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EXAMEN PRÁCTICO UNIDAD 3 MECA PRACTICA 8: PRUEBAS SEROLÓGICAS PARA IDENTIFICACIÓN DE VIRUS Primarias: PCR, Electroforesis, Microscopia electrónica, Aislamiento de cultivo celular y Inmunocromatografias. Secundarias: IFI y Elisa indirecta. INMUNOCROMATOGRAFÍA: Dx Primario que permite detectar INMUNOGLOBULINAS (Ig G y Ig M). -Colorante: Oro coloidal -Se lleva a cabo en un papel poroso (Nitrocelulosa), dos almohadillas Se Distinguen 5 zonas: 1. Zona de siembra de la muestra 2. Zona del conjugado (oro coloidal) 3. Zona de detección o Zona Test, Testigo 4. Zona de control. Ig No-Humano 5. Región absorbente CONTROL Y TESTIGO: Antigénica (Virus) ANTICUERPOS: Ig M: Inicio de la enfermedad, durante y después de la primera semana de infección. Ig M y Ig G: Manifestaciones Clínicas de la Enfermedad: Ig G: Después de la Enfermedad, protección frente a patogeno, fase de recuperación. Prueba rápida HIV-1/2 TriLine • Inmunoensayo visual cualitativo, flujo lateral bilateral. • Prueba en suero o plasma, 20 minutos • DETECTA: Anticuerpos anti-VHI-1 y/o anti-VIH-2 • EMPLEA: Antígenos recombinantes, oro coloidal rojo o Antígenos recombinantes VIH-1 gp41/120 o Antígenos recombinantes VIH-2 gp36 • VIH 1+2 = virus ARN monocatenario envueltos • VIH-1 = px con SIDA, px sanos con alto riesgo de desarrollar SIDA • VIH-2 = Px Africa, Px asintomáticos seropositivos, contagian COMPLEJO Anticuerpo-antígeno / Ac-Ag Prueba rápida HBsAg • Inmunoensayo cromatográfico cualitativo. • Prueba en suero, plasma o sangre total, • DETECTA: Antígeno de superficie HBsAg • EMPLEA: Anticuerpos anti-HBsAg • HBsAg = primero y ultimo que se forma Prueba rápida SARS-CoV-2 • Ac = COVID-19 SPIKE Quantitative Virclia IgG = IgM, IgG, C, suero o plasma • Ag = SARS-CoV-2 Antigen Test Kit = T, C = infección en el momento de la muestra, hisopado nasofaríngeo Dura 15 min • Ig M = Inf aguda, mayor contagio • Ig G = Inf pasada, menor contagio • Ig M y Ig G = aguda más evolucionada, moderado contagio • NO Ig M, Ig G = No hay infección o muy precoz (falsos negativos) DENGUE • Fase febril = NS1 - PCR • Fase crítica = Ig M / Ig G • Fase de recuperación = Ig M / Ig G Prueba de TORCH • Detecta Toxoplasma, Rubeola, Citomegalovirus, Herpes simple tipo 2. • Recién nacidos y embarazadas • TOXOPLASMA Ig M (+) / Ig G (-) = Toxoplasmosis comenzando la infección Ig M (+) / Ig G (+) = manifestaciones clínicas Ig M (-) / Ig G (+) = tuvo la enfermedad, ahora no PRACTICA 9: TECNICAS DE GOTA GRUESA Y EXTENDIDO SANGUÍNEO Gota gruesa - 2 gotas - Agua, alcohol, Giemsa (10 min) (deshemoglobinización) • Para detectar si hay parasitos • Recuento o densidad parasitaria o Numero: sistema de cruces +++ o Concentración de parásitos por microlitro (numero de parásitos entre numero de leucocitos) Frotis o extendido sanguíneo - 1 gota - Metanol, Giemsa, agua • Tipos de parasito: P. falciparum, P. vivac • Estadios del parasito: trofozoíto, gametocito … HEMOHISTOPARÁSITOS Plasmodium • P. Vivax (leve) (latencia dentro del hígado) • P. Falciparum (más grave, infecciones multiorgánicas) • MALARIA o PALUDISMO = daña hígado • Dx clínico o Fiebre cada 3 días, paroxismos febriles o Ictericia o Anemia grave o Esplenomegalia o Bajo peso • Anopheles pica a humano → GAMETOCITO (fuente de contagio, Dx) → ESPOROZOITOS (forma infectante