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UNIVERSIDAD DE SANTIAGO DE CHILE Av. Libertador Bernardo O´Higgins nº3363 - Estación Central - Santiago – Chile www.usach.cl Facultad de Ciencias Médicas Morfología General Módulo Histo-Embriología 2023 Práctico N°2: Tejido Conectivo I. Introducción Los tejidos conectivos se originan del mesénquima embrionario y están ampliamente distribuidos en nuestro organismo. Desempeñan funciones mecánicas (relleno, armazón, sostén), de nutrición e intercambio metabólico, defensa, reserva y reparación. Se clasifican en tejido conectivo embrionario (mesenquimatoso o mucoso), tejido conectivo propiamente tal (laxo [Figura 1], denso regular [Figura 2] o denso irregular [Figura 3]) y tejido conectivo especial (cartilaginoso, óseo, sanguíneo y hematopoyético, linfático o adiposo). Estos tejidos están constituidos por un componente celular, el cual varía en cantidad y características según cada subtipo de tejido conectivo y un componente intercelular denominado matriz extracelular (MEC). La matriz extracelular (MEC) está formada por fibras y sustancia fundamental, que se compone de moléculas especializadas secretadas por las células del mismo tejido conectivo. Las fibras se pueden clasificar en colágenas, reticulares y elásticas. Las reticulares y colágenas están formadas por distintos tipos de colágeno, que se diferencian de acuerdo al tipo de cadena alfa que conforme la triple hélice de tropocolágeno, mientras que las fibras elásticas, están formadas principalmente por elastinas. Sustancia fundamental: La sustancia fundamental tiene la consistencia de una solución viscosa o un gel de densidad variable altamente hidratado. Presenta macromoléculas de polisacáridos llamados glucosaminoglucanos (GAGs) o proteoglucanos cuando los GAGs se unen a una proteína. Estas estructuras están asociadas a líquido tisular proveniente del plasma sanguíneo. La sustancia fundamental también presenta glucoproteínas de adhesión como laminina, fibronectina, entactina o condronectina, cuya función esencial es la adhesión entre células y elementos de la MEC. Células: Células fijas Células migrantes o transitorias Población exclusiva y estable del tejido conectivo, donde se desarrollan y ejercen sus funciones. Se desarrollan en la médula ósea y pasan de la sangre al tejido conectivo donde efectúan su función. En general son de vida corta y son continuamente reemplazadas. UNIVERSIDAD DE SANTIAGO DE CHILE Av. Libertador Bernardo O´Higgins nº3363 - Estación Central - Santiago – Chile www.usach.cl Fibroblastos, macrófagos, células madre mesenquimáticas, adipocitos (originadas del mesénquima) y mastocitos (originados de la médula ósea). Son monocitos, plasmocitos, linfocitos, neutrófilos, basófilos y eosinófilos. Clasificación del tejido conectivo Tejido conectivo propiamente tal 1. Laxo: Es un tipo de tejido conectivo compuesto mayormente de sustancia fundamental con escasas y delgadas fibras de colágeno. La sustancia fundamental tiene una consistencia viscosa. Dentro de las funciones de este tipo de tejido se encuentran la difusión de sustancias nutritivas y oxígeno hacia otros tejidos, y dar soporte estructural y recubrimiento a glándulas y órganos tubulares. También es posible encontrarlo bajo los epitelios que recubren externamente al cuerpo. 2. Denso regular: Está constituido por abundantes fibras colágenas, MEC escasa y una baja cantidad de células, siendo el tipo celular predominante el fibroblasto. Las fibras colágenas se encuentran distribuidas en haces paralelos para otorgar la mayor resistencia posible. Entre estos haces es posible encontrar fibroblastos, los cuales se encargan de mantener las fibras. Ejemplos de tejido conectivo denso regular son los tendones, las aponeurosis y los ligamentos. 3. Denso irregular: Está constituido principalmente por fibras colágenas, las cuales, al contrario del tejido conectivo denso regular, se encuentran distribuidas en todas las direcciones. Esta característica le otorga resistencia al tejido frente a fuerzas de estiramiento múltiples. Este tejido tiene muy poca MEC y células, siendo nuevamente el tipo celular predominante el fibroblasto. Un ejemplo de este tejido es la capa reticular de la dermis. Figura 1: Corte de Ilio, área demarcada corresponde a tejido conectivo laxo. Disponible en [1] Figura 2: Tejido conectivo denso regular. Disponible en [1] Figura 3 Tejido conectivo denso irregular. Disponible en [1] UNIVERSIDAD DE SANTIAGO DE CHILE Av. Libertador Bernardo O´Higgins nº3363 - Estación Central - Santiago – Chile www.usach.cl Tejido conjuntivo embrionario 1. Mesénquima: se encuentra en el embrión y es el que dará origen a los otros tipos de tejido conectivo del cuerpo. Se forma de una red de células fusiformes comunicadas entre sí por uniones de hendidura y suspendidas en una sustancia fundamental viscosa, con una escasa cantidad de fibras de colágeno muy finas. 