Descarga la aplicación para disfrutar aún más
Vista previa del material en texto
ENTEROCOCOS [NTROOUCCION Este género está integrado por n1icroorganismos que pi¿:sen ian fonna esférica u oval, miden emre 0,6 y 2,5 }tffi de diámetro y se- agrupan de a pares o en e-ortas cadenas. Inmóviles o múviles por escasos flagelos, no forman esporns y algunas especies pueden presentar cápsula. Son grampositivos, anaerobios facultativos y quimiorganotrofos, con actividad fermentativa sobre los hidratos de carbono; producen ácido pero no gas a partir de la glucosa. No son exigentes en sus requerimientos y pueden crecer en con diciones hostiles. Se caracteriz<'l.n por tolerar temperaturas entre l O y 45 ºC, pH de 9,5, concentración de cloruro de sodio 6,5% y de bilis del 40%. Los enterococos se hallan ampliamente difundidos en la na turaleza, particularmente en heces de los vertebrados. En algunos casos producen enfermedades píogénicas. Taxonómicamente es el único género que integra la familia Enterococ{:ac.eae. HISTORIA Estos microorganismos se encontraban incluidos dentro del género Streptococcus y c lasificados según Lanceneld en el serogrupo D o estreptococos aislados del intestino. A su vez, este serogrupo está subdividido en dos: aquellos capaces de crecer en condiciones hostiles (enterococos) y los que son incapaces de crecer en condiciones hostiles (estreptococos no enterococos). En 1 984, Schleifer y Kilpper-Balz, por resultados de estudios genórnicos, detem, in.aron que ambos grupos de cocos entéricos pertenecían a dos géneros diferentes y propusieron transferir el grupo de los estreptococos del grupo enterococo a un nuevo género, denominado Enterococcus. HABITAT Los enterococos son bacterias u.bícuas presentes en los tractos intestinal, respiratorio superior, geni,tourinario, y en la piel de los animales y el hombre. Tambien. en agua dulce y salada, en el suelo y en vegetales. ESPECIE TIPO EnterococczLs faecalis, Las especies están incluidas en e.l serogrupo D de Lancefield o cocos catala,;a negativos aislados a partir del intestino y se cla sifican en dos grupos según sus características fisíúlógicas. !)Cocos del grupo O o Ent.erococcus, capaces de c1·ecer en condiciones hostiles: Enterococcusfaecalis, E. faecium, E. asini, E. avium, E. ccmis, E, casseli.fiavus, E. cecorum, E. columbae, E. dis par, E. durans, E, jlavescens, E. gallinarurn, E. gilvus, E. ,;� haemoperoxidus, E hirae, E. malodoratus, E. moraviensis}ff E. mundrii, E. pallen.�, E. phoeniculicola, E. pseudoavium/t1 E. rajlinosus, E. rarti, E. saccharolvíicus. .{J --'�) 2) Cocos del grupn D no enterococos, int'.apaces de multi- i\:i pticarse en con.diciones hostiles: i'! S1rep1ococcus alacwlvrícus (o S. imestinaiis ), S. entericus, -JI S. equinus (o S. bovis), S. gallolyricu.s ( o S. caprimL1' ), sJJl: infa.nzarius subsp . tnfantarius , S. in.famarius su.bsp co/i (o i}¡:j S luieriensis) y S. suis. l!tJ CARI\CTERISTICAS MORFOLOGICAS Itl Son cocos, a veces ovales y elongados. y pu.e.de variar su moró ,�¡ fología según las condiciones de cultivo. Miden entre 0.6-2"µmy}�} 0,6- 2,5 µm. Pueden presentarse solos o agrupados en diplococosiqf o cadenas cortas-; a partir de un caldo, las células aparecen ovales}lí y agrupadas en cortas cadena.e;, mientras que a partir de. un medio'' sólido pueden aparecer corno cocobacilos y fonnando pequeños ',i¡ racimos . Son gramposit.ívos. No son esporuíados. Se caracteri- ',\ll zan por ser i.n�óviles, aunque algunas pocas cepas pueden serjJ móviles por la presencia de escasos fi.agelos (E. casse/ifl.avus, E.t'H fiavescens , E. gallínarum). , Ji;d CARACTERISTICAS METABOLICAS . jf Tienen requerimientos nutricionales mínimos, y crecen bien'.tf en medios comunes, como caldo o agar cerebro c-0razón en lf�f: a 24 horas a 37ºC. Usualmente los enteroc-0cos desarrollan al 10 "C y a 45 ºC, así como también presentan ia capacidad detf tolerar temperaturas superiores a los 60 "C durante. 