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Esplénico canino no angiogénico, no miogénico Sarcoma de estroma una retrospectiva
LUISA SERATO
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, Eric P. Palmer†,‡ y Daniel P. Regan†,‡Douglas H. Thamm*,‡ ,Brittany M. Wittenberns*,‡ www.elsevier.com/locate/jcpa CienciaDirecta 2021 Elsevier Ltd. Todos los derechos reservados. Palabras clave: hiperplasia nodular compleja; nódulo fibrohistiocítico esplénico; masa esplénica; sarcoma estromal ENFERMEDAD NEOPLASICA Introducción *Departamento de Ciencias Clínicas, †Departamento de Microbiología, Inmunología y Patología y ‡Flint Animal Cancer Centro, Facultad de Medicina Veterinaria y Ciencias Biomédicas, Universidad Estatal de Colorado, Fort Collins, Colorado, EE. UU. Correspondencia a: DP Regan (correo electrónico: Daniel.Regan@colostate.edu). 00219975/$ ver el asunto anterior https://doi.org/10.1016/j.jcpa.2021.07.006 J.Comp. Camino. 2021, vol. 188, 1e12 precursores de células madre multipotentes (Valliet al, 2016). Los tumores del estroma esplénico canino se consideran neoplasias mesenquimatosas esplénicas primarias con huso. Resumen Anteriormente se caracterizaban como tumores no angiomatosos, no linfomatosos y histiocitoma (Spangleret al, 1994), y se informaron morfología celular y se sospecha que se originan a partir de incluyeron fibrosarcoma, leiomiosarcoma, coma osteosar, mesenquimoma, mixosarcoma, sarcoma histiocítico, liposarcoma y sarcoma fibroso maligno Podoplanina como marcador de histogénesis tumoral Análisis e Investigación Clinicopatológica de Esplénico canino no angiogénico, no miogénico Sarcoma de estroma: una retrospectiva Disponible en línea en www.sciencedirect.com diferencia estadísticamente significativa en el tiempo de supervivencia entre pacientes con sarcoma estromal (sarcoma de origen benigno Se validó un anticuerpo antipodoplanina (PDPN) en tejido canino y se utilizó para evaluar la expresión de esta proteína como indicador potencial del tejido de origen de las neoplasias (28/42 tumores fueron positivos). Hubo un (n = 1) y leiomiosarcoma (n = 1). Cuatro muestras fueron excluidas del análisis debido a una extensa necrosis. 2021 Elsevier Ltd. Todos los derechos reservados. derivados de hiperplasia nodular compleja benigna (n ¼ 3), sarcoma histiocítico (n ¼ 3), hemangiosarcoma origen. diagnósticos de sarcoma estromal indiferenciado (n = 22), hiperplasia nodular compleja (CNH, n = 9), sarcoma (67 días frente a 439 días; P = 0,01). El diagnóstico clínico de los tumores esplénicos debe incluir la evaluación de la presencia de donde se recomienda la terapia adyuvante. Al igual que en los seres humanos, la PDPN puede ser un marcador eficaz para los comas del sarma estromal del bazo canino y la inmunopositividad sugiere una célula dendrítica folicular o reticular fibroblástica. sobre la morfología en secciones teñidas con hematoxilina y eosina, junto con el inmunomarcaje del receptorA eliminador de macrófagos (CD204), desmina, antígeno relacionado con el factor VIII y actina del músculo liso, produjo Factores pronósticos en perros con sarcoma del estroma esplénico después del tratamiento mediante esplenectomía. Los datos clínicos fueron los sarcomas estromales y el conteo mitótico alto ($9 por 10 campos de alta potencia) tuvieron un tiempo de supervivencia significativamente más corto morfología de hiperplasia nodular benigna e inmunohistoquímica para excluir neoplasias malignas más agresivas se recolectó retrospectivamente y se revisó la histopatología de 47 pacientes. Clasificación histológica, basada Los sarcomas del estroma esplénico son tumores raramente informados que anteriormente se agrupaban como neoplasias mesenquimatosas no angiomatosas ni linfomatosas del bazo canino. Se han informado tiempos de supervivencia muy variables probablemente debido a su naturaleza heterogénea. El propósito de este estudio fue evaluar el resultado y CNH y sarcoma estromal indiferenciado) y CNH (178 d versus 637 d, respectivamente; P = 0,027). perros con Machine Translated by Google http://www.elsevier.com/locate/jcpa mailto:Daniel.Regan@colostate.edu https://doi.org/10.1016/j.jcpa.2021.07.006 https://doi.org/10.1016/j.jcpa.2021.07.006 https://doi.org/10.1016/j.jcpa.2021.07.006 www.sciencedirect.com/science/journal/00219975 BM Wittenberns et al. Materiales y métodos Selección y evaluación de pacientes Histopatología e Inmunohistoquímica 2 o histiocitos, pueden complicar los intentos de clasificación (Moore et al, 2012). No sólo las lesiones de a la omisión de información pronóstica significativa provista por la caracterización de la morfología de la lesión original, o (2) que implica un tumor de la aparición de hiperplasia nodular del complejo esplénico (CNH, por sus siglas en inglés), que puede estar dominada por células del estroma con preocupación por sarcoma estromal o nódulo fibrohistiocítico maligno de origen esplénico, y datos clínicos suficientes y seguimiento durante al menos 1 día podocitos glomerulares, y es un marcador conocido de desmina (RTU, clon DER11; Leica Biosystems), expansión del estroma (es decir, SFHN de grado II) de patología oncológica. Esta tendencia ha llevado a la confusión Categorización de un subconjunto de estos tumores en Por lo tanto, nuestro objetivo fue realizar un estudio retrospectivo en diagnósticos realizados, fecha y tipo de adyuvante riesgo conocido de su superposición morfológica con descrito como nódulos fibrohistiocíticos esplénicos realizado por métodos automatizados de rutina en el sistema de tinción automática Leica Bond Max (Leica Biosystems, Buffalo búsqueda de los envíos de histopatología al Laboratorio de Diagnóstico Veterinario de la Universidad Estatal de Colorado (CSU VDL) desde julio de 2010 hasta febrero de 2017. (MC) de estos tumores, con un MC # 9 asociado con un tiempo de supervivencia significativamente más largo (7 fuera de la veterinaria de la Universidad Estatal de Colorado masas esplénicas (Moore et al, 2012; Sabattini et al, varios cánceres humanos diferentes, incluidos el sar de células fibroblásticas reticulares y el sar de células dendríticas foliculares y La evaluación de los resultados se basó en el tiempo de supervivencia postoperatoria general. más específicamente definir clínicamente este tumor canino pobremente caracterizado. manejo del paciente debido a: (1) conducir indirectamente leiomiosarcoma, sarcoma histiocítico y sarcoma indiferenciado (Spangler et al, 1994). Además, La podoplanina (PDPN) es una glicoproteína transmembrana que se expresa en el endotelio linfático y diferenciando CNH con