÉMICO 
 
 
 
 
FACULTAD: CIENCIAS 
 
 
CARRERA: INGENIERÍA AMBIENTAL 
 
 
 
GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIOS, 
TALLERES Y CENTROS DE SIMULACIÓN DE 
 
MICROBIOLOGÍA 
CÓDIGO: AMBIP18 
 
 
DOCENTE RESPONSABLE: 
SANDRA PAOLA POZO GARCÍA 
 
LUGAR: 
LABORATORIO DE CIENCIAS 
SEDE ORELLANA 
 
 ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO 
GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIOS, 
TALLERES Y CENTROS DE SIMULACIÓN 
 
ASIGNATURA MICROBIOLOGÍA 
 
 
PRÁCTICA No. 01 
MEDIOS DE CULTIVO y ESTERILIZACIÓN 
 
FECHA INICO: 2021-12-05 
FECHA FIN: 2021-12-05 
HORA: 07H00 A 12H00 
 
 INTEGRANTES: 
 
 TOMM ANTHONY CUASAPAZ ALDAZ 492 
 TANNIA ABIGAIL ROJAS LOPEZ 463 
 CINTHYA DOMENICA TANGOY SALAZAR 527 
 VICTOR ORLANDO AJON AVILÉS 478 
 BRYGHAN IVER ZAMBRANO MERA 393 
 LIZETH XIMENA AGUINDA CORTEZ 477 
 
 
 
OBJETIVOS: 
1. Conocer los principales materiales y equipos de Laboratorio y su manipulación. 
2. Identificar las partes de un microscopio compuesto y su funcionamiento. 
3. Preparar un medio de cultivo bajo condiciones controladas y proceder a la inoculación 
4. Conocer el proceso de esterilización – uso de la autoclave- 
5. Observar las muestras cultivadas tanto caseras como de laboratorio. 
MÉTODOS 
 
Modalidad: Trabajo grupal 
 
Materiales y equipos 
1. Preparación casera: 
• Etiquetas (bolsas de té) 
• Cinta adhesiva 
• Hisopos estériles (cotonetes nuevo cerrados) 
• Frascos o envases de vidrio pequeños con tapa (recomiendo: papillas Gerber o parecidos) 
• Jeringas sin aguja para tomar mediciones (mayor a 10 ml) 
• Gelatina sin sabor en polvo 
• Un caldo maggy en polvo 
• Pinzas de madera o de cocina metálicos, para evitar quemarse 
2. Preparación en Laboratorio 
MATERIALES QUE APORTAN LOS ESTUDIANTES 
• Mandil blanco 
• Gorro de bioseguridad 
• Guantes quirúrgicos 
• Papel de Sticker pequeños 
• Tijeras 
• Mechero Bunsen 
• Alcohol y gel de manos 
 
 
 
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GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIOS, 
TALLERES Y CENTROS DE SIMULACIÓN 
 
ASIGNATURA MICROBIOLOGÍA 
 
 
MATERIALES Y EQUIPOS DE LABORATORIO 
• Cajas Petri 
• Autoclave 
• Estufa 
• Balanza 
• Agar deshidratado (Agar –agar 12g) 
• Agua esterilizada 
• Microscopios compuestos 
• Matraz Erlenmeyer con tapón 
• Kit de microbiología 
• Barrilla de agitación 
• Vaso de precipitación pequeño (100 ml) 
• Mechero bunsen 
• Porta y cubreobjetos 
PROCEDIMIENTO: 
Preparación casera: 
 
1. Esterilizar todos los materiales, utilizar una olla grande y llenarla de agua poner al fuego hasta 
llegar al punto de ebullición, inmediatamente colocar con precaución todo utensilio a ser 
utilizado para el experimento. 
2. Preparación del medio de cultivo – ver video paso a paso- 
3. Se obtendrá 4 frascos de vidrio pequeños con la solución del medio de cultivo solidificada. 
4. Etiquetar cada frasco con los siguientes datos: número de grupo; fecha y hora del cultivo; tipo 
de muestra (C: frasco control; CC: celular contaminado; CD: celular desinfectado; B: baño). 
5. Toma de muestras con hisopos de algodón estériles 
6. Colocación de la muestra en el medio de cultivo y tapado hermético 
7. IMPORTANTE: el frasco control en ningún momento se va a destapar; el frasco B, se colocará 
abierto en una superficie de su baño, evitar dejar en el piso. 
En el laboratorio: 
PASOS GENERALES 
 
1. Charla explicativa sobre el uso y manejo de materiales y equipos a utilizarse 
2. Charla demostrativa sobre las partes, manejo y el uso del microscopio compuesto. 
3. Ubicación y entrega de materiales y reactivos por grupos 
4. Aplicación de la guía de la práctica paso a paso – guía impresa- 
5. Observación al microscopio de las muestras de los medios de cultivos caseros preparados 
previamente. 
6. Graficar la observación en una amplificación de 40X y 100X. 
7. Preparación de un medio de cultivo en condiciones controladas 
8. Esterilizar los medios tipos de medio de cultivo preparados 
9. Observación con el microscopio el medio de cultivo de laboratorio previamente cultivado 
10. Graficar la observación en una amplificación de 40X y 100X. 
 
