antivirales 2013

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23 de Mayo de 2013
Vet. SABRINA GALDO NOVO 
 SGALDONOVO@FVET.UBA.AR
Que es un antiviral?
 Molécula o sustancia que bloquea la 
replicación viral y/o reduce la patogénesis 
del agente viral infeccioso.
Inconvenientes:
-parasito celular
-resultado in vivo / in vitro
Formas de control
• Inactivacion
Sustancias inactivantes
• Antiviral
• Inmunomoduladores
Condiciones previas a cumplir
- Alta especificidad  seguridad
- Baja toxicidad
+ < acción mutagénica, carcinogénica teratogénica
PARASITO 
INTERNO
ENZIMAS = 
O AL 
HUESPED˜
- Potencia  eficiencia
Condiciones previas a cumplir
Condiciones previas a cumplir
• Potencia  eficiencia
0%
Eficiencia
100%
Tener en cuenta: dosis adecuada!!
- Buena solubilidad y biodisponibilidad
- Dosificación y costo conveniente
Ej. HIV entra adiriendose a CD4r 
Proteína CD4 hipótesis de bloqueo de entrada
Vida media muy baja
Necesidad de cantidades incompatibles al haber tantos receptores
El virus también se fusiona a la célula evitando ese mecanismo de entrada
Condiciones previas a cumplir
Figure 1. HIV-1 (top) infects a macrophage cell (bottom) via binding of 
viral protein gp120 to cell-surface molecule CD4 and to co-receptor 
CCR5, poising gp41 for membrane fusion (BBC 2007).
http://thurj.org/wp-content/uploads/2011/01/thurj3-1-atreya-f1.jpeg
Curso de la enfermedad  no útil para híper 
agudas
Sintomatología  
+ tardo en identificar
+ tarde doy el antiviral 
- utilidad 
Localización viral vs. Difusión de la droga Ej. BHE
LIMITANTES
Evaluación
In vitro  SCREENING EN CELULAS:
– CITOTOXICIDAD - % DE INHIBICION 
– ej. hepatitis b, c y papiloma no crecen bien in vitro.
– fiebre hemorrágica  no económico  bioseguridad 
In vivo  Índice terapéutico
- No hay modelo animal para hepatitis c
LIMITANTES
Cytotoxic 
effect of 
cisplatin on 
HT1080 cells.
http://www.springerimages.com/Images/MedicineAndPublicHealth/1-10.1007_s00418-006-0183-4-0
Posibles blancos antivirales
• Interacción virus-célula, 
ingreso.
• Desensamblaje.
• Síntesis de DNA/RNA.
• Síntesis proteica.
• Modificaciones post-
traduccionales.
• Ensamble y liberación.
Terminadores de cadena
Análogos de nucleósidos 
No análogos de nucleósidos
Drogas inhibidoras del ingreso y maduración 
Péptidos miméticos
Moléculas solubles
siRNA
Otros 
ANTIVIRALES POTENCIALES
ANTIVIRALES POTENCIALES
– ACYCLOVIR:
HERPESVIRUS
ESPECIFICO – NO TOXICO (PRODROGA) – EFICAZ
NUCLEOSIDO SIMIL GUANOSINA - TERMINADOR DE CADENA
DERIVADOS:
VALACYCLOVIR (VALTREX®)
FAMICICLOVIR (FAMVIR®)
GUANOSINA ACYCLOVIR
– GANCICLOVIR (CYTOVENE®)
CITOMEGALOVIRUS
(CON AMENAZA DE VIDA NEUMONIA COLITIS RETINITIS 
O VIH + / INMUNOSUPRIMIDOS)
ALGO TOXICO
ANTIVIRALES POTENCIALES
– RIVAVIRIN (VIRAZOLE®)
USO PARTICULAR
 Aerosol en infantes con RSV (v. resp sincicial) – LASSA VIRUS – 
HANTAVIRUS – HEPATITIS B O C CON IFN
 DISTEMPER – BoHV – PIF – CALICIVIRUS – INFLUENZA – IP3
CITOTOXICO – MUTAGENICO
(FALTA LICENCIA EN PAISES – USO CONTROVERTIDO)
ANALOGO NUCLEOSIDICO
COMPITE CON INOSINA MONOFOSFATO DESHIDROGENASA
INHIBE INICIO DE POLIMERASAS DEP DE RNA
INTERFIERE CON EL CAPPING DE mRNA
ANTIVIRALES POTENCIALES
ANTIVIRALES POTENCIALES
– ZIDOVUDINA AZT
AZT DEBE SER 
FOSFORILADO POR 3 
KINASAS CELULARES A 
DIFERENCIA DEL 
ACICLOVIR (Primera P 
dada por HSV-1 TK). 