prominente fibrohistiocítica diagnóstico de sarcoma estromal, sarcoma anaplásico CD204 (1:200, clon SRAE5; TransGenic, Chuo ku, Kobe, Japón), antihumano de ratón monoclonal con sarcoma histiocítico y linfoma (colectivamente Los perros incluidos en este estudio fueron identificados a través de una potencialmente desalentando una mayor caracterización inmunohistoquímica de estas masas a pesar de la Los bloques disponibles se procesaron de forma rutinaria para tinción con hematoxina y eosina (HE) e IHC. IHC fue los registros fueron revisados retrospectivamente. La información del caso se solicitó por fax o correo electrónico a la clínica remitente si las muestrasse habían enviado desde se ha correlacionado más estrechamente con la mitosis 2013; Astarita et al, 2015; Chen et al., 2019). Además, la expresión de PDPN también se ha informado en terminología diagnóstica revisada para nódulo canino Esta dificultad, junto con la adopción de la con una mediana de supervivencia de 2,5 meses después de la esplenectomía (Weinstein et al, 1989). Comportamiento biológico Astarita et al, 2012; Malhotra et al., 2012; Chay et al, podría tener consecuencias negativas para el cáncer canino caracterización de estas neoplasias del sarcoma del estroma esplénico, así como evaluar los hallazgos clínicos y los resultados en perros tratados mediante esplenectomía con el fin de se clasificó como fecha de laparotomía exploratoria. es excepcionalmente difícil, ya que existe una superposición histomorfológica significativa entre el fibrosarcoma, entidades tumorales esplénicas biológicamente más agresivas. [SFHN]) (Spangler y Kass, 1998) pero específicamente, Grove, Illinois, EE. UU.), con el siguiente panel de anticuerpos primarios: monoclonal de ratón antihumano Los criterios de inclusión iniciales fueron un diagnóstico histopatológico diagnóstico de sarcoma del estroma esplénico en veterinaria et al, 1994). sexo, edad al momento del diagnóstico, fecha del diagnóstico, estadificación 2007; Xie et al., 2008; Krishnan et al, 2018). Se obtuvieron muestras de tejido del CSU VDL. CNH y el sarcoma estromal se superponen morfológicamente mediante el uso de inmunohistoquímica (IHC), por lo tanto Dako, Santa Clara, California, EE. UU.), monoclonal fueron eliminados del análisis final de datos. Médico después de la operación Casos inmunohistoquímicamente consistentes con origen endotelial o histiocítico subconjuntos de células reticulares fibroblásticas de ganglios linfáticos y bazos murinos y humanos (Yu et al, 2007; factor de von Willebrand antihumano policlonal de conejo/ antígeno relacionado con el factor VIII (1:1,000, A0082025; pero los sarcomas del estroma bien diferenciados e inflamados (es decir, SFHN de grado III) son particularmente difíciles. tener una alta tasa de metástasis y un pronóstico grave perros con coma de sar estromal esplénico previamente diagnosticado para proporcionar una inmunohistoquímica histo morfológica más completa entre oncólogos y patólogos veterinarios, y tratamiento y fecha del último seguimiento. Fecha de diagnóstico histotipos distintos basados en microscopía de luz estándar 2018), ha llevado a un uso creciente del paraguas meses versus 12 meses; P <0.0001) (Spangler Hospital de enseñanza. Los datos recopilados incluyeron raza, comas, que surgen de elementos del estroma (Yu et al, Archivado, fijado en formalina, incluido en parafina (FFPE) origen celular complejo cuyo diagnóstico no es de ayuda Machine Translated by Google Sarcoma del estroma esplénico no angiogénico, no miogénico en perros HNC. Componente linfoide de características similares a la hiperplasia nodular linfoide, asociado a proliferación de elementos del estroma esplénico (fibroblastos, células de músculo liso, histiocitos) que representan más del 30% de la sección del nódulo (SFHN grado II y grado III que conservan completamente arquitectura nodular). Ausencia de actividad mitótica y pleomorfismo celular (fig. 1). Sarcoma estromal indiferenciado. Pérdida completa de la arquitectura nodular, los linfocitos remanentes están presentes como pequeñas estructuras foliculares que se desvanecen, agregadas de forma laxa, o infiltrados difusos. Existe una población definitiva y mayoritaria de células neoplásicas mesenquimatosas caracterizadas por haces entrelazados densos de células pleomórficas poligonales a fusiformes, junto con cualquier combinación de CD204 (positivo debido a macrófagos reactivos asociados a tumores en lugar de inmunomarcaje de células neoplásicas). ), desmina y marcaje de PDPN, independientemente de la reactividad de SMA (Figs. 3 y 4). Las células se cultivaron en matraces de cultivo de tejido de plástico estándar (Cell Treat, Shirley, Massachusetts, EE. UU.), se incubaron en condiciones estándar de 37 °C, CO2 al 5 % y aire humidificado. Las células se cultivaron hasta una confluencia del 80 % y se generaron lisados retirando los medios de los matraces, lavando 1 en solución salina tamponada con fosfato fría e incubando con 1 ml de tampón de lisado MPER [7 ml de MPER; Thermo Fisher, Waltham, Massachusetts, EE. UU.), 140 mg de dodecilsulfato de sodio (ThermoFisher), 70 ml de fluoruro de fenilmetilsulfonilo 100 mM (Thermo Fisher), 35 ml de ortovanadato de sodio 200 mM (Sig maeAldrich, St. Louis, Missouri, EE. UU. ] y media tableta de cOmplete Mini Protease Inhibitor (Roche, Basilea, Suiza) durante 5 min en hielo. Los tejidos de control positivo consistieron en pulmón (antígeno relacionado con el factor VIII), vejiga urinaria (SMA), músculo esquelético (desmina) y macrófagos tumorales de sarcoma de tejidos blandos (CD204). Los controles negativos consistieron en tampón de lavado utilizado en lugar del anticuerpo primario para todos los marcadores. También se usó IgG de conejo no inmune como control negativo para el anticuerpo antiPDPN. Todos los portaobjetos teñidos con HE fueron revisados por un solo patólogo (DPR), cegado al resultado clínico. Para el análisis IHC de todos los marcadores, los tumores se consideraron positivos si $25 % de las células neoplásicas (o la fracción de células del estroma entre los folículos linfoides en casos de CNH) eran inmunopositivas para el marcador respectivo. Los tumores se describieron combinando los criterios de Sabattini et al (2018), Spangler y Kass (1998) y Meuten (Valli et al, 2016) de la siguiente manera: Las líneas celulares de osteosarcoma U2OS humano y sarcoma histiocítico DH82 canino se usaron como controles positivos para los ensayos de transferencia Western. La línea celular U2OS (HTB96) se adquirió de la American Type Culture Collection (Manassas, Virginia, EE. UU.). La