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MICROBIOLOGIA Profesor : Juan G. Juscamaita Morales Universidad Nacional Agraria La Molina, MAYO 2020 La Microbiología es una ciencia biológica extraordinariamente importante para la humanidad, dado que los microorganismos están presentes en todos los hábitats y ecosistemas de la Tierra y sus actividades presentan una gran incidencia en numerosos ámbitos de interés y en el bienestar humano general. 1. Los microorganismos fueron los primeros en aparecer en la evolución (hicieron su aparición hace 3,500 millones de años), constituyen la mayor parte de la biomasa del planeta tierra. 2. Muchos investigadores mencionan que se han descrito menos del 10% de los microorganismos existentes. MICROBIOLOGIA Deriva de 3 palabras griegas: mikros ( pequeño) bios (vida) logos (ciencia) Estudio de la vida microscópica (organismos o agentes que son demasiado pequeños para ser observados con claridad a simple vista) En términos de número total y masa - se estima que los microbios contienen el 50% del carbono biológico y el 90 % del nitrógeno biológico de la Tierra- exceden ampliamente a cualquier otro grupo de organismos del plantea tierra. La característica de una célula. Una célula viva es un sistema químico complejo. ¿Cuáles son las características que permiten separa las células de los sistemas químicos no vivos? Podemos citar cinco importantes caracteres diferenciales: 1. Autoamimentación 2. Auto replicación 3. Diferenciación 4. Señalización química 5. Evolución G:/CURSOS POST GRADO/JUAN/CURSOS/Microbiologia2007i/imagen0001.htm Ciencia biológica que estudia: •Morfología, Estructura y función de microorg. =Morfología y Citología •Crecimiento, reproducción y actividades metabólicas =Fisiología y Bioquímica •Mecanismos genéticos = Genética •Relaciones filogenéticas y taxonomía: Sistemática. •Distribución, cambios en el medio ambiente y relaciones con otros seres vivos=Ecología •Aplicaciones socioeconómicas MICROORGANISMOS MICROBIOLOGIA Reino Monera, Protista, Fungi, incluye a Virus y otros entes biológicos moleculares (viroides, priones) a bTRES DOMINIOS La Microbiología usa técnicas como: Esterilización Empleo de medios de cultivo Análisis Molecular y bioquímico Aislamiento y crecimiento de los microorganismos DESARROLLO HISTÓRICO DE LA MICROBIOLOGIA- Periodo especulativo ( 3 millones de años A.C.- 1676) P. Biotecnología Microbiana (1970 -Presente) P. Genet. Microb. (1941 - 1970) P. Fisiología Microbiana (1910-1940) Periodo de los cultivos (1867 - 1910 ) Periodo de la observación (1676- 1867) Periodo especulativo ( 3 millones de años A.C.- 1676) 3-2.5’ años AC aparición evolutiva del género Homo Desarrollo de 1ras. Prácticas agrícolas y procesamiento empírico de alimentos. (Hombre Microorganismos) Sumerios, Babilonios, Egipcios, Incas, Aztecas usaron los M.O : Pan, cerveza, vino, chicha. Culturas asiáticas, africanas, europeas y americanas Lucrecio ( s I. A.C.) De rorum natura, “semillas de enfermedad Fracastoro (1546) gérmenes invisibles causan enfermedades Jansen (1590-1608) desarrolla el 1er Mocroscopio compuesto útil Robert Hooke (1635-1703)observaciones microscópicas de hongos y Ptas. Antony Van Leeuwenhoek (1632-1723) es considerado el padre de la microbiología. Publica el 1er. Artículo sobre observaciones microscópicas “Philosophical Transactions of the Royal Society” * “Animáculos” Periodo de la observación (1676- 1867) Antes se creía que las formas de vida aparecían espontáneamente (Teoría de la Generación espontánea). (1579-1644) Van Helmont (químico, físico, alquimista, médico, y fisiólogo) belga. Origen de la vida del agua y de compuestos inanimados (1626-1698) Francesco Redi (italiano): los gusanos no aparecen espontáneamente a partir de materia inerte. (1745) John