Post Practica 1 y 2-Grup B Eq 3 - Ximena Monserrat Zapata Rodriguez

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UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE SAN LUIS POTOSÍ 
 
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS 
 
QUÍMICO FARMACOBIÓLOGO 
 
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA I 
 
 
NOMBRE DE LA PRÁCTICA ___1:” EFECTO DE LA CONCENTRACION DE 
SUSTRATO” 2: “EFECTO DE pH Y TEMPERATURA SOBRE LA ACTIVIDAD 
ENZIMATICA”______________ 
 
GRUPO ___” B" ____HORA _ 8:00 – 11:00__ EQUIPO: _ 3____ 
 
INTEGRANTES: 
1_______OLVERA FLORES GILBERTO__________________________________ 
2_______ZAPATA RODRIGUEZ XIMENA MONSERRAT ____________________ 
3__________________________________________________________________ 
4__________________________________________________________________ 
 
CRITERIO EVALUADO 
VALOR DEL 
CRITERIO (%) 
CALIFICACIÓN OBTENIDA (%) 
 1 2 3 4 
Cálculos previos a la 
practica 
10 
Participación 10 
Reporte 30 
Discusión y conclusiones 
de la práctica 
50 
TOTAL 100 
 
 
 
 
 
 
PRACTICA 1 “EFECTO DE LA CONCENTRACION DE SUSTRATO” 
 
1.- Complete los siguientes cuadros con los datos experimentales: 
Variación de la concentración de sustrato 
 
Tubo Volumen de urea 
(ml) 
Volumen de HCl 
(ml) 
Volumen corregido 
de HCl (ml) 
Blanco 0.5 0.1 ---------------- 
1 0.1 0.3 0.2 
2 0.2 0.5 0.4 
3 0.4 0.8 0.7 
4 1.0 1.3 1.2 
5 1.5 1.5 1.4 
 
𝑽𝒄𝒐𝒓𝒓𝒆𝒈𝒊𝒅𝒐 = 𝑽𝒑𝒓𝒐𝒃𝒍𝒆𝒎𝒂 − 𝑽𝒃𝒍𝒂𝒏𝒄𝒐 
 
 1) 0.3𝑚𝑙 − 0.1𝑚𝑙 = 𝟎. 𝟐𝒎𝒍 
 2) 0.5𝑚𝑙 − 0.1𝑚𝑙 = 𝟎. 𝟒𝒎𝒍 
 3) 0.8𝑚𝑙 − 0.1𝑚𝑙 = 𝟎. 𝟕𝒎𝒍 
 4) 1.3𝑚𝑙 − 0.1𝑚𝑙 = 𝟏. 𝟐𝒎𝒍 
 5) 1.5𝑚𝑙 − 0.1𝑚𝑙 = 𝟏. 𝟒𝒎𝒍 
 
 
2.- Escriba con fórmulas la reacción que cataliza la ureasa. 
 
𝑪𝑶(𝑵𝑯𝟐)𝟐 + 𝟐𝑯𝟐𝑶 → 𝟐𝑵𝑯𝟒
+ + 𝑪𝑶𝟑
𝟐− 
 
3.- Calcule los moles de sustrato y moles de producto formados por acción de la 
ureasa del experimento “variación de la concentración de sustrato” 
 
 
𝑴 = 
𝑵
#𝒄𝒂𝒎𝒃𝒊𝒐
 
 
𝑀 = 
0.1
𝑒𝑞 − 𝑔
𝐿
1
𝑒𝑞 − 𝑔
𝑚𝑜𝑙
= 𝟎. 𝟏
𝒎𝒐𝒍
𝑳
 
 
• Moles de Producto 
#𝒏 𝑯𝑪𝒍 = [𝑴] ∗ 𝑽𝒄𝒐𝒓𝒓𝒆𝒈𝒊𝒅𝒐 (𝑳) 
 
1) (0.1
𝑚𝑜𝑙
𝐿
) (2 × 10−4𝐿) = 𝟐 × 𝟏𝟎−𝟓 𝒎𝒐𝒍𝒆𝒔 
2) (0.1
𝑚𝑜𝑙
𝐿
) (4 × 10−4𝐿) = 𝟒 × 𝟏𝟎−𝟓 𝒎𝒐𝒍𝒆𝒔 
 
