microscopia

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Instituto Politécnico Nacional 
Escuela Nacional de Ciencias Biológicas 
 
 
 
 
PRÁCTICA 2 
Biología celular de Eucariontes 
“Microscopía” 
 
 
Integrantes: 
● Hernández León Saúl 
● Hernández Sánchez Karen Denise 
● Martínez Mireles Luz Angela 
● Olivares Puentes Jessica Yazmin 
● Sánchez García Gerardo Raúl 
 
Grupo: ​1QV2 
 
Equipo: ​4 
 
INTRODUCCIÓN 
La microscopía es el conjunto de técnicas y métodos destinados a hacer visible los 
objetos de estudio que por su pequeño tamaño están fuera del rango de 
resolución del ojo humano. En el caso de la microscopía óptica y electrónica, la 
técnica en sí misma implica la difracción, reflexión y refracción de una onda 
electromagnética que interactúa con el espécimen, y la recolección de la radiación 
dispersada o de cualquier otra señal para crear una imagen. 
· ​Microscopía óptica: en este tipo de microscopios el área observada está 
ampliamente iluminada. Normalmente alcanzan hasta unos 1000 aumentos, 
aunque con oculares poderosos esta cifra puede llegar a duplicarse. El límite 
útil de este aumento es de 2000 y la razón de este límite se debe al poder de 
resolución. Habitualmente los microscopios ópticos constan de una parte 
mecánica y una óptica. Ésta última consta de tres sistemas de lentes: 
1. El condensador que ilumina el objeto estudiado 
2. El objetivo que aumenta la imagen y hace que ésta se pueda observar 
desde el ocular 
3. Y las lentes oculares que aumentan aún más la imagen y hacen que la 
imagen sea visible por el ojo humano 
· ​Microscopía confocal​: el microscopio utiliza como fuente de luz un haz láser 
monocromático caracterizado por una determinada longitud de onda. La luz 
emitida desde la muestra pasa por una abertura muy pequeña, llamada agujero 
de alfiler (diafragma-pinhole). Esto permite que el enfoque se realice por capas 
de manera que por la superposición de planos es capaz de reconstruir la 
superficie de las muestras, obteniendo imágenes con una alta resolución 
permitiendo estudiar, entre otros, rugosidades, perfiles, alteraciones 
superficiales, etc. 
· ​Microscopía electrónica de barrido​: El método se basa en hacer incidir un 
haz muy estrecho de electrones, acelerados con energías desde unos cientos 
de eV hasta varios keV, sobre una muestra opaca a los electrones. Este haz se 
focaliza sobre la superficie de la muestra, realizando un barrido de esta. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
RESULTADOS 
Se observó en el microscopio diversas muestras, las cuales fueron analizadas a 
diferentes aumentos. Examinamos en el primer apartado preparaciones de letras a 
simple vista: 
 
 
 
 
En el microscopio se enfocó la palabra “Oleum” a seco débil, para ser exactos se 
enfocó en el campo de visión la letra “u”, obteniendo una imagen invertida y de 
mayor tamaño: 
 
 
 
 
 
 
 
Posteriormente se examinó desde un microscopio compuesto una preparación de 
un cabello claro y oscuro que se encontraban entrecruzados 
 
Se analizó a seco débil y a seco fuerte una preparación temporal de la ​fina 
película superficial que recubre el hueco de cada capa que conforma el bulbo de la 
cebolla, ​obteniendo las siguientes imágenes 
 
 
 
 
 
 
 ​SECO DÉBIL​ ​SECO FUERTE 
Para observar las muestras a mayor detalle se usó el objetivo de mayor aumento 
(objetivo de inmersión), agregando el aceite de inmersión, brindándonos así una 
imagen de alta resolución que nos permite observar a detalle la morfología de las 
preparaciones, en este caso se observaron dos preparaciones (I y II) 
 
 
 
 
 
 
 ​I) ​PARAMECIO​ ​II)​ ​FROTIS DE SANGRE 
Las imágenes obtenidas de los ejemplares de insectos y crustáceos observados 
en el microscopio estereoscópico arrojaron una estructura tridimensional ampliada 
 
 
 
 
 
 ​ ​INSECTO ​ ​CRUSTÁCEO 
DISCUSIÓN (Análisis de resultados) 
I. Observación de preparaciones 
Las primeras preparaciones que se observaron fueron las 
preparaciones fijas de letras, enfocadas al microscopio con 
el objetivo de S.D, en la imagen lateral izquierda se observa 
como se ven las preparaciones a simple vista, y así es como 
se vieron bajo el microscopio: 
 
Se enfocó directamente en la letra u, y el microscopio nos 
proporcionó una imagen real, invertida y de mayor tamaño (100 
veces más grande para ser exactos). Como se observa, la 
imagen está invertida debido a un prisma de cristal ubicado en el 
interior del microscopio, cuya función es concentrar la luz en la 
imagen aumentada y dirigirla hacia los oculares. 
El propósito de realizar esta 
preparación fija de dos tipos de cabello, uno claro y uno 
oscuro, es visualizar el cruce entre ambos, así como la 
profundidad de campo. El enfoque se realizó con el 
objetivo de S.D (10x). La diferencia de colores se debe 
a la cantidad de melanina presente en las células, es 
importante la observación ya que hace evidente los 
componentes a nivel microscópico de la estructura del 
pelo. 
 