 
 
 
 
 
 
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GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIOS, 
TALLERES Y CENTROS DE SIMULACIÓN 
 
ASIGNATURA MICROBIOLOGÍA 
 
 
 
PASOS A PASO PREPARACIÓN DE UN MEDIO DE CULTIVO 
PASO A PASO PREPARACIÓN DE CAJAS PETRI CON AGAR 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
PASO A PASO LA INUCULACIÓN DE LA MUESTRA 
PASO A PASO PREPARACIÓN DE PLACAS 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
RESULTADOS ESPERADOS 
Complete los datos del siguiente cuadro comparativo (Cuadro 1) 
 
 
Presencia de 
microorganismos (Alto, 
Medio, Bajo) 
Medio de cultivo casero Medio de cultivo de 
laboratorio 
Control Bajo ------------ 
Celular Contaminado Medio Medio 
Celular Desinfectado Bajo Bajo 
Baño alto Alto 
 
Etiqueta de cajas 
petri con el medio 
de cultivo 
Flamear la boquilla 
del matraz antes 
de cubrir el fondo 
de la caja petri 3/4 
partes 
 
Dejar solificar en 
una superficie 
plana. 
Voltear cara abajo 
para eliminar 
concentración de 
agua o humedad, 
reposo y refrigerar 
 
Muestras secas: 
Corte fino del 
medio de cultivo 
en agar 
 
 
Etiquetar 
portaobjetos 
 
Colocación en el 
centro de 
portaobjetos, no 
usar la mano 
Cubrimos con 
cubreobjetos, 
protege al lente 
objetivo del 
microscopio 
 
 
Preparación del 
AGAR (1 litro): 
Bacterias: 23 g 
Hongos: 18 g 
 
 
Colocar el agar 
pesado un 
matraz 
erlenmeyer 
Agregar agua 
destilada y 
calentar, 
agitatando 
con la barilla 
hasta que la 
mezcla esté 
cristalina 
 
Retirar de la 
estufa y 
colocar un 
tapón fijo 
pero no 
apretado 
 
Esterilizar la 
preparación 
por medio del 
autoclave a 
121°C por 20 
minutos. 
 
Identificación del 
inóculo (raspado del 
exterior de un celular) 
Aplicamos la técnica 
del contacto por 
medio de un hisopo 
de algodón 
esterilizado 
 
Cubrimos 
rápidamente la caja 
petri 
Dejamos que se 
cultiven los 
microorganismos en 
un lugar fresco de 15- 
25°C 
 
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GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIOS, 
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ASIGNATURA MICROBIOLOGÍA 
 
 
 
PREGUNTAS 
 
1. ¿Qué es el agar y para qué sirve? 
 
Se utiliza como agente gelificante para dar solidez a los medios de cultivo. En el agar bacteriológico 
el componente dominante es un polisacárido que se obtiene de ciertas algas marinas y que presenta la 
indudable ventaja de que, a excepción de algunos microorganismos marinos, no es utilizado como 
nutriente. Un gel de agar al 1-2% se licua alrededor de los 100ºC y se gelifica alrededor de los 40ºC, 
dependiendo de su grado de pureza. 
 
2. Explique las diferencias detectadas entre el experimento casero y el experimento del 
laboratorio 
 
En la situación del experimento casero no se hizo evidente el aumento de los microorganismos 
como por ejemplo las bacterias, sin embargo este tiene más posibilidad de que ocurra algo que no 
esperamos, ejemplificando, contaminación accidentalmente, mal cálculo de las porciones 
correctas para llevar a cabo el experimento, debido a que no estamos en un espacio apto para hacer 
dichos métodos, a diferencia del experimento de laboratorio hemos observado que crecen más 
microorganismos una vez que poseen una diversidad de nutrientes más completa en su medio, 
además que hay otros componentes que tienen la posibilidad de influir, como la acidez, y además 
realizamos exitosamente el experimento y obtuvimos los resultados deseados, lo que era la 
finalidad primordial para hacer las visualizaciones en el microscopio. 
 