Needham: caldos enfriados -aparecían microorganismos (1729-1799) Lazzaro Spallanzani: M.. org. Entran a través del aire - Sella frascos. Needham =“ fuerza vital “ (1820-1893) John Tyndall: Técnica de esterilización por etapas. (1822-1895) Louis Pasteur: refutó la teoría de la generación espontánea. Introdujo la teoría de la enfermedad, demostró que la levadura es responsable de la fermentación. Desarrollo la pasteurización, técnicas de inmunización. Descubrió Streptococcus pneumoniae. * Periodo de los cultivos (1867 - 1910 ) Cazadores de microbios Robert Koch (1843-1910): Demostró la teoría infecciosa de la enfermedad. Desarrolló técnicas de aislamiento y medios de cultivo para la identificación de un gran número de microorganismos. Walter Hesse (agar), Richard Petri (cajas circulares de vidrio) Fanny Angelina Eilshemius Descubrió: Bacillus anthracis, Micobacterium tuberculosis, Vibrio cholerae. Desarrollo Postulados de Koch: Relación causal de un M.org. con una enfermedad. (1883) Christian Gram : desarrolla el método de tinción diferencial para bacterias. Las que retienen o no el colorante básico Cristal Violeta. P. Fisiología Microbiana (1910-1940) o P. F.M. Y la Microbiología Industrial Winogradski (1856-1953) y Beijerick * (1851-1931) relacionaron: Metabolismo microbiano Transformaciones BIOGEOQUIMICAS (suelo-agua) En base a particularidades metabólicas microbianas Desarrollan técnicas de cultivo por enriquecimiento Kluyver y Van Niel estudiaron el metabolismo microbiano y la fotosíntesis bacteriana, respectivamente. Alexander Fleming (1928) Descubre la antibiosis de Penicillium notatun contra Staphylococcus aureus debido a la penicilina. Howard Florey (Australiano) y Ernst Chain (Alemán) (2°G.M) producción masiva de penicilina. Prod. en EEUU Merck, Pfizer y Squibb. + xx Medios de enriquecimiento y medios diferenciales P. Genet. Microb. (1941 - 1970) Mendel dio origen a la genética, no incluía a los microorganismos. G.W. Beadle y E.L. Tatum (1941) probaron la relación entre los Genes y las enzimas al encontrar mutantes auxotróficos (incapaces de sintetizar un metabolito, por tanto dependientes del suministro externo de éste) del Hongo Neurospora . Max Delbruck y Salvatore Luria: encontraron mutaciones espontáneas en bacterias. Avery, MacLeod y McCarty (1944) prueban : DNA es la molécula hereditaria y que las bacterias tranfieren genes por TRANSFORMACION Lederberg y Tatum (1946) demuestran la CONJUGACION •Zinder y Lederberg (1952) Transducción generalizada •Jacob y Monod (1961) Operon Lac Crick, Watson y Wilkins: proponen el modelo estructural del DNA Se mejoran características culturales e incrementan capacidades metabólicas de los microorganismos utilizados en la producción industrial. P. Biotecnología Microbiana (1970 -Presente) 1973 Se publica: Factibilidad de introducir y expresar genes foráneos en bacterias. Gen de la somatostatina en E. coli Biotecnología “ Aplicación a la ingeniería de los proceso biológicos desarrollados por células (microbianas, vegetales o animales), por sus componentes o partes, con la finalidad de obtener bienes y servicios”. Se producen en forma industrial: Proteínas humanas, animales y vegetales empleando microorganismos. Se usan microorganismos para solucionar problemas de contaminación ambiental. . RELACION ENTRE LA MICROBIOLOGIA Y LA TECNOLOGIA I IV III II T M T MT T M MP M MPMP MP I Japón y varios paises asiáticos II Ex Unión Soviética III Europa y Estados Unidos IV Paises del Sur (Tercer Mundo) IV. FUTURO Las perspectivas futuras pueden llevar a los siguientes beneficios: · Diagnóstico, prevención o cura de enfermedades infecciosas y genéticas. · Aumento del rendimiento de cultivos creando plantas resistentes a insectos, hongos y virus. · Desarrollo de microorganismos que