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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLÁN Uso de ultrasonido como pretratamiento en la deshidratación osmótica de carne de cerdo Longissimus thoracis T E S I S P A R A O B T E N E R E L T Í T U L O D E: Ingeniera en alimentos P R E S E N T A: MAYRA PAZ DÍAZ ASESORES Dra. Rosalía Meléndez Pérez Dr. José Luis Arjona Román Cuautitlán Izcalli, Estado de México. 2015 UNAM – Dirección General de Bibliotecas Tesis Digitales Restricciones de uso DERECHOS RESERVADOS © PROHIBIDA SU REPRODUCCIÓN TOTAL O PARCIAL Todo el material contenido en esta tesis esta protegido por la Ley Federal del Derecho de Autor (LFDA) de los Estados Unidos Mexicanos (México). El uso de imágenes, fragmentos de videos, y demás material que sea objeto de protección de los derechos de autor, será exclusivamente para fines educativos e informativos y deberá citar la fuente donde la obtuvo mencionando el autor o autores. Cualquier uso distinto como el lucro, reproducción, edición o modificación, será perseguido y sancionado por el respectivo titular de los Derechos de Autor. UNAM – Dirección General de Bibliotecas Tesis Digitales Restricciones de uso DERECHOS RESERVADOS © PROHIBIDA SU REPRODUCCIÓN TOTAL O PARCIAL Todo el material contenido en esta tesis esta protegido por la Ley Federal del Derecho de Autor (LFDA) de los Estados Unidos Mexicanos (México). El uso de imágenes, fragmentos de videos, y demás material que sea objeto de protección de los derechos de autor, será exclusivamente para fines educativos e informativos y deberá citar la fuente donde la obtuvo mencionando el autor o autores. Cualquier uso distinto como el lucro, reproducción, edición o modificación, será perseguido y sancionado por el respectivo titular de los Derechos de Autor. Agradecimientos Primeramente quisiera agradecerle a Dios por llenar mi vida de bendiciones y gente tan valiosa que me ha ayudado a lo largo de este sueño que hoy se ve concluido. Gracias por permitirme estar en el lugar y con las personas correctas y por llenarme de fortaleza en los momentos donde estuve a punto de caer. A mis padres por todo el apoyo brindado durante mi formación profesional, por su total entrega y sacrificio, por su eterno cariño y sus frases motivadoras en momentos difíciles. A la Universidad Nacional Autónoma de México por llenar mi vida académica de oportunidades que jamás pensé que tendría, por llenarme de conocimientos y acercarme a todas las increíbles personas que conocí. Soy orgullosamente UNAM. A mis asesores de Tesis la Dra. Rosalía Meléndez y el Dr. José Luis Arjona, por todo su apoyo, persistencia, paciencia y motivación que permitieron que me aventurara en este proyecto, no tengo las palabras para agradecer todo lo recibido, han sido capaces de ganarse mi más sincera admiración y lealtad, muchas gracias. A mis sinodales la Dra. Marta Rosas, el M. en C Jonathan Coria, el M. en C. Víctor Avalos y la I.A Guadalupe López, por todo su apoyo y por sus sinceros y constructivos comentarios durante las revisiones del presente trabajo. Al proyecto PAPIIT IT203314 por su apoyo durante este proyecto. Y a todas aquellas personas que me enseñaron el camino de la superación, a las que creyeron y no creyeron en mí, GRACIAS, ya que me hicieron más fuerte y nunca me di por vencida. Dedicatorias Cuando se terminan ciclos, siempre vienen a la mente todas aquellas personas por las que nos aventuramos, por las cuales nos atrevimos a dar un paso más, por las que valió la pena tanto esfuerzo. Todas aquellas personas que han marcado mi vida, sin duda alguna han puesto su granito de arena para que este sueño que comenzó hace cinco años se hiciera realidad. Quisiera dedicar este trabajo especialmente: A mi familia que han sido el motor de mi vida y sin los cuales yo no estaría aquí. Papás, gracias por apoyarme siempre y hacer de mí una persona fuerte, responsable y tenaz. Por siempre creer en mí y por alentarme a continuar pese a las adversidades, por su apoyo incondicional en momentos de tristeza, por su paciencia y sabiduría que sin duda alguna me han hecho crecer. Por todo lo que me han brindado, sus consejos, su amor, comprensión, su sacrificio y sobre todo por su inmenso cariño y por estar siempre conmigo. Hoy, soy lo que soy por ustedes y por fin sé que todo el esfuerzo valió la pena, este logro es suyo. Vane y Josue, gracias por aguantar mis buenos y malos momentos, por siempre enseñarme que hay tiempo para todo, hasta para jugar y platicar, por su ayuda en todo momento, por escucharme y apoyarme en todo. El camino no fue fácil, sin embargo siempre escuche una frase esperanzadora y motivadora por parte de todos ustedes que me hizo creer en la frase “No te rindas”. Los amo mucho y son lo más importante en mi vida A todas mis tías y tíos por todo el apoyo brindado, así como sus palabras de aliento y consejos durante mi formación profesional. A la Fam. Pérez Díaz y Urrusquieta Díaz por hacer de esté un camino menos difícil, gracias por apoyar a mi familia y ver siempre por mí. A mi prima Brenda, por su apoyo moral, por ser mi consejera y escucharme a toda hora y en todo momento, por apoyarme, por entenderme, por todas las horas de diversión. Gracias por ser más que una prima para mí. A mi amiga de toda la vida Angelica, por apoyarme, escucharme y por aconsejarme, por estar conmigo durante toda mi formación y entenderme cuando no tenía tiempo para estar con ella, por enseñarme lo que es ser un verdadero amigo. A mis amigos de la universidad, gracias por enseñarme el valor de la amistad y por hacer este largo camino más ameno para mí, gracias por todos los momentos que pasamos juntos y por su apoyo, sin duda alguna hicieron que mi estancia en la facultad fuera una experiencia muy especial. Amigos, ustedes son la familia que escogí, siempre tendrán un lugar en mi corazón A Daniel Chávez por todo el apoyo brindado durante la etapa más difícil de este proyecto, gracias por estar siempre para mi e impulsarme, gracias por tus constructivos comentarios y por siempre interesarte por mí, por tu ayuda, comprensión y eterna paciencia, por hacerme ver el lado bueno de las cosas y por enseñarme que si se sabe esperar, llegan mejores oportunidades, mil gracias. Te quiero ♥. A la Dra. Rosalía, por su exigencia, dedicación, critica y aliento durante la realización de este proyecto, por confiar en mí y despertar mi interés en algo que veía muy lejano, por hacerme creer en mí y por su apoyo incondicional, ya que sin su ayuda esto no habría sido posible. La admiro mucho, gracias por hacerme volver a creer en las personas y por hacerme ver que a veces, no todo lo puedo hacer sola. Gracias por sus elogios, regaños, palabras de aliento, pero sobre todo gracias ser partícipe de este proyecto. A la I.A Laura Cortázar, gracias por impulsarme en mis decisiones, gracias por tener siempre las palabras adecuadas en los momentos indicados. A la Dra. María Eugenia Ramírez por toda su buena vibra a pesar de estar a muchos kilómetros de distancia, gracias por siempre acordarse de mí. A la Dra. Marta, por esas revisiones que siempre terminaban en pláticas que siempre hacían amenos mis días de frustración. A todos ustedes y a todas aquellas personas que directa o indirectamente han sido parte esencial de mi vida y han contribuido en este logro, hoy quiero decirles GRACIAS, ya que la confianza que hace cinco años depositaron en mi hoy rinde frutos y me ha dado la dicha de culminar algo que veía inalcanzable. “Lo que importa verdaderamente en la vida no son los objetivos que nos marcamos, sino los caminos que seguimos para lograrlo” -Peter Bamm. Con cariño y afecto: MayraÍndice Pág. Introducción i Capítulo I. Marco Teórico 1.1. Situación actual de la carne de cerdo 1 1.2. La carne 5 1.2.1. Proceso de obtención. 7 1.2.2. Propiedades de la carne 7 1.2.3 Métodos de conservación 16 1.3. Deshidratación osmótica (DO) 19 1.3.1. Variables que afectan la deshidratación osmótica 20 1.3.2. Transferencia de masa durante la DO 23 1.4. Ultrasonido (US). 25 1.4.1. Efectos del US en la carne 26 1.5. Análisis térmico para la evaluación de cambios en la carne 27 Capítulo II. Metodología experimental 2.1 Cuadro metodológico 32 2.2. Objetivo general 33 2.3. Objetivos particulares 33 2.4. Actividades preliminares 35 2.4.1. Caracterización de la materia prima 35 2.4.2. Caracterización del baño ultrasónico 36 2.5. Objetivo 1 37 2.5.1. Parámetros osmóticos 37 2.5.2. Actividad de agua (Aw) 38 2.5.3. Coeficiente de difusión 38 2.5.4. Color 40 2.6. Objetivo 2 41 2.6.1. Pruebas por calorimetría diferencial de barrido modulada (MDSC) 41 2.7. Objetivo 3. 42 2.7.1. Punto inicial de congelación (PIC) 42 2.7.2. Capacidad de retención de agua (CRA) 42 2.7.3. Pruebas de resistencia a la deformación 42 Capítulo III. Resultados y análisis 3.1. Actividades preliminares 43 3.1.1. Caracterización de la materia prima 43 3.1.2. Caracterización del baño ultrasónico 43 3.2. Objetivo 1 45 3.2.1. Parámetros osmóticos 45 3.2.2. Actividad de agua (Aw) 48 3.2.3. Coeficiente de difusión 49 3.2.4. Color 51 3.3. Objetivo 2. 54 3.3.1. Pruebas por MDSC 54 3.4. Objetivo 3. 66 3.4.1. Punto inicial de congelación (PIC) 66 3.4.2. Capacidad de retención de agua (CRA). 68 3.4.3. Resistencia a la deformación 70 Conclusiones 73 Bibliografía 74 Índice de Tablas. Pág. Tabla 1. Principales países productores de carne de cerdo. 