30 minutos. ;t Son aerobios-anaerobios, aerotolerantes. El cultivo se ,e\{ , favorecido por una incubación en presencia de dióxido de ear-\:: , bono, siendo indispensable para algunas especies (E cecorrmt'f['.11 E. columbae). Las colonias suelen tener un tamaño entre 0,5 y !:fj mm de diámetro, son opacas o ligeramente blanquecinas. Algunasi:; especies dan colonias c�� un pigmento ��ari l lo (E. casse/ifiavus, ;);j E.jtavescens, E. mundt!I} cuya producc1on se ve favorecida al set �: i cultivadas en agar tripticasa soya e íncubada� 24 horas 2 37 •e: J Pueden producir a-hemólisis o -y-hemólisis en medios c<m sangré ':: ¡ de oveja. En medios con sangre humana, equina o de conejo J algu11as cepas pueden presentar una B-hemólisis. j Son quimiorganotrofos con metabolismo fem1entativo so- ..! ¡ bre los hidratos de carbono, generalmente homofermentativos d (ác ido láctico) pero sin producción de gas. Por lo usual so1l-:; ¡ catala,a negativos: a VC'.Ces, débilmente caralasa positivos como · E. haemoperoxidus. : i_'. Se desarrollan en medios de cu ltivo con el agregado de bilis � al 40% y se caracterizan por hídmlizar a ia esculina. Cuando ¡;e,,,¡ utiliza medio bilis-esculina o medio bilis-escu!ina-azida, las wlo- / nías de, los enterococos se acompañan con un ennegrecimiento del ¡ medio. Estas características son utilizadas para la diferenciacióni 1 __________ _______________________________ v el diagnó:-tico presuntivo entre los ente-rococos y los estreptoco �-OS - Crecen en caldo con cioruro de sc;dio al 6.5°A1. aunque ex.isren especi es que no lo hacen (E. avium, E. co!wnbae y E. ceconnn )_ E.sms nucroorganismos pueden crecer en medios con telurito de potasio a l 0,05�/(\. formando rípica.s colonias de color negro . La ac1ivídad sobre la PYR (pyrroglutami l aminopeptidasa) es una de::renninación que suele uti l izarse para la identificación de. los entcíococú:::. :Y es pcrsitiva. para todl'l s !�s especies, a t:"-xcepción de E. sorcharo�vricus-., E. cecorwn y E. coiumhae . DIAGNOSTICO Diagnóstico microbioiúgico A 1ravés del cultivo._ el aislamlento y la ldent iiicación. inclu yendost'- vanas pruebas metaMli -ca.s ( tabla 2 l - l ·1 . Existen tests comercia le-::. para ia identificación de este g:éncro. el más utilizado es APJ :!O Strep (B io�Merieux. !\-·1.aícy ! ' E.toile. Francc L aunque est:os ki,s sólo- pueden detectar un número limi tado de espe·c. ies de ent.erococos. Diagnústico por métodos genómicos Para una rápida id.entific.acíón y diferenciaci.ón de especies se han rea lizado estudíos recientes orientados a la aplicación de téc nicas hiomoleculares, lit.Hes con fines epidemiológicos. Algunas de el las incluyen esrudios sobre perfil plasrnídico. electroforesis de. campo pulsado (PFGE'), análisis de restricción del ge.n riboso ma! RNA (ribotyping) e hibridación de ácido nucleico. CLASIFICACION ANTIGENICA Se encuentran ubicados, seglm el esquema de Rebeca Lancefield. dentro del serog:rupo D. El antígeno de este. grupo no es un polisa� e.árido de la pared celular sino un áddo lipoteicoico asocia.do a la membrana citoplasmática: compuesto de poli.glicerol fosfato en el qu.e. parte del glicerol está sustituido por D-afanina y glucosa. En los enterococos1 los antígenos de la pared sirve-n como antígenos especificas de tipo. RESISTENCIA Resistencia a los agentes físicos Son resistentes al calor. tol.eran 60 ºC durante. 30 minutos. Sobreviven en los cultivos durante largo tiempo. Resistencia a los agentes químicos Los enterococos son reservorios de genes para la resistencia a los antibióticos ; se han podido recuperar cepas resistentes a partir de muestras clínicas (infecciones en animales y hombre). en comida destinada al consumo humano, en objetos inanirnados Tabla Género Enterococcus Prueba/género Catalasa BE Desarrollo en caldo/NaCI 6,5% PYR Enterococcus + + BE: crecimiento e.n bilis al 40% e hidrólisis de la esculina. PYR: re.acción de pyrrolidonyl aminope.ptidasa. y más reci.t."nr.ementc a partir de heces de pol los y de su;o: carcasa;;.a.sí como de otros animales. Se- han estudiado los factores de riesgo y los reservorios fuera de. fos hospitales: el uso de amlbi.