También se realizó una preparación 
temporal de la epidermis de una 
cebolla, se colocó sobre un 
portaobjetos con una gota de agua y 
encima se puso el cubreobjetos, 
enfocándose con el objetivo de S.D 
(10x) y posteriormente con el objetivo 
de S.F.(40x) Y bien, lo que 
observamos fueron las células vegetales así como su forma hexaédrica (en 
celdas) y alargadas. Realmente no se puede analizar lo que se ve, debido a que la 
preparación no utilizó algún colorante, y esto hubiera permitido observar tal vez 
algún organelo celular, sin embargo, se observa como ya se mencionó la 
morfología celular, así como el espacio entre cada célula. 
 
II. Paramecio y frotis sanguíneo observado con el objetivo de inmersión 
Para este enfoque se utilizó el objetivo de inmersión (100x), por lo que se usó el 
aceite de inmersión ya que tiene un alto índice refractivo que brinda la 
concentración de la luz cuando esta pasa a través del objetivo, aumentando su 
resolución. 
El paramecio es un protozoo de forma ovalada que puede 
tener una longitud de 50-300 µm en función de la especie, 
como se observa, su superficie cuenta con abundantes cilios 
sensoriales que le permiten su alimentación 
y locomoción. 
En el frotis sanguíneo se pueden observar 
eritrocitos hipocrómicos, sin embargo esto 
se puede deber a dos factores: la tinción o que realmente si 
presentan esa condición, si se estuviera analizando el frotis 
sería necesario preparar otro frotis para corroborar este dato. 
También se observa un neutrófilo y un linfocito B al parecer. 
III. Observación de insectos con el estereoscopio 
Las dos muestras que se observaron 
fueron de un insecto y un crustáceo, la 
observación con estereoscopio tiene la 
finalidad de observar las características 
tridimensionales, brindada por la 
arquitectura de las lentes, lo que 
observamos en cada lente no es lo 
mismo, pero nuestros ojos mezclan 
ambas imágenes y nos da como resultado esta imagen 
tridimensional ampliada. 
Con la observación al estereoscopio se pudo observar ampliamente las 
características morfológicasde ambos ejemplares, así como los colores y partes 
de su organismo. 
 
 
 
 
 
 
CUESTIONARIO 
1. ¿Tienen la misma aplicación el microscopio compuesto y el 
estereoscópico? De con lo anterior menciona 5 diferencias 
Ambos microscopios sirven para observar estructuras que son difíciles de ver a 
simple vista, sin embargo, tienen diferencias que los caracterizan. 
Las principales diferencias entre ambos microscopios son: 
1. Regularmente los compuestos tienen varios objetivos (Seco débil, seco 
fuerte e inmersión), a diferencia del estereoscópico que tiene 1 objetivo o a 
veces 2. 
2. El aumento que pueden tener estos objetivos, es mucho mayor en el 
microscopio compuesto. 
3. El microscopio estereoscópico tiene un solo tornillo para poder enfocar la 
muestra (Macroscópico), mientras que el compuesto tiene dos tornillos para 
esta función. (Macroscópico y microscópico) 
4. En el microscopio compuesto se tiene un diafragma, cuya función es 
controlar la entrada de luz a la muestra. En el estereoscópico solo se tiene 
una luz que no se puede controlar de esa manera. 
5. Al momento de observar la muestra, el microscopio compuesto tiene 2 
objetivos para poder observar la muestra, mientras que el estereoscópico 
tiene un solo objetivo común, con el que se observa la muestra. 
 
2. ¿Cuál es el poder de resolución de un microscopio? 
Los microscopios ópticos tienen un límite máximo de resolución de 0,2 µm. 
3. Enfocando con el microscopio compuesto ¿Qué nota usted cuando mueve 
la preparación hacia adelante, hacia atrás, a la derecha y a la izquierda? 
 
4. ¿Logró enfocar los dos cabellos a la vez, cuando los enfocó a seco débil y 
cuando los enfocó a seco fuerte? 
Si es posible enfocar ambos cabellos a la vez, logrando ver el entrecruzamiento de 
ellos. 
 
5. Si con el microscopio estereoscopio se observa ejemplares de 
organismos como insectos, arañas, también objetos como impresiones en 
papel, monedas, timbres postales, etc. ¿Con el microscopio compuesto 
lograría las mismas observaciones? Explique 
No es posible ver las mismas observaciones, ya que los objetos pueden ser muy 
gruesos, evitando así que la luz pase a través de ellos y puedan ser observados. 
 
