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CORONAVIRIDAE CORONAVIRIDAE Son virus ARN grandes con cubierta Virión: Esférico de 120-160 nm de diámetro, nucleocápside helicoidal Genoma: ARN de cadena única, lineal, no segmentado Proteínas: Dos proteínas y una fosfoproteína. Alguno virus contienen una tercera proteína, una glucoproteína (hemaglutinina esterasa) Cubierta: Contienen espigas grandes, altamente distribuidas Replicación: En el citoplasma. Las partículas maduran por gemación en el retículo endoplasmático y en el aparato de Golgi Características notables: Causan resfriados y síndromes respiratorio agudo y grave Muestran recombinación con gran frecuencia y dificultad para crecimiento celular Principales proteínas Proteína de la nucleocápside (N) fosforilada Glucoproteína de membrana (M) que sirve como matriz proteica integrada en la bicapa lipídica de la cubierta Glucoproteína en espiga (S) que constituye los peptómeros en forma de pétalo Glucoproteína HE que produce hemaglutinación CORONAVIRIDAE: MULTIPLICACIÓN VIRAL El virus se adhiere a los receptores situados en las células específicas mediante las glucoproteínas en espiga de la cubierta viral (mediante S o HE). El receptor funcional para SARS-CoV es la enzima 2 que convierte a la angiotensina. Replicación tiene lugar en el citoplasma La partícula entra por absorción por endocitosis. La glucoproteína S puede provocar fusión de la cubierta viral con la membrana celular Traducción del ARN genómica viral para producir un ARN polimerasa dependiente del ARN específico del virus ENZIMA DE CONVERSIÓN DE LA ANGIOTENSINA 2 ECA2 CORONAVIRIDAE: MULTIPLICACIÓN VIRAL La polimerasa viral transcribe un ARN complementario de longitud completa (cadena de signo negativo) que sirve como plantilla para alojar un conjunto de 5 a 7 ARN mensajeros subgenómicos Las moléculas de ARN genómico sintetizadas interactuan en el citoplasma con la proteína de nucleocapside para formar nucleocapsides helicoidales Las nucleocapsides geman a través de la membrana del retículo endoplásmico rugoso y del Aparato de Golgi en áreas que contienen las glucoproteínas virales. A continuación, los viriones maduros pueden transportarse en vesículas a la periferia de la célula para salir o esperar hasta que la célula muera para liberarse GLUCOPROTEÍNA S La glicoproteína S forma los peplómeros grandes en la superficie del virión, lo que le da al virus su corona o morfología similar a una corona cuando se examina bajo el microscopio electrónico. La proteína S es una glicoproteína de membrana de tipo I muy glicosilada que se puede dividir en tres dominios estructurales: un gran dominio externo N-terminal dividido en dos dominios, S1 y S2; una transmembrana dominio; y un dominio citoplásmico carboxiterminal corto. las mutaciones en las secuencias S1 se han asociado con alteraciones de la antigenicidad, patogenicidad, y tropismo celular del virus REPLICACIÓN VIRAL EL ESPECTRO DE TROPISMO Y HOSPEDARORES VA A DEPENDER DE LA PROTEÍNA S PUEDEN INGRESAR POR FUSIÓN O POR ENDOSOMAS LOS RECEPTORES CELULARES VARÍAN DEPENDIENDO DEL TIPO DE CORONAVIRUS: SARS: LA ENZIMA 2 QUE CONVIERTE LA ANGIOTENSINA ALFACORONAVIRUS: AMINOPEPTIDASA N (APN O CD13) MUCHOS CORONAVIRUS INTERACTUAN CON LECTINAS TIPO C, QUE SIRVEN COMO FACTORES DE UNIÓN NO ESPECÍFICA LA REPLICACIÓN SE DA EN UNA RED DE MEMBRANAS EXTENSAS DE VESÍCULAS DERIVADAS DEL RETÍCULO ENDOPLÁSMICO MODIFICADAS POR EL VIRUS REPLICACIÓN VIRAL EL ARN VIRAL SIRVE COMO ARNm PARA LA SÍNTESIS DE UNA POLIMERASA ADN DEPENDIENTE DE ARN (RdRp) ORF1a Y ORF1b QUE CODIFICAN LAS SUBUNIDADES DE LA POLIMERASA SE TRADUCEN COMO UNA SOLA POLIPROTEÍNA (pp1a o pp1ab) Coronaviridae: Diagnóstico de Laboratorio A. DETECCIÓN DE ANTÍGENO Y DE ÁCIDO NUCLEICO B. AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DEL VIRUS Es difícil de aislar, sin embargo se aislo es SARS-COV en células de riñón de mono Vero C. SEROLOGÍA PATOGÉNESIS Los coronavirus tienden a ser altamente especie-específicos La mayoría muestran un tropismo por células epiteliales del tracto respiratorio y gastrointestinal El virus del SARS probablemente se originó en un huésped no humano, probablemente murciélagos, se amplificó en civetas de palma y se transmitió a los humanos en los mercados de animales vivos. Los murciélagos de herradura chinos son reservorios naturales del SARS como los coronavirus. ORDEN NIDOVIRALES FAMILIA ARTERIVIRIDAE FAMILIA CORONAVIRIDAE FAMILIA RONIVIRIDAE MESONIVIRIDAE Arteriviridae. VIRUS DEL SÍNDROME RESPIRATORIO Y REPRODUCTIVO PORCINO VIRUS DE LA ARTRITIS EQUINA Arteriviridae. Virus con envoltura ARN lineal de cadena simple de sentido positivo Los arterivirus son más pequeños que los coronavirus, pero su organización genómica y su estrategia de replicación general es muy similar a la de los coronavirus. Se replican en el citoplasma y utilizan un modo discontinuo de transcripción para generar ARN subgenómicos. Arteriviridae. Los viriones de arterivirus son esféricos, de 45 a 60 nm de diámetro y consisten en una nucleocápside isométrica de 25 a 39 nm de diámetro, rodeada por una envoltura lipídica. Arteriviridae. La familia Arteriviridae (género Arterivirus) contiene cuatro virus específicos de especie que infectan de la siguiente manera: (i) caballos, burros, mulas y cebras (miembros de la familia Equidae), virus de la arteritis equina (EAV); (ii) porcino, virus del síndrome respiratorio y reproductivo porcino (PRRSV); (iii) monos, virus de la fiebre hemorrágica de los simios (SHFV); (iv) ratones, virus que eleva la lactato deshidrogenasa (LDV) Arteriviridae. Los arterivirus se dirigen principalmente a los macrófagos en sus respectivos hospedadores, y el resultado de la enfermedad es muy variable e incluye infecciones asintomáticas persistentes, enfermedades respiratorias, insuficiencia reproductiva (aborto) y fiebre hemorrágica letal. Arteriviridae. Mientras que las espinas de glicoproteína son prominentes en coronavirus y ronivirus, son pequeñas en viriones de arterivirus Estrategia de replicación distintiva que utiliza un conjunto anidado de 3 ARN mensajeros subgenómicos coterminales (ARNm). Los viriones de EAV y PRRSV consisten de una proteína de nucleocapside (N) y siete proteínas de envoltura (E, GP2, GP3, GP4, proteína ORF5a , GP5, M) Arteriviridae: Multiplicación viral El rango de hospedadores de arterivirus es muy restringido y todos los arterivirus comparten la capacidad de establecer infecciones asintomáticas prolongadas o persistentes en sus respectivos hospedadores naturales. Los arterivirus se replican en macrófagos Los receptores potenciales son: CD163 (una proteína celular en la superfamilia rica en cisteína del receptor eliminador) Sialoadhesina (o lectina 1 similar a la inmunoglobulina (Ig) de unión al ácido siálico (CD169). Glicosaminoglicanos de heparán sulfato Arteriviridae: Multiplicación viral SINDROME RESPIRATORIO REPRODUCTIVO PORCINO El virus puede introducirse en un rebaño a través de animales infectados, semen o fómites contaminados. El PRRS tiene dos presentaciones clínicas distintas: Insuficiencia reproductiva y enfermedad respiratoria posterior al destete. PRRS puede atravesar la placenta. Si el virus atraviesa la placenta en el tercer trimestre de gestación, los lechones pueden ser virémicos al nacer y pueden transmitir el virus durante 2-3 meses. La forma respiratoria de la enfermedad afecta a los lechones, provocando neumonía y dificultad respiratoria. La neumonía se desarrolla porque el virus infecta a los