óticos en ias raciones de ios anlmaies es un factor importante para la apa rióón de resistencia en ias e.epas de origen animal, lo cual genera cepas multirresis t.entes como consecuencia de la aha exposición a antibióticos . Los patrones de resistencia han sido estudiados pm numerosos autores <1 partir de aislamientos dfnicos en huma-nos Los emerococ.os presentan un.a resistencia cromosórnica naru ral o intrínseca para los f1-laciámicos (penicilinas se.misinr.éiicas y c-efa losporinas). aminoglucósidos de bajo niveL su lfonamidas, clinda.rnicina y algunas fiuorquinolona.s , así. como una rtsis.tencia "' crnmosómic,1 adquirida, ya sea por mutaciones o por selección con producción de- 0-lactamasa (B la -·1. (.'on respecto a los ami nog:lucósido::;, la resistencia- namral de bajo nivel se debe a un ingreso deficien1 e. del antibiótico y a la presencia de una enzirna cromüsómica denominada ac.etiiasa. ()tra frmna de resistencia e� la cxtracrnmosórnica, que esii1 da-da por plás.midos y transposones, y es la responsabk del 90�·,.1 de los casos de resistencia. Los enterococos pueden presentar resistencia a penidiina y am picilina debido a la modificación de su sitio blanco. por producción de. proteína-,; li.gadora.<; de penicil ina (PBP) de baja afinidad y a veces. c.on menor frecuencia, por la producción de ¡3-lactamasa.s. La resistencia a los gl ucopéptidos (vancomicina ) se prese:ma con mayor frecuenciaenf.ji:Jecium. Exist.en-diferemes-fenotipos--: Van A, Van B , Van C, Van D y Van E. Nunca deben informarse, aunque puedan aparecer como efe.c tivos in vitro, los siguientes antimicrobianos: aminogiucósidos ( excepto !.os de alta concentración), cefalosporinas, ciindamic.iníl y trimetroprima-sulfamet.oxazol . Estos microorganismos pueden presentar además otras pro piedades frente a los antimicrobianos, como tolerancia ( cuando la concentración bactericida mínima [CBM.] es mucho mayor que: la concentracíón inhibitoria mínima [CIM] y persistencia (aqu.ellüs microorganismo que han escapado del valor de !a CTM y t.ienen una fase logarítmica larg_a porque no se duplícan ) . Los enterococos son to lerantes a todos los B-lactámicos a causa de que poseen una PBP de baja afinidad. Se.gún recomendaciones del "National Commiteefór Clinical laboratory Stan.dards ,. (NCCLS), los antibióticos a ensayar fren.re a los enterococos son: arnpicilina. como el fármaco más representativo para ser probado frente. a cepas no productora$ de [��lactamasas; sinergismo entre penícilina o ampicilina más un amínoglucósido, o vancomicina sola o combinada. con un ami nogluc.ósido están indicados para infecciones graves. Se deben utilizar discos de alta carga para gentamicina ( l. 20 µg_) y estrep• tomicina (300 �tg)� éstos sirven para predecir la sinergia entre penicilina, ampicilina o vancomicina con un aminoglucósido_ FACTORES DE PATOGENICil)AD Las especies de este género se caracterizan por tener un poder patógeno limitado, pero a pesar de esto, pueden llegar a producir enfermedades graves, sobre todo en humanos. Pueden presentar adhesinas hidrocarbonadas. asi como una sustane-ia de agregación (SA), que es una proteína de aspecto ve.i.ioso que se encuentra en la membrana citoplasmatica e interviene en ia colonización al unirse a las células epiteliales. La SA fa.cilita además el intercambio genético por plásmidos. Algunos enterococos pueden producir P-hemólis.is en glóbu los rojos humanos y de caballo, pero no en los de oveja, y esto está Tabla Grnpos del Género Emerocou:us Prueba/grupo l 2 3 4 5 6 Arginina + + + + - Man.itol + + - + + Teiurito + - -/+ - Arabinosa - ·+ - + Grupo l: Especie: EnterococcusfCJeca!is -· Grupo 2: Pruebaíespecie E _(aecium E. gal!inarum E. casselfflavus E nnmdriil Pigmento - - - + Movilídad - + - Grupo 3: E. solitarius 1 Grupo 4: Especie/prueba E duran.