Aislamiento y cultivo de hongos filamentosos

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Instituto Politécnico Nacional Escuela Nacional de Ciencias Biológicas 
Aislamiento Y Cultivo De Hongos Filamentosos Y Levaduras
Grupo: 6FV01 Equipo: 6 Sección: 2
 « Microbiología General » 
Profesores: 
Sánchez Sánchez Antonio Aguilar Ayala Diana Angélica 
Integrantes:
Cruz Francisco Rodrigo García Estrada Beatriz Adriana
Ortega Valerio Areli
¿Qué son los hongos?
Los hongos son microorganismos eucarióticos unicelulares o pluricelulares heterótrofos, quimioorganotróficos, aerobios o anaerobios facultativos que se nutren por absorción. 
Clasificación
Filamentosos
Levaduras
Descripción morfológica microscópica
De acuerdo a su función:
Vegetativas (de crecimiento)
Fértiles (de reproducción)
Diferencia morfológica:
Septadas 
No septadas.
Posición en el medio:
Sumergidas 
Aéreas
De acuerdo al pigmento producido:
Hifas hialinas
Hifas mielínicas. Pigmento pardo oscuro (fulginoso)
Descripción morfología colonial
La textura o aspecto pueden ser:
Aldononosa o lanosa.
Vellosa.
Aterciopelada.
Granulosa.
Pulverulenta.
Cremosa.
Superficie:
Plana.
Acuminada.
Plegada.
Cerebriforme.
Crateriforme.
Umbilicada
Color:
Anverso(porción aérea)
Reverso (micelio vegetativo)
Pigmento difusible.
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Reproducción asexual
Esporas
Esporangiosporas
Conidiosporas
Artrosporas
Clamidosporas
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Reproducción sexual
Esporas
Deuterosporas
Zigosporas
Ascosporas
Basidiosporas
Importancia
Ecológica
Industrial
Medicinal
Alimentaria
Hongos Como Patógenos
Micosis
Trichophyton rubrum
Madurella micetoni
Trichophyton sp
Botrytis cinerea
Levaduras
Hongos unicelulares. Algunas pueden formar filamentos (Candida albicans)
Son ovales, esféricas o cilíndricas.
Tienen crecimiento isodiamétrico (uniforme en toda la superficie de la célula).
Reproducción asexual por gemación o fisión. 
Tienen aspecto húmedo y consistencia cremosa.
Típicos de hábitat con azúcares.
Requerimientos nutritivos y condiciones ambientales 		
Azúcares 
Oxígeno: La mayoría son estrictamente aerobias y algunas facultativas.
pH: 3.8-5.6
Temperatura: 22 y 30 °C.
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Utilizada en la panadería, producción de cervezas y vinos y como suplemento alimenticio del ser humano y animales
Producción de la proteína microbiana
Utilizados para el cultivo de derivados de los lácteos
Importancia de las levaduras
Metodología
	Agar Sabouraud	Agar Rosa De Bengala	Agar Papa Dextrosa
	Neopeptona 10 g/L
Dextrosa o maltosa 40 g/L
Agar 15 g/L
	Extracto de soya 5 g
Dextrosa 10 g
Fosfato monopotásico 1 g
Sulfato de magnesio 0.5 g
Agar 20 g
Rosa de Bengala 0.035 g
	Infusión de 250 g de papa
Dextrosa 20 g
Agar 15 g
	pH=5.6	pH=6.0	pH =5.6
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Medios de cultivo
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I. Aislamiento por diluciones
4.5 mL Agua destilada
0.5 g de tierra
0.1 mL
0.1 mL
0.1 mL
0.1 mL
0.1 mL
0.1 mL
Enfriar (Estéril)
10-1 
10-2 
10-3 
10-4 
10-5 
0.5 mL
0.5 mL
0.5 mL
0.5 mL
Gelosa Sabouraud
Rosa de Bengala
Incubar a 28°C 48-72h
Calcular UFC de hongos
Describir morfología colonial y microscópica
Preparaciones en fresco
Azul de algodón lactofenol
Observar en seco débil y seco fuerte
Observar micelio:
-Diametro de hifas.
