TP 3 Dialisis

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Introducción
Las células están separadas del medio que las rodea por la membrana plasmática, la cual constituye una barrera altamente selectiva. Esta semipermeabilidad implica selectividad en el pasaje de diferentes moléculas.
El transporte de moléculas mediante la membrana puede ser activo o pasivo, según se realice o no gasto de energía. Cuando el pasaje de sustancia se realiza a favor de su diferencia de concentración, el transporte es pasivo y no requiere de gasto de energía. Cuando el transporte se realiza en contra del ΔC, ya sea de concentración o eléctrico el transporte es activo y requiere gasto de energía en forma de ATP.
En este trabajo practico, nosotros trabajamos con el concepto de transporte pasivo que involucra a la difusión simple. Esta es aquella que permite el paso de moléculas no polares y pequeñas, las liposolubles y las polares pequeñas sin carga eléctrica como el agua. Otro tipo de difusión dentro del transporte pasivo es la difusión facilitada que permite el pasaje de partículas de mayor tamaño y/o polaridad mediante proteínas integrales de membrana y la transferencia de partículas cargadas a través de canales iónicos.
La técnica de diálisis es un proceso de purificación de una solución por la diferencia en sus índices de difusión a través de una membrana semipermeable selectiva, esto significa que la membrana permite el pasaje de solutos pequeños por una diferencia de concentración en cada compartimiento, estos solutos son denominados solutos difusibles. Los solutos no difusibles son aquellos que no pueden atravesar la membrana debido a su tamaño (macromoléculas).
En términos terapéutico, es un método empleado para remover con rapidez drogas o sustancias toxicas en situaciones agudas.
Existen dos tipos de diálisis dependiendo de la membrana semipermeable. Esta puede ser natural como en el caso del peritoneo del paciente la cual se llama diálisis peritoneal o por una membrana artificial la cual se llama hemodiálisis.
 La diálisis peritoneal implica la introducción del líquido de diálisis al espacio peritoneal a través de un catéter. Así las sustancias se movilizan desde la sangre a la solución de diálisis por procesos de dilución y ultrafiltración. El líquido es posteriormente extraído y se lleva consigo los desechos y el exceso de agua del organismo.
La hemodiálisis se realiza con un filtro especial que limpia la sangre denominado dializador. La sangre viaja hasta el dializador que sirve de membrana semipermeable selectiva y junto con soluciones elimina el agua y los productos urémicos de desecho que se acumulan en el cuerpo. La acción de la hemodiálisis se apoya en 3 principios: difusión, osmosis y ultrafiltración. El dializado es una solución compuesta por los electrolitos necesarios para el cuerpo en su concentración extracelulares ideales, la membrana impide la difusión de moléculas grandes como proteínas. Una vez purificada, la sangre retorna al cuerpo.
Los factores que afectan el procedimiento de diálisis son:
a) El área de la membrana semipermeable selectiva, ya que a mayor área se produce una mayor diálisis.
b) La diferencia de concentraciones de un soluto entre los lados de la membrana, ya que la diferencia es máxima al principio y tiende a disminuirlo según el tiempo de diálisis.
c) El tamaño de las moléculas de soluto, ya que las más pequeñas difunden más rápidamente.
d) La temperatura
Objetivo de la práctica
Lograr la purificación de una solución de NaCl y Fenolftaleina mediante el proceso de diálisis. 
Procedimiento
Luego de llenar la campana del osmómetro con la solución de Fenolftaleina y NaCl ; y el vaso de precipitados con agua destilada, llevamos a cabo una serie de controles a los componentes que colocamos en ambos medios. Esto se realizo para garantizar la limpieza de los materiales utilizados y que no seleccione por error otro tipo de compuesto. Para realizar estos controles tomamos cuatro muestras; dos del vaso de precipitados y dos de la campana.
A una muestra de agua destilada se agrego NaOH y a otra AgNO3. Ambas no reaccionaron; ya que al solo haber agua destilada no hubo reactivos que dieran señales positivas frente a los agregados.
Se realizó el mismo procedimiento con ambas muestras del osmómetro las cuales dieron positivas.
· El NaOH reacciona con la fenoftaleína, tornándose de un color magenta
· El AgNO3 reacciona con el NaCl provocando un precipitado blanco.
Los controles se registraron en una tabla, la cual se halla en la sección de resultados.
Seguido de esto sumergimos parcialmente el dializador en el vaso de precipitados hasta que el borde del dializador coincidió con el nivel de agua en el vaso de precipitado.
Dejamos el dializador en el vaso de precipitados por aproximadamente 15 minutos. Pasado este tiempo, se volvieron a tomar cuatro muestras; dos de cada medio.
Se les volvió a agregar los mismos reactivos de los controles a cada muestra y dieron los siguientes resultados:
Muestras del vaso de precipitados:
· Tratada con NaOH: Resultó negativo, ya que la fenoftaleína es una macromolécula y no atravesó la membrana semipermeable selectiva. Por lo tanto no hubo un indicador que diera una señal positiva.
· Tratada con AgNO3: Resultó positiva, ya que el NaCl, debido a su pequeño tamaño, si atravesó la membrana hasta equilibrarse las concentraciones del vaso de precipitados y la campana; reaccionando en un precipitado blanco.
Muestras del osmómetro:
· Tratada con NaOH: Resultó positiva por la presencia de fenoftaleína, la cual se encuentra en la misma concentración que al principio ya que no atravesó la membrana.
· Tratada con AgNO3: Resultó positivo ya que parte del NaCl atravesó la membrana hasta llegar al equilibrio y el resto se conservó en la campana; dando el precipitado blanco. 
Los resultados finales se registraron en una segunda tabla también en la parte de resultados.
Resultados
Estado inicial (control).
	
	NaOH
	AgNO3
	Campana
	Positivo(Precipitado magenta)
	Positivo(Precipitado blanco)
	Vaso
	Negativo
	Negativo
Estado Final
	
	NaOH
	AgNO3
	Campana
	Positivo(Precipitado magenta)
	Positivo(Precipitado blanco)
	Vaso
	Negativo
	Positivo(Precipitado blanco)
Discusión y conclusiones
Luego de analizar los resultados obtenidos experimentalmente, pudimos concluir que: el proceso de diálisis no es un proceso muy utilizado para purificar soluciones, ya que no solo requiere de mucho tiempo sino que además la maquinaria utilizada para realizar este proceso es muy costoso. 
Es importante aclarar que en laboratorio hay otras formas de mejorar la efectividad del proceso tales como aumentar la superficie de contacto o el aumento de la temperatura. La diálisis no es un proceso 100% efectivo ya que no puede purificar completamente los componentes. Si se desea seguir purificando la solución de la campana mejorando la efectividad del procedimiento será necesario reemplazar el solvente por uno nuevo debido a que los componentes de ésta y los del medio externo buscan el equilibrio de concentraciones. 
También llegamos a la conclusión de que las membranas semipermeables selectivas son eficientes a la hora de llevar a cabo el proceso de difusión, ya que no permiten el paso de cualquier soluto. Pero además nos permite concluir que para que ingresen dentro de la célula otras sustancias de tamaño más grande o iones, la célula debe efectuar otros mecanismos para que éstas puedan ingresar a la misma, como por ejemplo el transporte por bombas (para iones, con gasto de energía), o por medio de proteínas canal, entre otros mecanismos que dispone la membrana celular.
Bibliografía
Humberto Cisale, Física biológica veterinaria. 2da edición. Buenos Aires, Eudeba, 2014.