1 Microscopio

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Presentado por:
Juan Felipe Bejarano Bedoya
Laura Marcela Osorio Cubillos
Yuliana Andrea Ruiz Marín 
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Práctica de laboratorio I
Microbiología
Programa de Química
Facultad de Ciencias Básicas y Tecnologías
Universidad del Quindío
2019-I
Objetivos
Introducción 
Tipos de microscopios
Partes del microscopio y manejo
Mantenimiento
Comparación entre microscopio optico y electronico
Tinciones diferenciales
¿Qué vamos hacer hoy?
Conclusiones 
Referencias Bibliográficas
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CONTENIDO
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OBJETIVOS
Conocer e identificar las diferentes partes del microscopio y su uso.
Aprender el manejo adecuado del microscopio.
Realizar una comparación entre microscopio optico y electronico
Conocer el fundamento de las coloraciones.
Estudiar los diferentes tipos de coloraciones.
Observar y diferenciar las distintas morfologías bacterianas.
Comprender el fundamento de la Tinción Gram y la importancia que tiene este método para diferenciar la estructura de las células procariotas.
Microscopio
La microscopía es el conjunto de métodos que se utilizan para visualizar objetos muy pequeños que están fuera del alcance de resolución del ojo humano. El tipo de microscopio más utilizado es el microscopio óptico. Este consiste en dos sistemas de lentes, el objetivo y el ocular, montados en extremos opuestos de un tubo cerrado. 
Cuando se mira a través del ocular se ve una imagen virtual aumentada de la imagen real. El aumento total del microscopio depende de las distancias focales de los dos sistemas de lentes. Los objetivos tienen diferente poder de resolución que puede ser: 4X, 10X, 40X y 100X, el resultado final de número de aumentos se da multiplicando el aumento del ocular por el aumento del objetivo que se está utilizando; ejemplo: ocular 10X y el objetivo es de 40X, el resultado será 400. 
 
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INTRODUCCIÓN
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Tinciones 
Las tinciones son utilizadas para teñir las células y aumentar su contraste, de modo que se puedan ver con facilidad al microscopio. Los colorantes son compuestos orgánicos y cada colorante tiene una afinidad por materiales celulares específicos.
En la microbiología es fundamental la observación de los microorganismos. Esta observación se hace necesaria para su clasificación e identificación. Para ello se usa el microscopio tanto óptico como electrónico. 
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TIPOS DE MICROSCOPIOS
microscopio simple 
microscopio óptico 
microscopio compuesto
microscopio electrónico 
microscopio digital 
microscopio fluorescencia 
microscopio estereoscópico 
microscopio quirúrgico 
PARTES DEL MICROSCOPIO Y USOS
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MECÁNICA: La base es la que da soporte al microscopio y es la que se une al brazo, este sirve como asa para sujetar y transportar el aparato.
ÓPTICA: Los lentes oculares están en la parte superior del tubo y es por donde se observa la muestra. 
LUMÍNICA: Está ubicada por debajo de la platina y consta de un espejo (con una cara cóncava y una plana) que recibe los rayos luminosos y los refleja hacia la preparación a través del condensador, la cantidad de luz que llega a la preparación se regula abriendo o cerrando el diafragma.
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Mantenimiento 
Dejar puesto el objetivo de menor aumento en posición de observación.
Mantener cubierto con su funda para evitar que se ensucien y dañen las lentes.
Nunca hay que tocar las lentes con las manos.
No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se está utilizando el microscopio.
Después de utilizar el objetivo de inmersión, hay que limpiar el aceite que queda en el objetivo (limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona (7:3) o xilol ) .
No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio.
El cambio de objetivo se hace girando el revólver y dirigiendo siempre la mirada a la preparación para prevenir el roce de la lente con la muestra. 
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COMPARACIÓN MICROSCOPIO OPTICO Y ELECTRONICO
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TINCIONES DIFERENCIALES
TINCIÓN DE GRAM
 