línea celular DH82 (CRL10389) fue proporcionada por Dawn Duval (Flint Animal Cancer Center) y se había adquirido originalmente de la American Type Culture Collection. Las células se mantuvieron en medio Eagle modificado de Dulbecco (Gibco, Grand Island, Nueva York, EE. UU.) suplementado con suero fetal bovino al 10 % (Atlas Biologicals, Fort Collins, Colorado, EE. UU.), penicilina (100 U/ml), estreptomicina (100 mg /ml), Lglutamina (2 mM) y aminoácidos no esenciales (0,1 mM) (todos obtenidos de Gibco). (RTU, clon alfa sm1/1A4; Leica Biosystems) y PDPN/gp36 antihumano monoclonal de conejo (1:100/2,9 mg/ml, clon EPR22182; Abcam, Waltham, Massachussetts, EE. UU.). Para CD204, PDPN y factor de von Willebrand, la recuperación del antígeno se realizó utilizando Leica Epitope Retrieval 2 (tampón TriseEDTA, pH 9) durante 20 min (CD204 y PDPN) o 10 min (factor de von Willebrand). Para la desmina y la SMA, la recuperación del antígeno se realizó con Leica Epitope Retrieval 1 (tampónde citrato de sodio, pH 6), durante 20 min y 10 min, respectivamente. La detección se realizó con los sistemas de detección PowerVision IHC (Leica Biosystems), usando un cromógeno de peroxidasa de rábano picante polimérico antiIgG de ratón (CD204) o antiIgG de conejo (PDPN) y cromógeno 3,30diaminobencidina (DAB), antifosfatasa alcalina polimérica . IgG de ratón (desmina, SMA) o IgG anticonejo (factor de von Willebrand) y cromógeno rojo rápido. Sarcoma derivado de CNH. Conserva una arquitectura general consistente con CNH. La mayor parte (>50%) del componente estromal expandido entre los nódulos linfoides muestra una morfología mixta y carece de actividad mitótica y pleomorfismo celular, lo que es compatible con CNH. Sin embargo, una región focal (<50%) de este componente estromal demuestra una transición definitiva a una población monomórfica de células neoplásicas mesenquimales similares a las del sarcoma estromal indiferenciado (Fig. 2 ) . El MC se calculó como el número de figuras mitóticas por 10 campos de gran aumento (HPF; 400; 2,59 mm2 ) y se evaluó en la región tumoral de mayor actividad mitótica. El MC se estandarizó a 2,37 mm2 utilizando la estrategia de multiplicación reportada por Meuten (Meuten et al, 2016). actina de músculo liso antihumano de ratón (SMA) 3 Validación de Western Blot del anticuerpo antipodoplanina en tejido canino Machine Translated by Google BM Wittenberns et al. (BioRad Laboratories) para dodecilsulfato de sodio Los datos continuos se expresaron como medias estándar. (Laboratorios BioRad, Hércules, California, EE. UU.), en solución salina tamponada con Tris Tween 20 (TBST). Af sustrato ECL occidental; Laboratorios BioRad) utilizando la proteína del lisado celular se mezcló 1:4 con 4 Laemelli Transfer System (1,3 A, 25 V, 7 min) (BioRad Laboratories) y las membranas se bloquearon durante 1 h en de nuevo (3) con TBST. Por último, las membranas fueron desviación y datos categóricos como frecuencias y porcentajes. La supervivencia postoperatoria global (TSO) fue electroforesis en gel de poliacrilamida (SDSPAGE). pipeta antes de medir las concentraciones de proteínas las membranas se enjuagaron (3 con TBST), se incubaron Volúmenes de 50 ml y 20 ml, respectivamente, en un gel de poliacrilamida prefabricado Mini Protean TGX 4e20% anticuerpo (Abcam), diluido 1:300 en 5% sin grasa seco fotografiado con sustrato quimioluminiscente (Clarity Después de tres lavados en TBST, las membranas se incubaron con PDPN antihumano monoclonal de conejo. hervida durante 5 min, enfriada en hielo y luego cargada en un sistema Chemi Doc XES+ (BioRad Laboratories). lecheTBST durante 1 hora a temperatura ambiente. Se enjuagaron las membranas 37,5 mg de proteína de lisado celular DH82 y 15 mg de U2OS tampón de muestra que contiene 5 % de 2mercaptoetanol membranas de nitrocelulosa usando el Transblot Turbo temperatura ambiente (RT) en una leche en polvo sin grasa al 5% de la muerte. Perros que estaban vivos en el momento de los datos con el anticuerpo secundario (HRPligado cabra anti conejo IgG; ThermoFisher) diluido 1:3000 en 5% utilizando un kit de ensayo de proteínas Pierce BCA (Thermo Fisher). SDSPAGE se realizó a 180 V durante aproximadamente 40 min. A continuación, la proteína se transfirió húmeda a calculado desde la fecha de la esplenectomía hasta la fecha leche en TBST, durante la noche a 4C. Al día siguiente, Se retira de los matraces y se homogeniza con un 4 Análisis estadístico Fig. 1. Hiperplasia nodular compleja, bazo, perro, caso 18. (a) Lesión esplénica multinodular caracterizada por una mezcla de aproximadamente partes iguales de células fibrohistiocíticas y linfoides. ÉL. (b y c) Fuerte inmunomarcaje citoplasmático de desmina (b) y CD204 (c) en la mayoría de las células fibrohistiocíticas presentes entre las células linfoides. IHC. ( d ) Las células fibrohistiocíticas tienen un etiquetado citoplásmico uniformemente débil a moderado de PDPN. IHC. Machine Translated by Google 5 Características del paciente se usó la prueba de rango logarítmico para delinear la significación entre las subpoblaciones categóricas, con la significancia establecida en P #0,05. Factores evaluados para El análisis estadístico se realizó utilizando un software comercial (Prism 6; GraphPad Software, San 20 hembras (19 esterilizadas). Los Golden Retriever fueron los escáneres (uno tenía radiografías y tomografías computarizadas), ninguno de resultado de su tumor, incluso si esto no fue confirmado. 2.6e46.3). Había 27 machos (26 castrados) y y dos tenían tomografía computarizada (TC) torácica que reveló metástasis pulmonar. Abdominal criterios fueron identificados a través del CSU VDL, de Se suponía que los perros que habían muerto habían muerto como y la mediana de peso fue de 24,2 kg (rango (39%). Treinta y un animales tenían radiografías torácicas Cincuenta y tres perros con diagnósticos que coinciden con nuestra búsqueda los análisis fueron censurados en la última fecha de seguimiento. histiocitoma, sarcoma anaplásico y sarcoma maligno. La mediana de edad fue de 10,5 años (rango 4e14) (hematocrito #30%) y 16 eran neutrofílicos de los cuales 47 tenían información clínica adecuada para el análisis. Los diagnósticos histológicos originales incluyeron: 44 sarcomas del estroma y uno de sarcoma fibroso maligno entre perros. Se realizaron hemogramas completos y química sérica en 41 perros; 25 estaban anémicos Los datos analizados en este estudio están disponibles en el y tratamiento con quimioterapia adyuvante. Las pruebas diagnósticas iniciales realizadas fueron variables (n ¼ 4), cocker spaniel inglés, maltés (n ¼ 3 se realizaron estudios de imagen, incluyendo radiografías Material suplementario. valor pronóstico incluido tipo de tumor, grado, MC Diego, California, Estados Unidos). Las curvas de supervivencia se generaron utilizando el método de límite de producto de KaplaneMeier; más común (n ¼ 8) seguido de raza mixta cada uno) y otras razas (n < 2 cada uno). Resultados Fig. 2. Sarcoma por hiperplasia nodular compleja, bazo, perro, caso 17. (a) Masa esplénica caracterizada por predominio de células fibrohistiocíticas mezcladas con un bajo porcentaje (<40%) de células linfoides, clasificada como esplénica grado III nódulo fibrohistiocítico. ÉL. (b y c) Fuerte inmunomarcaje citoplasmático de desmina (b) y CD204 (c) en la gran mayoría de las células fibrohistiocíticas. IHC. ( d ) Las células fibrohistiocíticas tienen un marcado citoplasmático uniformemente moderado a fuerte de PDPN. IHC. Sarcoma del estroma esplénico no angiogénico, no miogénico en perros Machine Translated by Google BM Wittenberns et al. de los cuales 41 perros fueron identificados con nódulos o masas esplénicas. La expresión de PDPN en el bazo se superpone significativamente con la localización de desmina observadasarcoma mural de intestino delgado (n ¼ 1, caso 38). El la mediana de OST para todos los perros fue de 322 días (rango 1e959 red celular del bazo (Fig.1d complementaria). adenocarcinoma (n ¼ 2, casos 11 y 33), linfoma esplénico bajo a intermedio (n ¼ 1, caso 12), tumor de mastocitos del ganglio linfático portal (n ¼ 1, caso 8) y endotelio linfático y el reticular asociado perros en el momento de la cirugía, incluidos los mamarios Tejidos de control positivo de bazo y riñón caninos normales FFPE, demostraron un etiquetado positivo apropiado de podocitos (Figura complementaria 1b) y n = 2; epiplón, n ¼ 1) confirmado por histopatología. Se documentó neoplasia concurrente en cinco Figura 1a). IHC, realizada con este anticuerpo encirugía (hígado, n ¼ 6; ganglio linfático abdominal, línea celular de sarcoma (DH82) y el control positivo línea celular de osteosarcoma humano U2OS (Suplementario y siete tenían evidencia de metástasis en el momento de la El diagnóstico se realizó por laparotomía exploradora días). Western blot, realizado con un anticuerpo policlonal anti PDPN humano, detectó una banda de aproximadamente 40 kDa, consistente con el peso molecular predicho para PDPN, en el histiocítico canino. y esplenectomía. Ocho perros tenían hemoabdomen (n = 27), TC abdominal (n = 1) y ecografía abdominal o evaluación centrada en el abdomen con ecografía para trauma (AFAST) (n = 36), de (Fig. 1c complementaria), lo que sugiere coexpresión población de haces continuos de células fusiformes con bordes celulares indistintos y anisocariosis de leve a moderada, con infiltrados multifocales de linfocitos y células plasmáticas. ÉL. (b) Células fusiformes neoplásicas variablemente inmunopositivas para desmina. IHC. (C) Inmunomarcaje de CD204 en unas pocas células dispersas por la neoplasia, interpretado como histiocitos remanentes o infiltrados Fig. 3. Sarcoma estromal indiferenciado (reticular fibroblástico de alto grado), bazo, perro, caso 37. (a) Neoplasia compuesta por un uniforme macrófagos asociados a tumores. IHC. ( d ) Células fusiformes neoplásicas inmunomarcadas uniformemente fuertemente para PDPN. IHC. y expresión en sarcomas del estroma esplénico indiferenciados 6 Validación de un anticuerpo antipodoplanina en tejido canino Machine Translated by Google Evaluación Histológica e Inmunohistoquímica y Resultado clínico basado en la clasificación revisada Reclasificación de tumores 7 de estos marcadores por un tipo de célula común en la red celular reticular esplénica. células estromales malignas, a masas no discretas compuestas casi en su totalidad por láminas de células poligonales a fusiformes, con infiltrados principalmente difusos de linfocitos individuales y células plasmáticas. Cuarenta y tres muestras de tumores FFPE estaban disponibles para revisión histopatológica e IHC retrospectiva. Los tumores se clasificaron como sarcoma estromal indiferenciado (n = 22), CNH (n = 9), sarcoma derivado de CNH (n = 3), sarcoma histiocítico (n = 3), hemangiosarcoma (n = 1) y leiomiosarcoma ( n = 1). Los sarcomas estromales indiferenciados se estratificaron sobre la base de MC ($9 por 10 HPF) según lo informado para evaluar el resultado (Spangler et al, 1994). De los 34 perros diagnosticados con estroma indiferenciado En comparación con el sarcoma de CNH, las células neoplásicas de los sarcomas estromales indiferenciados tenían características crecientes de malignidad (Figs. 2A y 3A), con bordes celulares indistintos y anisocariosis de moderada a marcada. De los sarcomas estromales indiferenciados, 19/22 (86 %) fueron positivos para PDPN, 12/22 (54 %) positivos para CD204 y 12/22 (54 %) fueron positivos para desmina (Tabla 1). Se excluyeron cuatro casos debido a que la necrosis extensa o la hemorragia confundían la interpretación. La morfología general de los sarcomas estromales indiferenciados en secciones teñidas con HE varió de masas nodulares con muchas características de sarcoma de CNH (anteriormente SFHN de grado 3), pero que demostraron una transición focal a una población de verdadero pleomórfico Fig. 4. Sarcoma estromal indiferenciado (reticular fibroblástico de alto grado), bazo, perro, caso 2. (a) Neoplasia compuesta por una población uniforme de haces de células mesenquimatosas poligonales a fusiformes con bordes celulares indistintos, leve a anisocariosis moderada y una alta tasa mitótica. ÉL. (b) Células fusiformes neoplásicas inmunonegativas para desmina. IHC. ( c ) Marcaje de CD204 en una minoría de células individualizadas a lo largo de la neoplasia, interpretadas como histiocitos remanentes o macrófagos infiltrantes asociados al tumor. IHC. ( d ) Las células fusiformes neoplásicas tienen un inmunomarcaje citoplasmático uniformemente fuerte de PDPN. IHC. Sarcoma del estroma esplénico no angiogénico, no miogénico en perros Machine Translated by Google BM Wittenberns et al. respectivamente; P = 0,852). Los pacientes con coma del sar estromal también fueron evaluados sobre la base de MC sarcomas de tejidos blandos (Weinstein et al, 1989; Spangler el contexto de lesiones macroscópicas o microscópicas (Clifford La mayoría de los pacientes (84%) fueron diagnosticados con un bazo como CD79a y Pax5 pueden estar indicados para excluir vivo 2 años después del diagnóstico. doxorrubicina incluida (n ¼ 3), seguida de doxorrubicina tener cuatro casos con un MC $ 10. Sin embargo, esto puede diagnosticado con