en las glándulas salivales) → fusión binaria → MEROZOITO (hepatocitos) → TROFOZOITO y ESQUIZANTE (eritrocito, Dx) → algunos maduran y forman GAMETOCITOS (px con gametocitos es asintomático, pero es una fuente de contagio) Toxoplasma Gondii • NO por gota gruesa • ESPOROZOITOS (infectante, intestino del gato) → GAMETOCITOS → OOQUISTES con ESPOROZOITOS (heces) → QUISTES (en los tejidos) → TAQUIZOITOS ↔ ESPOROZOITOS → MONOCITOS lo fagocitan y lo diseminan • Gestantes, muerte neonatal Trypanosoma Cruzi • Enf de Chagas • TRIATOMAS → EPIMASTIGOTE (intestino) → triatoma come las cel de la piel y va defecando → TRIPOMASTIGOTE (heces) → produce prurito (rasga la piel) → parásito entra (TRIPOMASTIGOTE) → Ganglios Linfáticos → AMASTIGOTE (tejidos, inflamación) → TRIPOMASTIGOTE (sangre) Leishmania spp • AMASTIGOTO en LUTZOMYIA / PHLEBOTOMUS (mosca) → PROMASTIGOTE (intestino → faringe) → picadura PROMASTIGOTE → MACROFAGOS fagocitan → AMASTIGOTE dentro del macrófago, en sangre y tejidos, Dx LAMINAS Phylum: Apicomplexa Locomoción: Esporozoo, inmóvil Género: Plasmodium Especie: Vivax Estadio: Trofozoito Coloración: Giemsa Phylum: Apicomplexa Locomoción: Esporozoo, inmóvil Género: Plasmodium Especie: Falciparum Coloración: Giemsa Phylum: Mastigophora Locomoción: Flagelado Género: Leishmania Especie: Spp Estadio: Amastigote Coloración: Giemsa Phylum: Mastigophora Locomoción: Flagelado Género: Leishmania Especie: Spp Estadio: Promastigote Coloración: Giemsa Phylum: Mastigophora Locomoción: Flagelado Género: Leishmania Especie: Spp Estadio: Amastigote Coloración: Giemsa Phylum: Mastigophora Locomoción: Flagelado Género: Leishmania Especie: Spp Estadio: Amastigote Coloración: Giemsa T12. PARASITOS PROTOZOOS Phylum: Apicomplexa Locomoción: Flagelado Género: Giardia Especie: Lamblia Estadio: Trofozoito Coloración: Lugol (tricrómico) Rodeado por Bacterias E. coli Phylum: Apicomplexa Locomoción: Flagelado Género: Giardia Especie: Lamblia Estadio: Quiste Amebas Locomoción: Rizópodo Género: Endolimax Especie: Nana Estadio: Trofozoito Coloración: Lugol (tricrómico) “doble membrana” Phylum: Sarcodina Locomoción: Rizópodos Género: Entamoeba Especie: Histolytica Estadio: Quiste Coloración: Lugol (tricrómico) Phylum: Sarcodina Locomoción: Rizópodos Género: Entamoeba Especie: Coli Estadio: Trofozoito Coloración: Lugol (tricrómico) T13. HELMINTOS Phylum: Nemátodos Género: Ascaris Especie: Lumbricoides Estadio: Huevo fertilizado Phylum: Nemátodos Género: Ascaris Especie: Lumbricoides Estadio: Adulto Phylum: Nemátodos Género: Enterobius Especie: Vermicularis Estadio: Huevo Phylum: Platelmintos Clase: Cestodos Género: Echinococcus Especie: Granulosus Estadio: Adulto “Taenia del perro” Phylum: Platelmintos Clase: Cestodos Género: Taenia Especie: Solium Proglótido adulto Estróbilo = cuerpo Phylum: Platelmintos Clase: Cestodos Género: Taenia Especie: Solium Estadio: Adulto Phylum: Platelmintos Clase: Cestodos Género: Taenia Especie: Spp Estadio: Adulto Escólex (cabeza), con ventosas y ganchos o dientes, rostelo Phylum: Platelmintos Clase: Cestodos Género: Hymenolepis Especie: Nana / Diminuta Estadio: Adulto Proglótido maduro Phylum: Platelmintos Clase: Trematodos Género: Fasciola Especie: Hepática Estadio: Adulto Ventosa oral (opérculo), acetábulo (huevos afecundados)
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