𝟑) (𝟎. 𝟏
𝒎𝒐𝒍
𝑳
) (𝟕 × 𝟏𝟎−𝟒𝑳) = 𝟕 × 𝟏𝟎−𝟓 𝒎𝒐𝒍𝒆𝒔 
 
𝟒) (𝟎. 𝟏
𝒎𝒐𝒍
𝑳
) (𝟏. 𝟐 × 𝟏𝟎−𝟑𝑳) = 𝟏. 𝟐 × 𝟏𝟎−𝟒 𝒎𝒐𝒍𝒆𝒔 
 
𝟓) (𝟎. 𝟏
𝒎𝒐𝒍
𝑳
) (𝟏. 𝟒 × 𝟏𝟎−𝟑𝑳) = 𝟏. 𝟒 × 𝟏𝟎−𝟒 𝒎𝒐𝒍𝒆𝒔 
 
1) 
𝟐 × 𝟏𝟎−𝟓𝒎𝒐𝒍𝒆𝒔 𝑯𝑪𝒍 |
𝟏𝒎𝒐𝒍 (𝑵𝑯𝟒)𝟐𝑪𝑶𝟑
𝟐𝒎𝒐𝒍 𝑯𝑪𝒍
| = 
 
𝟏 × 𝟏𝟎−𝟓𝒎𝒐𝒍 (𝑵𝑯𝟒)𝟐𝑪𝑶𝟑 
2) 
𝟒 × 𝟏𝟎−𝟓𝒎𝒐𝒍𝒆𝒔 𝑯𝑪𝒍 |
𝟏𝒎𝒐𝒍 (𝑵𝑯𝟒)𝟐𝑪𝑶𝟑
𝟐𝒎𝒐𝒍 𝑯𝑪𝒍
| = 
 
𝟐 × 𝟏𝟎−𝟓𝒎𝒐𝒍 (𝑵𝑯𝟒)𝟐𝑪𝑶𝟑 
3) 
𝟕 × 𝟏𝟎−𝟓𝒎𝒐𝒍𝒆𝒔 𝑯𝑪𝒍 |
𝟏𝒎𝒐𝒍 (𝑵𝑯𝟒)𝟐𝑪𝑶𝟑
𝟐𝒎𝒐𝒍 𝑯𝑪𝒍
| = 
 
𝟑. 𝟓 × 𝟏𝟎−𝟓𝒎𝒐𝒍(𝑵𝑯𝟒)𝟐𝑪𝑶𝟑 
 
4) 
𝟏. 𝟐 × 𝟏𝟎−𝟒𝒎𝒐𝒍𝒆𝒔𝑯𝑪𝒍 |
𝟏𝒎𝒐𝒍 (𝑵𝑯𝟒)𝟐𝑪𝑶𝟑
𝟐𝒎𝒐𝒍 𝑯𝑪𝒍
| = 
 
𝟔 × 𝟏𝟎−𝟓𝒎𝒐𝒍(𝑵𝑯𝟒)𝟐𝑪𝑶𝟑 
5) 
𝟏. 𝟒 × 𝟏𝟎−𝟒𝒎𝒐𝒍𝒆𝒔𝑯𝑪𝒍 |
𝟏𝒎𝒐𝒍 (𝑵𝑯𝟒)𝟐𝑪𝑶𝟑
𝟐𝒎𝒐𝒍 𝑯𝑪𝒍
| = 
 
𝟕 × 𝟏𝟎−𝟓𝒎𝒐𝒍(𝑵𝑯𝟒)𝟐𝑪𝑶𝟑 
 
• Moles de sustrato (CO(NH2)2) 
 
#𝒏 𝑪𝑶(𝑵𝑯𝟐)𝟐 = [𝑴] × 𝑽𝒍𝒊𝒕𝒓𝒐𝒔 
 
𝟏) (𝟎. 𝟐𝟓
𝒎𝒐𝒍
𝑳
) (𝟏 × 𝟏𝟎−𝟒𝑳) = 𝟐. 𝟓 × 𝟏𝟎−𝟓𝒎𝒐𝒍 
 
𝟐) (𝟎. 𝟐𝟓
𝒎𝒐𝒍
𝑳
) (𝟐 × 𝟏𝟎−𝟒𝑳) = 𝟓 × 𝟏𝟎−𝟓𝒎𝒐𝒍 
 
𝟑) (𝟎. 𝟐𝟓
𝒎𝒐𝒍
𝑳
) (𝟒 × 𝟏𝟎−𝟒𝑳) = 𝟏 × 𝟏𝟎−𝟒𝒎𝒐𝒍 
 
𝟒) (𝟎. 𝟐𝟓
𝒎𝒐𝒍
𝑳
) (𝟏 × 𝟏𝟎−𝟑𝑳) = 𝟐. 𝟓 × 𝟏𝟎−𝟒𝒎𝒐𝒍 
 
𝟓) (𝟎. 𝟐𝟓
𝒎𝒐𝒍
𝑳
) (𝟏. 𝟓 × 𝟏𝟎−𝟑𝑳) = 𝟑. 𝟕𝟓 × 𝟏𝟎−𝟒𝒎𝒐𝒍 
4.- Elabore una gráfica de moles de producto vs. moles de sustrato del 
experimento “variación de la concentración de sustrato” 
 
