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UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUÍMICA FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD Página - 1 - “UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA” INFORME DE LABORATORIO Nº09 CURSO: BIOQUÍMICA TEMA: CREATININA Y BILIRRUBINA DOCENTE: DRA. VIOLETA MORÍN GARRIDO DR. CARLOS HOLGUÍN MAURICCI ALUMNO: ZAPATA NIEVES WINNER ALBERTO CICLO: II PIURA-PERÚ 2022 UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página - 2 - “CREATININA Y BILIRRUBINA” I. OBJETIVO: Determinación de productos especiales de formación de los aminoácidos y bilirrubina en suero. II. MARCO TEÓRICO: A. CREATININA 1. DETERMINACIÓN DE CREATININA a) ¿QUÉ ES? La creatinina es el anhídrido de la creatina, se transforma en gran parte en los músculos por la eliminación no enzimática e irreversible del agua del fosfato de creatina y creatinina. La creatinina es un producto terminal del catabolismo proteico que se elimina por la orina. En condiciones normales la creatina se encuentra sólo en la orina de los niños o en las mujeres embarazadas o en puerperio, pero no en hombre adulto. La creatinina en cambio es un constituyente habitual de la orina cuya excreción no depende como en el caso de otros compuestos nitrogenados, de la ingestión de proteínas de la dieta. De modo normal se elimina 7gr al día y esta cantidad es bastante fija para un determinado individuo dependiendo en forma directa de la masa muscular que tenga el sujeto. La creatinina es eliminada por un simple proceso de ultrafiltración glomerular por la cual se determinación simultánea en sangre y en orina representa un buen índice de la función renal (medlineplus). UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página - 3 - b) ¿PARA QUÉ SE USA LA PRUEBA DE CREATININA? La prueba de creatinina se usa para averiguar si los riñones están funcionando bien. A menudo, se solicita junto con otra prueba de riñón llamada prueba de nitrógeno ureico en sangre (NUS) o como parte de un panel metabólico completo. Un panel metabólico completo es un grupo de pruebas que entrega información sobre diferentes órganos, aparatos y sistemas del cuerpo. Se suele incluir como parte de un chequeo de rutina (medlineplus). c) ¿POR QUÉ NECESITO UNA PRUEBA DE CREATININA? o Fatiga o Hinchazón alrededor de los ojos o Hinchazón de los pies o los tobillos o Disminución del apetito o Orinar con mucha frecuencia o con dolor o Orina espumosa o con sangre o Diabetes tipo 1 o tipo 2 o Presión arterial alta o Antecedentes familiares de enfermedad renal d) ¿QUÉ OCURRE DURANTE UNA PRUEBA DE CREATININA? La creatinina se puede analizar en la sangre o en la orina. Para la prueba de creatinina en sangre: https://medlineplus.gov/spanish/pruebas-de-laboratorio/examen-de-nitrogeno-ureico-en-sangre-nus/ https://medlineplus.gov/spanish/pruebas-de-laboratorio/panel-metabolico-completo-pmc/ https://medlineplus.gov/spanish/healthcheckup.html https://medlineplus.gov/spanish/fatigue.html https://medlineplus.gov/spanish/edema.html https://medlineplus.gov/spanish/diabetestype1.html https://medlineplus.gov/spanish/diabetestype2.html https://medlineplus.gov/spanish/highbloodpressure.html UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página - 4 - El profesional de la salud toma una muestra de sangre de una vena de un brazo con una aguja pequeña. Después de insertar la aguja, extrae un poco de sangre y la coloca en un tubo de ensayo o frasco. Tal vez sienta una molestia leve cuando la aguja se introduce o se saca, pero el procedimiento suele durar menos de cinco minutos. Para la prueba de creatinina en la orina: Su médico o profesional de la salud le pedirá que recoja toda la orina durante 24 horas. El profesional de la salud o un laboratorio le dará un recipiente para que recolecte la orina e instrucciones sobre cómo recoger y almacenar las muestras. Los pasos para recolectar una muestra de orina de 24 horas son: Orine por la mañana en el inodoro y tire la cadena. Anote la hora Durante las 24 horas siguientes, guarde toda la orina en el recipiente provisto Guarde el recipiente de orina en el refrigerador o en una nevera portátil con hielo Siga las instrucciones para llevar o enviar el recipiente con la muestra al consultorio de su médico o al laboratorio (medlineplus). 