1 Tabla 2. Principales países exportadores e importadores de carne 2 Tabla 3. Composición química de diversos tipos de carne 9 Tabla 4 .Principales ácidos grasos de diversos tipos de carne 16 Tabla 5. Resultados de amplitud de onda (mV) 43 Tabla 6. Resultados promedio del coeficiente de difusión 49 Tabla 7.Parámetros de L* a* b* de las muestras al final de la deshidratación osmótica. 51 Tabla 8. Valor de cambio en matiz (h°) para los diferentes tratamientos. 52 Tabla 9. Cambios en la carne de cerdo a bajas temperaturas para cada tratamiento. 58 Tabla 10. Cambios en la temperatura de desnaturalización de las principales proteínas en la carne de cerdo para cada tratamiento 59 Índice de Figuras. Figura 1. Consumo per cápita de carne de cerdo en diversos países durante 2013 2 Figura 2. Producción de anual de carne en México 2012-2014 3 Figura 3. Consumo de carne en México 2012-2014 4 Figura 4. Estructura interna del músculo de la carne 5 Figura 5. Organización estructural de la fibra muscular de la carne 6 Figura 6. Corte transversal de la miofibrilla y principales partes que la componen 12 Figura 7. Esquema de una molécula de miosina 12 Figura 8. Estructura de actina 13 Figura 9. Estructura del colágeno 13 Figura 10. Estructura química del grupo hemo 14 Figura 11. Modelo de mioglobina y hemoglobina 14 Figura 12. Transformaciones de la mioglobina 15 Figura 13. Formación de cristales durante la congelación lenta (a, b y c) y congelación rápida (d). 18 Figura 14. Esquema de curva de congelación. 18 Figura 15. Proceso de difusión en la deshidratación osmótica. 19 Figura 16. Fenómeno de cavitación. 26 Figura 17. Termograma por DSC. 29 Figura 18. Temperatura en función del tiempo para MDSC y DSC 30 Figura 19. Comportamiento del flujo de calor total, reversible e irreversible 31 Figura 20. Cuadro metodológico 32 Figura 21. Contenedor de muestras realizado para la experimentación 36 Figura 22. Zonas propuestas en el Baño Cole-Parmer 36 Figura 23. Gráfico de amplitud de onda obtenido con un Osciloscopio Digital Tektonik TDS 1001C-EDU 37 Figura 24. Ventana Histograma en la escala Lab en Photoshop CS5 40 Figura 25. Determinación de cambios en un termograma por MDSC 41 Figura 26. Diagrama de caja para amplitud de onda 44 Figura 27. Cambios en la carne durante el pretratamiento con ultrasonido a) Muestra control b) US 3 min c) US 6 min d) US 9 min 44 Figura 28. Cinética de pérdida de agua (WL) y Ganancia de solutos (SG) 46 Figura 29. Reducción de Aw después de la deshidratación osmótica 48 Figura 30. Diagrama de caja para el coeficiente de difusión de agua 51 Figura 31. Color final de las muestras después de la deshidratación osmótica 52 Figura 32. Cambio de color (∆E) y croma (∆C) de las muestras al final de la deshidratación osmótica para cada tratamiento 53 Figura 33. a) Comportamiento del flujo de calor b) Comportamiento de la derivada del flujo de calor total en función de temperatura para los tratamientos con y sin ultrasonido 55 Figura 34. Comportamiento del Cp en función de temperatura para los tratamientos con y sin ultrasonido 56 Figura 35. a) Comportamiento de la derivada del flujo de calor total b) comportamiento del Cp en función de temperatura de -40 a 0°C para los tratamientos con y sin ultrasonido 57 Figura 36. a) Comportamiento del flujo de calor total b) comportamiento la derivada del flujo de calor en función de temperatura de 45 a 80 0°C para los tratamientos con y sin ultrasonido. 60 Figura 37. Diagrama de caja de flujo de calor para la zona de miosina a), actina (b) y mioglobina y colágeno (c) 64 Figura 38. Curva de congelación rápida para cada tratamiento 66 Figura 39. Curva de descongelación para cada tipo de tratamiento 67 Figura 40. Capacidad de retención de agua para cada tratamiento 68 Figura 41. Diagrama de caja de CRA para cada tipo de tratamiento 70 Figura 42. Resistencia a la penetración para cada tipo de tratamiento 71 Figura 43. Diagrama de caja de la resistencia a la penetración para cada tipo de tratamiento 72 i Introducción Actualmente la carne constituye un objeto de estudio importante debido al crecimiento de su consumo durante los últimos años. La carne de cerdo es la más producida en el mundo, al tener una participación del 40%. En México la carne de cerdo aporta el 21% de la producción a nivel nacional. La producción ha tenido una tasa de crecimiento del 2% y el consumo un incremento del 1.54%, siendo mayor que en años anteriores. Debido a tal aumento en el consumo, la producción nacional no ha sido suficiente por lo que en los últimos años se ha importado una cantidad considerable de carne, por lo que representa una gran oportunidad para la implementación de tecnologías que beneficien su conservación.Según la FAO, la carne es uno de los productos de mayor valor nutrimental, debido a la calidad de sus proteínas, denominadas “proteínas completas”, que contienen todos los aminoácidos esenciales para la nutrición, por lo que es necesario un método de conservación que permita conservar tales propiedades. Entre los métodos de conservación más empleados se encuentra la congelación, sin embargo, se ha estudiado el efecto que tiene el tiempo y la velocidad de congelación en la calidad final de la carne, por la formación de cristales. En los últimos años se ha empleado el uso de materiales inertes como nitrógeno líquido para una congelación rápida, trayendo beneficios importantes. Otro de los métodos más comunes es la reducción parcial del agua con tratamientos como el secado, pero éste provoca daños físicos y químicos debido a las altas temperaturas, por lo que se ha empleado la deshidratación osmótica como alternativa, ya que no representa un tratamiento térmico. A partir de esta tecnología, surge el interés por explicar fenómenos de transferencia de masa involucrados en esta operación unitaria, sobre todo en aspectos de difusión y cinética de deshidratación. El compuesto más empleado para este tipo de proceso es el NaCl, debido a sus características de reducción de humedad, sin embargo se han estudiado otros compuestos como CaCl2 o KCl. Un aspecto importante de la carne de cerdo son sus proteínas, que son afectadas tanto a bajas como a altas temperaturas, independientemente del método de conservación empleado. Se ha optado por estudiar el comportamiento de diversos materiales cuando son sometidos a diversas operaciones unitarias, sobre todos métodos termodinámicos, que permiten observar el efecto en la temperatura de desnaturalización de las proteínas, que tiene relación con la calidad final de la carne durante la cocción. Además de ello, el uso de ultrasonido como tratamiento y/o pretratamiento ha tenido gran impacto, ya que se han obtenido mejoras en cuanto al fenómenos de transferencia de masa y parámetros de calidad como terneza, capacidad de retención de agua y cambios en el color, por lo que ha sido estudiada ampliamente ya que representa una alternativa para mejorar las propiedades de la carne. Es por ello que resulta interesante el estudio del ultrasonido como pretratamiento en operaciones como la deshidratación osmótica, que cada vez está teniendo mayor interés. Las variables seleccionadas en este proyecto permiten evaluar la modificación estructural de la carne, cambios físicos en la misma y estudio de la cinética de transporte de masa, que permiten dar una aportación científica a la evaluación de dicho proceso. 1 Capítulo I. Marco teórico 1.1. Situación actual de la carne de cerdo El cerdo se encuentra hoy entre los animales más eficientemente productores de carne; sus características particulares, como gran precocidad y prolificidad, corto ciclo reproductivo y gran capacidad transformadora de nutrientes, lo hacen especialmente atractivo como fuente de alimentación. El valor nutritivo de la carne de cerdo la señala como uno de los alimentos más completos para satisfacer las necesidades del hombre, y su consumo podría contribuir en gran medida a mejorar la calidad de vida humana desde el punto de vista de los rendimientos físicos e intelectuales (Morales, 2010). Dentro de la situación mundial, la carne de cerdo es la más producida en el mundo, al tener una participación cercana al 40% del volumen total de cárnicos. Según datos del Consejo Mexicano de la Carne (COMECARNE), y Confederación de Productores Mexicanos (PORCIMEX), durante los últimos 3 años se ha observado un crecimiento anual de 2% aproximadamente en la producción de carne de cerdo. En la Tabla 1, puede apreciarse que China se posiciona como el principal productor de carne de cerdo en el mundo, al generar más del 47.3% del total, sin embargo, la mayor parte de su producción es para consumo interno. México por su parte se ubicó en el décimo sexto lugar, con una aportación de 1.3 %. Tabla 1. Principales países productores de carne de cerdo 2012 2013 2014 China 52,350 53,800 54,700 Unión Europea 22,630 22,450 22,450 Estados Unidos 10,554 10,508 10,785 Brasil 3,330 3,370 3,435 Rusia 2,075 2,190 2,300 Canadá 1,840 1,835 1,850 México 1,227 1,270 1,290 Fuente: COMECARNE con datos del USDA, 2015 En el caso de las exportaciones, entre 2012 y 2014, COMECARNE reporta un incremento del 3% anual. Dentro de los principales países exportadores se encuentran Estados Unidos y la Unión Europea. Por otro lado, en lo que corresponden a las importaciones los principales países son: Japón, Rusia, México y China, mismo que se puede apreciar en la Tabla 2. 