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Br. Alejandra Alvarado C | Microbiología UC Clase 11: Género Brucella y Pseudomonas GÉNERO BRUCELLA: cocobacilos gram (-), aerobios estrictos, no fermentadores, inmóviles, sin cápsula. Requieren CO2, son patógenos intracelulares facultativos (dependen de una célula viva para poder sobrevivir y multiplicarse), solamente 4 especies producen enfermedad en el humano: ● B. abortus ● B. melitensis ● B. suis ● B. canis Características de cultivo: ● Crecimiento lento (requiere de 3 a 10 días para poder observarse) ● Requiere medios de cultivo enriquecidos con agar tripticasa- soya, agar sangre, o suero equino. ● Requiere incubación en atmósfera de 10% de CO2 (37 C en estufa) Morfología: Pueden adoptar 2 tipos de morfología dependiendo del Antígeno O del LPS de la pared celular. Antígeno O Morfología Presente Lisa* Ausente Rugosa *(Las de morfología lisa tienen mayor virulencia) Brucelosis: Enfermedad infecciosa producida por el género Brucella. Zoonosis que afecta el aparato genito-urinario de vacas, ovejas, cerdos y otros animales. Se transmite ocasionalmente al hombre (antropozoonosis) a partir de estos animales infectados. Vías de transmisión de la Brucelosis: Vías de Entrada Formas de Adquisición Abrasiones en la piel Ocupacional (atención a animales) Digestiva Ingestión de alimentos contaminados (leche o derivados sin pasteurizar, carnes sin suficiente cocción) Respiratoria Inhalación de Brucellas (atención de abortos de animales, laboratorio de microbiologia) Persona a persona Transmisión sexual (Semen o fluidos vaginales contaminados) Auto Inoculacion accidental Ganaderos o Veterinarios (pinchazos con agujas, salpicaduras en ojos) Patogenia: Transmisión (por cualquiera de las 5 formas) ↓ Macrofagos y Monocitos fagocitan al microorganismo ↓ Invasión linfática → Linfadenopatías ↓ Sangre → Fiebre ondulante (ocurre bacteriemia y la infecc. se hace crónica) ↓ Sistema Reticuloendotelial ↙ ↓ ↘ Riñón M.O y huesos Hígado y bazo (se multiplica en ↓ Granulomas sinusoides hepáticos) La supervivencia intracelular de estas bacterias ocurre por la inhibición del sistema mieloperoxidasa y también por la fusión del fagosoma lisosoma. Las bacterias del género Brucella son capaces de inhibir la apoptosis celular (prolongan la vida de la célula donde habitan con la finalidad de prolongar su propia supervivencia) - actúan como un ‘’parásito’’. Clínica: ● Periodo de incubación de 1 a 8 semanas (o más) ● Los síntomas aparecen comúnmente de 1 a 2 meses después de la exposición. ● Puede ocurrir en 3 presentaciones (aguda, localizada o crónica) ● La forma aguda es la más común (aprox. 50% de los casos) Brucelosis Aguda Brucelosis Crónica Brucelosis Localizada - Inicio de síntomas de 2 a 4 semanas después de la inoculación - Fiebre ondulante - Diaforesis - Cefaleas - Mialgias y artralgias - Pérdida de peso - Diarreas - Vómitos - Tos seca - Esplenomegalia (del 20 a 50% de casos) - Hepatomegalia - Adenomegalias (del 10 al 20% de casos) - Epistaxis - Persistencia de síntomas y signos >12 meses - Persistencia de títulos altos de IgG - Circunscrita - Afecta a un órgano de forma específica, como por ejm: Columna lumbosacra, articulaciones, hígado, bazo, testículos, epidídimo, próstata, endocardio. Complicaciones: 1. Trastornos hematológicos (65% de casos) 2. Lesiones osteoarticulares (20% de casos) 3. Orquitis (20% de casos) 4. Abscesos hepáticos o Colecistitis 5. Meningoencefalitis y trastornos del SNC (5% de casos) 