2. FUNDAMENTOS DEL MÉTODO La creatinina y otros compuestos de la muestra reaccionan con el ácido pícrico en medio alcalino dando un complejo color rojo que se cuantifica mediante lectura fotométrica. UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página - 5 - Materiales - Tubos de ensayo - Gradilla - Pipetas y micropipetas Equipos - Centrífuga - Baño María - Espectrofotómetro - Reactivos - Standard : Solución de creatinina 20mg/l - Ácido pícrico : Solución de ácido pícrico 41,4 mmol/l - Buffer/Ple : Solución de polioxietilen laurel éter (PLE) DANS 15mmol/l en buffer glicina/NaOH - Stopper : Ácido acético al 20% 3. Procedimiento Equilibrar el Reactivo de Trabajo a la temperatura de reacción (25ºC). Antes de agregar la muestra, llevar el aparato a cero con agua destilada. En dos tubos de fotocolorímetro o cubetas espectrofotométricas marcadas S (Standard) y D (Desconocido), colocar: http://images.google.com.pe/imgres?imgurl=http://www.unizar.es/actividades_fq/ph_agua/img/materiales01.jpg&imgrefurl=http://www.unizar.es/actividades_fq/ph_agua/index.php?destino%3Dmateriales&usg=__yWG5eLMKokWuo8nP6GZFBqDJ5_o=&h=396&w=324&sz=13&hl=es&start=7&tbnid=pGHtewn7fbs8WM:&tbnh=124&tbnw=101&prev=/images?q%3DTubos%2Bde%2Bensayo%26gbv%3D2%26hl%3Des%26sa%3DG http://images.google.com.pe/imgres?imgurl=http://www.unicosci.com/espanol/images/centri/C856b.gif&imgrefurl=http://www.unicosci.com/espanol/centri/powerspinLX.htm&usg=__RwYJnpFeTbD9OfT7srSwzqt6yt4=&h=963&w=800&sz=187&hl=es&start=1&tbnid=LJMbOvMZy2EO0M:&tbnh=148&tbnw=123&prev=/images?q%3DCentr%C3%ADfuga%26gbv%3D2%26hl%3Des UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página - 6 - B S D Reactivo de trabajo 3ml 3ml 3ml Standard 0,6ml - Muestra - 0,6ml Mezclar inmediatamente, disparando al mismo tiempo el cronómetro y proseguir la incubación. A los 30 segundos exactos medir la absorbancia (S1 y D1) y continuar la incubación. Medir nuevamente la absorbancia (S2 y D2) a los 5 minutos (4 minutos 30 segundos después de la primera lectura). Luego agregar: STOPPER 1.5 ml 1.5 ml 1.5 ml • Leer a 5 minutos a 505 nm =D2. 4. Cálculo de los resultados 𝑪𝑹𝑬𝑨𝑻𝑰𝑵𝑰𝑵𝑨 𝒎𝒈%𝑳. = 𝑭𝒂𝒄𝒕𝒐𝒓 𝒙 𝑨𝒃𝒔. (𝑫𝟏 − 𝑫𝟐) 𝑭𝒂𝒄𝒕𝒐𝒓 𝒆𝒔𝒕á𝒏𝒅𝒂𝒓 = 𝒄𝒐𝒏𝒄𝒆𝒏𝒕𝒓𝒂𝒄𝒊ó𝒏 𝒑𝒂𝒕𝒓ó𝒏 𝒐 𝒆𝒔𝒕á𝒏𝒅𝒂𝒓 (𝒎𝒈/𝒅𝒍) 𝑨𝒃𝒔𝒐𝒓𝒗𝒂𝒏𝒄𝒊𝒂 𝒅𝒆𝒍 𝒑𝒂𝒕𝒓ó𝒏 𝒐 𝒔𝒕á𝒏𝒅𝒂𝒓 UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página - 7 - 5. Resultados 𝑭𝒂𝒄𝒕𝒐𝒓 𝒆𝒔𝒕á𝒏𝒅𝒂𝒓 = 𝟐 𝒎𝒈𝟎. 𝟐𝟒 = 𝟖. 𝟑𝟑 𝐷1 – 𝐷2 = 𝐷 0.16 – 0.04 = 0.12 = 𝐷 𝑪𝑹𝑬𝑨𝑻𝑰𝑵𝑰𝑵𝑨 𝒎𝒈%𝑳. = 𝑭𝒂𝒄𝒕𝒐𝒓 𝒙 𝑫 𝑪𝑹𝑬𝑨𝑻𝑰𝑵𝑨 𝒎𝒈%𝑳. = (𝟖. 𝟑𝟑) × (𝟎. 𝟏𝟐) = 𝟎. 𝟗 𝒎𝒈%𝑳. 𝒐 𝒎𝒈/𝒅𝒍. 6. Valores normales Suero: 0.8 – 1,4 mg/l VN ≤ 1mg% RIESGO: 1-2 mg% ALTERACION RENAL REVERSIBLE: 4-5 mg% ALTERACION RENAL IRREVERSIBLE: 10-30 mg% B. BILIRRUBINA 1.3 DETERMINACIÓN DE BILIRRUBINA GENERALIDADES UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página - 8 - i.Generalidades Entre los pigmentos biliares tenemos: a. Bilirrubina no conjugada o Bilirrubina Indirecta: Se forma a nivel del bazo y de la medula ósea. Se caracteriza por ser insoluble en agua, de la reacción de Vender Bergh indirecta y no se elimina por el riñón. b. Bilirrubina Conjugada ó Bilirrubina Directa: Formada en 8,0 a 85 96 en el hígado, se caracteriza por estar conjugada con una molécula de Ácido Glucorónico (Monoglucorónida) ó con dos moléculas de de Ácido Glucorónico (Diglucorumida) y con una molécula de Ácido sulfúrico (sulfoconjugada) de tal manera que existen tres tipos de bilirrubina directa. 1. Monoglucorónido de Bilirrubina, buena parte se forma en el RES 2. Diglucorónido de Bilirrubina, formado en su totalidad en el hígado. 3. Bilirrubina Sulfoconjugada formada también en el hígado. Estos tipos son solubles en el agua, dan la reacción de Van den Bergh Directa (Biconjugada) ó Bifásica (que estaría dado por las dos restantes; se filtran por el riñón y son las formas con la bilirrubina se excreta por la bilis al intestino. c. Urobilinógeno o Urobilina y el Estercobilinógeno y la Estercobilina que resultan de UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página - 9 - la acción de las bacterias de la flora intestinal sobre la Bilirrubina producto de reacciones y oxidación. Una parte es absorbida por la mucosa intestinal para luego el nivel hepático ser transformado nuevamente en Bilirrubina y otra parte ser eliminado por vía renal. Pero la mayor parte de los vbilinógenos formados en el intestino son eliminados por las heces. ii.Fundamentos del método 7. BILIRRUBINA ✓ ¿Qué es la bilirrubina? La bilirrubina es un componente de la bilis de color amarillo anaranjado. La bilis es el líquido de color verde brillante segregado por el hígado para ayudar a la digestión. La bilirrubina está formada principalmente por la degradación normal de la hemoglobina. La hemoglobina transporta oxígeno a las células dentro de los glóbulos rojos. La bilirrubina pasa a través del hígado. Después es excretada como bilis a través del intestino. Cuando se interrumpe este proceso, el exceso de bilirrubina mancha de amarillo otros tejidos corporales. Los tejidos grasos como la piel, el tejido del ojo y los vasos sanguíneos son los que más fácilmente son afectados. Los niveles más altos de bilirrubina están relacionados con un amplio abanico de enfermedades y problemas, entre las que estarían la ictericia relacionada con hepatitis y cirrosis, anemia, la enfermedad de Gilbert y la enfermedad de la célula de hoz. La http://gtt-vih.org/consultanos/glosario#term158 http://gtt-vih.org/consultanos/glosario#term158 http://gtt-vih.org/consultanos/glosario#term83 UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página - 10 - ictericia es habitual en bebés. Un nivel muy alto en bebés puede provocar daños permanentes (2009). ✓ Tipos de bilirrubina Existen dos tipos de bilirrubina en la sangre: ❖ No conjugada (indirecta): la bilirrubina es insoluble en agua. Esta es la bilirrubina antes de que pase por el hígado ❖ Conjugada (directa): la bilirrubina ha sido convertida en bilirrubina soluble en el hígado. ✓ ¿Por qué se realiza? El análisis de bilirrubina generalmente es uno de varios análisis que se hacen para controlar la salud del hígado. Este análisis se puede hacer para lo siguiente (mayoclinic): • Investigar si sufres ictericia, la coloración amarillenta de la piel y los ojos causada por niveles elevados de bilirrubina. Este análisis se hace comúnmente para medir los niveles de bilirrubina en recién nacidos con el fin de detectar ictericia infantil. • Determinar si puede haber una obstrucción en los conductos biliares, ya sea en el hígado o en la vesícula biliar. • Ayudar a detectar enfermedades hepáticas, en particular hepatitis, o controlar su avance. • Ayudar a evaluar la anemia causada por la destrucción de los glóbulos rojos. • Ayudar a hacer el seguimiento para saber si está funcionando un tratamiento. • Ayudar a evaluar una sospecha de toxicidad por medicamentos. UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página - 11 - Algunos análisis comunes que se pueden hacer al mismo tiempo que el análisis de bilirrubina incluyen: • Análisis de la función hepática. Análisis de sangre para medir ciertas enzimas o proteínas en la sangre. • Albúmina y proteína total. Los niveles de albúmina (una proteína producida por el hígado) y de proteína total indican si el hígado está produciendo correctamente ciertas proteínas que el cuerpo necesita para combatir infecciones y cumplir otras funciones. • Hemograma completo. Este análisis se realiza para medir los niveles de varios componentes y características de la sangre. • Tiempo de protrombina. Este análisis sirve para medir el tiempo de coagulación del plasma. ✓ NIVELES: (G, Ch., E, & C, 2002). ✓ GENERALIDADES La bilirrubina reacciona específicamente con el ácido sulfanílico diazotado produciendo un pigmento color rojo violáceo (azobilirrubina) Que se mide fotocolorimétricamente a 530 nm Si bien la bilirrubina conjugada (directa) reacciona con el diazoreactivo, la bilirrubina no conjugada (indirecta) requiere la presencia de un desarrollador- acuoso que posibilite su UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página - 12 - reacción. De forma tal que, para que reaccione la Bilirrubina total (conjugada y no conjugada) presente en la muestra, debe agregarse benzoato de cafeína al medio de reacción. Materiales - Tubos de ensayo - Gradilla - Pipetas de 2ml - Pipetas de 5ml Equipos - Centrífuga - Baño María - Espectrofotómetro Reactivos - Desarrollador: Solución acuosa de benzoato de cafeína, tamponada y estabilizada. - Nitrito de sodio: Solución de nitrito de sodio 0,07 mol/l - Reactivo sulfanílico: Solución de ácido sulfanílico 29 mmol/l y ácido clorhídrico 0,17 mol/l - Diazoreactivo: Mezclar 1 parte de Nitrito de sodio con 21 partes de Reactivo sulfanílico. UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página - 13 - iii.Procedimiento En tres tubos de ensayo, colocar: B D T Suero 200 ul 200ul 200ul Agua destilada 2,5ml 2,5ml - Desarrollador - - 2.5ml Reactivo sulfanílico 200ul - - Diazorreactivo - 200ul 200ul Mezclar de inmediato cada tubo por inversión. Luego de 5 minutos leer en el espectrofotómetro a 530mm, llevando el aparato a cero con agua destilada. Las lecturas pueden efectuarse entre 4 y 15 minutos, excepto la bilirrubina directaque debe leerse a los 5 minutos exactos. Si se lee antes habrá subvaloración de los resultados por reacción incompleta. Si se lee después habrá sobrevaloración porque comienza a reaccionar la bilirrubina libre. iv.Calculo de los resultados Bilirrubina Total (mg/l) : (T-B) x F Bilirrubina Directa (mg/l) : (D-B) x F UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página - 14 - Bilirrubina Libre (indirecta) : B-Total- B. Directa VALORES DE REFERENCIA Adultos Recién Nacidos Directa : Hasta 2mg/l Hasta las 24 horas : 60mg/l Total : Hasta 10mg/l Hasta las 48 horas : 75mg/l Del 3 al 5 día : 1250mg/ Resultados de absorvancia de los tubos: La absorvancia para los tres distintos tubos fue la siguiente ➢ ABS. BLANCO: 0.01 ➢ ABS. BILIRRUBINA DIRECTA: 0.03 ➢ ABS. BILIRRUBINA TOTAL: 0.09 Cálculo de bilirrubina total BILIRRUBINA TOTAL = (T - B)*F = (0.09 – 0.01)*21.63 UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página - 15 - = 1.73 mg% Cálculo de bilirrubina directa BILIRRUBINA DIRECTA = (D - B)*F = (0.03 – 0.01)*21.63 = 0.43 mg% Cálculo de bilirrubina indirecta BILIRRUBINA INDIRECTA = (T - D)*F = 0.08 – 0.02)*21.63 = 1.30 mg% III. CUESTIONARIO 1. Señale los factores de riesgo para influenciar los niveles elevados de Bilirrubina. UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página - 16 - Un exceso de bilirrubina en la sangre se manifiesta en un estado conocido como ictericia, siendo la principal característica de este proceso el que la piel adopte un tono amarillento o pálido. Existen causas diversas para el aumento de bilirrubina, dependiendo de si se trata de la forma directa o la forma indirecta de este compuesto. Así tenemos: Factores y enfermedades que generan aumento de niveles