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Seres vivosaparatos órganos tejidos células moléculas químicas alimentos AA, bases, ácidos grasos, azúcar--(enlaces covalentes) Polisacáridos, fosfolípidos, ac nucleicos, proteínas HIDRATOS DE CARBONO: Polialcoholes con grupos funcionales aldehídos o cetonas Función: obtener energía, estructural, protección, sostén y participan en la comunicación, Los grupos aldehídos y cetonas son reductores Antígenos de superficie dependen de los hidratos de carbono Clasificación: monosacáridos (1molécula), oligosacáridos (2-20), polisacáridos (más de 20), glicoconjugados (HC + Proteinas o lipidos) Estructura y función de los monosacáridos: Aldosas o cetosas: reductores (donan electrones), actividad óptica (enantiómeros, epimeros, alfa o beta según como se cierra el anillo) Monosacarido + monosacárido —enlace glucosídico disacáridos 1,4 o 1,6 LIPIDOS: Reserva y obtención de energía Base de la estructura de las membranas biológicas Comunicación celular Forman parte de los cofactores Estructura: conjunto de moléculas orgánicas solubles en solventes no polares Constituidos por C,H,O 2 tipos: saponificables + base= glicerol + acido graso tienen ácidos grasos en la estructura Glicerolipidos Glicerofosfolipidos Esfingolípidos Ceras No saponificables No tienen acidos grasos Esteroides Prenoles Sacarolipidos Polucetonidos Ácido Graso: cadena larga (no polar) hidrocarbonada con grupos COOH polar en el extremo Saturados: todos los enlaces SIMPLES ocupados Insaturados: 1 o más enlaces dobles La molécula se curva H en posiciones Cis o trans Cis: los H estan del mismo lado de la olecula y son los que usa el organismo Trans: 1 de cada lado de la molecula Son Hidrofobicos o Anfipaticos se forma una micela cuando lo disuelvo en H2O o en solventes polares Colas hacia adentro y cabezas hacia afuera Esterificación: (inverso a la saponificacion): reacción entre el COOH y el OH de un alcohol SAPONIFICABLES GLICEROLÍPIDOS: triglicéridos: reserva energética, precursores sintéticos, Comunicación celular Son hidrofóbico y forman GOTAS LIPIDICAS: Exceso de ácidos grasos almacenado en tejido adiposo blanco o tejido adiposo pardo, ácido graso + glicerol, estructura similar a la lipoproteína Transportados por lipoproteínas triglicéridos recubiertos por una monocapa de fosfolípidos: las colas están en contacto con el triglicérido y la cabeza con la sangre GLICEROFOSFOLIPIDOS/FOSFOLIPIDOS: Función: estructura y comunicación celular 1 molécula de glicerol esterificada con 3 moléculas de ácidos grasos (no tienen que tener doble enlace) 2 ácidos grasos + 1 cabeza polar grupo PO4 3- esterificado con una azúcar o un amino alcohol Ácido fosfático PO4 3- no esterificado Son antipática: forma bicapas en solventes polares Se cierran sobre si mismas y forman liposomas El ácido graso cis se quiebra provoca un desorden en la molécula Membrana más fluida Ac graso trans es una molécula lineal Fabricados por el hígado ESFINGOLÍPIDOS: estructura de las membranas Mucha cantidad de funciones biológicas Comunicación celular: son receptores y mediadores lipídicos Forman parte de la estructura de la membrana Amino alcohol (esfingosina) esterificada con un ácido graso largo ceramida + cabeza polar= esfingolipido Galactosilceramida, sulfatido importantes en la estructura de membranas, receptores de señales extracelulares. La degradación forma mediadores lipídicos hormonas CERAS: Forman parte de la estructura y dan protección ac graso de cadena larga + alcohol de caden alarga productos altamente hidrofobicos (insolubles en agua) NO SAPONIFICABLES: PRENOLES: terpenos, ácidos esenciales, vitaminas, resinas Función: precursores biosinteticos Derivan del isopreno: Monoterpeno: 2 isoprenos (ac aromaticos) Triterpeno: 6 isoprenos (B-carotenos) Diterpeno: 4 isoprenos (vitaminas E, A) Sesquiterpeno: 3 isopreno (farmesol) Politerpeno: 6 isoprenos (caucho) Coenzimas Q10, dolicol fosfato (intermediario metabolico) Escualeno (intermediario ) sintetiza ESTEROLES esteroides, acidos biliares y esteroides conjugados En el colesterol animal: compacta fosfolípidos en la bicapa lipídica biológica, permite que la bicapa sea rigida y tiene efecto buffer (le da fluidez a la membrana) Como fitoesteroles en las plantas (B- citoesterol) y como ergoesterol en los hongos ESTEROIDES (hormonas) andrógenos, progesterona, etc ACIDOS BILIARES: (higado) acido desoxicolico y acido colico acidos que liberan la vesicula para emulsionar las grasas que ingerimos SECOESTEROIDES: vitamida Dcolesterol + luz uv pre vit D colicalciferol calcidiol (higado) calcitriol vit