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PRÁCTICA N°3 FUNCIONES CELULARES: MECANISMOS DE TRANSPORTE: DIFUSIÓN Y ÓSMOSIS INTRODUCCIÓN La célula es la unidad fundamental de todos los organismos vivos. Son responsables de realizar todas las funciones vitales necesarias para la vida, como la producción de energía, la síntesis de proteínas, la división celular, la reparación de tejidos, la comunicación celular, la regulación de procesos bioquímicos, y la transmisión de información genética. En el ámbito de la biotecnología, las células son la base de la manipulación genética, la producción de proteínas recombinantes, la terapia celular y la ingeniería de tejidos. El transporte celular es esencial para el funcionamiento de las células, ya que permite el movimiento de moléculas y sustancias a través de la membrana celular para llevar a cabo funciones vitales como la respiración celular o la síntesis de proteínas, Asimismo, permite a las células mantener el equilibrio interno y controlar su entorno externo. Existen dos mecanismos de transporte celular: la difusión y la ósmosis. La difusión es el movimiento de moléculas desde una región de alta concentración a una región de baja concentración, hasta que se alcanza un equilibrio. Este proceso es impulsado por la energía cinética de las moléculas. La ósmosis es un tipo de difusión que involucra el movimiento de agua a través de una membrana semipermeable hacia una solución con una mayor concentración de solutos. Es importante en la regulación del equilibrio hídrico en las células. En la presente práctica, se pretende ejemplificar el efecto de diferentes concentraciones salinas sobre una célula animal y una vegetal, empleando soluciones salinas hipertónicas, isotónicas e hipotónicas, analizando su reacción. Asimismo, se desea estudiar la permeabilidad que posee la membrana celular. MARCO TEÓRICO La principal función celular y una de las más importante debido a que es la que se encarga del transporte de solutos, moléculas, proteínas, entre otros es la membrana celular presente en los seres vivos. Debido a que las membranas son la barrera para la difusión de iones y moléculas, de una manera selectiva con la finalidad de que todo el sistema funcione correctamente. En la membrana está presente proteínas que ayuda tanto al transporte de moléculas para el metabolismo como en la creación y cambios de gradientes electroquímicos, estos son bombas, canales, transportadores que pueden o no requerir energía. Estos fenómenos de transporte se producen para mantener un equilibrio, ante un desbalance de concentraciones, temperatura, cargas, potencial eléctrico. - Bombas: Son proteínas transmembrana que transporta moléculas o iones esto en contra de su gradiente de concentración implicando un gasto de energía, la energía es obtenida de reacciones óxido reducción, hidrólisis de ATP. - Transportadores: Son Proteínas transmembrana que usa gradientes electroquímicos para mover moléculas en ambos lados de la membrana celular, encontramos a la difusión facilitada siendo un transporte pasivo por el gradiente de concentración, este implica un reconocimiento de la molécula. El transporte uniporte mueve esta molécula a favor de gradiente, el cotransporte la traslación de dos moléculas o iones, antiporte cuando ambos elementos van de manera opuesta, simporte si van en el mismo sentido de la molécula. - Canales: Son proteínas integrales que crean poros o conductos hidrofílicos, ambos comunican los lados de la membrana, se abren o cierran dependiendo de las condiciones, su función es regular los gradientes iónicos, alterando el potencial electroquímico, siempre se da en favor al transporte de gradiente de concentración. La difusión es el flujo de las moléculas que va desde una alta concentración a una baja concentración, denominado gradiente de concentración es un movimiento aleatorio de las partículas, relacionado a su energía cinética en donde las partículas se mueven hasta chocar con otras, no se presenta pérdida de energía hasta que se distribuyan de manera uniforme. Lo podemos observar en la disolución de tintes como el permanganato de potasio en donde habrá colisión de moléculas con el soluto, hasta llegar a un equilibrio dinámico. Figura 1. Difusión de moléculas. La ósmosis es un tipo de difusión en donde el solvente o agua pasa a través de una membrana semipermeable, desde un área elevada concentración a una de baja concentración. Este tipo de sistema