Moles de sustrato (𝑪𝑶(𝑵𝑯𝟐)𝟐) Moles de producto (𝑵𝑯𝟒)𝟐𝑪𝑶𝟑) 
𝟐. 𝟓 × 𝟏𝟎−𝟓𝒎𝒐𝒍 𝟏 × 𝟏𝟎−𝟓𝒎𝒐𝒍 
𝟓 × 𝟏𝟎−𝟓𝒎𝒐𝒍 𝟐 × 𝟏𝟎−𝟓𝒎𝒐𝒍 
𝟏 × 𝟏𝟎−𝟒𝒎𝒐𝒍 𝟑. 𝟓 × 𝟏𝟎−𝟓𝒎𝒐𝒍 
𝟐. 𝟓 × 𝟏𝟎−𝟒𝒎𝒐𝒍 𝟔 × 𝟏𝟎−𝟓𝒎𝒐𝒍 
𝟑. 𝟕𝟓 × 𝟏𝟎−𝟒𝒎𝒐𝒍 𝟕 × 𝟏𝟎−𝟓𝒎𝒐𝒍 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
0
0.00001
0.00002
0.00003
0.00004
0.00005
0.00006
0.00007
0.00008
0 0.00005 0.0001 0.00015 0.0002 0.00025 0.0003 0.00035 0.0004
n
 d
e
 p
ro
d
u
ct
o
 (
m
o
le
s)
n de sustrato (moles)
Universidad Autonoma de San Luis Potosi
Facultad de Ciencias Quimicas
Laboratorio de Bioquimica Metabolica 1
Practica1 "Efecto de la concentracion de sustrato"
n de producto (moles) vs. n de sustrato (moles)
5.- Escriba la discusión y conclusiones de la práctica. 
 
Discusión 
 
Basándonos el fundamento teórico de la velocidad de reacción, se esperaba 
observar la dependencia de la velocidad de reacción respecto a la 
concentración del sustrato, por lo cual observaríamos de manera gráfica una 
línea recta con pendiente positiva ya que estas variables son directamente 
proporcionales. Cabe mencionar que en caso de ir agregando más sustrato 
y llegar a un exceso de este la reacción alcanzaría su velocidad máxima y 
gráficamente observaríamos que en un punto de la gráfica ya no se obtendría 
un cambio y se presentaría una meseta. 
 
Si comparamos los resultados obtenidos de manera experimental podemos 
observar que efectivamente existe una relación directamente proporcional 
entre las concentraciones de sustrato y productos y por lo tanto que la 
velocidad depende de estas, también observamos gráficamente que la línea 
de tendencia es una línea recta con pendiente positiva y no podemos 
observar la meseta donde se alcanza la velocidad máxima debido a que no 
hicimos los problemas suficientes para observar esta etapa de la reacción. 
 
 
Conclusiones 
 
Con esta práctica se esperaba analizar el efecto que tiene la concentración 
del sustrato en la velocidad de reacción que cataliza la ureasa. Pudimos 
observar de manera experimental que al aumentar la concentración del 
sustrato (urea CO(NH2)2), aumentaba de manera proporcional la 
concentración del producto (carbonato de amonio (NH4)2CO3). Cabe 
mencionar que si se siguiera agregando sustrato llegaría un punto en donde 
la enzima dejaría de reaccionar esto debido a que sus sitios activos se 
saturarían. 
 
Al graficar las concentraciones del producto obtenido en cada problema 
contra las concentraciones del sustrato agregado se esperaba obtener una 
línea recta con pendiente positiva debido a que estas variables son 
directamente proporcionales y dependen una de la otra, con esto también 
podríamos comprobar que la velocidad de reacción enzimática es 
proporcional a ellas. La grafica obtenida nos muestra una línea de tendencia 
correspondiente a lo esperado, por lo cual podemos concluir con que se logro 
el objetivo de la práctica y logramos comprendender como es que se efectúa 
una reacción enzimática y el efecto que tienen en su cinética variables 
externas como la concentración. 
 