enfermedad metastásica en el momento de la cirugía tuvo un tiempo de supervivencia significativamente más corto (27 días sarcoma estromal fue de 178 días. Tumores con un El sarcoma histiocítico y el hemangiosarcoma son neoplasias altamente metastásicas con un pronóstico grave cuando respectivamente; prueba, prueba de rango logarítmico, P = 0,31). en el momento de la cirugía fue censurado). tiempo medio En este estudio, las características de los pacientes fueron similares a aunque, como lo demuestran Moore et al (2012) quimioterapia. Un paciente tenía CNH y seis tenían (Figura 6). Aquellos perros con un MC bajo (#9 por 10 et al, 1994; Spangler y Kass, 1997; Linden et al, et al, 2007; Skorupski et al., 2007; Thamm, 2007; masa en imágenes abdominales antes de la arotomía lap exploratoria. La onda de líquido abdominal palpable y el dolor abdominal también son signos clínicos informados (Valli et al, Hubo una diferencia estadísticamente significativa en estas entidades (Moore et al, 2012). Tres tumores fueron por ciclofosfamida (n = 2), seguida de doxorrubicina GehanBreslowWilcoxon frente a 279 días; prueba de rango logarítmico, P = 0,31). El diagnóstico de neoplasia concurrente fue estadísticamente insignificante (649 debido al bajo número de casos tratados. días con versus 161 días sin; prueba de rango logarítmico, Se encontró que MC # 9 tiene un tiempo de supervivencia significativamente más largo, lo cual es consistente con informes previos de si no se trata, la quimioterapia puede ser eficaz P = 0,027). Al comparar sarcomas del estroma indiferenciados con sarcomas de CNH (Fig. 5), hay el seguimiento fue de 250 días. La supervivencia media informes previos de no angiogénicos, no miogénicossarcoma estromal indiferenciado (dos con y Sabattini et al (2018), algunas lesiones nodulares pueden 2019). Nuestros hallazgos no indicaron que el adyuvante Canon et al, 2015). Un tiempo medio de supervivencia de 8 HPF) tenían un tiempo de supervivencia significativamente más largo tiempo de supervivencia entre pacientes diagnosticados con sarcoma del estroma (sarcoma de CNH o indiferenciado 2016). La mediana del tiempo de supervivencia posterior a la esplenectomía reclasificado sobre la base de IHC de diagnóstico de rutina, por clorambucilo (n ¼ 1) y fosfato de toceranib Nueve casos fueron reclasificados como CNH después de la evaluación morfológica e IHQ. No teníamos muestras sarcoma, sarcoma de CNH o CNH, 33 fueron P = 0,3). sarcomas estromales y viscerales abdominales primarios no hubo diferencia en el tiempo de supervivencia (236 d versus 466 d, en la prolongación de la supervivencia, con informes de respuesta en sarcomas sin predilección por sexo, peso, raza o edad (Weinstein et al, 1989; Spangler et al, 1994). ser reclasificados como zona marginal o linfomas difusos de células B grandes. IHC para marcadores de linaje de células B el tiempo fue de 439 días (rango 1e959). Tres perros estaban MC #9, cuatro con MC >10). Protocolos de tratamiento la quimioterapia proporcionó una ventaja de supervivencia, a pesar de meses ha sido reportado para el leiomiosarcoma esplénico (439 d versus 67 d; prueba de rango logarítmico, P = 0,01). Pacientes sarcoma estromal) y CNH (178 d versus 637 d, para pacientes con bazo indiferenciado confirmado (n = 1). El uso de quimioterapia adyuvante fue estadísticamente insignificante (434 días con versus 178 días sin; e incluyó uno de sarcoma histiocítico, hae mangiosarcoma y leiomiosarcoma. Ambos esplénicos incluido en el análisis de supervivencia (el paciente sacrificado morfológicamente compatible con linfoma, Después de la operación, siete perros recibieron adyuvante Discusión mi + 37 ee e + Factor VIII PDPN SMA + + mi 12 +, inmunopositivo; , inmunonegativo. + + sarcomas estromales* mi + 1 + eeee + + eeee + mi mi + + + ++ mi 6 ++ mi mi mi + inmunomarcaje para cualquier combinación de dos o más de los siguientes CD204 43 + + + + 15 + + 16 19 21 23 26 27 28 ee e 29 30 ee e 33 34 35 ee e mi mi+ 2 ee ee mi + + No caso. + + mi marcadores: CD204, desmina y podoplanina (PDPN), independientemente de mi + 7 mi + Desmin tabla 1 + + + + mi + mi mi + mi 3 ++ mi mi + mi + mi + Antígeno + ++ + Inmunoreactividad de actina de músculo liso (SMA). mi + 8 ++ mi + eee + Perfiles de inmunomarcaje de 23 caninos indiferenciados + + + + mi mi + mi +mi 5 ++ mi *Los tumores se clasificaron como sarcoma estromal sobre la base de resultados positivos + 8 Machine Translated by Google Considere la quimioterapia posoperatoria para pacientes de alto grado. origen. La caracterización histológica e IHC más reciente de estas lesiones sugirió que los SFHN representan una variedad de entidades de enfermedad, que incluyen lesiones estromales. con características anatómicas sugestivas de mioide también identificó sarcomas estromales indiferenciados como después de la esplenectomía, aunque no se conoce ningún efecto de la quimioterapia. Independientemente, los médicos a menudo las neoplasias del bazo canino se describieron en detalle por Spangler et al. (1994) e incluyó una agrupación heterogénea de sarcomas no linfoides y no endoteliales. Esta serie tuvo tres casos. entidad de enfermedad específica no está garantizada. Nuestro estudio entrelazando corrientes y haces de poligonales a La primera gran serie de casos de cáncer mesenquimatoso primario formas de hiperplasia nodular esplénica, caracterizadas sarcoma, y el uso del término SFHN para describir este que tiene una apariencia morfológica distinta de sarcomas a pesar de los datos limitados que muestran una mejor supervivencia (Liptak y Forrest, 2007). y sarcoma estromal indiferenciado (SS) (n = 24). Probabilidad de supervivencia (%). HR, razón de riesgo. Fig. 5. Curva de supervivencia de KaplaneMeier para 33 perros diagnosticados con hiperplasia nodular compleja (CNH) (n = 9) versus sarcoma de CNH Fig. 6. Estimaciones del límite del producto de KaplaneMeier para 24 perros diagnosticados con sarcoma esplénico por hiperplasia nodular compleja y sarcoma estromal no diferenciado agrupados por recuento mitótico (<9 por 10 HPF, línea continua; >9 por 10 HPF, línea discontinua). Probabilidad de supervivencia (%). HR, razón de riesgo. Sarcoma del estroma esplénico no angiogénico, no miogénico en perros 9 Machine Translated by Google Figura 7. Algoritmo diagnóstico propuesto para la evaluación histopatológica de tumores esplénicos en perros. Después del diagnóstico, inmunohistoquímica el etiquetado debe realizarse inicialmente para excluir el hemangiosarcoma y el sarcoma histiocítico. Sarcoma estromal indiferenciado CNH con <50% de células con transición a