6. Endocarditis (2% de casos)* -casos graves. Diagnóstico: ● Historia clínica ● Signos ● Síntomas ● Métodos Directos e Indirectos Métodos Directos (buscan identificar al microorganismo) Métodos Indirectos (buscan identificar anticuerpos) Identificación preliminar por morfología microscópica de las colonias Oxidasa positiva Pruebas con anticuerpos específicos contra Brucellas Hemocultivos (lento crecimiento)* Biopsias de órganos comprometidos Aglutinación Antígeno tamponado en placa (BPA) Fijación de complemento Polarización de fluorescencia (FPA) Prueba de inmunodifusión en agar (IDAG) ELISA Hemoaglutinación inversa PCR Epidemiología: La brucelosis tiene una distribución mundial. Adquirida por diferentes vías, ya sea conjuntival, cutánea, respiratoria o digestiva. ● Patrón urbano-alimentario (consumo de leches o quesos sin procesar) - es la vía de transmisión más frecuente en zonas endémicas. ● Patrón rural-laboral (por exposición profesional al ganado infectado o sus productos bien sea por contacto directo o por inhalación) Tratamiento: Es importante destacar que solamente el humano puede recibir tratamiento, ya que cuando existe un animal infectado este se debe sacrificar. Profilaxis: Vacunación de animales en fincas o criaderos, instalaciones limpias, sacrificio de los animales enfermos, empleo de medidas de protección cuando se manipulan animales sospechosos, pasteurización de leches, quesos y derivados, así como evitar el consumo de leche cruda. Patogenia en animales: Animales preñados Animales no preñados ↓ ↓ Vía hematógena (útero-placenta) Brucella entra por mucosa oral o nasal ↓ ↓ Trofoblastos eritrofagociticos Pueden estar dentro de los fagocitos del placentoma (infección contigua) o libres en la circulación ↓ ↓ Trofoblastos de la membrana corioalantoidea Ganglios regionales ↓ (inflamación) Ulceracion y ruptura de la membrana ↓ ↓ Invasión de órganos del SRE Feto y placentoma (hígado, bazo, MO). Síntomas clínicos de la brucelosis animal: ● Abortos ● Esterilidad ● Lesiones articulares ● Retención de placenta ● Animales nacidos débiles ● Orquitis y epididimitis GÉNERO PSEUDOMONAS: Pertenecen a la familia Pseudomonadaceae, junto a las especies acidovorax y oligella. El género pseudomonas es el más importante a nivel clínico y el más importante de los bacilos gram (-) no fermentadores. Son patógenos vegetales, pero se ha vuelto patógeno para los humanos en casos donde el paciente está inmunodeprimido o inmunosuprimido (es un patógeno oportunista). Se encuentra en suelos, aguas jabonosas, piscinas, lavaplatos, baños. ● Son móviles gracias a un flagelo polar único ● Son oxidasa positivos ● Son mcconkey positivos ● Se pueden agrupar en fluorescentes y no fluorescentes ● La especie más relevante a nivel clínico es P. aeruginosa Grupo fluorescentes Grupo no fluorescentes* - P. aeruginosa - P. fluorescens - P. putida - P. stutzeri - P. mendocina - P. balearica - P. alcaligenes - P. pseudoalcaligenes *(Dentro del grupo no fluorescentes existen 2 especies que se diferencian por ser oxidasa negativos: P. luteola, P. oryzhiabitans) P. aeruginosa Es un bacilo gram (-) no fermentador, aerobio estricto (aunque es capaz de multiplicarse en ambientes anaerobios, lo hace muy lentamente), oxida azúcares. Sobreviven en ambiente hospitalario. Existen especies psicrófilas (pueden crecer a temperaturas frías). Son multiresistentes (tienen resistencia a la mayoría de los antibióticos) Características de cultivo: ● Crece en todos los medios ● Temperatura óptima de 20 