de bilirrubina directa (conjugada): Este tipo de hiperbilirrubinemia se da por procesos patológicos que no permiten se realice una excreción normal de la bilirrubina. El aumento de la bilirrubina directa puede indicar: • Obstrucción de la vía biliar: Ya sea por cálculos, tumores de la vía biliar o páncreas. • Enfermedades hepáticas colestásicas: Cirrosis biliar primaria, colangitis esclerosante primaria o secundaria, toxicidad por medicamentos y tóxicos, etc. • Hepatitis agudas: Una inflamación aguda del hígado puede producir elevaciones importantes de la bilirrubina por falla de la excreción a nivel de la célula hepática. En estos casos la elevación de bilirrubina es de predominio directo y se acompaña de elevaciones importantes de aminotransferasas (transaminasas, SGPT y SGOT). Las hepatitis virales (virus hepatitis A, hepatitis B), hepatitis por toxicidad de medicamentos UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página - 17 - (toxicidad por paracetamol) o tóxicos (p. ej. toxicidad por hongos) pueden producir daño hepático e ictericia. • Cirrosis: La cirrosis hepática puede acompañarse de elevaciones progresivas de la bilirrubina. Es importante destacar que la elevación de bilirrubina es un fenómeno relativamente tardío en las enfermedades hepáticas crónicas y refleja un daño importante de la función hepática. • Elevaciones aisladas de bilirrubina directa: Algunas enfermedades genéticas poco frecuentes se caracterizan por elevaciones aisladas de bilirrubina directa, con el resto de las pruebas hepáticas normales. Estos cuadros incluyen el síndrome de Rotor y Dubin- Johnson. El aumento de la bilirrubina indirecta o bilirrubina total pueden ser un signo de: • Síndrome de Crigler-NajjarSíndrome de Crigler-Najjar • Eritoblastosis fetalEritoblastosis fetal • Enfermedad de GilbertEnfermedad de Gilbert • Cicatrización de un hematoma grande (moretón o sangrado bajo la piel) • Anemia hemolíticaAnemia hemolítica • Enfermedad hemolítica del recién nacidoEnfermedad hemolítica del recién nacido • Hepatitis • Ictericia fisiológica (normal en los recién nacidos) • Anemia drepanocíticaAnemia drepanocítica http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/001127.htm http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/001298.htm http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/000301.htm http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/000571.htm http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/001559.htm http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/000527.htm UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página - 18 - • Reacción a una transfusiónReacción a una transfusión • Anemia perniciosaAnemia perniciosa 2. Señale dietas especiales para controlar los niveles de bilirrubina. Dieta rica en fibras Ingerir verduras y frutas El principio básico: no comer comidas que contienen almidón Es muy importante beber varios litros de agua por día, para ayudar a detoxificar el hígado. Remedios naturales: Tomar tres tazas de Eufrasia (Euphrasia officinalis L.), prepare una infusión con media cucharada de planta en una taza con agua hirviendo y tómesela después de un reposo de 20 minutos. También pueden ser útil las tisanas de Genciana amarga (Genciana lutea L.). Hacer una infusión de la planta entera dejándola reposar 20 minutos. Tomar 3 tacitas al día. http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/001303.htm http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/000569.htm UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página - 19 - El zumo de limón en ayunas ayuda a limpiar el hígado, su consumo todos los días puede ayudar a bajar los niveles de bilirrubina. Para evitar los vómitos se puede preparar una infusión de Manzanilla (Matricaria chamomilla L.) con Jengibre (Zingiber officinale R.). Prepare una ensalada de hojas de Diente de León (Taraxacum officinale W.) con aceite de oliva de primera presión en frío. Oligoterapia: Tomar suplementos de Vitamina C para fortificar el sistema inmunológico, 1000 mg diarios es la dosis recomendada. Para proteger el hígado se puede consumir estos aminoácidos, que se encuentran en farmacias o en herbolarios, Glutation, L-cisteína y L-metionina a razón de 500 mg diarios. Precaución: No se deben tomar con leche, porque se dificulta su absorción. Es recomendable tomar 60 mg diarios de Coenzima Q10 para aumentar la oxigenación celular. También es útil tomar 1.200 mg de Lecitina de soja, tres veces al día, para proteger las células hepáticas. Alimentos recomendados: ▪ Frutas ▪ Verduras ▪ Hortalizas UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página - 20 - ▪ Cereales integrales ▪ Pastas integrales ▪ Frutos secos ▪ Melazas de cereales ▪ Aceites de primera presión en frío Alimentos prohibidos: ▪ Huevos ▪ Lácteos y derivados ▪ Fritos ▪ Comidas grasas y procesadas ▪ Azúcar refinada ▪ Embutidos ▪ Carnes rojas ▪Carnes blancas ▪ Embutidos Oligoterapia, vitaminas y minerales: Vitamina B6 Vitamina C Vitamina E Glutation UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página - 21 - L-cisteína L-metionina Coenzima Q10 Comprimidos de Lecitina UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página 22 3. ¿Qué es ictericia? Explique Bioquímicamente. La ictericia se refiere al color amarillo que toma la piel debido al aumento de la bilirrubina en la sangre. La ictericia es uno de los síntomas más clásicos de las enfermedades del hígado y se manifiesta cuando la bilirrubina en la sangre aumenta sobre 2 a 3 mg/dL (el valor normal es inferior a 1). Habitualmente antes de producirse ictericia se produce coluria, que es la coloración oscura de la orina por excreción de la bilirrubina a través de los riñones. La ictericia no es una enfermedad en sí misma, sino que es un signo de alarma. La elevación de la bilirrubina habitualmente se debe a una falla en la excreción, ya sea porque el hígado tiene un problema (por ejemplo, hepatitis aguda) o por una obstrucción de la vía biliar. Menos frecuentemente hay ictericia por excesiva producción de bilirrubina, como por ejemplo en las anemias hemolíticas. El síndrome de Gilbert es una causa frecuente de elevación leve de bilirrubina y de ictericia. La ictericia se puede clasificar en 3 grupos fundamentalmente: 1. Ictericia prehepática. Por ejemplo la producida por una hemólisis. El incremento de la rotura de hematíes produce una hiperbilirrubinemia no conjugada que será superior a la capacidad de depuración del hígado. Habrá un aumento de bilirrubina indirecta en sangre y la bilirrubina directa será prácticamente normal. En orina habrá generalmente una elevación de urobilinógeno y no se detectará la bilirrubina, ya que la bilirrubina no conjugada, al ir fuertemente unida a la albúmina, no filtra por el riñón a la orina. UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página 23 2. Ictericia posthepática. Por una obstrucción extrahepática como es una coledocolitiasis. La obstrucción hace que la bilirrubina conjugada vuelva a la sangre y no pase al intestino. La hiperbilirrubinemia será fundamentalmente directa, con lo que habrá un aumento también de bilirrubina en orina. Al eliminarse poca bilirrubina hacia el intestino se forma muy poco urobilinógeno, con lo que las heces serán pálidas. Una vez retirada la obstrucción, las heces han de recuperar el color y la orina ha de ser positiva para urobilinógeno. 3. Ictericia hepática. Es un estado intermedio entre las dos anteriores. Puede ser debido a toxinas o infecciones como, por ejemplo, la hepatitis vírica. Habrá un aumento de bilirrubina directa e indirecta en sangre. En orina habrá una elevación de bilirrubina y el urobilinógeno estará poco aumentado o incluso puede estar disminuido. Explicacion: La bilirrubina es un producto de degradación de las proteínas que contienen el grupo hemo, como es la hemoglobina. El proceso de formación y metabolismo se explica a continuación: Los hematíes viejos, defectuosos o dañados, son retirados por unas células fagocíticas, llamadas macrófagos, que están situados, por ejemplo, en el bazo. Dentro de estos macrófagos la hemoglobina se metaboliza y el hemo se transforma en la bilirrubina, que es UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página 24 liberada a la sangre. Esta bilirrubina es muy poco soluble en agua y para su transporte en sangre va unida a la albúmina. Una vez que llega al hígado esta bilirrubina es captada por el hígado. Allí el hígado la une al ácido glucurónico, de forma que la bilirrubina se hace más soluble. Este glucurónido de bilirrubina se secreta activamente en la bilis y se dirige hacia el intestino. Las bacterias intestinales metabolizan esta bilirrubina y la transforman en una serie de pigmentos denominados urobilinógenos. Estos pigmentos son los que le dan a las heces el típico color amarillo marrón. Una parte de estos urobilinógenos, dado que son más solubles en agua, se reabsorben hacia la sangre y son eliminados por los riñones a la orina. La bilirrubina se determina en suero por métodos químicos y, según la forma de reaccionar, se diferencia clásicamente a la bilirrubina en directa e indirecta. El término bilirrubina directa comprende fundamentalmente a la bilirrubina conjugada con el ácido glucurónico y el término bilirrubina indirecta comprende fundamentalmente a la que va unida a la albúmina. En el suero se determina químicamente la bilirrubina total y directa y se calcula la indirecta por diferencia. Lo normal es una concentración de bilirrubina total menor de 1,2 mg/dl y la mayor parte es bilirrubina indirecta. En los individuos normales no debe de aparecer bilirrubina en orina. Cuando hay una elevación de bilirrubina directa en sangre, entonces se puede filtrar por el riñón y aparece en orina, con lo que ésta puede coger un color anaranjado. La presencia en orina de bilirrubina y urobilinógeno se puede detectar de forma fácil cualitativamente empleando tiras reactivas. UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página 25 Un aumento de la concentración en sangre de bilirrubina total conduce a una situación denominada ictericia. La ictericia se puede definir como una decoloración amarillo verdosa de la piel y membranas mucosas por una acumulación de bilirrubina. 