 
 
PRACTICA 2 “EFECTO DE pH Y TEMPERATURA SOBRE LA 
ACTIVIDAD ENZIMATICA” 
 
 
1.- Completa los siguientes cuadros experimentales 
 
Variación de temperatura 
Tubo Temperatura 
(°C) 
Volumen de HCl 
(mL) 
Volumen corregido 
De HCl (mL) 
Blanco 0.2 ------------------ 
1 0 0.4 0.2 
2 22 0.5 0.3 
3 50 2.1 1.9 
4 95 0.4 0.2 
 
 
Variación de pH 
tubo pH Volumen de HCl 
(mL) 
Volumen corregido 
de HCl (mL) 
B1 5.5 0.1 -------------------- 
P1 5.5 1.9 1.8 
B2 6.2 0.1 ------------------- 
P2 6.2 2 1.9 
B3 7.2 0.2 ------------------- 
P3 7.2 2.3 2.1 
B4 8.0 0.2 -------------------- 
P4 8.0 1.7 1.5 
B5 8.5 0.2 -------------------- 
P5 8.5 1.5 1.3 
 
 
2.- Con los datos anteriores calcule los moles de producto obtenidos por acción de la ureasa 
en cada experimento. 
 
• Temperatura: 
1) A temperatura de 0 °C 
(0.1n) (2x10-4 L) = 2x10-5 mol 
 
 𝟐 × 𝟏𝟎−𝟓𝒎𝒐𝒍𝒆𝒔 𝑯𝑪𝒍 |
𝟏𝒎𝒐𝒍 (𝑵𝑯𝟒)𝟐𝑪𝑶𝟑
𝟐𝒎𝒐𝒍 𝑯𝑪𝒍
| = 𝟏 × 𝟏𝟎−𝟓𝒎𝒐𝒍 (𝑵𝑯𝟒)𝟐𝑪𝑶𝟑 
 
2) Temperatura de 22 °C 
 (0.1n) (3x10-4 L) = 3x10−5𝑚𝑜𝑙 
 𝟑 × 𝟏𝟎−𝟓𝒎𝒐𝒍𝒆𝒔 𝑯𝑪𝒍 |
𝟏𝒎𝒐𝒍 (𝑵𝑯𝟒)𝟐𝑪𝑶𝟑
𝟐𝒎𝒐𝒍 𝑯𝑪𝒍
| = 𝟏. 𝟓 × 𝟏𝟎−𝟓𝒎𝒐𝒍 (𝑵𝑯𝟒)𝟐𝑪𝑶𝟑 
 
3) Temperatura de 50 °C 
 (0.1n) (1.9x10−3𝐿) = 1.9x𝟏𝟎−𝟒𝒎𝒐𝒍𝟏. 𝟗 × 𝟏𝟎−𝟒𝒎𝒐𝒍𝒆𝒔 𝑯𝑪𝒍 |
𝟏𝒎𝒐𝒍 (𝑵𝑯𝟒)𝟐𝑪𝑶𝟑
𝟐𝒎𝒐𝒍 𝑯𝑪𝒍
| = 𝟗. 𝟓 × 𝟏𝟎−𝟓𝒎𝒐𝒍 (𝑵𝑯𝟒)𝟐𝑪𝑶𝟑 
 
 4) Temperatura de 95 °C 
(0.1n) (2x10−4𝐿) = 2x𝟏𝟎−𝟓𝒎𝒐𝒍 
 
 𝟐 × 𝟏𝟎−𝟓𝒎𝒐𝒍𝒆𝒔 𝑯𝑪𝒍 |
𝟏𝒎𝒐𝒍 (𝑵𝑯𝟒)𝟐𝑪𝑶𝟑
𝟐𝒎𝒐𝒍 𝑯𝑪𝒍
| = 𝟏 × 𝟏𝟎−𝟓𝒎𝒐𝒍 (𝑵𝑯𝟒)𝟐𝑪𝑶𝟑 
 
 
• pH: 
1) P1 
 
(0.1n) (1.8x10−3𝐿) = 1.8x𝟏𝟎−𝟒𝒎𝒐𝒍 
(1.8x10−4𝑚𝑜𝑙)/2 = 9x𝟏𝟎−𝟓mol 
 
2) P2 
 (0.1n) (1.9x10−3𝐿) = 1.9x𝟏𝟎−𝟒𝒎𝒐𝒍 
 (1.9x10−4𝑚𝑜𝑙)/2 = 9.5x𝟏𝟎−𝟓mol 
 
 3. P3 
(0.1n) (2.1x10−3𝐿) = 2.1x𝟏𝟎−𝟒𝒎𝒐𝒍 
 
(2.1x10−4𝑚𝑜𝑙)/2 = 1.05x𝟏𝟎−𝟒mol 
 
 4. P4 
 (0.1n) (1.5x10−3𝐿) = 1.5x𝟏𝟎−𝟒𝒎𝒐𝒍 
 (1.5x10−4𝑚𝑜𝑙)/2 = 7.5x𝟏𝟎−𝟓mol 
 5. P4 
 (0.1n) (1.3x10−3𝐿) = 1.3x𝟏𝟎−𝟒𝒎𝒐𝒍 
 (1.3x10−4𝑚𝑜𝑙)/2 = 6.5x𝟏𝟎−𝟓mol 
 
3.- Elabore una gráfica de: moles de producto vs temperatura y una de moles de producto 
vs pH. 
 