se encuentra en todos los organismos unicelulares y multicelulares porque están rodeados de agua. - Solución Isotónica: Cuando en una solución, la concentración de los solutos es la misma que la concentración dentro de una célula. Significa que la concentración de agua es la misma dentro de la célula, está en equilibrio dinámico. - Solución Hipotónica: Cuando una solución, la concentración de solutos es menor que la concentración dentro de la célula, la concentración de agua es menor dentro de la célula, obtendrá agua por ósmosis y se hinchará en tamaño. En células animales, estas carecen de pared celular al hincharse puede ocurrir lisis celular o estallar. En células vegetales presentan una pared celular rígida está es capaz de resistir la presión y no lizarse, se denomina turgencia, da soporte y forma a las plantas. - Solución Hipertónica: Es cuando la concentración de solutos es mayor que la concentración dentro de la célula. En células animales, están perdiendo agua y se marchitarán o se denomina crenación, debido a la pérdida de agua y disminución de presión dentro de la célula. En células vegetales pierden agua de la vacuola central, se contraen la membrana plasmática y citoplasma alejándose de la pared celular, por pérdida de agua y disminución de turgencia, denominado plasmólisis. Figura 2. Efecto de la concentración en una célula. MATERIALES Y MÉTODOS MATERIALES: Biológico ● Muestra de sangre ● Rodajas de papas ● Hígado de pollo Equipos ● Frascos con soluciones hipotónica ● Frascos con soluciones isotónica ● Frascos con soluciones hipertónica ● Láminas portaobjetos ● Láminas cubreobjetos ● Beakers ● Pipetas ● Pinzas ● Tijeras ● Bisturí ● Lanceta METODOLOGÍA Primero realizamos 3 cortes iguales en porte y grosor en la primera muestra biológica que fue la papa para luego agregarlo a 3 beakers. De igual manera se hizo con el hígado. Figura 3. Corte de muestras biológicas. Después agregamos los 3 trozos de papa en 3 beakers y en cada uno se agregó las diferentes soluciones hasta cubrir la muestra que fueron solución hipotónica, isotónica e hipertónica, de igual manera se hizo con el hígado. Figura 4.Muestras con solución hipotónica, hipertónica e isotónica Luego agarramos una lanceta para colocar una gota de sangre en 3 láminas portaobjetos para después echarle una gota de solución a cada lámina portaobjeto para finalmente ponerle un cubreobjetos a cada una y observar en el microscopio en una resolución de 40x, para reconocer las diferentes soluciones en cada una. Figura 5.Muestra sanguínea con soluciones Finalmente al transcurrir aproximadamente una hora observamos las muestras biológicas para ver la reacción que tuvieron en cada una de las diferentes soluciones. RESULTADOS Transcurrido el tiempo de observación se denotaron los cambios producidos tanto en la muestra animal, como en la muestra vegetal. En el caso de la muestra vegetal, se puede observar un cambio en la estructura de la muestra tanto en solución hipertónica, como en solución hipotónica. Principalmente,se observa una reducción en el tamaño de la muestra de papa en solución hipertónica, debido a que las células han perdido presión de turgencia. En la solución hipotónica, se observó un incremento del volumen de la papa, debido al incremento de la turgencia. Debido a la naturaleza de la solución isotónica, no se observa un cambio notable en la morfología de la muestra. Figura 6. Resultado final de la muestra vegetal. En el caso de la célula animal, el efecto se da de manera similar, influyendo además en la textura de la muestra de hígado. En la soluciónhipotónica, la célula animal estallará debido al movimiento neto de agua desde la solución hacia la célula. En el caso de la muestra en solución hipertónica, las células se arrugan y mueren en un proceso conocido como plasmólisis. Asimismo, la textura de la muestra se suaviza. En la solución isotónica no se dan cambios notables. Figura 7. Resultado final de la muestra animal. Los resultados del análisis de muestras de sangre en distintas soluciones para observar el efecto de la ósmosis, los resultados se observaron al instante para evitar muerte celular. A. B. C. Figura 8.Muestra de sangre 40x en: A. Solución isotónica, B. Solución hipertónica y C. Solución hipotónica. En este caso, no se pudo obtener una observación adecuada del comportamiento de células sanguíneas en solución hipotónica. DISCUSIÓN En los resultados se puede observar que en la muestra de papa