> E (aeca!is var E. hirae Sacarosa Rafinosa - VP + Grupo 5: Especie/prueba E. rtfffinosus Rafinosa T Grupo 6: Especie/prueba E. malodoratus Rafinosa + dado por la actividad de una e-itolisina que favorece también ta colonización. Elaboran una gela.tinasa y bacteriocinas. Estas bac teriocinas se denomínan enterocinas y son sustancias que tienen propie<lades inhibitorias especificas sobre ciertas bacterias, corn.o Lisieria monoc.yrogenes, Staphylococcus aureus, Vibrio cho!erae, Clostridium spp, y Bacillus spp; tal es el caso de. Enterococcus faecium 1 E. fa:eca!is y E. cassel{flavus. IMPORTANCIA Históric.amen.tc, los enterococos han sido considerados como patógenos oportunisms, dado que se encuentran incluidos entre los microorganismos propios de la rnicrobíota residente. del hombre y los animales y están relacionados sólo con procesos i.nfecciosos de individuos inmunosuprimidos. Hoy la siruación ha cambiado: en el área de la clinica veterinaria es frecuente hallarlos a partir de infec cíones de la glándula mamaria de bovino, cabra y llamas, a,;i como en abscesos y otras infecciones supurativas de perros y gatos. Los enterococos se can1(..1erlzan por poseer un mecanismo efi ciente para transferir plásmidos DNA por conjugación. La expresión de este sistema de transferencia por parte de las células dadoras es inducida por un oligopéptido (feromona). secretado por las célttlas receptoras. Esta inducción resulta en un incremento de la expresión de una proteína de superficie (sustancia de agregación o A.S) en· la - - - +/. + E. al-'iu.m - E. pseudoavium - célula dadora. que actúa como una adhesina para dar cümienz:o a la tr.:msforencia génic.a. A través de e.ste mecanismo, estos microorga nismos son capaces de incorporar información para modificar ciertas característica,;;� como factores de patogenicidad y resistencia a los antibióticos. Esta situación ha sido estudiada desde h.ac.e tiempo en el campo de la medicina humana, considerando a los ent.erncoe-os come, microorganismos emergentes y patógenos nosocomiales. BIBLIOGRAFIA Day .A.M. Sandoe JAT, Cove JH, Phi!lips-Jooes MK. Evaluarion c,f a bioche� mica! test scheme for identifying clinie-al i.¼ilates of Enterococcusfáecali.s and Enterococcusfaecium. Lett Appl Microbio l. 200 !: 3:,: 3 92-J 96. Devriese. L, Pot 8, Van Damme L, Kersters K, H.ae:-ebrouck F. Identiñ c.aüon üÍ Enrerococcus speó.es ísolated from í'Oods of anim3[ origin. lnt J FoodMicrobiol. 1995:26:187-197. Domíg KJ. Mayer HK. Kneifel W. Me.thods used for the isolation, enmne· ration. tharacterization and ídentification of Enurococcus spp. 2. Pheno and genotypic critcria. lnter J offod Mícrobíol. 2003; 88: 165-188, Fack.lam RR. Sahm DF. Enterococcus. In: PR M.urray. EJ Bawn. MA Pfaller. FC Tenover., RH Yolke.n. Manual of Clinicu.l Mic.robiology. 6th ed, American Society fo-r Microbioiogy, Washington DC, l 995, p, 308-323. Giraffa. Enterococcal bacteriocins: their potential as ;mti Listeria factors in dairy te-dmology. food MicrobioL 1995; 12: 291---299. NCCLS Periúnnance Srnn<lud.$ for ...\.ntimicrohial Disk a.nd Diiution Sus ceptihii1ty T estS for Bi,cteria lsoiated frorn Anima!s: Apprn\1ed Srandard ¡99q_ M3 l-•A., 19 d 1") Resplaces M.31-T l 7 (i ! '¡. Farrng_hetti A. Quinteros M. Predari S. Corso . .'!..., Lopardo H. CaseUa J. Banuir C Couro E. Gafas M, Soloag_2 R. C,msenso sohrc líis pruebas de sensibilidad a ios antimicrobianos en e<Ko5 grnmpositivos Rev Arg de Microbioi. 2003: 35: 29-40. �-íarJ.111 M. Fluorogc·nic and chromogenic e-r.zyrn.e �ubstr;:-:tts in c1iln.l.Tt medi;i and idenrific.alion test,;. ln1 J Food Mic-robiol. H96: '.1 :. : "4'.'---5k Manero A, Blanch AR. ldentifü:2tion ofEnt(!l'oCo(.'(:usspp. w1th a biocbe micaJ key. Appl Environ Microbio!. 1999: 65: 4425--4430. She:pard B-D, Gílmore \1S. AntíbíoHc-resisrnm enteroc.occ.i: the mecha ni:sms and dynamic� o[ dnig intrnduc:t.ion and rcsisumct:. Micro bes lnfect. 2002; 4:11 ) .. ~224.
Compartir