estroma indiferenciado Sarcoma de CNH CD204+ o CD18+, negativo para todos los demás marcadores según lo descrito por Moore et al (2012) y Sabattini et al (2018) Morfología compatible con sarcoma Teñir con hematoxilina y eosina Evaluar el recuento mitótico para el pronóstico Masa esplénica sarcoma CNH Cualquier combinación de ≥2 (CD204+, desmin+, PDPN+) independientemente de la positividad de SMA F8RA+ o CD31+, negativo para todos los demás marcadores Morfología consistente con leiomiosarcoma SMA, desmina, PDPN Sarcoma histiocítico (a) CD204 o CD18, F8RA o CD31, y (b) hemangiosarcoma Desmin+ y/o SMA+ Realizar inmunomarcaje para diferenciar (Liptak y Forrest 2007; Moore et al, 2012). Alguno células en el bazo. expansión que surge de las células del estroma que son probablemente de células reticulares fibroblásticas/dendríticas foliculares células fusiformes en una matriz colágena, que células reticulares (Spangler et al, 1994). características habían sido definidas en otras células no miocitos morfología y perfiles de marcado IHC de estos tumores como desmin+/PDPN+ o CD204+/PDPN+ sarcoma estromal indiferenciado maligno, que leiomiosarcoma, sarcoma indiferenciado) sugieren una estudio podría diferenciarse aún más en los de subconjunto de sarcomas del estroma esplénico, de hecho pueden surgir las regiones parafolicular y extrafolicular del bazo marcado en células reticulares fibroblásticas y foliculares de estos sarcomas están claramente definidos por su estándar origen celular en lugar del componente linfoide que esos sarcomas del bazo canino diagnosticados continuo desde una lesión inflamatoria hasta células reticulares fibroblásticas transformadas, se requieren estudios más amplios La evaluación de los datos presentados en este estudio retrospectivo indica que probablemente existe un continuo de enfermedad de CNH benigno, definido por esta serie evaluó el mesenquimatoso maligno en el bazo y los ganglios linfáticos (ToccanierPelte et al, células dendríticas foliculares en los centros germinales de anisocariosis, necrosis y multinucleación(Fig. 4) bajo poder estadístico de este estudio, no hubo diferencia estadística en el resultado entre linajes. Si bien esta diferenciación puede proporcionar información sobre el origen de esta sarcomas del bazo, excluyendo aquellos de un subconjunto mioide común de reticular residente células dendríticas (Zeng et al, 2011). Con base en estas observaciones y los resultados de nuestro estudio, el observado presentan criterios característicos de malignidad, incluidos Nuestro estudio es paralelo al subconjunto de lesiones nodulares esplénicas evaluadas por Sabattini et al (2018). Sin embargo, tipos que incluyen una población de células reticulares presentes PDPN se ha utilizado en humanos como marcador de son sugestivos de sarcomas de células reticulares fibroblásticas y de células dendríticas foliculares, respectivamente. Debido a la hiperplasia fibroblástica e histiocítica reactiva, a mesénquimoma), pero la prevalencia superpuesta de características mioides inmunomarcadas en otros (fibrosarcoma, sarcoma, que representó el 60% de este original los 23 sarcomas del estroma esplénico evaluados en nuestro origen celular común de los miofibroblastos esplénicos o origen de células reticulares fibroblásticas (n = 11) o células dendríticas foliculares (n = 4). Demostración ultraestructural e inmunohistoquímica de células mioides SuárezVilela e Izquierdo, 2016) Desmin también es sobre el comportamiento biológico y el resultado clínico. necesarios para determinar la influencia de esta distinción perfil morfológico e IHC (es decir, sarcoma histiocítico, osteosarcoma, mixosarcoma, liposarcoma, descrito por Sabattini et al (2018). Con base en los resultados de nuestro análisis IHC, también sugerimos que 15 de como fibrosarcoma, leiomiosarcoma o indiferenciado (Yu et al, 2007; Xie et al, 2008; Astarita et al, 2012; incluye todos los ambiguos descritos anteriormente 1987). Es importante señalar que estos datos plantearon la posibilidad folículos linfoides, así como fibroblastos reticulares en tipo de tumor y potencialmente sugieren que los nódulos hiperplásicos esplénicos y los sarcomas del estroma representan un 10 BM Wittenberns et al. Machine Translated by Google 11 Fondos Dato suplementario Declaracion de conflicto de interes Referencias Expresiones de gratitud Sarcoma del estroma esplénico no angiogénico, no miogénico en perros Los datos complementarios de este artículo se pueden encontrar en línea en https://doi.org/10.1016/j.jcpa.2021.07.006. L30 TR002126, ambos a DPR. podría perderse debido a la variabilidad del muestreo. Pacientes sarcoma. sarcoma histiocítico y hemangiosarcoma, células B grandes y zona marginal), como pronóstico y está indicado el sarcoma del estroma esplénico indiferenciado liposarcoma y mesenquimoma. hay un claro bazo hiperplásico linfoide y nodular complejo y análisis postmortem para confirmar la causa de la muerte. Los autores agradecen a Jennifer Phinney y al Kansas y tumores esplénicos mesenquimales. Estos resultados sugieren que la PDPN puede representar un diagnóstico útil más de cerca que aquellos con CNH, ya que este proceso de enfermedad probablemente representa un continuo de malignidad con sarcoma del estroma esplénico sobre la base de la evaluación morfológica y arquitectónica de células teñidas con HE de CNH (grado 3) en comparación con maligno verdadero Proponemos un nuevo enfoque diagnóstico para separar con sarcoma estromal indiferenciado con un MC # 9 ser necesario determinar completamente su sensibilidad y especificidad para esta entidad tumoral. Limitaciones de este estudio recomendaciones de quimioterapia serían significativamente para apreciar completamente si el tiempo de supervivencia prolongado es luto distinción en apariencia morfológica entre La investigación reportada en esta publicación fue apoyada lesiones deben denominarse como tales y pueden ser transformación y progresión. Muchos de los sarcomas del estroma no diferenciados aparecieron como CNH con Laboratorio de Diagnóstico Veterinario de la Universidad Estatal, marcador de sarcoma estromal esplénico indiferenciado y cáncer Fronteras en inmunología, 3 283e283. sarcomas estromales, denominados sarcomas estromales indiferenciados Los autores no declararon posibles conflictos de intereses. las secciones deben tener IHC realizado para excluir otros 1013e1024. lesiones de bajo grado del estroma netamente neoplásico sarcomas que se pueden clasificar definitivamente en función de microarquitectura de nodos. Inmunología de la naturaleza, 16, 75e84. puede