ORAL
HIV
Reduce número de 
algunos leucocitos en 
sangre, anemia y 
trastornos 
musculares. sola o en 
combinación con 
otros antivíricos, 
daño en hígado y 
acidosis láctica
Terminadores de cadena
Análogos de nucleósidos 
No análogos de nucleósidos
Drogas inhibidoras del ingreso y maduración 
Péptidos miméticos
Moléculas solubles
siRNA
Otros 
ANTIVIRALES POTENCIALES
– FOSCARNET (FOSCAVIR®, TRISODIUM®, PHOSPHONAFORMATE®)
HERPESVIRUS – VIRUS DE HEPATITIS B - HIV
ALGO TOXICO SI SE DA EV 
SE ACUMULA EN TEJIDO OSEO Y ES NEFROTOXICO 
INHIBIDOR NO COMPETITIVO, NO NUCLEOSIDICO
INTERFIERE EN SITIO DE ADHESION DE LA POLIMERASA VIRAL
Y RT DE HIV. SE INCORPORA EN EL DNA
“Mechanism of action of foscarnet against viral polymerases” Clyde S. Crumpacker, M.D.
Dept of Infectious Diseases, Beth Israel Hospital, and the Dept of Medicine, Harvard Medical School, Boston, 
Massachusetts, USA. 7 June 2004.
ANTIVIRALES POTENCIALES
– NEVIRAPINE Y TIBO (TETRAHIDROIMIDAZOBENZODIAZEPINONE)
INHIBIDOR DE LA TRANCRIPTASA REVERSA
ANTIVIRALES POTENCIALES
ANTIVIRALES POTENCIALES
- NEVIRAPINE Y TIBO 
Terminadores de cadena
Análogos de nucleósidos 
No análogos de nucleósidos
Drogas inhibidoras del ingreso y maduración 
Péptidos miméticos
Moléculas solubles
siRNA
Otros 
ANTIVIRALES POTENCIALES
– AMANTADINA (SYMMETREL®)
INFLUENZAVIRUS TIPO A
ACTUA EN M2 
NO ENTRAN H+ 
NO CAMBIA LA HA NO SE EXPONE EL PEP. FUSION
(TIPO B NO PRODUCE M2)
NO TOXICO – DENTRO DE LAS 48 HS – MUTANTES
TAMBIEN ACTUA EN SISTEMA NERVIOSO  
PARKINSON
Influenza A
DERIVADOS:
RIMANTADINA – NO CRUZA BHE – 
SOLO INFLUENZA
ANTIVIRALES POTENCIALES
ANTIVIRALES POTENCIALES
– ZANAMIVIR - OSELTAMIVIR
INFLUENZAVIRUS TIPO A Y B
BLOQUEAN LA FUNCION DE LA NEURAMINIDASA
NO REMUEVEN EL AC. SIALICO LOS VIRUS GEMAN DE LA 
CELULA PERO SIGUEN ADHERIDOS
NO INFECTA
NO TOXICO – INHALACION(ZANAMIVIR) ORAL (OSELTAMIVIR)
ANTIVIRALES POTENCIALES
– ZANAMIVIR - OSELTAMIVIR
INHIBEN LA NEURAMINIDASA
Terminadores de cadena
Análogos de nucleósidos 
No análogos de nucleósidos
Drogas inhibidoras del ingreso y maduración 
Péptidos miméticos
Moléculas solubles
siRNA
Otros 
ANTIVIRALES POTENCIALES
Comparación de un sitio de clivaje de la proteasa de 
HIV con un inhibidor péptido mimético. 
Toward a live microbial microbicide for HIV:
Commensal bacteria secreting an HIV fusion
inhibitor peptide. PNAS, 2005.
Poliproteina 
Gag-Pol
A Natural substrate of the HIV-1 protease
B Protease inhibitor Ro 31-8959
– INHIBIDORES DE PROTEASA Y FUSION
ANTIVIRALES POTENCIALES
http://www.pnas.org/content/102/34/11993/F1.large.jpg
Terminadores de cadena
Análogos de nucleósidos 
No análogos de nucleósidos
Drogas inhibidoras del ingreso y maduración 
Péptidos miméticos
Moléculas solubles
siRNA
Otros 
ANTIVIRALES POTENCIALES
vacunación de 1ml con 50UI 
IFN por día durante 7 días 
con 7 días de descanso 
durante 6 meses
ANTIVIRALES POTENCIALES
Human IFN-a strengthens instead the 
immune response to viral
infections, with a significant modulation of 
important cytokines like IL-1,
IL-5, IL-6, IL-8, GM-CSF. 
Terminadores de cadena
Análogos de nucleósidos 
No análogos de nucleósidos
Drogas inhibidoras del ingreso y maduración 
Péptidos miméticos
Moléculas solubles
siRNA
Otros 
ANTIVIRALES POTENCIALES
ANTIVIRALES POTENCIALES
– Que es in miRNA??