producirán compuestos químicos, polímeros, aminoácidos, enzimas y varios aditivos de alimentos. · Facilitar la eliminación de contaminantes y residuos tóxicos del medio ambiente. Aunque es importante enfatizar los aspectos positivosde los nuevos avances, también es necesario considerar las consecuencias sociales que pueden derivarse del uso de esta tecnología: ¿Puede ser algún organismo modificado genéticamente perjudicial para otros organismos o el medio ambiente? ¿Puede el desarrollo y uso de los organismos modificados genéticamente reducir la diversidad genética natural? ¿Deben modificarse genéticamente a los hombres? ¿Los nuevos diagnósticos invadirán la privacidad de las personas? ¿Deben tener propietario los organismos creados por ingeniería genética? APLICACIÓNES DE LA MICROBIOLOGIA Salud: - Control de enfermedades (estudio causal) -Quimioterapia - Vacunas Alimentacion: Productos elaborados Conservación de los alimentos (encurtidos) Enfermedades alimentarias Descomposicón de los alimentos Producción de enzimas (amilasas, proteasas, lactasa, invertasa) Industria: Enzimas hidrolíticas Proteasas de detergentes Lipasas Lixiviación de minerales ( conc. De minerales) ´Producción de biofertilizantes Agricultura y Ganadería: Fijación biològica de nitrógeno Manejo de simbiosis (Micorrizas, aporte de fósforo) Simbiosis del rumen Producción de alimentos para ganado. http://edicion-micro.usal.es/web/educativo/micro2/tema01.html#anchor535108 http://coli.usal.es/web/educativo/entrada.html http://www.umsl.edu/~microbes/pdf/Coming%20Clean%20With%20Enzymes.pdf http://www.umsl.edu/~microbes/high.htm http://www.umsl.edu/~microbes/pdf/fungus1.pdf http://coli.usal.es/web/educativo/formatonew/mf8.html http://coli.usal.es/web/educativo/formatonew/mf8.html http://www-micro.msb.le.ac.uk/Video/Gram.html http://es.geocities.com/joakinicu/apartado12c.htm fai.unne.edu.ar/.../micro-ianez/05_micro.htm http://fai.unne.edu.ar/biologia/microgeneral/micro-ianez/05_micro.htm LA IDEA CENTRAL DE ÉSTA TEORÍA, PRESUPONE QUE LOS SERES VIVOS PODÍAN ORIGINARSE A PARTIR DE SUSTANCIAS INANIMADAS. POR EJEMPLO, DEMÓCRITO, TALES DE MILETO Y ANAXIMANDRO, CONSIDERABAN QUE LA VIDA PODÍA SURGIR DEL LODO, DE LA COMBINACIÓN DEL AGUA CON EL FUEGO, O DE CUALQUIER OTRA COMBINACIÓN DE ELEMENTOS. PARA ARISTÓTELES, ÉSTE PROCESO ERA EL RESULTADO DE LA INTERACCIÓN DE LA MATERIA INERTE CON LO QUE ÉL LLAMABA "ENTELEQUIA". ÉSTA CONCEPCIÓN FILOSÓFICA, SOBRE EL POSIBLE ORIGEN DE LA VIDA, PERDURÓ POR MUCHOS SIGLOS, Y VAN HELMONT SE ENCARGÓ DE DIFUNDIRLA POR TODA EUROPA. LOS SERES VIVOS EN LA NATURALEZA TEORÍAS DEL ORIGEN DE LOS SERES VIVOS : TEORÍA DE LA GENERACIÓN ESPONTÁNEA * El error que Needham cometió era que no calentaba el caldo lo suficiente, y por lo tanto al tiempo aparecían los microorganismos. JOHN NEEDHAM (1713-1781)- Científico inglés. Sacerdote católico. Needham llevó acabo numerosos experimentos en los que preparaba unos caldos de carne y vegetales. Entonces, los dejaba estar en envases con tapones de corcho que no estaban bien ajustados. De hecho, creía que al hervir los caldos, mataría todos los microorganismos que había en ellos. Pasados unos días, Needham observó que los caldos contenían microorganismos. Needham llegó a la conclusión de que los microorganismos tenían que haberse desarrollado de los caldos. Los descubrimientos de Needham apoyaron la teoría de la generación espontánea de los microorganismos. El no se dio cuenta de que los microorganismos pudieron entrar porque los frascos no estaban bien cerrados. Una “fuerza vital” originaba la vida (Generación Espontánea) The Redi experiment http://aportes.educ.ar/biologia/nucleo-teorico/recorrido-historico/como-se-origina-la-vida/los_primeros_experimentos.php Medico y científico (Italiano) Refuta la