2. Mucoso: también denominada gelatina de Wharton se encuentra en el cordón umbilical y se compone de células fusiformes muy separadas y rodeadas de una MEC con abundante ácido hialurónico, que le da un aspecto gelatinoso. Tejidos conectivos especializados Algunos de ellos son: 1. Tejido adiposo: es un tejido conjuntivo especializado con irrigación abundante. Sus componentes celulares principales son los adipocitos, los que se mantienen unidos mediante una malla de fibras reticulares (colágeno tipo III) que les brindan sostén. El tejido adiposo se especializa en almacenar grasas en forma de triglicéridos como la forma de reserva de energía química más importante; sin embargo, sus funciones son aún más complejas, puesto que desempeña un papel fundamental en la homeostasis energética y participa en la producción de diferentes hormonas, siendo considerado un órgano endocrino importante. Se identifican desde el punto de vista funcional e histológico dos tipos diferentes de tejido adiposo: el unilocular (o blanco) y el multilocular (o pardo). Ambos reciben esa denominación por el color del tejido fresco (blanco o pardo) y la forma de almacenar los triglicéridos en sus células (una gota o múltiples gotitas lipídicas). El tejido adiposo unilocular [Figura 4] predomina en los adultos, mientras que el multilocular [Figura 5] se encuentra principalmente durante la vida fetal y va disminuyendo después del nacimiento durante la primera década de vida. El tejido adiposo blanco es metabólicamente inactivo, en cambio el tejido adiposo pardo es metabólicamente activo y juega un papel importante en la termorregulación de los neonatos. UNIVERSIDAD DE SANTIAGO DE CHILE Av. Libertador Bernardo O´Higgins nº3363 - Estación Central - Santiago – Chile www.usach.cl Tejido Adiposo Blanco Tejido Adiposo Pardo Inclusiones lipídicas Una gota Multilocular Ubicación Todo el cuerpo En adultos: Interescapular Etapa de vida predominante Adultos Niños Figura 4: Tejido adiposo blanco (HE) de rata. Disponible en [2] Figura 5: Tejido adiposo pardo (HE) de rata. Disponible en [2] 2. Tejido cartilaginoso: Es una variedad de tejido conectivo que se caracteriza por presentar una matriz con consistencia de gel más o menos rígida y depresible, lo que hace que este tejido esté adaptado para soportar presión. El tejido cartilaginoso no posee vasos sanguíneos (avascular), por lo tanto, su nutrición está dada por difusión desde el tejido conectivo que lo rodea y que recibe el nombre de pericondrio, o, a través del líquido sinovial en el caso del cartílago articular. Se describen tres tipos de cartílago: cartílago hialino [Figura 6], elástico [Figura 8] y fibrocartílago o cartílago fibroso [Figura 7]. Las células maduras del tejido cartilaginoso reciben el nombre de condrocitos. Hialino Fibrocartílago Elástico Tipode fibras Colágeno Tipo II Colágeno Tipo I y II Colágeno tipo II y fibras elásticas Visión al microscopi o Condrocitos en lagunas, rodeados por matriz extracelular Condrocitos dispuestos entre fibras colágenas Condrocitos dispuestos entre fibras colágenas y elásticas UNIVERSIDAD DE SANTIAGO DE CHILE Av. Libertador Bernardo O´Higgins nº3363 - Estación Central - Santiago – Chile www.usach.cl Presencia de pericondrio Sí No Sí Ubicación Superficies articulares, cartílagos costales Acetábulo, discos intervertebrales Oído externo, epiglotis Figura 6. Cartílago hialino en corte transversal de laringe teñido en orceína. Disponible en [2] Figura 7. Fibrocartílago en corte transversal. Disponible en [1] Figura 8. Cartílago elástico en corte transversal de laringe teñido en orceína. Disponible en [2] 3. Tejido sanguíneo: la sangre es un tejido conectivo especializado de tipo libre, debido a que sus células no se encuentran unidas normalmente entre sí y tampoco se están fijadas a sustancia extracelular como ocurre con los otros tejidos conectivos. Está compuesto por elementos figurados (eritrocitos, leucocitos, plaquetas) y plasma (MEC, porción líquida que le otorga fluidez a la sangre). UNIVERSIDAD DE SANTIAGO DE CHILE Av. Libertador Bernardo O´Higgins nº3363 - Estación Central - Santiago – Chile www.usach.cl II. Actividad Práctica a. Objetivos: i. Reconocer los distintos tipos de tejidos conectivos en muestras histológicas mediante el uso de microscopios virtuales ii. Describir las características del tejido conectivo presente en cada tipo de tejido analizado en el práctico iii. Reconocer la diferencia morfológica entre los cartílagos elástico y hialino iv. Identificar los componentes celulares y estructurales del cartílago v. Relacionar la morfología de los diferentes tipos de cartílago con sus funciones vi. Identificar los componentes de la sangre vii. Relacionar las células transitorias del tejido conectivo con los elementos figurados de la sangre b. Durante el paso práctico Las preparaciones virtuales que deberá utilizar durante el práctico corresponden a cordón umbilical, piel, tráquea, frotis sanguíneo, disponibles en los Microscopios virtuales disponibles en Moodle, las cuales deberá revisar en grupo. Los enlaces a cada preparación podrá verlos durante el práctico. 