colocada en las tres soluciones correspondientes con el mismo tamaño al registrarse sus medidas, la solución isotónica mantuvo las características iniciales tanto de tamaño como de textura, esto nos dice que la solución al estar en equilibrio no hubo un movimiento de solutos y solvente. En cambio en la solución hipertónica, se observó una disminución de tamaño y la textura de esta no estaba tan firme podemos decir que esto se debe a que las células perdieron agua causando una salida de agua y por ende una disminución de volumen. Finalmente en la solución hipotónica de la célula vegetal está aumentó su tamaño y al tacto estaba muy firme y dura, debido a que las células se llenaron de agua caudado una turgencia en las células. Por otro lado, en las células animales, donde se empleó hígado al sumergirlo en las tres soluciones distintas se observó en la solución isotónica las características se mantienen no hubo aumento, ni disminución de volumen, en la solución hipertónica se observó una ligera disminución de la muestra y al tacto estaba suave esto debido a la salida del agua de la célula, finalmente en la solución hipotónica se observó un aumento de la muestra en volumen sobre todo, como si estuviera inflamado y duro esto debido a la lisis o hemólisis en este caso de la célula vegetal. CONCLUSIÓN 1. En conclusión, la difusión y la ósmosis son mecanismos de transporte vitales para las funciones celulares y para el correcto funcionamiento de los organismos vivos. Comprender estos procesos es fundamental para entender cómo las células obtienen nutrientes y eliminan desechos, y cómo los organismos mantienen el equilibrio de sus fluidos. 2. Se concluyó que las muestras biológicas dieron el resultado que esperamos respecto a las diferentes soluciones que utilizamos. CUESTIONARIO DE LA PRÁCTICA N° 3 1. ¿Qué ha sucedido con el tamaño , forma y consistencia de las papas en las distintas soluciones y por qué? Se puede observar que en la muestra de papa colocada en la solución isotónica mantuvo las características iniciales tanto de tamaño como de textura, esto nos dice que la solución al estar en equilibrio no hubo un movimiento de solutos y solvente. En cambio en la solución hipertónica, se observó una disminución de tamaño y la textura de esta no estaba tan firme podemos decir que esto se debe a que las células perdieron agua causando una salida de agua y por ende una disminución de volumen. Finalmente en la solución hipotónica de la célula vegetal está aumentó su tamaño y al tacto estaba muy firme y dura, debido a que las células se llenaron de agua caudado una turgencia en las células. 2. Que ha sucedido con las características en la carne/hígado. Explicar en la misma forma que la anterior pregunta. Se observó en la solución isotónica las características se mantienen no hubo aumento, ni disminución de volumen esto debido a que hubo un equilibrio entre el solvente y el soluto de la muestra, por ende no uno un movimiento de partículas o moléculas, en la solución hipertónica se observó una ligera disminución de la muestra y al tacto estaba suave (se puede deber a que la célula sufrió de crenación), esto debido a la salida del agua de la célula, finalmente en la solución hipotónica se observó un aumento de la muestra en volumen sobre todo, como si estuviera inflamado y duro esto debido a la lisis o hemólisis en este caso de la célula vegetal. 3. Construir una tabla similar a la siguiente: 4. Tomando en cuenta que un gran porcentaje de la composición celular está compuesta por agua y que el tejido vegetal de la papa está compuesto por células, plantea una hipótesis que explique éste fenómeno. La turgencia en las células del tejido vegetal de la papa, se explica debido a que las células de la papa tienen una alta concentración de iones de potasio y azúcares en su interior, en comparación con el medio ambiente en el que se encuentran, en este caso, agua. Al ser estos elementos solutos, se presenta una diferencia de concentración que crea una gradiente osmótica, lo que significa que el agua tiende a entrar a las células de la papa desde el medio ambiente para igualar las concentraciones de solutos entre el interior y el exterior de las células. Debido a que las células de la papa están rodeadas por una pared celular rígida, la entrada de agua en el interior de la célula causa que la célula se hinche y que la pared celular se estire. Este estiramiento de la pared celular crea la presión turgente que mantiene a la célula rígida y en buena forma. Si la célula pierde agua debido a la deshidratación, la pared celular se encoge y la célula se arruga. Entonces, una hipótesis sobre este caso podría ser que la turgencia en las células del tejido vegetal de la papa se debe a la entrada de agua en el interior de las células a través de la ósmosis, y a la rigidez de la pared celular que mantiene la forma de la célula. 