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FUNDAMENTOS DE LOS MEDIOS DE CULTIVOS ENTÉRICOS Y LAS PRUEBAS BIOQUÍMICAS EN LA IDENTIFICACIÓN DE LAS ENTEROBACTERIAS CURSO: BACTERIOLOGIA II DOCENTES: MSc. MARGARITA DIAZ DURANGO MSc. YIRA REYES TAVERA FAMILIA ENTEROBACTERIACEAE Género Escherichia Género Salmonella Género Yersinia Género Shigella Género Proteus Género Serratia Género Morganella Género Enterobacter Género Citrobacter Género Klebsiella Género Providencia AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN Medios de Cultivo Pruebas bioquímicas Pruebas serológicas Pruebas de biología molecular SUSTRATOS AGENTES INHIBIDORES INDICADORES MEDIOS DE CULTIVOS ENTÉRICOS MEDIOS DE CULTIVOS SELECTIVOS Y DIFERENCIALES INDICADORES DE LOS MEDIOS DE CULTIVOS NOMBRE DEL INDICADOR pH NEUTRO pH ÁCIDO pH ALCALINO ROJO FENOL ROJO AMARILLO ROJO O TRANSPARENTE ROJO NEUTRO ROJO FUCSIA ÁMBAR O TRANSPARENTE AZUL DE BROMOTIMOL VERDE AMARILLO O NARANJA AZUL PÚRPURA DE BROMOCRESOL MORADO PÁLIDO AMARILLO MORADO OSCURO/PÚRPURA ROJO DE METILO ROJO ROJO AMARILLO MEDIOS DE CULTIVOS ENTÉRICOS MEDIOS NO SELECTIVOS: Agar sangre (producen hemólisis) MEDIOS DE CULTIVOS ENTÉRICOS MEDIOS LIGERAMENTE SELECTIVOS-DIFERENCIALES: Agar Mac Conkey Agar EMB o Agar Levine MEDIOS DE CULTIVOS ENTÉRICOS MEDIOS ALTAMENTE SELECTIVOS- DIFERENCIALES: Agar SS Agar XLD Agar Hektoen Agar Bismuto Sulfito AGAR HEKTOEN SUSTRATO: Lactosa, sacarosa, salicina y tiosulfato de sodio AGENTES INHIBIDORES: Sales biliares INDICADORES: Azul de bromotimol, fuscina ácida y citrato de hierro AGAR HEKTOEN Colonias fermentadoras de lactosa: Rosa Salmón (amarillas/anaranjadas) Colonias no fermentadoras de lactosa: Verde-azuladas, verdes. Producción de H2S: Citrobacter (Colonias anaranjadas/amarillas con centro negro) Salmonella (Colonias verde azuladas con centro negro) Agar Hektoen AGAR EMB O LEVINE SUSTRATO: Lactosa y sacarosa AGENTES INHIBIDORES: Eosina y azul de metileno Indicadores: Eosina y azul de metileno Agar EMB Agar EMB Agar EMB Agar MacConkey AGAR BISMUTO SULFITO SUSTRATO: Glucosa y tiosulfato de sodio AGENTES INHIBIDORES: Verde brillante y bismuto sulfito INDICADORES: Sulfato de hierro AGAR BISMUTO SULFITO Salmonella ( Colonias con centros negros y bordes claros, como ojos de pescado) Otras (verdes pequeñas) AGAR BISMUTO SULFITO AGAR SALMONELLA-SHIGUELLA (SS) SUSTRATO: Lactosa y Tiosulfato de sodio AGENTES INHIBIDORES: Verde brillante, sales biliares INDICADORES: Rojo neutro y citrato férrico Agar S,S (Agar Salmonella, Shigella) Agar S,S (Agar Salmonella, Shigella) AGAR XLD SUSTRATO: Xilosa, lisina, lactosa, sacarosa y tiosulfato de sodio. AGENTES INHIBIDORES: Sales biliares, desoxicolato de sodio INDICADORES: Rojo fenol y citrato férrico de amonio AGAR XLD Colonias fermentadoras de lactosa: Amarillas o rojo amarillentas. Colonias No Fermentadoras: Rojas Producción de H2S: Citrobacter (Amarillas con centro negro) Salmonella (Colonias rojas con centro negro) Agar XLD Agar XLD Agar XLD Agar XLD Pruebas bioquímicas Medios de cultivo empleados para las pruebas bioquímicas de identificación de Enterobacterias Agar TSI Agar TSI Agar TSI Agar TSI Agar TSI AGAR SIMMONS CITRATO INDICADOR SUSTRATO ENZIMA P.FINAL pH LECTURA INTERPRETACIÓN Azul de bromotimol Citrato de sodio y sales de amonio Citrato permeasa Carbonatos y bicarbonatos alcalinos Básico (+) Azul Azul de bromotimol Citrato de sodio y sales de amonio - - Neutro (-) Verde AGAR SIMMONS CITRATO Agar Urea CALDO MR/VP MEDIO INDICADOR SUSTRATO ENZIMA P. FINAL pH LECTURA INTERPRETACIÓN RM ROJO DE METILO GLUCOSA GLUCOSIDASA ÁCIDOS MIXTOS ÁCIDO (+) ROJO RM ROJO DE METILO GLUCOSA - - BÁSICO (-) AMARILLO VP VOGUES PROSKAUER ALFA NAFTOL 5% KOH 40% GLUCOSA GLUCOSIDASA ACETIL METIL CARBINOL DIACETILO NEUTRO (+) ROJO VP VOGUES PROSKAUER ALFA NAFTOL 5% KOH 40% GLUCOSA - - BÁSICO (-) AMARILLO Caldo MR/VP Agar LIA ACI ACIDO ALFA-CETO CARBÓNICO CITRATO DE HIERRO Y AMONIO AMINA CADAVERINA Agar LIA Medio SIM TTTTRIPTEÍNA SSULFATO DE HIERRO Y AMONIO Medio SIM Medio SIM Medio SIM
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