 
3. Explique si el medio de desinfección del celular fue suficiente 
 
Por medio del resultadoobtenido se ha podido comprobar que la eliminación total en este proceso 
no ha sido suficiente, debido a que se evidencio que este no ha sido capaz de remover todos los 
microorganismos, dando como consecuencia la presencia de estos en la muestra que tenía dentro 
su isótopo. 
 
4. Explique en que influyen las condiciones de temperatura y esterilización en el experimento 
 
La esterilización es un proceso por medio del que se consigue la devastación total de los 
microorganismos viables presentes en un definido material de un medio de cultivo, además para 
intentar dividir unos de otros y tener en un recipiente solo hongos y en otro solo bacterias y hacer 
más simple el análisis de todos ellos en el microscopio. 
El aumento de la temperatura aumenta el poder bactericida del agente, siempre que no lo 
desnaturalice. la situación de esta donde promedia de 29 °C a 32° C es mucho más rápida debido a 
que los microorganismos se desarrollan más rápido y Así para temperaturas bajas, por lo general, por 
cada 10ºC de incremento de esta, la tasa de mortalidad se duplica, en la situación de esterilización en 
climas fríos en donde la temperatura promedia entre los 10°C a 14°C se dificulta más el aumento y 
desarrollo de microorganismos. 
 
 
 
 
 
 
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GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIOS, 
TALLERES Y CENTROS DE SIMULACIÓN 
 
ASIGNATURA MICROBIOLOGÍA 
 
 
 
PRODUCTOS: 
1. Informe del experimento 
2. Presentación con diapositivas para la defensa 
3. Anexos: Gráficos de observaciones 40X y 100X 
 
 
 
CLASIFICACIÓN DE AGARES 
Tipo de agar Consistencia Composición Función 
 
Agar-Agar Semisólido Complejo Simple 
Extracto de carne Liquido Definido Enriquecimiento 
 
Agar manitol sal Semisólido Definido Selectivo 
 
Agar sangre Solido Definido Enriquecimiento 
Agar chocolate solido Definido Enriquecimiento 
Agar EMB Solido Definido Selectivo y diferencial 
 
Agar MacConkey Solido Definido Selectivo 
Agar soya tripticasa Solido Definido Enriquecimiento 
Agar peptona Solido Complejo Enriquecido 
 
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CONCLUSIONES 
 
Mediante el desarrollo de esta práctica definimos, estudiamos y aplicamos los procedimientos que se deben 
realizara para la elaboración de un medio de cultivo, es claro que esto es referido con la unidad que estamos 
estudiando, microbiología, por otro lado, conocimos y utilizamos algunos materiales naturales que existen, 
por lo tanto, creemos firmemente que la práctica fue muy amena y fructífera para con los objetivos trazados 
al inicio de la misma. 
 
RECOMENDACIONES 
 
➢ Es obligatorio el uso de todos los implementos de bioseguridad como gorro, guantes, mascarilla, 
lentes, cubre calzado y guardapolvo. 
➢ Se requiere que la puerta del laboratorio esté cerrada y que el ingreso al laboratorio sea restringido. 
Lavarse las manos antes y después de realizar la preparación de medios de cultivo u otra 
experiencia que se desee realizar. 
➢ Limpiar con alcohol la mesa de trabajo y evitar contaminar con algunos objetos sobre ella como 
celulares, cuadernos, cartucheras, mochilas, etc. 
➢ Para el sembrado siempre esterilizar antes y después de usar el asa de siembra para no contaminar 
otros medios. 
➢ Es importante rotular las, placas, y tubos de ensayo indicando la sustancia o medio de cultivo que 
contienen. 
➢ Lavarse las manos con agua y jabón antes de salir del laboratorio. 
 
Elaborado por: 
SANDRA 
PAOLA 
POZO 
GARCIA 
 
 
Firmado 
digitalmente por 
SANDRA PAOLA 
POZO GARCIA 
Fecha: 2021.11.29 
13:08:02 -05'00' 
----------------------------------------------- 
SANDRA PAOLA POZO GARCÍA 
 
Revisado por: 
 
 
 
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EDWIN NARANJO 
COORDINADOR ACADÉMICO 
 
Nota. Se recomienda que los Técnicos Docentes tengan acceso a las Guías de Laboratorio con el 
objeto de coordinar con el profesor de asignatura las necesidades de recursos, materiales y equipos 
necesarios para el desarrollo de las prácticas.