2 Tabla 2. Principales países exportadores e importadores de carne de cerdo (miles ton) 2012 2013 2014 2012 2013 2014 Exportaciones Importaciones Estados Unidos 2,442 2,292 2,390 Japón 1,259 1240 1250 Unión Europea 2,226 2,200 2,200 Rusia 1,070 900 920 Canadá 1,243 1,245 1,245 México 706 785 800 Brasil 661 600 620 China 730 750 775 China 235 250 265 Corea del Sur 502 400 425 Chile 180 185 190 Hong Kong 414 400 410 México 95 110 120 Estados Unidos 363 389 390 Otros 140 110 131 Canadá 241 235 235 Fuente: COMECARNE con datos del USDA, 2015 En cuanto al consumo per cápita, de acuerdo con la Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura Alimentaria (FAO), el consumo a nivel mundial ha experimentado cambios importantes en las últimas décadas, pasando de una media de 26 kg en 1970 a 41 kg en los últimos años, sin embargo, el consumo en México aún sigue siendo menor comparado con los países asiáticos o europeos. Se puede observar en la Figura 1 el consumo per cápita de los principales países según COMECARNE en el 2013. Figura 1. Consumo per cápita de carne de cerdo en diversos países durante el 2013 Fuente: COMECARNE con datos de USDA-FAS (2015). En lo que respecta al contexto nacional; en México, la producción de carne de cerdo no se realiza con animales de raza pura, sino con la cruza de éstas; entre las principales se encuentran Duroc, Landrace, Hampshire, Cheter White, Yorkshire y Pietrain. Recomendaciones de la FAO establecen que para combatir de manera eficaz la malnutrición 40.2 40.2 27.2 21.7 20.1 16.4 13.8 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 Union Europea China Estados Unidos Rusia Japon Mexico Brasil C o n su m o p er c áp it a (k g) 3 y la subnutrición, deben suministrarse 20 g de proteína animal per cápita al día, o 7,3 kg al año. Esto puede lograrse mediante un consumo anual de 33 kg de carne, 45 kg de pescado, 60 kg de huevos o 230 kg de leche. A pesar de que la carne de cerdo proporciona mejor calidad de proteínas, en los últimos años se sigue optando por la carne de pollo, esto a causa de su precio. Como se observa en la Figura 2, según datos de COMECARNE, la carne de cerdo representa casi la tercera parte de la producción anual con respecto a la de pollo, sin embargo ha crecido considerablemente en los últimos años. Figura 2.Producción de anual de carne en México 2012-2014 Fuente: COMECARNE con datos de USDA (2015). En 2014, la carne de porcino tuvo una participación de 21% en la producción de carne en canal en el país, adjudicándose el tercer lugar, superada sólo por la carne de pollo y de bovino. En lo que al valor de producción se refiere, la carne de porcino aporta el 21.8% al total nacional. De esta manera, ocupa el cuarto lugar entre los productos cárnicos más dinámicos, superado por el crecimiento en el volumen y valor de producción de la carne de pollo o ave (3.9%), de bovino (2.2%) y ovino (5.1%). La producción de carne de cerdo en México durante los últimos años ha registrado una tasa superior al 2%, por lo que se estima que durante los años siguientes siga teniendoel mismo comportamiento. La producción de carne de porcino en canal durante el 2014 según datos de PORCIMEX, se concentra prácticamente en dos estados de la República: Jalisco y Sonora, que tienen una participación en la producción nacional de 19% y 18.2%, respectivamente. El primer estado abastece al mercado nacional, mientras que el segundo orienta su producción principalmente hacia la exportación. Entre otras entidades sobresalientes encontramos a Puebla (11%), 2012 2013 2014 Pollo 2,958 3,002 3,045 Cerdo 1,227 1,270 1,290 Bovino 1,820 1,775 1,795 0 500 1,000 1,500 2,000 2,500 3,000 3,500 P ro d u cc ió n ( m ile s to n ) 4 Guanajuato y Veracruz (9%). El 33.8% restante de la producción la conforman los demás estados del país. Por el lado del consumo se observa que éste también ha tenido un ritmo creciente, en los últimos 3 años, según datos de COMECARNE, el consumo nacional a partir del 2012 tuvo un crecimiento del 1.078% y los años siguientes ha tenido un crecimiento considerable tal como se observa en la Figura 3, sin embargo, la carne de pollo sigue siendo la más consumida. Figura 3. Consumo de carne de cerdo en México 2012-2014 Fuente: COMECARNE con datos de USDA (2015). Como se podrá notar en las Figuras 2 y 3, existe una amplia diferencia entre el consumo y la producción nacional de carne de cerdo. Esta brecha es cubierta con importaciones, misma que ha aumentado considerablemente en los últimos años, estas importaciones provienen sobre todo de Estados Unidos, Canadá y China una pequeña proporción. México es un importador neto de carne de porcino destacándose como el tercer comprador a nivel mundial, al participar con el 15.36% del total global importado durante el 2014, alcanzando niveles de importación comparables a los de China. Aunque en menor medida que otras especies ganaderas, la porcicultura muestra una estacionalidad motivada principalmente por efectos del mercado. La variación de la demanda se debe a la variación del poder adquisitivo de la población y a los hábitos de consumo de carne de cerdo derivado de las costumbres y tradiciones. La carne de porcino por lo tanto representa una gran oportunidad de negocio para los productores mexicanos, ya que el mercado interno requiere una cantidad mayor del cárnico que actualmente se produce, así como desarrollo de tecnologías para su conservación. 1,838 1,945 1,970 1,750 1,800 1,850 1,900 1,950 2,000 2012 2013 2014 C o n su m o ( m ile s to n ) 5 1.2. La carne Según la NOM-194-SSA1-2004, se entiende por carne a la estructura muscular esquelética estriada, acompañada o no de tejido conectivo, hueso y grasa, además de fibras nerviosas, vasos linfáticos y sanguíneos; provenientes de los animales para abasto, que no ha sido sometida a ningún proceso que modifique de modo irreversible sus características sensoriales y fisicoquímicas. El conocimiento de la estructura del músculo es esencial para entender las relaciones existentes entre sus propiedades y su empleo como carne. En la Figura 4 se observa su estructura; las fibras se acomodan y se mantienen por medio del tejido conectivo, que actúa como envoltura, denominado epimisio. El tejido conectivo se adentra en el músculo dando lugar a otro nivel que se denomina perimisio, el cual forma grupos de fibras llamados haces o fascículos. Por ultimo una pequeña y delgada extensión del tejido conectivo rodea a cada fibra individual, denominada endomisio (Rodríguez, 2008). El músculo está formado por fascículos, que no son más que grupos de células alargadas que reciben el nombre de fibras musculares. En el interior de cada una de estas células se encuentran las miofibrillas, estructuras alargadas que están formadas por filamentos (miofilamento fino y miofilamento grueso). Estos filamentos, que son los que hacen posible la contracción muscular, están constituidos por proteínas, sobre todo por actina y miosina (Amerling, 2001). Figura 4. Estructura interna del musculo de la carne. Fuente: http://datateca.unad.edu.co/contenidos/211614/Modulo/fig2.jpg (2015) Las fibras musculares constituyen las unidades celulares básicas del músculo (Jensen, Devine y Dikerman, 2004). Son células multinucleadas y extremadamente largas que pueden llegar a medir varios centímetros. Cada fibra está compuesta por unidades denominadas miofibrillas, las cuales finalmente se encuentran integradas por un arreglo de proteínas miofibrilares. Las miofibrillas están incluidas en el citoplasma de cada célula muscular, el cual se denomina sarcoplasma. En el interior de la fibra, las miofibrillas se encuentran envueltas longitudinalmente y cada una por separado por el retículo sarcoplasmático, el cual es un 6 complicado sistema de vesículas y túbulos que revisten por completo a cada miofibrilla (Price y Scweingert, 1976). Un arreglo entrecruzado de filamentos gruesos de miosina y delgados de actina conforman las miofibrillas. Estos arreglos se encuentran agrupados en unidades básicas secuenciales denominadas sarcómeros. Los sarcómeros conforman la unidad contráctil básica del músculo y tiene por ello una gran importancia en los procesos que determinan la dureza final de la carne. Los sarcómeros se encuentran separados unos de otros por una estructura denominada línea Z. Adheridos perpendicularmente a la línea Z se encuentran filamentos delgados principalmente constituidos por actina. Dado que el sarcómero está delimitado por dos líneas Z, se tienen dos grupos de filamentos de actina, también denominados bandas I, dirigidos desde los extremos hacia el centro del sarcómero. En la parte central del sarcómero, entre las bandas I opuestas, se ubican unos filamentos gruesos formados por miosina que integran la llamada banda A. Los extremos de estos filamentos gruesos se enlazan a los extremos libres de las fibras de actina de las bandas I. En la parte central de la banda A existe una región denominada zona H, la cual corresponde a la parte de la banda A que no está ligada a las bandas I cuando el sarcómero está relajado. La zona H se encuentra a su vez dividida por una banda oscura denominada línea M, la cual tiene una función de soporte (Jensen, Devine y Dikerman, 2004). En la Figura 5 se detalla la organización estructural del músculo y del sarcómero. Figura 5. Organización estructural de la fibra muscular de la carne. Fuente: http://datateca.unad.edu.co/contenidos/211614/Modulo/fig_3.JPG (2015) La organización estructural del sarcómero y los mecanismos de la contracción son muy importantes para entender la textura final, pues estos se intercalan con los procesos fisicoquímicos, enzimáticos y metabólicos propios de los cambios postmortem que transforman el músculo en carne destinada al consumo (Taylor et al., 1995). 