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MICROBIOLOGÍA Y MICOLOGÍA INSTRUMENTOS DE LABORATORIO Normas de bioseguridad Un laboratorio de Microbiología es un lugar habilitado para manejar y estudiar microorganismos. Es importante recordar que la finalidad es determinar los microorganismos presentes en una muestra por lo que es preciso extremar las precauciones para evitar contaminaciones que den lugar a resultados erróneos. Todas las muestras deben ser manejadas con precaución por su potencial patogenicidad. Para deshacerse del material contaminado se deben utilizar recipientes adecuados que deben ser esterilizados posteriormente. Nunca se puede tirar nada contaminado por el lavadero o al cesto de la basura común sin haber sido esterilizado previamente. La limpieza de superficies externas se realiza con solución desinfectante (alcohol 70%, desinfectante fenólico diluido, etc.). En caso de usar soluciones de hipoclorito de sodio (lavandina) en zonas metálicas, limpiar posteriormente para evitar el efecto corrosivo. En caso de derrame de material peligroso o formación de aerosoles: evitar inspiraciones de esos aerosoles, esperar 30 minutos hasta que las partículas se hayan depositado y limpiar con mascarilla, guantes y protectores. En caso de vertido de materiales, cubrir la superficie con desinfectante y posteriormente cubrir con papel humedecido con desinfectante. Dejar durante 15 minutos y limpiar. Instrumentos de laboratorio Incubadora o estufa de cultivo Es un gabinete calentado eléctricamente aislado del exterior la cual se utiliza para proporcionar a los microorganismos la cantidad correcta de temperatura que necesitan para promover su crecimiento. La incubadora está controlada por un termostato y se fija a una temperatura particular. Generalmente, la temperatura se establece en torno a los 28-30 grados Celsius en el caso de las bacterias de cultivo. Horno de aire caliente o estufa de esterilización Es una especie de equipo similar a una incubadora en su estructura y en su uso, pero tiene la capacidad de operar a aún a más altas temperaturas de llegando hasta 300 grados Celsius. Hay un ventilador instalado en el horno que le ayuda a mantener una buena circulación del aire caliente de manera que el proceso de esterilización se realiza a la perfección, también se utilizan para el secado de material de vidrio. La mayoría de los materiales que se esterilizan son objetos de vidrio o material que se vea afectado por la humedad en un autoclave. Autoclave Equipo utilizado para esterilización mediante calor húmedo. Se realiza durante 15 o 20 min, según el volumen a 115°C o 121°C, según la naturaleza del material que se desee esterilizar. Este procedimiento emplea vapor a presión (a 1 atmósfera). Como tiene gran poder de penetración la temperatura y el tiempo utilizados son menores que los que se emplean con la estufa de esterilización. Se utiliza para esterilizar: Medios de cultivo, ropa, material de plástico resistente al calor húmedo, objetos de metal que no se alteren con la humedad y sobre todo material de vidrio. Baño de maría de laboratorio Su función se basa en transferir calor indirectamente, por convección térmica del medio a una sustancia. Se basa en un método empleado para conferir la temperatura uniforme a una sustancia liquida o sólida. Es de vital importancia para calentar sustancias altamente inflamables, las cuales no pueden ser expuestas a fuentes directas de calor. La cual es sumergida en un recipiente mayor, en este caso el baño, con agua que se lleva hasta la ebullición. El baño de maría, también es utilizado para realizar pruebas serológicas, procedimientos de incubación, agitación, inactivación, biomédicos y farmacéuticos. Se utilizan con agua en rangos de temperara que van desde ambiente (20-22°C) y los 90°C. Adicionalmente, cuando se requiere trabajar con temperaturas por encima de los 60°C, se recomienda utilizar tapa para evitar que se evapore el agua rápidamente. Refrigerador Su función consiste en mantener, en un ambiente controlado (espacio refrigerado) diversos fluidos y sustancias, para que los mismos se conserven en buenas condiciones (mientras más baja sea la temperatura, menor actividad química y biológica). Para lograr esto se requiere que la temperatura interior del refrigerador sea inferior a la temperatura ambiente. En el laboratorio se utilizan diversas clases de refrigeradores que podrían agruparse dentro de los siguientes rangos: Refrigeradores de conservación funcionan en el rango de 0°C a 8°C. Refrigeradores de baja temperatura funcionan en el rango de 0°C a -30°C Refrigeradores de ultrabaja temperatura funcionan en el rango de 0°C a -86°C Dependiendo de las actividades que realice el laboratorio, debe seleccionarse el refrigerador que resulte apropiado a sus funciones. Por ejemplo: Si se requiere conservar sangre entera, basta utilizar un refrigerador conocido como de Banco de sangre, que proporciona temperaturas comprendidas entre los