5. Explique la teoría del mosaico fluido en las membranas. El modelo de mosaico fluido describe la estructura de las membranas celulares como estructuras compuestas por una doble capa de moléculas de fosfolípidos con cabezas hidrofílicas hacia afuera y con colas hidrofóbicas hacia adentro. Esta bicapa lipídica proporciona una base flexible y fluida para la membrana. Además, el modelo se refiere al hecho de que la membrana está incrustada con varios tipos de proteínas, lípidos y carbohidratos que están dispuestos en un patrón similar a un mosaico. Estos componentes no están distribuidos al azar, sino que están organizados en patrones y densidades específicos que son fundamentales para el correcto funcionamiento de la membrana. Las proteínas son un componente principal de la membrana celular y son responsables de muchas de sus funciones. Algunas proteínas abarcan todo el ancho de la membrana, formando canales o poros que permiten el paso de las moléculas. Otras proteínas se encuentran en la superficie de la membrana y actúan como receptores que reconocen y se unen a moléculas específicas. Adicionalmente, están involucradas en el movimiento de la membrana o en el mantenimiento de su forma. Asimismo, los lípidos se presentan como componentes esenciales de la membrana celular. Además de los fosfolípidos que forman la estructura básica de la membrana, también existen varios tipos de lípidos que están incrustados en la membrana. Estos lípidos ayudan a mantener la fluidez de la membrana y también pueden actuar como moléculas señalizadoras o participar en otros procesos celulares. Los carbohidratos se encuentran en la superficie externa de la membrana y están unidos a proteínas o lípidos. Estas cadenas de carbohidratos ayudan a identificar la célula ante otras células y son importantes para el reconocimiento y la señalización celular. 6. ¿Qué es ósmosis? La ósmosis se refiere al proceso del movimiento espontáneo de moléculas de agua desde una región de mayor concentración a una región de menor concentración, a través de una membrana semipermeable, que sólo permite el paso de ciertas sustancias. La reacción se da con el fin de equilibrar la concentración de solutos a ambos lados de la membrana. Cuando hay una mayor concentraciónde solutos en un lado de la membrana, las moléculas de agua se moverán del lado de menor concentración de soluto al lado de mayor concentración de soluto hasta que la concentración se iguale. La ósmosis está estrictamente ligada a la tonicidad de una solución, pudiendo ser la última: ● Hipertónica: En este caso, la concentración de solutos es mayor fuera de la célula que dentro de la célula. Como resultado, el agua se mueve de un área de alta concentración a un área de baja concentración, como consecuencia la célula se encoge. Este fenómeno se da porque el agua se extrae de la célula para diluir la mayor concentración de solutos fuera de la célula. En células animales, esto se conoce como crenación. ● Isotónica: La solución es isotónica cuando la concentración de solutos es igual en ambos lados de la membrana. Las moléculas de agua se mueven libremente a través de la membrana en ambas direcciones, manteniendo el equilibrio de solutos dentro y fuera de la célula. La célula permanece sin cambios en tamaño y forma. ● Hipotónica: En una solución hipotónica, la concentración de solutos es mayor dentro de la célula que fuera de la célula. Esto da como resultado, un efecto en el que el agua se mueve de un área de alta concentración a un área de baja concentración, ocasionando que la célula se hinche. Esto ocurre porque el agua ingresa a la célula para diluir la mayor concentración de solutos dentro de la célula. Este fenómeno se conoce como citolisis en células animales. En los seres vivos es un proceso importante que permite el movimiento de agua y nutrientes a través de las membranas celulares, ayudando a la supervivencia de las células y del organismo en su conjunto. Regula el equilibrio del medio interno por lo que es muy importante en varios procesos fisiológicos, como la función renal y el mantenimiento de la presión arterial. 