7 1.2.1. Proceso de obtención El sacrificio y el despiece son el conjunto de las operaciones que transforman al animal vivo en carne, para la comercialización o la transformación industrial. El sacrificio incluye un número de operaciones que comienzan con la preparación del animal (reposo, dieta, control sanitario y lavado), seguido de la matanza, desangrado depilado, evisceración y conservación (Escobar, 1994). La musculatura de los animales sufre, tras el sacrificio y hasta su consumo, una serie de transformaciones fundamentales de carácter fisicoquímico, bioquímico y estructural. Dichas transformaciones incluyen una primera fase de instauración del rigor mortis, y otra de maduración posterior de duración muy variable. El desarrollo post mortem de ambos procesos va a determinar en gran medida la calidad de la carne (Rodríguez, 2008). El rigor mortis es un proceso post mortem el cual los músculos de los animales se contraen al momento de la expiración, ya que se establecen las uniones actina- miosina a nivel miofibrilary los músculos pierden su capacidad de relajarse; tras el sacrificio del animal cesa la circulación sanguínea lo que conlleva una serie de cambios: cesa el aporte de oxígeno y cesa la regulación hormonal (disminuye la temperatura del canal). Ante este déficit de oxigeno comienza la glucolisis anaerobia, disminuyendo la formación de ATP produciendo ácido láctico. El ácido láctico produce una disminución del pH hasta 5.4-5.6 (Gil, 2001). Esta reducción en el pH se debe a la acumulación de ácido láctico en el músculo, en caso que el pH a las 24 horas sea superior a 6.2 indica que el animal estuvo estresado, lesionado o enfermo antes del sacrificio (González et.al., 2004). 1.2.2. Propiedades de la carne Según la FAO, la carne es uno de los productos de origen animal de mayor valor. Posee proteínas y aminoácidos, minerales, grasas y ácidos grasos, vitaminas y otros componentes bioactivos, así como pequeñas cantidades de carbohidratos. Dentro de las principales propiedades físicas y sensoriales de la carne son: Sabor: Depende tanto de la composición química de la carne, como de la alimentación que ha recibido el animal durante su vida. Cambios en el sabor se deben a la degradación química de ciertos componentes como lípidos y proteínas. Olor: La carne cruda posee solamente un aroma débil que depende principalmente de los ácidos grasos y numerosos compuestos con aromas variados y muy intensos. El sabor y el aroma de la carne de cerdo pueden cambiar a consecuencia de la duración y las condiciones de almacenamiento (Forrest et. al., 1979). Color: La importancia del atractivo color de la carne magra es destacado por Barbut (2001), quien indica que el impulso de compra es debido a la apariencia atractiva de la carne. A menudo el consumidor usa el color como un indicador del sabor, de la jugosidad, terneza y frescura durante la compra (Naumann, McBee y Brady, 1957). 8 El color de la carne depende de la cantidad y estado físico de los pigmentos musculares (principalmente la mioglobina, proteína ligada a la membrana externa de las mitocondrias y del retículo sarcoplásmico) y de la estructura del músculo (que adsorba o refleje más o menos la luz y permita más o menos entrar al oxigeno). El observador percibe el color de la carne como impresión global de la síntesis de tres parámetros que dependen a su vez de diversos factores (biológicos, bioquímicos o físico-químicos: 1) Saturación: relacionado a la cantidad de pigmentos, 2) Matiz: que tiene relación con estado químico del pigmento 3) Claridad: que tiene que ver con el estado físico de la carne, ligado al pH último, a la estructura de las proteínas y a la cinética de instauración del rigor mortis. Diversos autores han analizado las características visuales de los productos cárnicos, por ejemplo el grado de marmoleo y el color de los filetes (Gerrard, Gao y Tan, 1996), además, diferentes métodos y diversas escalas de color como RGB y L*a*b* pueden ser empleadas debido a su facilidad, esta última evaluada por Yam y Papadakis (2004), así como Falade, Igbeka y Ayanwuyi (2007), para diversos alimentos. La concentración de mioglobina es, sin embargo, el factor principal de determinación del color rojo de la carne. Asimismo, influye sobre el color de una pieza de carne la proporción de grasa y tejido conectivo que posea y la existencia de otros pigmentos como la catalasa, citocromos, flavinas, vitamina B12, etc. (Taylor y Clydesdale, 1987; Fox, 1980). El color normal de la carne de cerdo fluctúa entre un rojo y rosado. La uniformidad en el color es usualmente apreciable en músculos individuales; cuando apreciamos los músculos en conjunto, el color puede variar considerablemente. Esta variación en el color puede atribuirse, en el caso del más oscuro a un aumento de oximioglobina por edad avanzada del animal o por músculo o grupo de músculos con mayor actividad fisiológica, penetración de oxígeno en la superficie, contaminación bacteriana o deshidratación en la superficie (Meléndez, 2014). Mientras que el color rosa pálido o casi gris se puede presentar como consecuencia de una rápida conversión de glucógeno muscular a ácido láctico, esta propiedad se genera por los pigmentos (absorben ciertas longitudes de luz y reflejan otras) los cuales pueden ser hemoglobina (sangre) o mioglobina (músculo) (Illescas, Ferrer y Bracho, 2012). Textura: La textura aparece como una percepción psicoquímica compleja y multidimensional. Se puede definir como la unión de las propiedades reológicas y de la estructura de un producto alimenticio perceptible por los receptores mecánicos, táctiles y eventualmente visuales y auditivos, condicionando la apetencia de un alimento. En la carne cocida, Dransfield, et al. (1984), señalan que la textura lleva consigo dos componentes principales: terneza y firmeza. La terneza es la cualidad de la carne de dejarse cortar y masticar (con mayor o menor facilidad) antes de la deglución, estando directamente ligada a la resistencia mecánica del producto consumible. El caso contrario sería la dureza, definida como la propiedad de la textura manifestada por una alta y persistente resistencia a la rotura en la masticación (Jowitt, 1979). La carne puede considerarse como la suma de tres componentes: facilidad de penetración de los dientes en la carne al inicio de la masticación, facilidad de fragmentación y cantidad de residuo que queda en la boca concluida la masticación. La firmeza se define 9 como la propiedad de la textura manifestada por una alta resistencia a la deformación por aplicación de una fuerza, siendo registrada tras los primeros mordiscos. Dos fracciones proteicas determinan la terneza, de una parte las proteínas del tejido conectivo y de otra las proteínas miofibrilares. Las proteínas del tejido conectivo que envuelve el músculo constituyen un elemento negativo que limita la terneza. Este tejido, formado principalmente por colágeno, es relativamente estable postmortem y poco sensible a los tratamientos tecnológicos. La cantidad de colágeno, principal componente del tejido conjuntivo, determina la llamada dureza de base, posee una alta fuerza de tensión y propiedades físicas (Bailey y Light, 1989), que hacen que a una edad dada sea determinante su influencia, de forma que cuanto más importante es esta fracción más dura es la carne. La segunda fracción proteica implicada son las proteínas miofibrilares cuyas transformaciones postmortem son responsables de las principales variaciones de terneza registradas, existiendo relación entre terneza y el grado de contracción de miofibrillas (músculos relajados son más tiernos que los contraídos). Locker (1960), Marsh y Leet (1966) y Herring et al. (1967), demostraron que la dureza de la carne está relacionada con la contracción de las fibras musculares la cantidad y solubilidad de tejido conectivo, el acortamiento del sarcómero durante el desarrollo rigor, y proteólisis postmortem, mismo que fue comprobado por Koohmaraie y Geesink (2006). Algunos autores ha evaluado la terneza de la carne con el uso de diversos tipos de sales, como cloruro de calcio (Gerelt et al., 2002), así como el uso de ultrasonido y NaCl (Siró et al., 2009). En lo que respecta a la química de la carne, en la Tabla 3 se observa la composición química de diversos tipos. Tabla 3. Composición química de diversos tipos de carne. Animal Agua (%) Proteína (%) Grasa (%) Cenizas (%) Aporte energético (kJ) Cerdo 75.1 22.8 1.2 1.0 472 Vacuno 75.0 22.3 1.8 1.2 116 Pollo 75.0 22.8 0.9 1.2 105 Fuente: FAO (2014) Según la FAO, desde el punto de vista nutrimental, la importancia de la carne deriva de sus proteínas de alta calidad, que contienen todos los aminoácidos esenciales, así como de sus minerales y vitaminas de elevada biodisponibilidad. Dentro de los componentesquímicos se encuentran las siguientes: a) Agua: Es el mayor constituyente de la carne, aproximadamente de 62 a 78% del tejido muscular. La mayor parte del agua de composición se encuentra en el interior de las células, separadas por la membrana celular y sometida a cambios iónicos por procesos de osmosis. Podemos decir que la cantidad de grasa y proteínas influye en las propiedades físicas, ya 10 que químicamente