tener una supervivencia prolongada con esplenectomía sola incluyen un pequeño número de pacientes, falta de lesiones hiperplásicas linfoides, observaciones extraídas de registros médicos incompletos y falta de estándares varían en función de estos resultados. Pacientes diagnosticados con logrado con quimioterapia adyuvante. Nuestro estudio también validó la reactividad cruzada de un descrito con más detalle según Moore et al. la descripción original de SFHN en Spangler y 425e429. por los Institutos Nacionales de Salud, Oficina del Director, premio no. K01ODO22982 y Centro Nacional para el Avance de las Ciencias Traslacionales, premio no. una región focal de diferenciación sarcomatosa, que así como a Todd Bass y al Laboratorio de Diagnóstico Veterinario de la Universidad Estatal de Colorado, por realizar la inmunohistoquímica para este proyecto. del perro; sin embargo, los estudios que evaluaron la expresión de PDPN en un subconjunto significativamente mayor de tumores mesenquimatosos esplénicos caninos clínicamente relevantes, como Una evaluación prospectiva estandarizada de perros con con respecto a la investigación, autoría o publicación de este artículo. tipos de tumores malignos, incluidos el sarcoma histiocítico, el hemangiosarcoma y el linfoma (difuso sarcomas del bazo canino (Fig. 7). Benigno distintas características histomorfológicas e inmunohistoquímicas, que incluyen osteosarcoma, sar hemangiosarcoma histiocítico, coma, mixosarcoma, estadificación diagnóstica, tratamiento, protocolo de seguimiento en comparación con el tu más mitóticamente activo el sarcoma derivado de CNH debe ser monitoreado anticuerpo antiPDPN en tejido canino y expresión demostrada de PDPN en el bazo canino normal (2012) y Sabattini et al (2018). Perros diagnosticados Kass (1998), ahora denominada hiperplasia nodular linfoide (grado 1), CNH benigna (grado 2) y sarcoma células reticulares fibroblásticas de precursores miofibroblásticos es fundamental para la inmunidad antiviral. Inmunidad, 38, Clifford C, Skorupski K, Moore P (2007) Enfermedades histiocíticas . En: Withrow y MacEwen's Small Animal Clinical Eds, Elsevier Saunders, St. Louis, págs. 706716. Chai Q, Onder L, Scandella E, GilCruz C, Perez Shibayama C et al (2013) Maduración de los ganglios linfáticos € Oncología, 4.ª edición, SJ Withrow, DM Vail, RL Page, funciones emergentes en el desarrollo, el sistema inmunitario, Evaluación de un protocolo de quimioterapia combinada Astarita JL, Acton SE, Turley SJ (2012) Podoplanina:incluyendo lomustina y doxorrubicina en el sarcoma histiocítico canino. Revista de Práctica de Pequeños Animales, 56, Cañón C, Borgatti A, Henson M, Maridos B (2015) células reticulares fibroblásticas en la pulpa blanca esplénica. Nature Communications, 10, 1739. contractilidad de las células reticulares fibroblásticas y la linfa Cheng HW, Onder L, Novkovic M, Soneson C, Lutge M et al (2019) Trayectorias de origen y diferenciación de (2015) El eje CLEC2podoplanina controla el Astarita JL, Cremasco V, Fu J, Darnell MC, Peck JR et al. Machine Translated by Google https://doi.org/10.1016/j.jcpa.2021.07.006 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref1 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref1 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref4 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref2 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref2 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref3 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref4 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref6 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref6 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref6 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref4 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref6 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref1 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref3 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref1 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref3 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref3 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref5 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref2 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref5 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref5 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref5 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref2 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref2 BM Wittenberns et al. 488e498. Patología Experimental, 1, 276e284. Medicina, 21, 121e126. evaluación. Patología Veterinaria, 55, 645e653. 776e782. 31, 37e47. 998e1008. Nódulos fibrohistiocíticos en perros. Journal of Veterinary Internal Medicine, 26, 1164e1168. Supervivencia postesplenectomía en perros. Journal of Veterinary Internal Medicine, 11, 166e171. et al (2019) Resultados y variables pronósticas asociadas con sarcomas primarios de tejidos blandos viscerales abdominales en perros: una Sociedad Veterinaria de Cirugía Weinstein MJ, Carpenter JL, Schunk CJ (1989) Sarcomas no angiogénicos y no linfomatosos del canino y Small Animal Clinical Oncology de MacEwen, 4.ª edición, ToccanierPelte MF, Skalli O, Kapanci Y, Gabbiani G Skorupski KA, Clifford CA, Paoloni MC, LaraGarcia A, sarcomas de células dríticas. Revista Internacional de Clínica y Xie Q, Chen L, Fu K, Harter J, Young KH et al (2008) Po doplanina (D240): un nuevo marcador inmunohistoquímico Oncología, 17, 265e270. El estroma de los ganglios linfáticos inflamados y en reposo define et al (2018) Podoplanina: un biomarcador de cáncer emergente nódulos tiocíticos: 98 casos. Patología Veterinaria, 35, 109e118. Oncología clínica de pequeños animales, 4.