7. Que es plasmólisis. Que es hemólisis. El movimiento del agua a través de una membrana con permeabilidad, por ósmosis, como la membrana plasmática en respuesta a distintas concentraciones de solutos. Cuando nos referimos a permeabilidad selectiva hablamos del paso del agua de iones y moléculas pequeñas. En las soluciones cuando varía su concentración, siendo hipertónica, hipotónica e isotónica. Plasmólisis: Ocurre cuando las células vegetales pierden agua luego de estar en una solución que tiene una mayor concentración de solutos que la célula, es decir una solución hipertónica, el agua o solvente se mueve e ingresa a la célula debido al movimiento de moléculas, ocasionando que el protoplasma, es decir, el material del interior de la célula se contraiga y se aleje de la pared celular, se da un colapso de la pared celular de la célula vegetal hasta muerte celular. Al ser un proceso que no requiere energía es difícil de controlar y detener. El responsable de la plasmólisis es la ósmosis debido a que es un tipo de difusión, hay tipos de plasmólisis: - Plasmólisis cóncava: Proceso que generalmente se puede revertir, cuando el protoplasma y la membrana se alejan de la pared celular en algunos lugares por la misma pérdida de agua, se observa la formación de bolsas de media luna esto a medida que el protoplasto se desprende de la superficie de la pared celular, si se coloca una solución hipotónica se puede revertir. - Plasmólisis convexa: Es más grave porque en este tipo la célula se somete a una plasmólisis compleja, aquí pierden demasiada cantidad de agua que la membrana plasmática y el protoplasma se desprenden por completo de la pared celular, se da un colapso de este llamado ctyorrhysis, no se puede revertir causando la muerte de la planta por falta de agua. Hemólisis: Es el proceso que se presenta cuando los glóbulos rojos de la célula animal se desintegra o cuando se da lisis celular debido a que esta está expuesta a un medio hipotónico, absorbiendo agua o dándose un ingreso agua o solvente a la célula. Se da una deshidratación de los glóbulos rojos, debido al proceso de un medio hipotónico. 8. ¿Qué es difusión? La difusión es uno de los principales mecanismos de transporte celular. Es el proceso de movimiento de moléculas o iones desde una región de alta concentración hacia una región de baja concentración a través de la membrana celular. Este movimiento ocurre hasta que se alcanza un equilibrio, donde la concentración de moléculas es la misma en ambos lados de la membrana celular. La difusión puede darse de dos maneras: difusión simple y difusión facilitada. En la difusión simple, las moléculas pueden atravesar directamente la membrana celular sin la ayuda de proteínas transportadoras. En la difusión facilitada, las moléculas se mueven a través de proteínas de canal o proteínas transportadoras específicas que facilitan su paso a través de la membrana celular. Es un proceso pasivo, lo que significa que no requiere energía de la célula para llevarse a cabo. Además, la velocidad de la difusión depende de la concentración de las moléculas, la temperatura y la permeabilidad de la membrana celular. Además, es esencial para la supervivencia de las células ya que permite la entrada de nutrientes y la eliminación de desechos a través de la membrana celular. También juega un papel importante en la regulación del equilibrio químico en el interior y exterior de la célula. 9. ¿Qué es turgencia? La turgencia es un fenómeno que ocurre en las células de las plantas, debido a la presión osmótica que se produce cuando las células absorben agua. Cuando una célula vegetal se coloca en una solución hipotónica, el agua ingresa a la célula a través de la membrana celular, lo que hace que el protoplasto empuje contra la pared celular. Esta presión contra la pared celular se conoce como presión de turgencia. La turgencia es importante para la supervivencia de las plantas, ya que les permite mantener su forma y rigidez. Es esencial para la supervivencia de la planta, ya que ayuda en procesos como la fotosíntesis, la absorción de nutrientes y el transporte de agua y minerales desde las raíces hasta las hojas. La pérdida de presión de turgencia, por ejemplo, a través de la pérdida de agua debido a sequías o enfermedades, puede hacer que la planta se marchite y finalmente muera. Está relacionada con la labor de los estomas, debido a que,permite el intercambio de gases. Los estomas son pequeños poros en la superficie de las plantas. Son abiertos gracias a la presión provocada por la turgencia que provoca una hinchazón, ya que la pared interna del poro es más rígida que la pared del lado opuesto de la célula. A través de estas aberturas se tiene una vía para que la entrada de dióxido de carbono, siendo esencial para la fotosíntesis. 