4. El Urobilinógeno como aparece en sangre y en orina. El urobilinógeno es un producto de la conjugación de la bilirrubina por las bacterias intestinales en el tubo digestivo, que se absorbe hacia la circulación portal y es re-excretado por el hígado. Una cantidad mínima de urobilinógeno circula normalmente en la sangre y es eliminada finalmente por los riñones. El urobilinogeno es un producto incoloro, con estructura de tetrapirrol, que se produce por acción de las bacterias de la flora intestinal sobre la bilirrubina que proviene de la excreción biliar en el tracto digestivo. Es parcialmente absorbido por el sistema vascular portal, pasando al hígado donde es procesado los hepatocitos siendo excretado de nuevo en la bilis. En condiciones normales, sólo una pequeña parte del urobilinógeno es eliminado por vía renal (< 1 mg/24 horas) Sin embargo, en caso de enfermedades hepáticas o hematológicas en las que hay una superproducción de bilirrubina, el sistema de de transporte enterohepático se ve desbordado y una parte del urobilinógeno en exceso se eliminado por vía renal. En la orina, el urobilinógeno es transformado en uronilina, que confiere a la orina un color característico. El exceso de urobilinógeno en las heces es transformado en estercobilina un pigmento de UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página 26 color marrón. La bilirrubina entra en el hepatocito probablemente mediante un mecanismo de transporte facilitado, aunque este punto permanece sin aclarar ya que no se han conseguido aislar la proteína transportadora Una vez en el hepatocito, las cadenas laterales de la bilirrubina son conjugadaspara formar un diglucurónido, que es mucho más soluble que la bilirrubina con lo cual esta puede ser eliminada en la bilis. El glucurónido de la bilirrubina se absorbe pobremente por el tracto intestinal y es hidrolizados al final del ileón y en el intestino grueso por hidrolasas bacterianas, recuperándose la bilirrubina que es reducida in situ a urobilinógeno incoloro. El urobilinógeno puede ser transformado a urobilinas , productos coloreadas que son excretadas en las heces o puede ser parcialmente reabsorbido en el ileón terminal volviendo a entrar en el circuito hígado-bilis. Si el sistema biliar extrahepático está obstruído, no llega bilirrubina al intestino y no se detecta urobilinógeno en la orina o las heces. Algunas condiciones en los que los niveles de urobilinógeno están elevados son: ✓ Hepatitis ✓ Cirrosis ✓ Metástasis hepáticas ✓ Infartos hepáticos ✓ Ictericia hemolítica ✓ Resolución de grandes hematomas o grandes infartos hemorrágicos ✓ Colangitis UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página 27 5. La Bilirrubina directa del metabolismo de qué compuestos resulta, explique los pasos de la degradación del hem. La mayoría de la bilirrubina deriva de la hemoglobina liberada por la destrucción del eritrocito. El factor hem por la acción de la enzima hemo-oxigenasa se transforma en biliverdina, produciéndose además monóxido de carbono que se elimina por los pulmones y hierro libre que pueda ser reutilizado en la síntesis de hemoglobina. La biliverdina se convierte en bilirrubina por acción posterior de la biliverdina reductasa (NADPH). Esta bilirrubina se denomina indirecta o no conjugada y es un anión liposoluble y tóxico en su estado libre. Un gramo de hemoglobina produce 35 mg de bilirrubina y aproximadamente se forman 8-10 mg de bilirrubina al día por cada kilogramo de peso corporal. La albúmina capta dos moléculas de bilirrubina indirecta. La primera se une fuertemente a la bilirrubina, pero la segunda tiene una unión lábil y puede liberarse fácilmente en presencia de factores clínicos (deshidratación, hipoxemia, acidosis), agentes terapéuticos (ácidos grasos por alimentación parenteral) y algunas drogas (estreptomicina, cloranfenicol, alcohol benzílico, sulfisoxasole, ibuprofeno), que compiten con esta unión y liberan bilirrubina en forma libre a la circulación. Un gramo de albúmina puede unir hasta 8, 2 mg de bilirrubina. La bilirrubina indirecta libre penetra fácilmente al tejido nervioso causando encefalopatía bilirrubínica. UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página 28 Al llegar la bilirrubina al hepatocito se desprende de la albúmina y es captada en sitios específicos por las proteínas Y-Z (ligandinas), cuyos niveles son bajos los primeros 3-5 días de vida, las cuales transportan la bilirrubina indirecta al interior del hepatocito hacia el retículo endoplásmico liso, donde se lleva a cabo la conjugación, siendo la enzima más importante la uridil difosfoglucuronil transferasa-UDPGT y el producto final un compuesto hidrosoluble, la bilirrubina directa o glucuronato de bilirrubina. La bilirrubina directa o conjugada es excretada activamente hacia los canalículos biliares, la vesícula biliar y luego al intestino, donde la acción de las bacterias la transforman en urobilinogeno. La ausencia o escasa flora bacteriana, el