generación espontánea de gusanos Experimento de Francesco Redi a. Alimentos son expuestos a moscas las cuales ponen huevos de donde nacen las larvas b. Recipientes tapados no dejan entrar las moscas ni dejan salir el olor de los alimentos, por lo tanto no se ponen huevos ni nacen larvas c. Recipientes tapados con gaza/tela dejan salir el olor pero no dejan entrar las moscas, por lo tanto ponen los huevos en la gasa. Experimento de Redi Experimentos de Spallanzani Spallanzani calentó un caldo en un frasco abierto y observó que al cabo de un tiempo aparecían microorganismos. Pero cuando repitió la experiencia con frascos cerrados no aparecieron microorganismos Ataca la generación espontánea La disputa entre J.Needham (1713-1781) y L.Spallanzani (1729-1799) Needham interpreta los experimentos de Spallanzani erróneamente “ al calentar los frascos el aire pierde su fuerza vital” (vitalismo) Pasteur usó probetas con cuello de cisne para los estudios sobre la generación espontánea 3i Experimento de Pasteur con matraces de cuello de cisne. (a) Esterilización del contenido del matraz. (b) Si el matraz se mantiene en posición vertical no ocurre crecimiento microbiano. (c) Si los microorganismos atrapados en el cuello alcanzan el líquido estéril, crecen rápidamente. Postulado 1 El microorganismo patógeno sospechoso debe estar presente en todos los casos de la enfermedad y ausente en animales sanos Postulado 2 El microorganismo sospechoso debe cultivarse en cultivo axénico (puro) Postulado 3 Las células de un cultivo axénico (puro) del microorganismo aislado deben causar la enfermedad en animales sanos Postulado 4 El microorganismo debe se reaislado y ser idéntico al original POSTULADO DE KOCH Koch 2 i G (a) Microscopio utilizado por Robert Hooke. (b, c) Dos dibujos de Robert Hooke que representan una de las primeras descripciones microscópicas de microorganismos. (b) Un moho azul creciendo sobre la superficie de un objeto de cuero; las estructuras redondeadas contienen las esporas del moho. (c) Un moho creciendo sobre la superficie de una hoja de rosal vieja y deteriorada. (a) (b) (c) Primeros dibujos de bacterias (Leeuwenhoek, 1683) Anton van Leeuwenhoek Microscopio simple de Leeuwenhoek a) Fotografía de una copia del microscopio de Leeuwenhoek. (b) Dibujos de bacterias por Leeuwenhoek, publicados en 1864. En estos sencillos dibujos podemos reconocer varios tipos morfológicos de bacterias comunes. http://es.geocities.com/joakinicu/apartado1h.htm COLUMNA DE WINOGRADSKY *16 G:/CURSOS POST GRADO/JUAN/CURSOS/Microbiologia2007i/Historia2007a.ppt#14. Diapositiva 14 o Martines Beijerinck: Ecología microbiana. • proceso de fijación de N por bacterias (1888) • bacterias reductoras de sulfato (1901) • reacciones cíclicas mediadas por organismos son necesarias para mantener la calidad ambiental y esenciales para soportar la vida en la Tierra * TRANSFORMACIONES BIOGEOQUIMICAS CICLO DEL NITRÓGENO Melón infectado por moho Penicillium chrysogenum NRRL Instalación para la extracción de un antibiótico del caldo de fermentación mediante el uso de disolventes. El proyecto de la somatostatina + Neurospora crassa + http://images.google.com.pe/imgres?imgurl=http://www.nature.com/nature/journal/v422/n6934/images/422821a-f1.2.jpg&imgrefurl=http://www.nature.com/nature/journal/v422/n6934/fig_tab/422821a_F1.html&usg=__i5nzuHgovMHrs3qWtEgS_1NNFbo=&h=452&w=600&sz=58&hl=es&start=83&tbnid=lerpINcdZ9vNDM:&tbnh=102&tbnw=135&prev=/images%3Fq%3DNEUROSPORA%2BCRASSA%26gbv%3D2%26ndsp%3D18%26hl%3Des%26sa%3DN%26start%3D72 http://images.google.com.pe/imgres?imgurl=http://genet.seitai.saitama-u.ac.jp/Ncrassa.gif&imgrefurl=http://genet.seitai.saitama-u.ac.jp/English2.html&usg=__YUC81PBpfadgAMPucpjscdrncw0=&h=540&w=454&sz=130&hl=es&start=135&tbnid=IMWIWT7Tawb8SM:&tbnh=132&tbnw=111&prev=/images%3Fq%3DNEUROSPORA%2BCRASSA%26gbv%3D2%26ndsp%3D18%26hl%3Des%26sa%3DN%26start%3D126 