se encuentran enlazados formando una red que impide el libre movimiento del agua con otro componente (Esperanza, 2013). El agua en la carne se encuentra presente en 2 formas, principalmente: de constitución, que se localiza en el interior de las proteínas y está fuertemente ligada a los grupos específicos o ubicada en regiones intersticiales, y agua de interfase, que está fuertemente retenida y cuya presión de vapor es menor que la del agua libre. El agua ligada representa del 4-5% en el músculo, aquí las moléculas del agua (polares) reaccionan con proteínas por lo que es difícil de eliminar, ya que depende de la organización espacial de las proteínas miofibrilares, es decir, de la disposición de los filamentos de actina y misiona; el agua libre se encuentra presente debido a sus enlaces débiles y dadas las cargas en las proteínas, pueden generar puentes de hidrogeno, que pueden ser eliminados mediante diversos métodos (Pearce et al., 2011). La medición de la actividad acuosa (Aw) es una propiedad muy importante en el control de alimentos. La Aw establece el grado de interacción del agua con los demás constituyentes y es una medida indirecta de la disponibilidad del agua para llevar a cabo diferentes reacciones a las que están sujetas las de deterioro. El nivel de Aw alto o bajo ayuda a establecer las cualidades nutrimentales, microbianas, aromáticas, de textura y apariencia productos alimenticios (Bolaños, Lutz y Herrera, 2003). El valor de Aw para la carne es de aproximadamente 0.98, sin embargo, puede ser disminuida por diferentes tipos de interacciones del agua, tales como con solutos disueltos, formación de puentes de hidrogeno con materiales hidrofílicos, fuerzas capilares etc., así como tratamientos térmicos. Otro aspecto relevante es la capacidad de retención de agua (CRA) que es la habilidad de retener el agua durante la aplicación de fuerzas externas; de ésta depende la interacción agua-proteína, por lo tanto características como jugosidad, color y textura son afectadas. La CRA es causada en primer lugar por una inmovilización de agua de los tejidos en el sistema miofibrilar (Hamm, 1986); específicamente, el agua es mantenida o atrapada en el músculo o producto muscular por una acción capilar, que es generada por pequeños poros o capilares. Teniendo en cuenta además, que las miofibrillas ocupan aproximadamente el 70% del volumen total de la masa molecular; significa que una notable parte del agua inmovilizada debe estar localizada entre los filamentos gruesos y finos de las miofibrillas (Offer y Trinick, 1983); las proteínas tales como la miosina y actina son responsables de dicha capacidad (Morrisey, Mulvihill y Neill, 1987). Los tratamientos térmicos y la congelación también tienen un efecto importante sobre la CRA, ya que provocan la desnaturalización y agregación de las proteínas, así como la ruptura de células musculares. En el caso de la congelación, la formación de hielo conlleva una rotura del tejido muscular y una redistribución del agua. Estas modificaciones producen el descenso en la CRA que se manifiesta después de la descongelación por la formación de exudado, lo que ocasiona una pérdida de peso considerable y textura reseca (Fennema, 2010). La liberación de gotas (pérdidas por goteo) desde el músculo parece ser dependiente del estado de contracción (sarcómeros contraídos, fibrillas o fibras) después de la instauración del rigor y es debido a la reducción del espacio filamental (Honikel, Kim y Hamm, 1986), o quizá también a cambios en la membrana celular 11 y cambios en la permeabilidad (Currie y Wolfe, 1983) así como de fuerzas osmóticas debidos a las fuerzas electrostáticas (Bombrun et.al., 2015). La causa más importante para ocasionar un aumento de la CRA durante la maduración, sería el incremento del pH durante el proceso. Por otra parte algunos autores también señalan como causa del incremento de la CRA, la desintegración de las líneas Z por la acción de proteasas (Hamm, 1986) y por cambios en la permeabilidad de las membranas, con una cierta difusión y redistribución iónica, que da como resultado la sustitución de algunos iones divalentes y el debilitamiento de las fuerzas que aproximan las cadenas proteicas. Debido a la importancia de aumentar la CRA, ha sido objeto de estudio para otros autores tales como Farouk, et al. (2012) en carne de bovino, Dolata, et al. (2004); Hullberg y Lundström (2004), en carne de cerdo; Gerelt et al. (2002) en deshidratación osmótica de Longissimuss dorsi con cloruro de calcio, Graiver, et al. (2006) con NaCl a diversas concentraciones y Siró, et al. (2009) con el uso de ultrasonido. b) Proteína: Cuando una proteína tiene todos los aminoácidos esenciales en cantidad suficiente, y en la proporción adecuada, se denominan proteínas “completas” o “de buena calidad” y éstas se encuentran en la carne (Monge, 2005). Las proteínas en la carne son útiles debido a que por medio de ellas se sintetizan aminoácidos, que participan en múltiples funciones en nuestro organismo (Badui, 2006). En la carne, las proteínas principales son la actina y la miosina, que corresponden a las proteínas del aparato contráctil, la mioglobina que se encuentra en las proteínas sarcoplásmicas y el colágeno que es el responsable de la solubilidad y la digestibilidad de la carne, el cual es una proteína del tejido conectivo (Rodríguez, 2008); dichas proteínas son susceptibles a cambios en la temperatura durante diversos procesos. La desnaturalización de las proteínas implica un cambio de su estructura ya que se alteran las fuerzas de dispersión, los enlaces de hidrógeno y los enlaces iónicos (Acuña, 2006). La oxidación de proteínas en la carne puede llevar a la disminución de la calidad de ésta debido a la reducción de la terneza, jugosidad, sabor y decoloración (Rowe, et al., 2004). Estos cambios se deben en parte a la formación de agregados de proteínas a través de enlaces intermoleculares no covalentes y covalentes. Otros cambios comunes en las proteínas incluyen el aumento de la hidrofobicidad de la superficie, la fragmentación de proteínas que conducen a la formación de carbonilos proteicos y modificación de la carga de las proteínas a pH más bajo (Bombrun et.al., 2015). Las proteínas desempeñan un papel importante en la calidad de la carne, sobre todo, en características como capacidad de hidratación y ligazón del agua, emulsificación de la grasa, propiedades de gelificación, cohesión y viscosidad. En lo que respecta a las proteínas del aparato contráctil, también llamadas proteínas miofibrilares se encuentran la misiona y la actina que son las principales proteínas estructurales, por lo que el efecto que tiene el calor sobre estas influye principalmente en la textura resultante en la cocción (Bruton et al., 2006). 12 En la Figura 6 puede observarse que tanto la actina como la miosina confieren a la miofibrilla el aspecto estriado, debido a sus filamentos paralelos y alternativamente espesos y delgados. Figura 6. Corte transversal de la miofibrilla y principales partes que la componen. Fuente: http://mariadoloresbioygeoiesarroyo.blogspot.mx/2011/05/el-tejido-muscular.html (2015). La miosina constituye aproximadamente el 45% del total de proteínas miofibrilares y comparada con la actina es la menos estable al calor, pues se desnaturaliza generalmente en un intervalo detemperatura de 40 a 60°C (Arrondo y Goñi, 1998). La miosina es una proteina con un peso molecular de 500,000 Da, esta formada por 6 subunidades; 4 cadenas delgadas y 2 cadenas gruesas enrolladas entre si, cuya representacion esta en la Figura 7. Esta proteina tiene una conformacion α-helice lo cual le permite su libre plegamiento, además de una zona con grupos sulfidrilo (–SH) que es la parte que actúa con la actina. Está conformada por la secuencia de aminoacidos Gly - Glu - Ser - Ala - Gly - Lys – Thr que son aminoacidos ácidos y básicos, lo que la convierte en una molécula muy cargada (teniendo un punto isoeléctrico de 5.4, presentando una afinidad por los iones, sobre todo calcio y magnesio (Nelson y Cox, 2010). Figura 7. Esquema de una molécula de miosina. Fuente: Teijón y Garrido, 2006. 