C a 42 C ● Forma diferentes tipos de colonias (mucoides y no mucoides, dependiendo de la cantidad de alginato que posea la cápsula) ● Contiene pigmentos como la piocianina (verde, azul, rojo, marrón) y la pioverdina (fluorescencia) ● Tiene olor dulzón (como a fruta madura) Estructura antigénica: ➔ Antígeno O (termoestable) ➔ Antígeno H (termolábil) ➔ Cápsula polisacárida (alginato)*. Esta cápsula de alginato produce complicaciones en pctes con fibrosis quística, ya que produce moco en mayor cantidad ➔ Pili Toxinas: ● Bacteriocinaso piocinas ● Exotoxina A ● Otras exotoxinas: proteasas, elastasas, hemolisinas (fosfolipasa C), leucocidinas, enterotoxinas, etc… ● Endotoxina Patogenia (factores bacterianos): Factor Actividad Lipopolisacárido Endotoxina débil Cápsula Adherencia, antifagocitica Pili Adherencia Exotoxina A 20.000 veces más potente que el LPS. Interrumpe la traducción de síntesis proteica, por lo que induce la muerte celular. Proteasas y Elastasas Fenómenos necrotizantes, destrucción de anticuerpos Hemolisinas y Leucocidina Hemólisis, destrucción de leucocitos Exoenzima S Induce apoptosis Pioverdina Captación de hierro Piocianina Inhibe flora normal Patogenia (factores del huésped): ➔ Tratamientos antimicrobianos previos ➔ Inmunosupresión primaria o inducida ➔ Instrumentalización (catéteres, sondas, etc) ➔ Enfermedades malignas (como por ejm, hematológicas) ➔ Quemados en gran superficie corporal, politraumatizados Cuadros clínicos: Cuadro Características ITU Sondas urinarias Bacteriemias Enfermos hematológicos o quemados Endocarditis Drogadictos Infecciones respiratorias Fibrosis quística, ventilación asistida. Infecciones oculares Uveítis, endoftalmitis Infecciones ORL Otitis externa Infecciones cutáneas Foliculitis, infecciones de heridas Infecciones osteoarticulares Hematógenas o contigüidad Infecciones cutáneas: sepsis fulminantes Adquiridas en la comunidad: oculares, otitis, endocarditis Infecciones hospitalarias: tracto genitourinario, tracto respiratorio, peritonitis, bacteriemia, heridas y quemaduras Tratamiento antibiótico: En la mayoría de los casos se debe hacer antibiograma, ya que como se mencionó anteriormente esta especie es multiresistente. Entre los antimicrobianos utilizados se encuentran: 1. Betalactámicos: ceftazidima (cefalosporina de 3era generación), cefepime (cefalosp. de 4ta generación), piperacilina, carbapenemas 2. Fluoroquinolonas: ciprofloxacina 3. Aminoglucósidos: los de primera generación no tienen efecto. Solo tiene efecto la gentamicina, tobramicina y amikacina 4. Polimixinas: colistina Epidemiología: Fuentes Transmisión Receptores - Agua, vegetación, suelo - Humanos (5% a 9% de nuevos ingresos) - Persona a persona - Líquidos contaminados Al ser un patógeno oportunista, los receptores - Reservorios hospitalarios (desinfectantes, soluciones estériles, respiradores, etc) son humanos inmunodeprimidos Profilaxis: Fuentes Transmisión Receptores - Medidas de aislamiento - Asepsia rigurosa - Esterilidad de soluciones y aparatos - Política de antibióticos Lavado de manos Aislamiento de personas susceptibles Diagnóstico: Tinción de GRAM→ agar sangre y mcconkey (debe haber crecimiento a las 24hrs) → observar características de la colonia (morfología, color y olor) → observar oxidasa y motilidad → realizar antibiograma. Otros bacilos gram (-) no fermentadores: Ex-Pseudomonas: (La shewanella es conocida porque produce sulfuro de hidrógeno a nivel de laboratorio)
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