El método de identificación de bacterias mediante una tinción específica, Tinción de Gram, fue Desarrollado por el médico danés Hans Christian Joachim Gram y es un procedimiento utilizado universalmente para distinguir a las bacterias en dos grandes grupos: Bacterias Gram + y Bacterias Gram -. Esta tinción diferencial basa su distinción en la estructura diferente de la pared bacteriana de las bacteria Gram + (pared más gruesa, y una sola capa de peptidoglucano) y de las Gram- (pared más delgada y dividida en dos partes). 
Colorante básico Cristal Violeta o Violeta de Genciana: Es un colorante selectivo que tiñe a todos los microorganismos.
Lugol: Producto compuesto de yodo y yoduro potásico. Es un mordiente, que intensifica al Cristal Violeta haciendo que precipite.
Safranina: Colorante básico diferenciador, tiñe a las bacterias gram.
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TINCIÓN DE ZIEHL-NEELSEN PARA COLORACIÓN DE MICOBACTERIAS Y BACTERIAS SIMILARES A HONGOS 
Las paredes celulares de ciertos parásitos y bacterias contienen ácidos grasos de cadena larga que les confieren la propiedad de resistir la decoloración con alcohol-ácido, después de la tinción con colorantes básicos. Por esto se denominan ácido-alcohol resistentes BAAR. 
Esta tinción requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras. Se ha desarrollado una coloración de ácido-alcohol resistencia modificada que diferencia las especies de Nocardia de los actinomiceos, son decoloradas por la mezcla ácido-alcohol estándar pero no por un tratamiento más suave con ácido sulfúrico 0,5 a 1%. Estos microorganismos se denominan ácido-alcohol resistentes parciales o débiles. 
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TINCIÓN DE ESPORAS WIRTZ-CONKLIN 
Algunos géneros bacterianos, entre los que destacan Clostridium y Bacillus, producen en su interior formas de resistencia denominadas endosporas. Se producen cuando las condiciones ambientales son desfavorables formándose una espora por cada forma vegetativa. Al finalizar el proceso de esporogénesis, la célula vegetativa se lisa y libera la espora al exterior. Cuando el ambiente es favorable, la espora germina generando una nueva forma vegetativa. La capacidad de germinar perdura durante años. Algunas de las bacterias productoras de endosporas son patógenas para el hombre, por lo que su estudio y observación son de enorme interés. 
Verde malaquita: capaz de teñir las esporas en caliente. 
Safranina: colorante de contraste que tiñe las formas vegetativas. 
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TINCIÓN DE WRIGHT
Se emplea generalmente para la diferenciación de elementos celulares de la sangre y es clasificada como una tinción policromática, dado que puede tener compuestos ácidos o básicos presentes en la célula. 
Eosina: Colorante ácido que tiene como afinidad compuestos alcalinos, colorea componentes citoplasmáticos de color rosado - anaranjado y rojo intenso en el caso de eritrocitos. 
Azul de metileno: 
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¿Qué vamos hacer hoy?
Pasos tinciones de Gram 
 
 
 
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Las bacterias que retienen el colorante cristal violeta y aparecen coloreadas de azul o violeta intenso, son Gram positivas. 
Aquellas que pierden este colorante y se tiñen de rojo con el colorante safranina son Gram negativas. 
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PRUEBA DEL HIDRÓXIDO DE POTASIO (KOH)
 
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Interpretación: Si al separar el asa de la mezcla se forma una hebra viscosa, la prueba es positiva e indica que se trata de bacterias Gram negativas. Si al separar el asa no se forma hebra, la prueba es negativa, e indica que las bacterias son Gram positivas.
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El Microscopio es cualquiera de los distintos tipos de instrumentos que se utilizan para obtener una imagen aumentada de objetos minúsculos o detalles muy pequeños de los mismos.
Las tinciones diferenciales se denominan así porque son procedimientos mediante los cuales no se tiñen del mismo modo todas las bacterias
La tinción es importante en la microbiología debido a que proporciona contraste entre microorganismos y el medio que lo rodea permitiendo diferenciar varios tipos morfológicos y a su vez permite el estudio de las estructuras internas de las células bacterianas.‹#›
CONCLUSIONES
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file:///C:/Users/pc/Downloads/Guia-4-TINCIONES-DIFERENCIALES-DE-C%C3%89LULAS-PROCARIOTAS-Y-EUCARIOTAS.pdf
https://www.mundomicroscopio.com/partes-del-microscopio/
http://ecociencia-chile.blogspot.com/2015/04/microscopio-tarea-primero-medio.html
file:///C:/Users/usuario/Downloads/LABORATORIO%202%20Uso%20y%20manejo%20del%20microscopio.pdf 
http://www.bio-nica.info/biblioteca/TincionBacterias.pdf
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REFERENCIAS
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