13 La actina constituye del 20 al 25% de las proteínas miofibrilares, es una proteína de estructura helicoidal con polaridad en su estructura, rica en prolina que debido a su grupo terminal amino (≡N-H), contribuye al plegamiento de las cadenas. Tiene una estructura globular esferica, debida a la union de los monomeros de actina G, que en conjunto forman la actina F como se muestra en la Figura 8; la actina G que es la parte gobular constituye la forma monomérica de la actina, mientras que la actina F es la parte filamentosa (Teijón y Garrido, 2006), que genera una estructura de hélice. Su punto isoeléctrico es de aproximandamente 4.7 (Aberle y Forrest, 2001) y es mas estable al calor; su desnaturalización comienza desde los 71°C hasta los 83°C (Cheftel, Cheftel y Pierre, 1992). Figura 8. Estructura de actina Fuente: http://www.my-personaltrainer.it/fisiologia/miosina-actina.html (2014) Dentro de las proteínas del tejido conectivo, el colágeno es el constituyente principal. Está formado principalmente por glicina (33%), seguido de prolina, alanina e histidina; sin embargo, un aumento en la proporción de dichos aminoácidos aumenta la resistencia del colágeno. La unidad esencial del colágeno está constituida por tres cadenas de polipéptidos que aparecen entralazadas formando una triple hélice, constituyendo una unidad macromolecular denominada tropocolágeno, tal como se observa en la Figura 9. Figura 9. Estructura del colágeno. Fuente: http://www.biorom.uma.es/contenido/av_biomo/FigT3/Fig3_15.gif (2015) 14 Las moléculas de colágeno se agrupan de manera específica y ordenada para formar fibras que son los componentes de la membrana protectora del músculo (epimisio, perimisio y endomisio). Su desnaturalización comienza alrededor de los 64°C hasta los 70°C; sin embargo factores como especie, raza y edad del animal puede provocar variaciones en la estructura (Aberle y Forrest, 2001). Se ha mencionado que la Mioglobina (Mb) es el compuesto principal que confiere el color, es una proteína sarcoplásmica globular de estructura terciaria y de bajo peso molecular que presenta una afinidad por el oxígeno y está formada de una porción no proteica llamada anillo o grupo hemo, representado en la Figura 10. El grupo hemo del pigmento tiene especial interés debido a que el color de la carne depende, del estado químico del hierro (estado de oxidación) dentro del núcleo, su desnaturalización completa ocurre alrededor de los 70°C (Nair et al., 2014). Figura 10. Estructura química del grupo hemo Fuente: Teijón y Garrido, 2006. Además de la mioglobina, la hemoglobina confiere propiedades del color, está formada por dos cadenas α-hélice y dos β-laminar. Mientras que la mioglobina puede oxidarse en presencia de una molécula de oxígeno, la molécula de hemoglobina lo hace con cuatro, por lo que la mioglobina es más susceptible, el modelo de cada una de ellas se observa en la Figura 11. Figura 11. Modelo de mioglobina y hemoglobina Fuente: http://www.my-personaltrainer.it/fisiologia/proteinas.html (2014) 15 Hay que destacar que la concentración de estos pigmentos nos va a dar diferentes coloraciones en la carne, además de que son afectados por especie, sexo, musculo y actividad física de cada animal. Cabe mencionar que la reacción de pigmentos con compuestos va a traer consigo una coloración diferente, ocasionado por la destrucción de la mioglobina por el desarrollo bacteriano (color verde) o la exposición al aire libre: (oscurecimiento por oxidación); además de que una alta proporción de agua libre entre células del músculo (agua extracelular) incrementa la reflexión de la luz cambiando el color (Badui, 2006).La cantidad de esta proteína y la conversión ya sea por oxidación (desoximioglobina, metamioglobina y sulfomioglobina), oxigenación (oximioglobina) o reducción (colemioglobina) son las responsables de cambios en el color, tal como se observa en la Figura 12. Figura 12. Transformaciones de la mioglobina. Fuente: Badui, 2006 c) Lípidos: Los Lípidos son los componentes de los depósitos grasos distribuidos en tejidos, células y estructuras tisulares del músculo, lo que se denomina marmoleo (Cannata et al., 2010). La cantidad de grasa va a depender de la relación grasa-agua y su composición de ácidos grasos, varía en función de la especie, localización anatómica y del tejido. De acuerdo a su localización existen dos tipos de grasa: las de depósito y las intercaladas en las fibras musculares. 16 El contenido lipídico de los músculos es muy variable y se compone fundamentalmente de lípidos neutros y fosfolípidos (Fennema, 2010). En la Tabla 4 se enuncian los principales ácidos grasos presentes en la carne de cerdo, sin embargo, y debido a su estructura e importancia, los de mayor interés en son el palmítico y oleico (Badui, 2006). Tabla 4. Principales Ácidos grasos en diversos tipos de carne. Tipo de lípido Res Oveja Cerdo Ave % Saturados 50% 47% 39% 30% % Insaturados 42% 41% 45% 45% % polinsaturados 4% 8% 1% 21% Pto. Fusión ( general) 40-50 °C 44-51°C 28-48°C 31-33°C Ácidos Grasos Palmítico 29% 25% 28% - Esteárico 20% 25% 13% - Oleico 42% 39% 46% - Linoleico 2% 5% 12% - Fuente: Badui, 2006 Una de las funciones metabólicas de las grasas es la de servir como vehículo a las vitaminas liposolubles presentes (A, D, E, K). Los lípidos presentes en la carne de cerdo, en cantidad no mayor de 3-5%, proporcionan características de jugosidad, terneza y buen sabor, además de aportar textura y palatabilidad d) Cenizas: Dentro de los minerales que se encuentran en la carne son el hierro, el magnesio, fosforo, potasio y zinc, cuyas funciones principales son formar iones disueltos y constituir compuestos esenciales. El equilibrio de iones y minerales regula la actividad de muchas enzimas, conserva el equilibrio de ácidos, bases, presión osmótica y facilita el transporte de diferentes compuestos, dentro de las vitaminas encontramos la tiamina (B1), riboflavina (B2), niacina (B3), cianocobalamina (B12), pirodixina (B6) (Gil, 2010). 1.2.3. Métodos de conservación de carne Algunos de los métodos de conservación de los productos cárnicos son los siguientes: a) Salado: La salazón consiste en la adición de sal común a la carne o a otros productos de origen animal. Puede llevarse a cabo por inmersión o por contacto directo con capas de sal. Cuando la carne se encuentra inmersa en la salmuera, la penetración de sales está relacionada con el equilibrio entre la concentración en el interior y la concentración de la solución de salmuera (Aliño et al., 2010). Como consecuencia de ello, producen una disminución de la cantidad de agua disponible para las reacciones de degradación por las enzimas y los microorganismos (Cárcel et al., 2007). Esta falta de agua provocala reducción o incluso la interrupción total de los procesos vitales, es decir, a concentraciones altas de sal, penetran los iones, alterando el metabolismo celular, por lo que es de suponer que también perjudican a las células bacterianas por este efecto. b) Curado: Por curado se entiende la adición de agentes curantes (nitratos y nitritos) a la carne con el fin de incrementar su capacidad de conservación, así como para conferirle un 17 color típico y un aroma característico. Durante el proceso de curado también se le añade, en menor o mayor concentración, sal común. El nitrato como tal no posee ningún efecto inhibidor de los microorganismos, pues es una fuente de oxígeno para estos, por lo cual el nitrato se reduce a nitrito. El curado mediante nitrito exige, por tanto, que se desarrollen unos determinados tipos de microorganismos específicos (nitratos reductores) (Escobar, 1994). En lo que se refiere a los métodos físicos, la congelación o refrigeración son los más empleados para productos de origen animal por su facilidad de manipulación, el empleo del frio permite mantener sus cualidades en cuanto a color, sabor, apariencia, textura; la degradación es más lenta o casi nula ya que impide el desarrollo de microorganismos y bacterias. c) Congelación La congelación es la forma más segura y eficiente para mantener la calidad de la carne en almacenamientos a largo plazo (Lee et al., 2008). La congelación se puede llevar a cabo a través de diversos métodos; los más comunes en la industria incluyen congelación por aire, placas de congelación y líquidos criogénicos ya sea por inmersión o spray (Fabre et al., 2014). El proceso de congelación inicia con la transformación en cristales de hielo del líquido que rodea las células, tal como se observa en la Figura 13a, como consecuencia de ello se produce una difusión de agua del interior al exterior siendo más intenso a temperaturas entre -4 y -10°C. El agua libre que rodea las células del alimento es la primera que cristaliza en la congelación lenta; en cuanto se destruye el equilibrio, el agua en el interior de las células del alimento empieza a salir de éstas, destruyendo la pared celular, como se aprecia en la Figura 13b. Cuanto más largo es el tiempo de congelación, mayor es la destrucción de las células. Finalmente, los cristales de hielo se hacen tan grandes que las células se rompen completamente, como se observa en la Figura 13c, debido a la formación de cristales de hielo irregulares y relativamente grandes, lo que provoca daños de las células causando un deterioro estructural que se ve reflejado en la pérdida de agua cuando el producto se descongela o se recalienta (Zhu et al., 2004; Fellows, 2000). Debido a las razones explicadas anteriormente, el proceso de congelación debe transcurrir lo más rápidamente posible para alcanzar una calidad elevada del producto. Utilizando la congelación criogénica que se logra a temperaturas más bajas y tiempos menores, la cristalización se desarrolla también en el plasma celular, el agua dentro y fuera de las células se congela a la misma velocidad, asegurando que la célula permanece intacta, tal como aparece en la Figura 13d, por lo que el alimento conserva su frescor, sabor y textura como si no hubiera sido congelado. 