 
6. ¿Qué es necesario para lograr una buena observación de las bacterias y 
de las células sanguíneas a través del microscopio compuesto? Indica 
alguna explicación. 
Se necesita hacer una tinción que pueda hacer resaltar el citoplasma y el núcleo 
de las células observadas. 
7. ¿Por qué no se logran más de 2,000 aumentos en el microscopio 
compuesto? 
La limitación de los microscopios ópticos es de 1500x, ​debido a la difracción de 
la luz, esto es consecuencia de la longitud de onda de la luz con la que está 
enfocada la muestra. 
8. Mencione tres tipos de microscopios ópticos y anote alguna de sus 
características 
● Microscopio de campo oscuro​. ​Es un ​microscopio que utiliza un haz enfocado 
de luz muy intensa en forma de un cono hueco concentrado sobre la muestra. El 
objeto iluminado dispersa la ​luz y se hace así visible contra el fondo oscuro que tiene 
detrás, como las partículas de polvo iluminadas por un ​rayo de ​sol que se cuela en una 
habitación cerrada. Por ello las porciones transparentes del espécimen quedan 
oscuras, mientras que las superficies y partículas se ven brillantes, por la luz que 
reciben y dispersan en todas las direcciones, incluida la del eje óptico que conecta el 
espécimen con la pupila del observador. 
● Microscopio de contraste de fase. ​El microscopio de contraste de fase 
permite observar células sin colorear y resulta especialmente útil para 
células vivas. Este aprovecha las pequeñas diferencias de los índices de 
refracción en las distintas partes de una célula y en distintas partes de una 
muestra de tejido. 
● Microscopio de luz polarizada. ​E​s un ​microscopio óptico al que se le han 
añadido dos polarizadores (uno entre el condensador y la muestra y el otro 
entre la muestra y el observador). El material que se usa para los 
polarizadores son ​prismas de Nicol o ​prismas de Glan-Thompson (ambos 
de ​calcita​), que dejan pasar únicamente la luz que vibra en un único plano 
https://es.wikipedia.org/wiki/Microscopio
https://es.wikipedia.org/wiki/Luz
https://es.wikipedia.org/wiki/Rayo
https://es.wikipedia.org/wiki/Sol
https://es.wikipedia.org/wiki/Microscopio_%C3%B3ptico
https://es.wikipedia.org/wiki/Prisma_de_Nicol
https://es.wikipedia.org/wiki/Prisma_de_Glan-Thompson
https://es.wikipedia.org/wiki/Calcita
(​luz polarizada​). Esta luz produce en el campo del microscopio claridad u 
oscuridad, según que los dos nícoles estén paralelos o cruzados. 
 
9. Elabore un pequeño resumen en el que se destaque la utilidad del 
microscopio electrónico, tomando en cuenta las limitaciones del 
microscopio compuesto y el por qué no se logran más de 2,000 aumentos en 
este. 
El microscopio electrónico es un instrumento de 
gran utilidad en la investigación científica gracias a 
su gran poder de ​aumento​. Mediante este tipo de 
microscopio es posible aumentar imágenes de 
muestras hasta niveles muy superiores a los del 
microscopio óptico​. 
El principio de funcionamiento de un microscopio 
electrónico se basa en utilizar electrones en lugar de luz visible. La ​longitud de 
onda con la que se mueve un electrón es inversamente proporcional a su 
velocidad. Esto significa que si los electrones son acelerados a altas velocidades 
pueden obtenerse longitudes de onda muy cortas. 
A un nivel muy básico consiste en una fuente de electrones que son acelerados a 
gran velocidad. Estos electrones impactan con la muestra de modo equivalente a 
como la luz podría iluminarla. Algunos de estos electrones son reflejados por la 
muestra y otros la atraviesan. Mediante la detección de estos electrones es 
posible reconstruir una imagen de la muestra. 
Gracias a que no utiliza luz, la limitante de la longitud de onda de esta no es 
problema, logrando así superar el aumento máximo del microscopio óptico, 
logrando incluso aumentos de hasta 1 millónx. 
Esto sirve para poder observar muestras con muchísimo mayor aumento, incluso 
imágenes en tres dimensiones. 
 
https://es.wikipedia.org/wiki/Luz_polarizada
https://www.mundomicroscopio.com/aumento-del-microscopio/
https://www.mundomicroscopio.com/
https://www.mundomicroscopio.com/longitud-de-onda/
https://www.mundomicroscopio.com/longitud-de-onda/
CONCLUSIÓN 
En esta práctica, comprendimos y entendimos el correcto uso del 
microscopio, ya que es una pieza fundamental del laboratorio, para observar 
la morfología y anatomía de cada uno de los especímenes a estudiar de 
manera microscópica, concluyendo y diagnosticando alguna distrofia que 
este podría tener, pero para esto se tendría que conocer el correcto uso del 
microscopio, para sacar observaciones y diagnósticos precisos. 
BIBLIOGRAFÍA 
Nin, G. V. (2000). ​Introducción a la microscopía electrónica aplicada a las ciencias biológicas​. 
UNAM. 
Microscopía | CENIEH. (s. f.). CENIEH. Recuperado 16 de octubre de 2020, de 
https://www.cenieh.es/infraestructura/laboratorios/microscopia 
 
 
 
 
https://www.cenieh.es/infraestructura/laboratorios/microscopia