• Temperatura vs moles de productos 
 
Temperatura °C moles de productos 
0 0.00001 
22 0.000015 
50 0.000095 
95 0.00001 
 
 
 
 
 
 
• pH vs moles de productos 
 
pH moles de 
productos 
5.5 0.00009 
6.2 0.000095 
7.2 0.000105 
8 0.000075 
8.5 0.000065 
 
 
0
0.00001
0.00002
0.00003
0.00004
0.00005
0.00006
0.00007
0.00008
0.00009
0.0001
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
n
 D
E
 P
R
O
D
U
C
T
O
 (
M
O
L
E
S
)
Temperatura (ºC)
Universidad Autonoma de San Luis Potosi
Facultad de Ciencias Quimicas
Laboratorio de Bioquimica Metabolica 1
Practica2 "Efecto de pH y temperatura sobre la actividad enzimatica"
n de productos (moles) vs. Temperatura (ºC)
 
 
 
 
4.- ¿De qué forma, afecta la concentración de H+ la velocidad de reacción? 
 
El pH al cual enzimas adquieren su máxima actividad es diferente para cada una 
de ellas, pero si se excede la enzima se puede desnaturalizar ya que no se 
encuentra en un ambiente optimo 
 
5.- ¿Cuál es la temperatura óptima para la mayoría de las enzimas humanas? 
La mayoría de las enzimas del cuerpo humano funcionan bien entre 36-37 °C, que 
es la temperatura corporal. Las enzimas humanas comienzan a desnaturalizarse 
rápidamente a partir de los 40°C. 
 
 
 
 
 
0
0.00002
0.00004
0.00006
0.00008
0.0001
0.00012
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9
n
 d
e
 p
ro
d
u
c
to
 (
m
o
le
s
)
pH
Universidad Autonoma de San Luis Potosi
Facultad de Ciencias Quimicas
Laboratorio de Bioquimica Metabolica 1
Practica 2 "Efecto de pH y temperatura sobre la actividad 
enzimatica"
n de producto (moles) vs. pH 
6.- Escriba la discusión y conclusiones de la práctica. 
 
Discusión 
 
Gracias a él fundamento teórico del efecto que tienen factores como la 
temperatura, el pH, la concentración, etc., Sobre la actividad enzimática podemos 
saber que las enzimas son sensibles a los cambios de temperatura, y que si su 
temperatura optima se ve afectada la enzima procederá a desnaturalizarse. Con 
los resultados de esta practica nos mostraron este efecto, pudimos observar que 
al modificar la temperatura de 50 ºC el trabajo de la enzima no será bueno puesto 
que obtuvimos menor cantidad de productos. 
 
Lo mismo paso con el cambio de pH pudimos observar que al modificar el pH 
optimo de 7.2 de la ureasa, la cantidad de productos que obtuvimos es menor que 
si se mantenía a este pH óptimo. Todos estos cambios los pudimos observar de 
mejor manera al realizar las gráficas. 
 
 
Conclusiones 
 
En esta práctica esperábamos poder observar y conocer mas a detalle el efecto que tienen 
los factores de temperatura y pH sobre la actividad enzimática. Sabemos que estos dos 
factores logran modificar el funcionamiento de una enzima y en este caso conocemos que la 
temperatura y pH óptimos para la ureasa son 50 ºC y 7.2 de pH. 
 
De manera experimental pudimos observar al realizar las gráficas correspondientes que si la 
temperatura o el pH están por debajo de sus valores óptimos la actividad enzimática estará 
baja, pero al ir aumentando estas condiciones la línea de tendencia aumentará también hasta 
llegar al valor óptimo. Al seguir aumentando estas condiciones observamos que la línea de 
tendencia comenzara a caer, con esto comprobamos que el sobrepasar las condiciones 
optimas de la enzima esta dejara de funcionar como normalmente lo haría, seria ineficiente 
y no solo eso, sino que podría comenzar a desnaturalizarse.