Pequeño mRNA endógeno que
 regula la expresión de genes 
- Como se descubrió?
1993 lee, feinbaum & ambros
Gen lin-4 NO CODIFICA PARA PROTEINA SOLO PEQUEÑOS RNA
3`UTR complementario con el lin-14 (prot. Nuclear que promueve el 
avanze al proximo estadio larval)
Lo destruye
miRNAs en todos los organismos  miRBase microrna.sanger.oc.uk
Clivando al mRNA >plantas
Reprimiendo la traducción 
del mRNA > mamiferos
ANTIVIRALES POTENCIALES
miRNA (micro)
Moléculas de doble cadena (˜21-25 
nt). Provienen de transcriptos 
endógenos con estructuras hairpin.
Complementariedad variable con la 
secuencia blanco.
siRNA (small interfering)
Provienen de Moléculas de dsRNA 
(˜21-23 nt). Por DICER Respuesta 
ante un dsRNA foraneo.
Complamentariedad total con la 
secuencia blanco.
risc
risc
RISC: RNA induced silencing complex  complejo de 
silenciamiento inducido por RNA
ANTIVIRALES POTENCIALES
– siRNA
ANTIVIRALES POTENCIALES
– siRNA El gen 3D codifica para la RNA pol dependiente 
de RNA. Sintetiza un RNA- que se dobla el 
mismo formando una especie de templado 
primer que lo elonga el producto del gen 3d 
para formar dimeros de RNA
ANTIVIRALES POTENCIALES
– siRNA
CLONADO DE AMPLIFICACION EN KpnI Y XbaI EN pcDNA3.1-
CT-GFPvector de la 3D CON GFP
ANTIVIRALES POTENCIALES
– siRNA
TRANSFORMADO DE E. COLI COMPETENTES CON CALOR
CHEQUEO DE SECUENCIACION
CELULAS BHK 21 TRANSFECTADAS CON LIPOFECTAMINA
ANTIVIRALES POTENCIALES
– siRNA
BHK-21 cells were co-transfected in 
triplicate with Lipofectamine
2000 and Opti-MEM I Reduced Serum 
Medium
0.2 μg of reporter plasmid p3D-GFP and 
0.5 μg of each miRNA expression
plasmid. 
Four miRNA expression plasmids 
were able to significantly silence 
the expression of the reporter 
plasmid
Terminadores de cadena
Análogos de nucleósidos 
No análogos de nucleósidos
Drogas inhibidoras del ingreso y maduración 
Péptidos miméticos
Moléculas solubles
siRNA
Otros 
ANTIVIRALES POTENCIALES
ANTIVIRALES POTENCIALES
Agentes químicos
Nuevas tecnologías
Veterinary microbiology
 By Dwight C. Hirsh, Nigel James Maclachlan, Richard L. Walker
(Blackwell publishing, 2004)
Potenciales aplicaciones en medicina veterinaria
ESTRATEGIAS PARA NUEVOS TARGETS 
ANTIVIRALES
Probar drogas para tratamientos de 
cáncer
Prueba de baterías de drogas y luego se 
evalúa su mecanismo de acción
PERSPECTIVAS FUTURAS
 Búsqueda de nuevos blancos
 Diseño de nuevas drogas
 Inhibidores de proteasas
 Oligonucleótidos antisentido
DISEÑO DE NUEVAS DROGAS
DRACO
DOBLE ACCION
DETECTOR DE dsRNA
Ej. PKR SE AUTOFOSFORILA Y 
FOSFORILA elf-2α QUE 
INHIBE LA TRADUCCION DE 
TODAS LAS PROTEINAS
APOPTOSIS COMPLEJO DE 
SEÑALAMIENTO APOPTOTICO 
Ej. FADD o Apaf-1 QUE SE 
ACTIVAN Y TRANSACTIVAN 
OTRAS CASPASAS. 
ESTRATEGIAS 
VIRALES:
- BLOQUEO DE PROT. DE 
SEÑALAMIENTO
- SECUESTRO DE dsRNA
- INTERFERENCIA CON DOMINIOS 
QUE RECONOCEN dsRNA
-BLOQUE DE PRECURSORES DE 
CASCADA APOPTOTICA Ej. 
PPA BLOQUEA CASP 3
POX BLOQUEA CASP 1 Y 8
BIBLIOGRAFIA
-PRINCIPLES OF VIROLOGY, FLINT, S.J., third ed. chap 19
- VIROLOGY, Fields. Fourth ed chap. 15
-Virology, FENNER 
-CAPITULO 2 (COMO CUANTIFICAR VIRUS) CAÍTULO 4 
(Chemotherapy of Viral Diseases)
-VERSION LIBRE EN INTERNET
.
-Papers en: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/
-
-sgaldonovo@fvet.uba.ar
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/
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