10. Qué es difusión simple La difusión simple es un proceso de transporte pasivo de moléculas a través de una membrana semipermeable. En este proceso, las moléculas se mueven desde una región de alta concentración hacia una de baja concentración, siguiendo el gradiente de concentración. En la difusión simple, las moléculas pequeñas, no polares y liposolubles pueden atravesar fácilmente la membrana, mientras que las moléculas grandes y polares necesitan proteínas transportadoras para cruzar la membrana. Este proceso es importante para muchos procesos biológicos, como la respiración celular, la absorción de nutrientes en el intestino y la eliminación de desechos por los riñones.(*) 11. Que es Transporte activo El transporte activo es un proceso de transporte celular que requiere energía para mover moléculas o iones en contra de un gradiente de concentración o electroquímico a través de una membrana celular. A diferencia del transporte pasivo, que se produce a favor del gradiente de concentración y no requiere energía, el transporte activo utiliza energía en forma de ATP (adenosín trifosfato) para impulsar el movimiento de las moléculas o iones en contra del gradiente. Existen diferentes tipos de transporte activo, como la bomba de sodio-potasio, que mueve iones de sodio y potasio en contra de su gradiente electroquímico para mantener elequilibrio en la célula; la bomba de calcio, que transporta iones de calcio hacia el exterior de la célula; y el transporte activo mediado por proteínas transportadoras, que utiliza proteínas transportadoras para mover moléculas grandes, como los aminoácidos, en contra del gradiente de concentración. El transporte activo es fundamental para el funcionamiento celular y es necesario para mantener la homeostasis en el organismo. 12. Funciones de la membrana plasmática. La membrana plasmática es una capa doble de lípidos que recubre y delimita a las células, sirviendo de frontera entre el interior y el exterior de la misma, y permitiendo además un equilibrio fisicoquímico entre medio ambiente y citoplasma celular. - Protege a la célula. - Proporciona un entorno estable dentro de la célula. - Se encarga del transporte de nutrientes dentro de la célula, esto por el paso de sustancias seleccionadas, siendo un filtro tanto afuera como adentro y permite desechar toxinas y desechos metabólicos. - Se encarga del transporte de sustancias tóxicas fuera de la célula. - Delimita la célula, separando un entorno de adentro y afuera. Es la primera barrera de defensa en caso de agentes invasores. - Tiene una alta selectividad al ingreso o salida de moléculas. - Se encarga del intercambio de fluidos y sustancias entre el citoplasma y medio ambiente, conservar el pH y carga de iones, controlando el balance de agua y otras sustancias. - Transmite información exterior de la célula, teniendo una respuesta o reacción en procesos bioquímicos. - Compartimentalización esto debido a que la membrana rodea toda la célula, en donde hay contenidos diversos. - Permite la interacción celular. - La transducción de energía. 13. Cuál es la diferencia entre el fenómeno de Ósmosis en células vegetales y células animales En cuanto al comportamiento de la células cuando las colocamos en distintas soluciones como isotónicas, solución hipertónica y solución hipotónica, como se pudo comprobar en la práctica es que tienen a tener el mismo comportamiento, siendo la principal diferencia la pared presencia de pared celular en las células vegetales, en caso de las estas las células en vez de lizarse o romperse como sería en las células animales, estas no se rompen debido a que su pared celular es capaz de resistir la presión osmótica, y la presión de turgencia en caso de las células vegetales, evita que la célula pierda la forma gracias a la misma pared celular. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ● Transporte Celular. Universidad Nacional Autónoma de México [Internet]. Ciudad de México: UNAM; 2015 [citado 3 de abril de 2023]. 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