18 Figura 13 .Formación de cristales durante la congelación lenta (a, b y c) y congelación rápida (d) Fuente: http://es.scribd.com/doc/143054773/Guia-Basica-Del-Frigorista#scribd (2014). La congelación criogénica es el sistema idóneo para conservar un producto. Mediante la utilización de nitrógeno líquido ya sea de manera directa (imersión) o indirecta (en placas), se consiguen grandes velocidades de enfriamiento y debido a su bajo punto de ebullición, que a presión atmosférica es de –196 ºC y a su elevada potencia frigorífica de 75 kcal/L, se obtiene una refrigeración continua y completa en pocos minutos, sin dañar la estructura celular del producto. Además, su condición de gas químicamente inerte no produce alteraciones bacteriológicas en los productos alimenticios. (Barreiro y Sandoval, 2006). El proceso de congelación está formado por dos etapas: la precongelación, que es el período desde el comienzo del enfriamiento hasta que comienza a cristalizarse el agua y la congelación, que es el período durante el cual la temperatura del material es más o menos constante (cambio de fase) si la sustancia es pura. Antes de iniciar la congelación puede existir un ligero subenfriamiento seguido de un incremento de temperatura hasta el punto de fusión o congelación del material; luego que los materiales se congelan por completo sigue un descenso de temperatura aproximadamente lineal, causado por el retiro de calor sensible del producto sólido, fase que concluye cuando el material alcanza la temperatura del medio refrigerante tal como se observa en la Figura 14 (Orrego, 2003). Figura 14. Esquema de curva de congelación Fuente: Orrego, 2003. a) b) c) d) 19 Mientras que el agua pura tiene un único punto inicial de congelación, los productos alimenticios (ya que tienen entre 10 y 30% de sustancias distintas de agua) tienen un intervalo de éste debido a que en el agua se encuentran componentes diluidos lo que reduce su punto de congelación, ya que el calor latente se libera gradualmente (James et. al., 2005; Mannapperuma y Singh, 1998). En la carne de cerdo, el punto inicial de congelación se encuentra entre -1.5 y -1.8 °C (Moreno, 2006). 1.3. Deshidratación osmótica Consiste en la remoción de una parte del agua contenida en los alimentos sólidos mediante su inmersión en soluciones hipertónicas (concentradas), que poseen una mayor presión osmótica y menor actividad de agua que el alimento en cuestión (Rastogi et al., 2002). Como se observa en la Figura 15, la deshidratación osmótica es un proceso de transferencia simultánea de agua y solutos que conduce a mayor concentración de solutos y menor contenido de agua en el alimento, lográndose determinada relación pérdida de agua/ganancia de solutos que depende de las condiciones del proceso. Figura 15. Proceso de difusión en la deshidratación osmótica Fuente: http://1.bp.blogspot.com/- MoUhqwbr52M/UIwQZOF1BYI/AAAAAAAAAwc/Dn4k9kApZIs/s320/brining-diagram.jpg (2015). Además se produce modificaciones estructurales en los tejidos que, por lo general, son ventajosas para el producto deshidratado final. La fuerza impulsora para la difusión del agua desde los tejidos a la solución es la diferencia de presión osmótica entre el alimento y la solución, debido al gradiente de concentraciones. Esta operación unitaria se rige bajo fenómenos de transferencia difusional debido al fenómeno de osmosis que permite la movilidad (Betancourt, 2003), se dice que la DO es una difusión pasiva, que se caracteriza por el paso de agua desde una zona de menor a una zona de mayor concentración. La ósmosis es el desplazamiento de moléculas de solvente a través de una membrana semipermeable desde una región hacia otra del mismo soluto, por acción de las diferencias de presión osmótica y de concentración que poseen estas soluciones, El 20 proceso finaliza cuando se igualan los potenciales químicos en ambos lados, dependiendo principalmente de la reducción de la actividad de agua (aw). Por lo tanto ciertos materiales, incluidas muchas membranas de sistemas biológicos actúan como barreras semipermeables (Welti, Velez y Barbosa, 2010). La deshidratación osmótica se basa en la ósmosis para remover agua del alimento. Esta remoción se da generalmente por difusión. La difusión de agua u otros fluidoso gases a través de sistemas no biológicos homogéneos es fácil de describir y modelar matemáticamente. La complejidad se da cuando el medio en el que el agua se difunde es muy heterogéneo y presenta cambios durante el desarrollo de la difusión. Los alimentos son sistemas biológicos heterogéneos, por lo tanto, el curso que sigue el agua durante la difusión y la velocidad de deshidratación son muy variables y dependen de la constitución tisular y de la disposición celular de la estructura del alimento . Se propone que el frente de deshidratación se desplaza durante el proceso hacia el centro del alimento. El paso de este frente a través del alimento provoca una desintegración celular en la región deshidratada. El agua es transportada a través de tres regiones definidas y con características propias y distintas. El agua se difunde desde el centro del material hacia el frente de deshidratación, luego hay difusión a través del frente y, finalmente, difusión de agua en la sección del material tratado osmóticamente En principio, el agua se difunde de la capa exterior de la muestra hacia el medio osmótico. Esto genera una presión osmótica en la superficie del alimento, la cual tiende hacia un valor crítico. Una vez alcanzado dicho valor, la membrana celular se rompe y la célula se encoge. Como consecuencia, hay una reducción desmesurada en la proporción de células intactas. Al proseguir con la deshidratación osmótica, el frente de deshidratación ∆x continúa desplazándose hacia el centro del alimento. La característica principal de este frente es que el proceso de deshidratación que se da ahí es muy rápido debido a la presión osmótica ejercida por la concentración de la solución 1.3.1. Variables que afectan la deshidratación osmótica a) Concentración de la solución. Tanto la transferencia de masa por difusión como los gradientes de presión osmótica, están relacionados directamente con la concentración de solutos en la solución osmótica. Además, ésta, tiene una influencia considerable en la viscosidad de la solución y, por ende, en el movimiento que pueden tener las moléculas durante el proceso (Barat, Fito y Chirald, 2001). . b) Relación de solución / alimento. La relación solución osmótica/alimento expresa la cantidad de solución requerida por unidad de peso del alimento a procesar. Este factor es importante ya que, a medida que transcurre la deshidratación osmótica y los solutos van penetrando al alimento, la solución va disminuyendo su concentración de solutos, lo cual reduce de modo gradual el gradiente osmótico y así, la velocidad de transferencia de masa. Cuando se utilizan grandes volúmenes de solución en relación con la masa del producto, el 21 gradiente de concentración no disminuye notablemente, por lo que la velocidad de transferencia del soluto no se ve afectada, sin embargo esto puede incrementar los costos del proceso. En la práctica es común utilizar relaciones masa de solución osmótica: masa de producto entre 3:1 a 5:1 para diversos alimentos, en tejidos animales generalmente se utiliza 4:1 (Suca, 2007). c) Agitación. La agitación es una operación física que hace más uniforme al fluido, generando una distribución homogénea de las propiedades del sistema. En la deshidratación osmótica, normalmente se lleva a cabo una agitación de la solución para reducir y evitar la resistencia externa del sistema osmótico y para incrementar la pérdida de agua (Campos y Flores, 2012), esto se logra creando un flujo turbulento que provoca una difusión mayor, ya que el equilibrio se rompe, por lo que la pérdida de humedad se ve beneficiada. d) Tiempo de inmersión. El tiempo de inmersión (hasta alcanzar el equilibrio) es una variable importante para definir la cantidad de agua removida y/o la cantidad de sólidos ganados. Se ha observado que la velocidad de remoción de agua es mayor que la de penetración del soluto, lo cual puede aprovecharse cuando se desea remover agua sin adicionar grandes cantidades de soluto en el producto. El tiempo requerido para obtener un nivel de concentración de sólidos específico en un alimento durante la deshidratación osmótica varía mucho, depende de muchos factores y puede ir de 1 a 18 horas. La mayor tasa de transferencia de agua, desde el tejido hacia el medio, ocurre hasta las 2 a 3 primeras horas de inmersión, después, la diferencia en el contenido de agua entre el producto y la solución osmótica tiende a cero, hasta que eventualmente alcanza un estado de equilibrio dinámico de transferencia molecular (Rahman y Perera, 1996), por lo que la transferencia de masa no se favorece, es por ello que para tejidos animales se emplean tiempos de 3 a 4 horas, para asegurar la mayor pérdida de humedad. e) Tipos de solutos osmóticos y otros aditivos: La correcta elección del soluto osmótico depende de diversos factores, como es el costo del soluto y el grado con que deprimen la actividad de agua, así como su grado de solubilidad del soluto en agua. Dado su capacidad de reducción de actividad de agua, fijación de color, pH y peso molecular, las sales más utilizadas en la deshidratación osmótica de carne de cerdo son el cloruro de calcio, cloruro de sodio y cloruro de potasio. Cloruro de sodio (NaCl): El cloruro de sodio es un compuesto iónico formado por un catión sodio (Na+) y un anión cloruro (Cl-), con un peso molecular de 58.4 g/mol. El cloruro de sodio como la mayoría de las sales iónicas confiere propiedades coligativas a sus disoluciones, es decir es capaz de variar la presión de vapor de la disolución, elevar el punto de ebullición y descender el punto de congelación según su concentración molar (Belitz y Grosch, 1997). Una de las funciones del NaCl en los productos cárnicos es extraer proteínas miofibrilares. La extracción y solubilización de estas proteínas musculares contribuye a la unión de la estructura de la carne, emulsificación de grasa, y la capacidad de retención de agua, y