1. Cordón umbilical: Corte transversal de un cordón umbilical teñido con HE. En el corte se observa la morfología típica, consistente en dos arterias y una vena umbilical, rodeada del tejido conectivo característico y recubierto por amnios, compuesto por un tejido epitelial de tipo cúbico simple. En esta preparación podrá ser capaz de reconocer: a. Tejido conectivo embrionario b. Tejido epitelial del amnios y vasos umbilicales c. Arterias umbilicales d. Vena umbilical 2. Embrión de ratón: La muestra contiene 3 cortes seriados y teñidos con HE y Alcian blue, en donde se pueden observar estructuras de la cabeza, extremidades superiores, abdomen y pelvis. Reconocer: a. Tejido conectivo embrionario b. Estructuras cartilaginosas (en azul) c. Estructuras corporales en desarrollo 3. Piel: Corte de la piel que teñido con HE. Este trozo de piel es grueso, lo que implica una capa de queratina bastante grande. En la muestra se pueden encontrar 3 tipos de tejido conectivo, uno de ellos especializado. En esta preparación será capaz de reconocer: a. Tejido conectivo propiamente tal b. Tejido adiposo c. Vasos sanguíneos d. Epitelio de revestimiento UNIVERSIDAD DE SANTIAGO DE CHILE Av. Libertador Bernardo O´Higgins nº3363 - Estación Central - Santiago – Chile www.usach.cl 4. Tendón: Corte longitudinal de una sección que contiene tanto tejido tendinoso como músculo esquelético, este último caracterizado por la presencia de estrías. Reconocer: a. Tejido conectivo propiamente tal b. Tejido adiposo c. Músculo esquelético 5. Tráquea: Corte transversal de la tráquea teñida con HE. Se pueden reconocer las diferentes capas que la constituyen, incluyendo la capa cartilaginosa. Reconocer: a. Cartílago i. Pericondrio ii. Grupos isógenos iii. Condrocitos iv. Distintos tipos de matriz cartilaginosa b. Epitelio de revestimiento c. Vasos sanguíneos d. Tejido conectivo propiamente tal 6. Disco intervertebral: Corte de un fragmento de disco intervertebral. Reconocer: a. Cartílago i. Pericondrio ii. Grupos isógenos iii. Condrocitos iv. Distintos tipos de matriz cartilaginosa 7. Oreja: Corte teñido con Tricrómico de Masson y aldehido-fucsina. En azul se observan las fibras elásticas, en verde las fibras colágenas y en rojo los núcleos y epitelios. Reconocer: a. Cartílago i. Pericondrio ii. Grupos isógenos iii. Condrocitos iv. Distintos tipos de matriz cartilaginosa b. Piel c. Vasos sanguíneos d. Tejido adiposo e. Folículos adiposos 8. Frotis sanguíneo: Esta lámina no contiene un tejido propiamente tal, sino que contiene sangre, en la que se pueden identificar los diferentes componentes celulares que la conforman. Corresponde a una citología teñida con la tinción de May Grünwald, especial para identificar correctamente los diferentes componentes de la sangre: a. Eritrocitos UNIVERSIDAD DE SANTIAGO DE CHILE Av. Libertador Bernardo O´Higgins nº3363 - Estación Central - Santiago – Chile www.usach.cl b. Plaquetas c. Leucocitos (neutrófilos, eosinófilos, linfocitos, etc.) Posteriormente, seleccione 7 de las estructuras antes identificadas y señálelos en la hoja de evaluación entregada, anotando los datos solicitados. Posteriormente será evaluado por el equipo docente. Por cada estructura correctamente identificada en primera instancia se otorgará un punto, mientras que en segunda instancia se otorgarán solo 0,5 puntos. Para la selección, debe considerar que debe al menos: ▪ Identificar dos tipos de tejido conectivo propiamente tal con su nombre completo. Ej: tejido conectivo denso distribuido regularmente ▪ Identificar algún componente de cada tipo de cartílago, indicando el tipo de cartílago al que pertenece. Ej: Grupo isógeno en fibrocartílago. No puede identificar el mismo componente en distintos cartílagos. ▪ Identificar dos tipos de célula sanguínea, sin considerar a los eritrocitos. III. Bibliografía: [1] Ross MH, Wojciech P. Histología: texto y atlas: correlación con biología celular y molecular. 7th ed. Barcelona: Wolters Kluwer; 2016. [2] Departamento de Histología y Embriología, Facultad de Medicina, Universidad de la República, Uruguay.