-Hifas pigmentadas ó hialinas.
-Micelio septado o cenocítico.
-Tipo de esporas.
II. Preparación de microcultivos
1.5cm c/l PDA Grueso
10 mL Glicerol (fondo)
Inocular con hongo 
Tapar caja( colocar solo un poco de masking tape)
Incubar a 28°C 72-96h
Extraer glicerol con pipeta pateur
Formaldehído al 10 % 1h (inactivación)
Describir morfología microscópica
Colocar en portaobjetos con azul de algodón lactofenol
Sellar las dos preparaciones con barniz de uñas
Desprender cubreobjetos
III. Cultivo y descripción de la morfología colonial de levaduras.
Sembrar Pichia sp y Saccharomyces cerevisiae
Medio: Gelosa Sabouraud
Incubar a 28°C 24-482h
Observar crecimiento y describir morfología colonial.
10 características como en bacterias
IV. Observación de las acoesporas (esporas sexuales)
Hacer frotis de Saccharomyces sp y otro de Pichia sp
Teñir con técnica de Zielh-Neelsen modificada.
#Usar alcohol láctico en lugar de alcohol ácido,
Retirar exceso de azul de metileno
Nigrosina 1 gota
Inmersión 
Observación de cigosporas (esporas sexuales)
Sembrar al centro por picadura Zygorrhynchus sp.
Incubar a 28°C 72-96h
Seco débil 
Buscar las cigosporas formadas por la unión de dos hifas
Resultados
	Característica Colonial		Colonia 1	Colonia 2
	Textura		Algodonosa	Algodonosa
	Superficie		Acuminado	
	Color	Anverso	Blanco	Blanco
		Reverso	Rosa	Café
		Pigmento difusible	-	-
Morfología microscópica de los microcultivos
Mucor sp
Rhizopus sp
Geotrichum sp
Curvularia sp
Penicillium sp
Aspergillus sp
Cuestionario
Dibuje el hongo macroscópico y ponga nombre de cada una de sus estructuras.
2. Mencione tres ejemplos de hongos (género y especie) que tengan 
Importancia médica 
Candida albicans
Trichophyton rubrum
Trichophyton mentagrophytes
Importancia agrícola 
Patogeno para plantas
Alternaria solani
Ceratocystis sp.
Botrytis cinerea
b) Formación de micorrizas 
Acaulospora delicata
Scutellospora fulgida
Glomus clarum
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b)Productores de antibióticos
Penicillium notatum 
Cephalosporium acremonium
Penicillium chrysogenum
Importancia alimentaria
 
a)Comestibles 
Pleurotus ostreatas
Agarius 
Lentinula edodes 
b) Venenosos 
Amanita muscarina 
Gyromitra ínfula 
Chlorophyllum molybdites 
c) Alucinógenos 
Psilocybe weraroa
Psilocybe cyanescens
Psilocybe mexicana
Importancia industrial
a)Productores de ácidos orgánicos 
Aspergillus niger
Rhizopus nigricans
Saccharomyces cerevisae 
3. Mencione tres diferencias entre las esporas de los hongos y las endoesporas de bacterias
Estructuras de protección (bacterias)
Formas de reproducción (hongos)
Las esporas de reproducción (hongos) se producen en grandes cantidades y las endoesporas son estructuras únicas 
4. ¿Qué es una micorriza y qué un niquel? En que se parecen y en qué son diferentes?
Micorriza: asociaciones simbióticas entre los hongos y las raíces de las plantas 
Liquen:asociación simbiótica de un hongo filamentoso con un alga, 
5. Mencione 5 diferencias y 5 semejanzas entre hongos y bacterias 
Diferencias
Los hongos son mas grandes que las bacterias 
Las bacterias no retículo endoplasmático 
Los hongos crecen lento 
Organismos complejos (pluricelulares)
Reproducción sexual y asexual
Semejanzas 
Formación de esporas 
Resistencia a antibióticos 
Transforman materia orgánica 
Algunas bacterias son heterótrofas 
Los actinomicetos se nutren también por absorción.
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