ª edición, SJ Withrow, DM Vail, Patología, 53, 7e9. Sabattini S, Lopparelli RM, Rigillo A, Giantin M, Renzi A Malhotra D, Fletcher AL, Astarita J, LukacsKornek V, Revisión histológica e inmunohistoquímica del bazo DJ Meuten, Ed, John Wiley & Sons, Ames, págs. 203321. Linden D, Liptak JM, Vinayak A, Grimes JA, Sandey M SuarezVilela D, Izquierdo FM (2016) La podoplanina es positiva no solo sobre las células dendríticas foliculares y sus contrapartes tumorales, sino también sobre los fibroblastos reticulares 499e510. con sarcoma histiocítico. Revista de Veterinaria Interna Spangler WL, Culbertson MR, Kass PH (1994) Primaria neoplasias que ocurren en el bazo canino: clasificación anatómica, inmunohistoquímica y actividad mitótica Yu H, Gibson JA, Pinkus GS, Hornick JL (2007) Podoplan nin (D240) es un marcador novedoso para la detección de células dendríticas foliculares. Barber L et al (2007) CCNU para el tratamiento de perros bazo: 57 casos (1975e1987). Journal of the American Veterinary Medical Association, 195, 784e788. Estudio retrospectivo oncológico. Veterinaria y Comparativa Thamm D (2007) Hemangiosarcoma. En: Withrow y MacEwen y el área del campo de visión: hora de estandarizar. Veterinario Schacker T et al (2011) Mecanismos acumulativos de e infecciones por VIS. Diario de Investigación Clínica, 121, Aceptado el 30 de julio de 2021½ Recibido el 22 de marzo de 2021 Moore AS, Frimberger AE, Sullivan N, Moore PF (2012) RL Page, Eds, Elsevier Saunders, St. Louis, pp 679688.Liptak L, Forrest L (2007) Sarcomas de tejidos blandos. En: Retirar para células dendríticas foliculares reactivas y den folicular características de la esplenomegalia en perros por fibrohis tumores Diario Americano de Patología Clínica, 128, mesenquimatoso (no angiomatoso/no linfomatoso) Tayalia P et al (2012) Perfil transcripcional de SJ Withrow, DM Vail, RL Page, Eds, Elsevier Saunders, St. Louis, pp 356380. Krishnan H, Rayes J, Miyashita T, Ishii G, Retzbach EP (1987) Caracterización de células estromales con características mioides en ganglios linfáticos y bazo en condiciones normales y patológicas. Diario Americano de Patología, 129, fibrosis del tejido linfoide y agotamiento de las células T en el VIH1 Spangler WL, Kass PH (1998) Patológico y pronóstico Zeng M, Smith AJ, Wietgrefe SW, Southern PJ, características inmunológicas. Inmunología de la naturaleza, 13, Valli VE, Bienzle D, Meuten DJ (2016) Tumores del sistema hemolinfático. En: Tumores en animales domésticos, y diana terapéutica. Ciencia del Cáncer, 109, 1292e1299. et al (2018) Lesiones linfoides nodulares esplénicas caninas: inmunofenotipado, actividad proliferativa y clonalidad correlacionada con la supervivencia del paciente. patología veterinaria, Spangler WL, Kass PH (1997) Factores patológicos que afectan Meuten DJ, Moore FM, George JW (2016) Recuento mitótico y en algunos tumores de fibroblastos reticulares. Inmunohistoquímica aplicada y morfología molecular, 24, e11. 12 Machine Translated by Google http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref17 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref23 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref23 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref14 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref14 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref13 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref13 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref24 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref15 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref15 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref25 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref12 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref12 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref16 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref16 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref8 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref22 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref9 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref20 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref14 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref23http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref23 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref8 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref8 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref10 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref7 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref17 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref20 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref19 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref11 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref11 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref13 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref10 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref12 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref21 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref21 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref8 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref18 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref10 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref14 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref15 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref15 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref24 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref14 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref22 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref22 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref22 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref8 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref19 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref11 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref25 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref25 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref12 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref19 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref19 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref9 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref24 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref15 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref10 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref9 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref9 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref7 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref20 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref25 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref17 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref25 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref10 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref21 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref7 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref7 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref13 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref15 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref16 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref11 http://refhub.elsevier.com/S0021-9975(21)00099-2/sref18
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