CONJUGACION * http://home.scarlet.be/~tsk05520/biomolespa/plasmidos/plasmido-01a.jpg t Esquema del experimento que realizó Grifftith en 1928 Al conjunto de genes contiguos más los elementos reguladores que controlan su expresión se le denominó operón. Patrón de difracción que produce elADN a b c Hace 80 años, el mes de septiembre de 1928, Alexander Fleming se dio cuenta de que un hongo que había contaminado uno de sus cultivos de laboratorio impedía el desarrollo de varios gérmenes. De ese hongo, el «Penicillium», salió después la penicilina, una «bala mágica» contra las infecciones. «Yo no intentaba descubrir la penicilina, me tropecé con ella» solía decir Flemming.xx TOCOSH http://www.google.com.pe/url?sa=i&rct=j&q=tocosh&source=images&cd=&cad=rja&docid=KdvwPgHNHiHHCM&tbnid=x2Mxr_92VqNeGM:&ved=0CAUQjRw&url=http%3A%2F%2Fheraldo21.blogspot.com%2F2009%2F05%2Fla-papa-resumen.html&ei=JoNZUbjpHMrA4AP2xYDYBA&bvm=bv.44442042,d.dmg&psig=AFQjCNH7Ne1vZlSr_fwPTL5dFbz7ypYpFw&ust=1364907121232709 http://www.google.com.pe/url?sa=i&rct=j&q=tocosh&source=images&cd=&cad=rja&docid=-5bEk0u5ei8PkM&tbnid=Hqr0nez-2vHdOM:&ved=0CAUQjRw&url=http%3A%2F%2Fgrupos.emagister.com%2Fdocumento%2Fmazamorra_de_tocosh%2F1613-341396&ei=k4NZUeeaNLKz4APRpICACQ&bvm=bv.44442042,d.dmg&psig=AFQjCNH7Ne1vZlSr_fwPTL5dFbz7ypYpFw&ust=1364907121232709 http://www.google.com.pe/url?sa=i&rct=j&q=tocosh&source=images&cd=&cad=rja&docid=-5bEk0u5ei8PkM&tbnid=Hqr0nez-2vHdOM:&ved=0CAUQjRw&url=http%3A%2F%2Fblogs.elcomercio.pe%2Fpapasycamotes%2F2010%2F06%2Fla-mazamorra-de-tocosh-un-dulc.html&ei=WYNZUeSkBOfk4AOClYH4DQ&bvm=bv.44442042,d.dmg&psig=AFQjCNH7Ne1vZlSr_fwPTL5dFbz7ypYpFw&ust=1364907121232709 Thiomargarita namibiensis ("perla sulfurosa de Namibia") es una proteobacteria gram- negativa encontrada en los sedimentos oceánicos de la plataforma continental. Es la mayor bacteria conocida, con una longitud de hasta 750 μm (0,75 mm),[lo que la hace visible a simple vista. Es una bacteria quimiolitotrófica, y es capaz de usar el anión nitrato como aceptor electrónico terminal en la cadena de transporte electrónico. Ya que la bacteria es sésil, y la concentración de nitrato varía considerablemente con el tiempo, es capaz de almacenar altas concentraciones (hasta 10.000 veces más) de nitrato en una inmensa vacuola, la cual es responsable del 98% de su tamaño. Cuando las concentraciones de nitrato en el medio exterior son bajas, esta bacteria usa el nitrato contenido en su vacuola para poder seguir respirando. Una investigación reciente ha mostrado que la bacteria podría ser anaerobia facultativa, más que anaerobia obligatoriamente, y por tanto ser capaz de respirar oxígeno si está disponible. Otra adaptación poco común es su patrón de división reductiva. Bajo condiciones de estrés, como la inanición, dicha bacteria es capaz de reproducirse, pero de forma que se parta la célula manteniendo el volumen total constante. Este patrón de comportamiento podría deberse a su gran tamaño. Esta especie fue descubierta por Heide H. Schulz et al. en 1999, en la costa de Namibia. En 2005 se descubrió una especie muy cercana en el Golfo de México, planteándose así la posibilidad de que la Thiomargarita esté mucho más difundida de lo que se pensaba anteriormente. No hay otras especies en su género. http://es.wikipedia.org/wiki/Proteobacteria http://es.wikipedia.org/wiki/Gram-negativa http://es.wikipedia.org/wiki/Nitrato http://es.wikipedia.org/wiki/S%C3%A9sil http://es.wikipedia.org/wiki/Vacuola http://es.wikipedia.org/wiki/Anaerobio_facultativo http://es.wikipedia.org/wiki/Namibia http://es.wikipedia.org/wiki/Golfo_de_M%C3%A9xico
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