inadecuado transito intestinal y la enzima beta glucuronidasa produce desconjugación de la bilirrubina que es reabsorbida por el intestino, incrementando la circulación entero hepática. UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página 29 6. Para qué sirve la glucoronida conjugación. De 3 ejemplos. La bilirrubina es no polar y puede persistir en las células (por ejemplo, ligada a lípidos) si no se convierte en hidrosoluble. Los hepatocitos la convierten en el tipo polar, que es la variedad que se excreta en la bilis, mediante la adición de moléculas de ácido glucorónico. Este proceso se denomina también conjugación y puede emplear otras moléculas polares aparte del ácido glucorónico. Por ejemplo, el sulfato. Puede ser utilizado en: ✓ Detoxificación ✓ Formación de pigmentos biliares UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página 30 ✓ Eliminación de drogas Proceso de conjugación de la Bilirrubina con el ácido-UDP-Glucorónico, para aumentar la solubilidad en agua o la polaridad de la bilirrubina o por un proceso y/o conjunto específico de enzimas. ACIDO-UDP-GLUCORONICO BILIRRUBINA MONOGLUCORONIDA UDP-GLUCORONIL + + TRANSFERASA BILIRRUBINA UDP ACIDO-UDP-GLUCORONICO BILIRRUBINA DIGLUCORONICA UDP-GLUCORONIL UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página 31 + TRANSFERASA + BILIRRUBINA UDP 7. La Bilirrubina es tóxica para el organismo del recién nacido. ¿Por qué? La bilirrubina libre o no conjugada, es una sustancia tóxica para el organismo. Una vez que el niño nace, él debe encargarse del metabolismo completo de la bilirrubina que produce. Su metabolismo se lleva a cabo en cuatro etapas importantes: Producción de la bilirrubina, transporte, captación y conjugación de la bilirrubina en el hepatocito y excreción y recirculación de la bilirrubina. Hay que recordar que en el recien nacido la producción de bilirrubina es casi el doble lo que provoca una ictericia fisiologica. La ictericia es comun en los recien nacidos. Resulta de dos fenomenos: 1. produccion de bilirrubina aumentada, causada por la lisis de los globulos rojos fetales, 2. bajo clearence hepatico causado por bajas concentraciones de proteinas ligadoras en los hepatocitos. En la gran mayoria de los neonatos la ictericia es un evento inocuo sin secuelas a largo plazo. En algunos, los efectos neurotoxicos de la bilirrubina pueden causar somnoencia/letargia, anorexia, y llanto alterado, y puede medirse por cambios en la respuesta auditiva central y UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página 32 por otros parametros neurofisiologicos. En la mayoria de estos niños los cambios aparentan ser reversibles despues de que disminuyen los niveles sericos de bilirrubna. En una minoria de niños con ictericia severa, la toxicidad por bilirrubina puede resultar en muerte neonatal, o sobrevida con secuelas permanentes en forma de coreoatetosis, paresias, sordera, y ocacionalmente retraso mental. La correlacion patologica de estacondicion consiste en la tincion amarillla de los ganglios basales comunmente conocida como “Kernicterus”. Para que la bilirrubina perturbe la funcion cerebral, esta debe entrar al cerebro. La bilirrubina es lipofilica con respecto a las membranas, y es esta caracteristica la que le permite atravesar una barrera hematoencefalica (BHE) intacta y entrar al cerebro. La glicoproteina P (PGP), encontrada en la membrana de una variedad de tejdos normales incluyendo la BHE, tiene un rol fisiologico en la proteccion del organismo contra los efectos potencialemente toxicos de la misma. La bilirrubina es transportada en el plasma unida a la albumina. La bilirrubina que se encuentra unida a albumina probablemente no atraviesa la BHE mientras esté intacta. Por lo tanto, de acuerdo a la teoria de la “bilirrubina libre2, la molecula de la bilirrubina no unida ingresa al cerebro para producir daño neuronal. Concentraciones aumentadas en sangre de bilirrubina no unida, harán, por las leyes del equilibrio, que pase más bilirrubina a os tejidos, incluyendo el cerebro. 8. ¿Cuáles son las reacciones de la síntesis de creatina y que metabolito final deja? UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página 33 El metabolito final de la creatina es la creatinina, la concentracion de esta es usada, en el plasma y en la orina como indicadores de la funcion renal desde hace mucho tiempo. En los seres humanos, la creatina se sintetiza principalmente en el hígado, en el pancreas y en menor medida, en los riñones. Se produce a partir de los aminoacidos glicina y arginina, mediante un proceso que involucra a dos reacciones catalizadas por las enzimas arginina: glicina amidinotransferasa (AGAT) y Guanidinoacetato Metiltransferasa (GAMT). Luego es transportada a través de la circulacion sanguinea y su almacenamiento se lleva a cabo mediante un proceso de transporte avtivo en los principales organos blanco especificos. Esta proteina transportadora de creatina es, tambien, la que permite el cruce de a barrera hematoencefalica. Se ha demostrado en mamiferos que la creatina se halla en una