http://www.fullquimica.com/2011/06/temperatura.html http://www.fullquimica.com/ 0°C y los 8°C. Por el contrario, si se requiere conservar una cepa particular, es necesario un refrigerador de ultrabaja temperatura. Importancia del refrigerador Básicamente, los refrigeradores son utilizados para la conservación de sangre y derivados, líquidos biológicos y tejidos reactivos, químicos, biológicos y cepas. La actividad química y biológica, por lo general es mas alta cuanta mas alta sea la temperatura. Por esta razón, al reducir la temperatura, se logra controlar el efecto que la misma tiene sobre las sustancias cuya composición y estructura se quiere conservar. En el laboratorio los sistemas de refrigeración se usan para la conservación de sustancias como reactivos y elementos biológicos que, de mantenerse en condiciones de temperatura ambiente, se descompondrían o alterarían sus propiedades. Centrifuga Es una máquina que pone en rotación una muestra para separar por fuerza centrífuga sus componentes o fases (generalmente una sólida y una líquida, aunque también pueden separarse líquidos con diferentes densidades) En el laboratorio las centrífugas se usan generalmente en procesos como la separación por sedimentación de los componentes sólidos de los líquidos biológicos y, en particular, en la separación de los componentes de la sangre: glóbulos rojos, glóbulos blancos, plasma y plaquetas, entre otros, y para la realización de múltiples pruebas y tratamientos. http://www.fullquimica.com/ Medidor de pH o peachimetro El pH es una unidad de medida de la acidez o alcalinidad de un cuerpo o sustancia, mide la cantidad de iones de hidrogeno que contiene un líquido, es el coeficiente que indica el grado de acidez o basicidad (alcalinidad) de una solución acuosa, su valor va entre 0 y 14. La medición efectiva del pH nos da parámetros para la salud humana, las sustancias y conservación de la vida en muchos sentidos. Por ejemplo, se tiene entendido en los estándares internacionales la cantidad sana de pH en la piel humana húmeda, con un nivel de 5.5. Esto sirve para la creación de jabones, champús, cremas, acondicionadores, o diferentes tipos de elementos de limpieza, contengan un pH equilibrado y así conservar la salud de la piel. En personas con problemas de enfermedades de la piel, esto es muy delicado y de vital importancia. Para la naturaleza, el nivel de pH, afecta al ecosistema. Esto varía según la geografía, condiciones climáticas, contaminación natural o artificial. De esta forma, sabemos si existen contaminantes, que generen estos niveles anormales. Mechero Bunsen Todas las manipulaciones en microbiología deben realizarse en un radio de 10-15cm de la llama del mechero, denominada zona aséptica. Se realiza esto para evitar contaminaciones de la muestra. Gradillas Se utilizan para sostener los tubos de ensayo. Cámaras de seguridadbiológica Se utilizan cuando se trabaja con microorganismos altamente infectantes, por ejemplo, el SARS-CoV-2, causante de la enfermedad Covid 19. Desionizador de agua La mayor parte de los trabajos que se realizan en un laboratorio de Microbiología necesitan la utilización de agua pura con el fin de evitar cualquier tipo de interferencia. Entre otras características debe: estar exenta de materiales en suspensión o un pH comprendido entre 5,0 y 7,5. Durante años se ha utilizado agua destilada, en la actualidad los destiladores se han ido abandonando para dar paso a desionizadores que funcionan con resinas de intercambio iónico. También se pueden utilizar otras técnicas como la ósmosis inversa. Balanzas Para pesar diferentes reactivos. Agitador/ mezclador Para cuando se necesitan mezclar soluciones o que un reactivo se incorpore a la muestra. Jarras de anaerobios Recipientes que se usan para conseguir una atmósfera libre de oxígeno para el cultivo de microorganismos anaerobios. Ansas de siembra Se utilizan para sembrar (poner la muestra en un medio de cultivo). Pueden ser metálicas o de plástico, curvas o rectas (para la siembra por picadura). Placas de Petri Son recipientes para la preparación de medios de cultivo sólidos Placas de Petri con medio de cultivo sólido Tubos con medio de cultivo líquido Tubos con medio de cultivo sólido Pipetas de vidrio, de plástico Se utilizan para pasar un líquido de un recipiente a otro. Pipetas automáticas (micropipetas) y puntas de pipeta Se utilizan para pipetear pequeñas cantidades de líquidos. Se utilizan con puntas desechables de distinto tamaño y color según la micropipeta. Existen cuatro tamaños: de 0,5-2µm; de 2-20 µm; de 20-200 µm y de 200-1000 µm. Ansas acodadas o Ansas de Digralsky Se utilizan para la extensión de microorganismos sobre la superficie de un medio de cultivo en placa Petri. Porta objeto y cubre objeto Para realizar las observaciones al microscopio. Vasos de precipitados y matraces Cucharas y espátulas Se utilizan para pesar muestras o medios de cultivo.
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