D activa Célula Eucarionte: muchos compartimentos que cumplen funciones específicas En cada compartimento hay reacciones enzimáticas características, condiciones de fuerza iónica, pH, etc. Esto es posible porque están separados y delimitados del entorno por biomembranas biológicas El núcleo y las mitocondrias tienen doble membrana La membrana se estudia según el aspecto que busco (estructura, fluidez, etc) y que membrana quiero estudiar (célula entera o de alguna en particular) bicapa fosfolipídica (lípidos + proteínas) LIPIDOS: dan impermeabilidad en el núcleo hidrofóbico del centro de la bicapa Dan fluidez para que las proteínas se anclen de forma correcta y puedan cumplir su función Intervienen en procesos de señalización: aportan sustratos y cofactores de las enzimas que los degradan para formar señales Modulan la actividad de las proteínas asociadas a membrana GLICEROFOSFOLÍPIDOS: Fosfolípidos (55-75%) determinan la estructura de la matriz de todas las membranas Forman las bicapas Las bicapas grandes se pliegan y forman lisosomas Plasmógenos: fosfolípidos con una unión éster del OH de glicerol ESFINGOLÍPIDOS: esfingomielia (NO en mitocondrias) Glucoesfingolípidos (5-20%) COLESTEROL: (15-25%) SOLO EN EUCARIOTAS (bacterias NO) Cada membrana biológica tiene un perfil de lípidos característicos Las membranas tienen 2 HEMICAPAS citosólica: en contacto con el citosol (Distinta composición En contacto con el lumen de los compartimentos o con el Química y proteica) exterior MOVIMIENTO DE LOS LIPIDOS: los lípidos se mueven hacia los costados (difusión lateral), rotan sobre si mismos (rotación) y balancease (flexión) Las colas de los ácidos grasos se mueven libremente. Flip-Flop: pasaje desde un lado de la bicapa a otro Muy restringido: se pueden pasar pero tardan mucho Termodinámicamente muy desfavorable por el tamaño de la cabeza polar Se necesitan flipasas FLUIDEZ: la fluidez se ve afectada por la temperatura y depende de la composición química de la bicapa Temperatura: a mayor temperatura mayor energía cinética, la membrana se desordena y es más fluida. En animales la temperatura es constante y la fluidez dependede la composición química Composición química: ácidos grasos y colesterol Ácidos grasos largos, con dobles insaturaciones trans que ordenan la membrana (las cis se quiebran) Los ácidos grasos de cadena corta no llegan al centro del núcleo hidrofóbico y evitan el empaquetamiento de las colas Colesterol: en los primeros 10 o 12 ácidos grasos hacia el extremo de las 2 capas o Rigidiza la membrana externa (más cerca de las cabezas polares) o Favorece y fortalece las propiedades de barrera o Impide que los fosfolípidos se separen y que sustancias del medio extracelular/citosólico atraviesen la bicapa. o Favorece y mantiene la fluidez: a bajas concentraciones la bicapa es muy fluida o Impide que las cabezas estén muy unidas (las proteínas van a estar activas con el entorno y fluidez adecuados) Esfingomielina (rigidizador) + colesterol + fosfatidilcolina LIPID RAFT/ bolsas lipídicas/ microdominios de membrana: dominios muy rígidos donde la membrana es más gruesa que permiten la activación/ inactivación de las proteínas porque la membrana cambia sus propiedades físico- químicas ASIMETRIA DE BICAPA: la membrana está formada por una bicapa fosfolipídica asimétrica: cada hemicapa tiene una conformación especifica Extracelular: fosfatidilcolina, esfingomielina y glicoesfingolípidos (ONLY EXTRACELULAR) Citosólica: fosfatidiletanolamida + fosfatililserina + fosfatililenocitol + fosfatidilcolina No todas las membranas son asimétricas, ej: Golgi (síntesis de esfingomielina y glicolipidos) tiene flipasas dependientes y no dependientes de ATP que transportan lípidos a ambos lados de la bicapa Si algún fosfolípido pierde la capacidad de estar de un lado o del otro de la membrana se pierde la homeostasis y pueden ocurrir actividades biológicas malas: Aumenta la composición de fosfatililserina del lado externo y se considera a la célula como “enferma” y los macrófagos las digieren Los fosfolípidos de la capa citosólica participan en las vías de señalización iniciadas por fosfolipasas, si estuvieran del lado externo las vías de señalización no ocurren CURVATURA: Cada fosfolípido tiene una forma característica que hace que este de un lado u otro de la membrana, ej: Fosfatidilcolina: cilíndrica, puede apilarse Fosfatidiletanolamida: forma conica, cabezas polares muy chicas, favorece la curvatura de la membrana Esfingomielina: cilíndrico, tiene dominio raft, aumenta el espesor de la membrana porque los aminoácidos y el aminoalcohol