concentracion de 4 a 20 veces superior en el cerebro en sus organos de sintesis. Dentro de la celula, la enzima creatinkinasa (CK) interviene en la fosforilacion de la creatina para formar creatinafosfato. Esta al intraccionar con el ADP (adenosindifosfato) forma ATP (adenosintrifosfato), que actua a manera de reserva de energia. La cantidad de creatina excretada por la orina, es proporcional al pool de creatina corporal total. Por ultimo, tanto la creatina como la creatinafosfato son convertidas en creatinina por medio de un proceso no enzimatico y tambien es eliminada por orina. UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página 34 Ruta metabolica de la sintesis de creatina 9. ¿Por qué puede aumentar la creatinina en la sangre? Creatinina: Valor normal entre 0.6 y 1.2 mg/dl Es una proteína derivada del músculo que circula por la sangre y se elimina a través de la orina. Se emplea para valorar la función de los riñones. UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página 35 Aumenta - Cuando el riñón no funciona correctamente. El aumento de creatinina puede deberse a que la persona está un poco deshidratada, o a problemas dentro de los riñones o en las vías urinarias (por ejemplo, una obstrucción por un cálculo o por aumento del tamaño de la próstata). - También puede estar un poco por encima de lo normal en individuos muy musculosos, sin que esto tenga que estar relacionado con una enfermedad. 10. La creatinina fosfato, en qué tejido se encuentra y qué fines cumple. La creatina es un aminoácido presente naturalmente en el cuerpo y especialmente en el tejido muscular. Aunque no sea un nutriente esencial, esta íntimamente relacionada con el metabolismo humano (creatina fosfato) y eventualmente es catabolizada en la musculatura y excretada por vía renal. En la última década, la suplementación de creatina se convirtió en la estrategia nutricional más popular empleada por los atletas y practicantes de actividad física en general como recurso energético natural. Los efectos relatados por diversos estudios evidencian el aumento de la masa corporal, de masa corporal magra, de la capacidad de esfuerzo y de la velocidad de repetición del esfuerzo, de la fuerza y/o potencia y de la performance durante sesiones de esfuerzo con contracción muscular máxima. La suplementación con creatina evita la fatiga aumentando la disponibilidad del fosfato de creatina mediante el aumento de la resíntesis de creatina fosfato y reduciendo la acidosis muscular. Parece también que aumenta el metabolismo oxidativo e incrementa la carga de UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página 36 entrenamiento. Con el objetivo de analizar las investigaciones publicadas en los últimos diez años en relación con el desempeño en el ejercicio y el uso de la suplementación con creatina y sus posibles efectos ergogénicos, utilizamos en esta revisión los trabajos registrados en los principales bancos de datos electrónicos y revistas científicas de las áreas de fisiología aplicada y nutrición. CONCLUSIONES: ✓ La creatinina es el anhídrido de la creatina, se transforma en gran parte en los músculos por la eliminación no enzimática e irreversible del agua del fosfato de creatina y creatinina. ✓ La prueba de creatinina se usa para averiguar si los riñones están funcionando bien. ✓ Los niveles de creatinina altos en la sangre y bajos en la orina indican una enfermedad renal o que afecta el funcionamiento de los riñones ✓ La bilirrubina es un componente de la bilis de color amarillo anaranjado. La bilis es el líquido de color verde brillante segregado por el hígado para ayudar a la digestión. ✓ La bilirrubina está formada principalmente por la degradación normal de la hemoglobina. ✓ Los resultados normales de un análisis de bilirrubina total son 1,2 miligramos por decilitro (mg/dl) en los adultos y, generalmente, 1 mg/dl en los menores de 18 http://gtt-vih.org/consultanos/glosario#term158 UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA BIOQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA HUMANA Página 37 años. Los resultados normales de bilirrubina directa son generalmente de 0,3 mg/dl IV. BIBLIOGRAFIA: http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/003479.htm http://www.scribd.com/doc/8705335/-Creatinina-en-sangre http://www.hepatitis.cl/foro/index.php?topic=94.0 http://www.sap.org.ar/staticfiles/publicaciones/correo/cor3_03/1071.pdf http://books.google.com.pe/books http://themedicalbiochemistrypage.org/spanish/aminoacidderiva Nueva Bibliografía (14 de Setiembre de 2009). Obtenido de http://gtt- vih.org/aprende/enfermedades_y_sintomas/sintomas/bilirrubina G, B. A., Ch., A. H., E, O. L., & C, H. G. (diciembre de 2002). Obtenido de http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1609-91172002000200018 mayoclinic. (s.f.). Obtenido de https://www.mayoclinic.org/es-es/tests-procedures/bilirubin/about/pac- 20393041 medlineplus. (s.f.). Obtenido de https://medlineplus.gov/spanish/pruebas-de-laboratorio/prueba-de-creatinina/
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