Diferenciación de la Coxiella burneti por medio de la coloración de Gram

Vista previa del material en texto

REVISTA DÉ REVISTAS
G im e n e s , D. F . - Journal of Bacterio- 
logv, 90 (N 9 3, sept. 1 9 6 5 ) , p. 834-835. 
(Traducción y anotaciones de M . J. T o ­
rres ) .
“Diferenciación de la Coxiella bur- 
netii * por medio de la coloración de 
Gram ” .
Utiliza el autor cuatro diferentes siste­
mas de coloración primaria en la colora­
ción de Gram frente a los tipos diferentes 
de mordiente, dos tipos de decolorantes 
y dos tipos de colorantes secundario o dé 
contraste. El autor compara los resulta­
dos de las diferentes coloraciones frente 
a Coxiella burnetii, Rickettsia, Bacterias 
típicamente Gram positivas y Bacterias 
típicamente Gram negativas.
A — Gram Hucker: Según Bartholomew 
(Stain'Technology, 37: 139, 1962). 
El mordiente acuoso contiene 1% 
de Iodo. Decolorante alcohol etíli­
co, 95%.
La Coxiella burnetii, agente causal de la Fie- 
re Q, enfermedad zoonósica, pertenece a la 
lase Microtatobiotes, Orden Rickettsiales, Fa­
milia Rickettsiaceae, Tribu Rickettsiae y Género 
oxiella, que a diferencia del otro género de la 
' " 1Snia tribu (Género Rickettsia) y a semejanza 
e ios virus es filtrable. (N ota del Trad u ctor).
B — Grana Nicolle, con violeta fenolada 
por 1 minuto. El mordiente acuoso 
contiene 0.5% de Iodo. Decoloriza- 
dor, alcohol etílico-acetona.
C — Gram - Kopeloff & Beerman, según 
Conri. et al. (Society of Am. Bac- 
teriologists, Manual of Microbiolo- 
gial Methods, McGraw Hill Book 
Co. Inc., New York, 1957), pero 
decolorando como en Gran Nicolle.
D — Modificación del método de Gram- 
Kopeloff & Beerman en el que la 
colaración primaria (cristal violeta, 
solución acuosa al 1%, más la mis­
ma cantidad de solución acuosa de 
Bicarbonato de Sodio al 5%, solu­
ción que debe prepararse inmedia­
tamente antes de usarla y no estable 
después de una hora) se somete al 
vapor por 1 minuto. El mordiente 
acuoso contiene 1% de Iodo. De- 
colorizar con alcohol etílico-acetona 
por 18 segundos.
56 F A C U L T A D D E M E D I C I N A V E T E R I N A R I A Y D E Z O O T E C N I A
Los tipos de mordientes usados fueron:
1) El mordiente acuoso corriente de 
composición:
Y o d o ........................... ... 1.0%
Yoduro de p o tasio .................... 2.0%
En agua destilada.
Y o d o ............................................ 0.5%
Yoduro de p o ta s io .................... 1.0%
En agua destilada.
2) El mordiente etílico en cuya aplica­
ción radica la importancia de este tra­
bajo:
2 volúmenes de solución con 2% de 
yoduro de potasio, citada en el punto 
anterior, más 1 o 2 volúmenes de al­
cohol etílico al 95%.
Los decolorizadores usados fueron: al­
cohol etílico al 95% por 1 minuto o una 
mezcla de alcohol etílico (al 95%, 4 vo­
lúmenes) y acetona (1 volumen) por 
15-18 segundos. Se colocaban en vasos de 
Coplin y las láminas se sumergían en di­
chos recipientes. Los decolorantes se re­
emplazaban cada 3 láminas.
El contraste se hacía con Safranina, 
solución acuosa al 0,2% por 30 segundos 
o con azul de Bismark-Brown por 1 mi­
nuto.
Entre cada paso se hizo lavado de lá­
mina en agua de grifo. Los mordientes y 
colorantes se aplicaban por inundación 
de la lámina y luégo se hacía enjuague de 
ésta.
R E S U L T A D O S
M O R D IE N T E *
R E A C C IO N D E LA C O X IE L L A B U R N E T II A LA C O L O R A C IO N D E G R A M E N CUATRO 
D IS T IN T A S V A R IA C IO N E S , C O N IO D O A C U O SO O A L C O H O L E T IL IC O -IO D O COMO
Microorg. Iodo Acuoso Iodo E tíl ic o * *
A B C D A B C D
C. B u rn e tii ............................ — — ± + + +
Otras R iclcettsias................. — — — — — — — —
Bacterias Gram - ) - ............... + + + + + + + +
Bacterias Gram — ............... ---
* 4- = Gram positivo. 
— = Gram negativo. 
± = Variable.
* * La Coxiella burnetii se considera siempre como Gram positiva a diferencia d e las otras R 'c SQU¿ 
E n la práctica, sin embargo, es difícil diferenciarla por reacción a la coloración de Gram, ya 13 ¡ 
los resultados son variables. La introducción de 3 variaciones de la coloración de Gram C0I!> CY ]a 
etílico yodado com o m ordiente, que muestren en forma uniforme (M étodos B , C y ¿2
Coxiella burnetii como Gram negativa, es de suma importancia. Es de anotar que el auto 
énfasis al método D . (N ota del traductor).