son saturados y ocupan una mayor extensión que los acidos grasos de la fosfatililcolina RE sintetiza todos los lípidos básicos Cada compartimento puede terminar la síntesis de algún lípido en particular Ej: mitocondria fosfatililetanolamina fosfatililglicerol y cardiolipina (no en RE) Las membranas del Golgi y celulares son ricas en poliesfingocitos: lípidos derivados del fosfatidilinositol CUERPO LIPIDICO: acumulación de triglicéridos entre las 2 capas de la membrana de Golgi. Forma una gota recubierta de 1 de las capas. Dan PERMEABILIDAD SELECTIVA: deciden que entra y que no a través de los transportadores Interviene en procesos de señalización: son o forman parte de los receptores de membrana que permite la transducción de señales biológicas (por degradación de lípidos) Las proteínas transmembrana anclan la celula al citoesqueleto proteínas extracelulares interactúan con proteínas de la matriz extracelular Se clasifican según la forma de ser extraídos de la bicapa ALTA FUERZA IÓNICA (KCl 1M): extrae proteínas periféricas Una vez separada la proteína se centrifuga para aislarla Las puedo extraer más fácil porque interaccionan con lípidos o proteínas a través de interacciones débiles (salinas) Si reemplazo la interacción proteína-lípido por lípido-KCl la proteína queda libre DETERGENTES IONICOS (SDS) y NO IONICOS (TRITON): extrae proteínas que interactúan con el núcleo hidrofóbico de la bicapa, ej: Proteínas con 1 o muchos dominios atravesando los barriles B Proteínas ancladas a 1 hemicapa (4), Proteínas ancladas por lípidos (5), Proteínas que unen proteínas (6) Se usa un sistema libre de célula Las interacciones proteína-lípido favorecen la curvatura Las proteínas periféricas interaccionan por COMPLEMENTARIEDAD MOLECULAR Proteínas ancladas por lípidos: (5) del lado citosólico están ancladas por un prenilo o un acilo Prenoles farmecilo: molécula que se une a algún resto de AA de la proteína y va a permitir que la proteína quede inmersa y anclada a la membrana Exterior están ancladas por fosfatidilnositol Proteínas integradas al núcleo hidrofóbico de la membrana: (1,2,3) Tienen 1 o más pasos de membrana Interactúan y están ancladas a la hemicapa por alfa hélices hidrófobicas Constituidas por barriles beta hidrofobicos donde atraviesan Tienen 3 dominios: 1 extracelular/ luminal, 1 citoplasmático y 1 transmembrana: AA no polares hidrofóbicos que interactúan con las colas hidrófobicas de los ácidos grasos para mantenerlos unidos a la membrana Ej: glucoforina: glóbulo rojo (1 paso) Receptores GPCR: señalización intracelular. 7 pasos + alfa hélice que atraviesan la membrana Canales de K+: 4 subunidades cada una formada por 3 alfa hélices Barriles B en procariontes EXTRACCION CON DETERGENTES: Los ácidos grasos forman micelas con la membrana y con las estructuras proteicas que haya No Iónicos: la proteína forma micelas con el detergente Extraigo la proteína en su forma nativa. Para medir la actividad la pongo en un liposoma que yo fabrico Iónico fuerte: (SDS) las colas hidrófobicas se unen a la parte hidrofóbica de la proteína y la desnaturalizan La carga de la cabeza polar ROMPE las interacciones IONICAS y PUENTE HIDROGENO que estabilizan la estructura 2° y 3° de la proteína y la desnaturalizan NO SIRVE SI QUIERO ESTUDIAR LA ACTIVIDAD DE LA PROTEINA VECTORIALIDAD: las proteínas asociadas a la membrana tienen dirección (desde el citosol hacia el medio extracelular) Los dominios son distintos en ambos lados de la membrana. La parte glucosidica va hacia el medio extracelular Parte citoplasmática: raro encontrar proteínas glucosidadas o puentes disulfuros porque el citoplasma es reductor y rompe estas uniones La composición proteica y la topografía de las 2 hemicapas son debido a la función que tiene cada una de su lado MOVIMIENTO DE LAS PROTEINAS: Las proteínas se mueven de forma restringida: Forman agrupaciones que interaccionan entre si y se mueven en conjunto (clusters) Las proteínas unidas al citoesqueleto solo se mueven sobre el citoesqueleto o directamente no se mueven Pueden tener movimiento libre y al azar Si están unidas a la MEC (matriz extra celular) tienen movimiento restringido El movimiento de una proteína se visualiza/mide usando la técnica de FRAP: un láser decolora el fluorocromo que está unido a una proteína o un lípido y se ve si la fluorescencia vuelve o no al cabo de un tiempo. Si vuelve es porque hay proteínas o lípidos que migraron desde otro lado para restablecer la fluorescencia. Si no vuelve es porque las proteínas o lípidos no se mueven.
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