macrófagos alveolares y la infección es citopática. El PRRSV también predispone a los cerdos a infecciones secundarias DIAGNÓSTICO PCR: Para arteritis viral equina la mayoría de los diagnósticos por RTPCR se basan en los cebadores derivados del gen ORF7 más conservador que codifica la proteína N de nucleocápsida RHABDOVIRIDAE RHABDOVIRIDAE RABIA: GENERO Lyssavirus DE LA FAMILIA Rhabdoviridae (Brown et al., 1979) VIRUS ARN MONOCATENARIO DE SENTIDO NEGATIVO (FORMA DE BALA) PRESENTAUNA ENVOLTURA DE MEMBRANA DE LIPOPROTEÍNA CON PROYECCIONES TIPO ESPIINA (6-9 nm) QUE SE EXTIENDEN DESDE SU SUPERFICIE EXCEPTO EN SU BASE Rhabdoviruses SON DE APROXIMANDAMENTE 180 nm DE LARGO Y 75 nm DE ANCHO. LA GLICOPROTEÍNA G ES EL PRINCIPAL FACTOR DE VIRULENCIA EL GENOMA DEL VIRUS DE LA RABIA CODIFICA CINCO PROTEÍNAS DE UN NÚMERO IGUAL DE ARN MENSAJEROS QUE CONTIENEN INFORMACIÓN PARA UNA SOLA CADENA POLIPEPTÍDICA. RABIA: ETIOLOGÍA TODOS LOS RABDOVIRUS TIENEN DOS COMPONENTES ESTRUCTURALES PRINCIPALES: UN NÚCLEO DE RIBONUCLEOPROTEÍNA HELICOIDAL (RNP) UNA ENVOLTURA CIRCUNDANTE. CARACTERÍSTICAS Presenta cinco proteínas estructurales: G, M2(M), L, M1(P) y N (Nucleoproteína). La cubierta de lípidos y lipoproteína constituye la glicoproteína G (proteína G) y hacia ella se producen los anticuerpos neutralizantes. La proteína de membrana o matriz (proteína M2) es importante como intermediario y catalítico entre y dentro de la envoltura viral y la nucleocápside (NC). Una transcriptasa (proteína L) La fosfoproteína (proteína NS o proteína M1 o proteína P) La proteína P se une a la N para la síntesis del ARN viral RHABDOVIRIDAE El virus de la rabia se une a las células por medio de sus espigas de glucoproteína: el receptor nicotínico de la aceticolina puede servir como receptor celular para el virus de la rabia El genoma de ARN de una sola cadena es transcrito por la ARN polimerasa relacionada con el virion a CINCO ESPECIES DE ARN MENSAJERO La plantilla para la transcripción es el genoma de ARN en forma de ribonucleoproteína (encerrado en la proteína N y el cual contiene la transcriptasa viral) REPLICACIÓN VIRAL El ARN monocistrónico codifica las cinco proteínas del virión: NUCLEOCÁPSIDE (N), PROTEÍNAS POLIMERASAS L Y P, MATRIZ M Y GLUCOPROTEÍNA G LAS MISMAS PROTEÍNAS VIRALES SIRVEN COMO POLIMERASAS PARA LA REPLICACIÓN DE ARN VIRAL y también para la transcripción El ARN genómico recién formado se une a la transcriptasa viral y a la nucleoproteína para formar centros de RNP en el citoplasma Las partículas adquieren cubierta por gemación a través de la membrana plasmática MURCIÉLAGOS HEMATÓFAGOS DESMODUS ROTUNDUS DIPHYLLA ECAUDATA DIAEMUS YOUNGI SUBFAMILIA Desmodontinae INMUNIDAD La glicoproteína y la nucleoproteína son los antígenos inductores más importantes para conocer si hay protección contra la rabia. A diferencia de la proteína G, la N es la más conservada a través de los diferentes genotipos, estimula la producción de células TH, induce protección cruzada contra retos intramusculares y estimula la producción de anticuerpos neutralizantes inducidos por las vacunas clásicas DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO No hay test para el diagnóstico de la infección por rabia en humanos antes del inicio de los signos clínicos. La rabia puede ser diagnosticada a partir de animales eutanaziados mediante el test de anticuerpos fluorescentes directos de tejido cerebral ANTÍGENOS DE RABIA O ÁCIDOS NUCLEICOS Usando anticuerpos monoclonales mediante inmunofluorescencia o inmunohistoquímica. Corpúsculo de negri da el diagnostico definitivo SEROLOGÍA Anticuerpos serológicos para personas vacunadas, pero no para diagnóstico 3. AISLAMIENTO VIRAL 4. OBSERVACIÓN DEL ANIMAL
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