por lo tanto, mejora 22 la calidad y textura (Sofos, 1986). La concentración de NaCl afecta la dirección de transporte de la humedad, así como el estado de equilibrio (Cheng y Sun, 2008). Un bajo contenido de NaCl en la carne aumenta la capacidad de retención de agua (CRA) (Nguyen et al., 2010), un fenómeno conocido como ''salting-in”' que está vinculado a la red de proteína. Sin embargo, un alto contenido de NaCl en la carne podrían también provocar una disminución en la CRA, probablemente debido a la insolubilización de proteínas ('' salting-out '') (Graiver et al., 2009). Por lo tanto, la concentración de NaCl no sólo puede afectar a gradientes químicos, sino también la CRA, afectando así a la magnitud de transporte de masa. Cloruro de calcio (CaCl2): El cloruro cálcico o cloruro de calcio es un compuesto químico, inorgánico, que en contacto con agua genera una reacción exotérmica, posee un peso molecular de 110.986 g/mol. Es un agente de firmeza y regulador de acidez debido a la formación de pectatos de calcio insoluble que interaccionan con grupos hidroxilos o radicales libres en la carne. El cloruro de calcio se utiliza como tratamiento pre o post rigor en el tejido muscular, siendo eficaz para mejorar la terneza de la carne (Gerelt et al., 2002; Boleman et al., 1995; Wheeler. Crouse y Koohmaraie, 1992). Diversos autores han utilizado al cloruro de calcio en tratamientos como marinado, inyección, infusión y deshidratación osmótica (Whipple, Koohmaraie y Landsdell, 1994; Morgan et al., 1991; Wheeler et al., 1993), determinando que los cambios en la carne se deben a la activación de las enzimas de calpaína, provocando mejoras de la terneza de la carne. La eficiencia de este compuesto está estrechamente relacionada a su concentración (Polidori et al., 2000). Un aspecto importante en el uso de sales es la densidad de carga y la fuerza iónica. La fuerzaiónica, es una medida adecuada del efecto de las interacciones, ion-ion y ion-solvente, en una solución electrolítica. La fuerza iónica se define como un medio de la sumatoria de la concentración molar (o molal) de cada tipo de ión (por ejemplo, es crítico para la solubilización y/o extracción de algunas proteínas. Una fuerza iónica de 0.5 o más, hará que miofibrillas musculares comiencen a hincharse o solubilizarse las proteínas, a causa de las sales que modifican el punto isoeléctrico; además de ello se genera el efecto esponja, el cual es la contracción e hinchazón de los músculos de la carne a causa de la interacción con las sales. Por ejemplo, en el caso del NaCl el ion Cl- va a interactuar con proteínas para aumentar las cargas eléctricas negativas, ocasionando un aumento en las propiedades de unión de agua ya que permite una mayor interacción, por lo que hay una mayor afinidad por el agua (Hamm, 1986). f) Naturaleza y geometría: Los alimentos frescos son derivados de organismos vivos, que están compuestos por células. La estructura de las células es uno de los factores que contribuyen a las características texturales. La variabilidad observada en los alimentos está relacionada principalmente con la compactación del tejido, contenido inicial de sólidos solubles e insolubles, espacios intercelulares y presencia de gas. Por ejemplo, la compactación está directamente relacionada con la densidad aparente y ésta, a su vez, tiene que ver con la porosidad. Se ha demostrado que una mayor porosidad y permeabilidad del 23 tejido, aumenta la velocidad de transferencia de masa. La geometría y el tamaño son fundamentales para una adecuada velocidad de deshidratación, ya que hay un área mayor expuesta al medio osmótico por unidad de peso, su importancia radica en que variará la superficie por unidad de volumen expuesta a la difusión (Barat, Fito y Chiralt, 2001). 1.3.2. Transferencia de masa durante la DO Durante la deshidratación osmótica, la cinética de deshidratación se describe generalmente a través de los términos: pérdida de agua (WL), ganancia de sólidos (SG) y reducción de peso (WR). El agua en la carne puede ser transportada simultáneamente por difusión molecular, difusión líquida, flujo hidrodinámico, transporte capilar y difusión superficial. Frecuentemente, ocurre transporte de agua por combinación de estos mecanismos debido a la complejidad mencionada de la estructura del tejido. Entonces, la cinética de la transferencia de masa depende de la estructura tisular del alimento así como de los parámetros de proceso (Azuara, et al., 1992), la rapidez de los diferentes procesos depende de la velocidad del transporte de masa en la interfase y en el medio exterior por medio de los coeficientes de transferencia. La transferencia de masa, puede definirse como el transporte de un componente de una fase a otra, este transporte está gobernado por la tendencia del componente a dejar la fase, lo cual se denomina potencial químico (µ), que es la capacidad de un componente para experimentar un cambio en el sistema (Gekas, 2001). Matemáticamente, el potencial químico puede definirse en términos de la energía libre de Gibbs (G) teniendo como variables independientes a la temperatura, presión y cantidad de sustancia, expresado en la Ecuación 1. 𝜇 = ( 𝜕𝐺 𝜕𝑛 ) 𝑇,𝑃,𝑛𝑗≠𝑖 (1) El sentido físico del potencial químico es la variación de la energía libre del sistema correspondiente a un cambio infinitesimal en el número de moles del constituyente i cuando la presión, temperatura y cantidad de sustancia se mantienen constantes, por lo que un sistema está en equilibrio cuando el potencial químico es constante en todos sus puntos, cuando no es así, la diferencia de µ actúa como fuerza impulsora para la transferencia de masa del componente i desde el punto de mayor µ hacia el menor hasta que ambos se igualan. En los alimentos, los mecanismos por los que ocurre la migración de componentes son complejos, sin embargo, el modelo que describe la forma en que la materia se transfiere es el modelo de difusión molecular. Tal proceso puede describirse utilizando la ley de difusión de Fick, que se muestra en la Ecuación 2, la cual propone que el flujo de materia de un componente por unidad de área es proporcional al gradiente de su concentración (Singh y Heldman, 1998). 24 𝑚𝐵 𝐴 = −𝐷 𝜕𝐶 𝜕𝑥 (2) Donde 𝑚𝐵= flujo masico del componente (kg/h) C= concentración del componente (kg/m3) D= coeficiente de difusión (m2/s) A= área (m2) A partir de la primera ley de Fick y realizando un balance de materia en estado no estacionario, se deduce la segunda ley de Fick, que establece en forma diferencial la relación entre el tiempo y la concentración de un punto dado (Martínez et al., 1999), que se observa en la Ecuación 3. 𝜕𝐶 𝜕𝑡 = 𝐷 𝜕2𝐶 𝜕𝑥2 + 𝜕2𝐶 𝜕𝑦2 + 𝜕2𝐶 𝜕𝑧2 (3) Dónde: C = concentración (kg/m3) t = tiempo (s) D = coeficiente de difusión (m2/s) La solución a la ecuación anterior es posible a partir de algunas condiciones de entorno como: concentración inicial de los componentes, sistema homogéneo y difusividad constante en el intervalo de concentración empleado. Generalmente la soluciones a la ecuación se han realizado en flujo unidireccional para diversas geometrías como lámina, cilindro y esfera (Crank, 1975). Dado que los modelos de Fick no son necesariamente representativos de los mecanismos de difusión de agua presentes en los alimentos, el coeficiente de difusión se denomina aparente o efectivo (Def), ya que hay diversos factores que afectan los valores en el coeficiente de difusión. Los coeficientes de difusión en la carne han sido estudiados por diversos autores: Gou, Comaposada y Arnau (2003) evaluaron el efecto a bajas concentraciones de NaCl en el musculo de cerdo Gluteus medius con geometría de lámina; Graiver et al. (2006), por su parte, evaluaron el tejido de cerdo Longissimus dorsi en geometría de cilindros empleando soluciones de NaCl a diversas concentraciones y diversos tiempos de inmersión, encontrando efectos a causa de cambios en la microestructura de las fibras observado por microscopia electrónica de barrido (SEM), Vestergaard, Risum y Adler (2004), analizaron efectos por medio de tomografías, Siró et al. (2009), emplearon el uso de ultrasonido en placas de Longissimus dorsi, Sabadini et al. (1998), McDonnell et al. (2013) entre otros, han estudiado la transferencia de masa en carne, sobre todo en el caso de soluciones con NaCl a diferentes concentraciones. Sin embargo, pese a la complejidad de los mecanismos de transferencia de masa y su comprensión, es difícil el desarrollo de aplicaciones industriales. 25 1.4. Ultrasonido (US) El ultrasonido, es una forma de energía de vibración mecánica en un sólido o fluido a una frecuencia superior a la máxima audible al oído humano (16-18 kHz) (Leighton, 2007). Las aplicaciones de ultrasonido se clasifican en dos grupos: de baja potencia (<10 W), que implican uso de frecuencias de 2 a 10 MHz, y de alta potencia (>100 W), que se realizan a frecuencia de 20 kHz a 100 kHz (McClements, 1995). La eficiencia de estos tratamientos depende de parámetros acústicos como frecuencia, intensidad, duración del tratamiento y temperatura (Jayasooriya et al., 2004). Los baños ultrasónicos son la fuente de ultrasonido que más se han empleado en la mayoría de los trabajos experimentales. El ultrasonido es cada vez más popular en la industria de alimentos, para supervisar un proceso o producto, como pretratamiento o como método alternativo. Los procesos están controlados
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